全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 11期,2009年 11月1104
收稿 2009-09-15 修定 2009-11-05
* 通讯作者(E-mail: lxq732000@yahoo.com.cn; Tel: 0754-
8 8 3 8 2 3 5 7 )。
穗花牡荆的组织培养
李旭群 1, 2,*, 李曦 1, 石小聪 1, 张奋鹏 2, 陈麟林 2
1汕头中医药技工学校, 广东汕头 515061; 2潮州市泽润制药有限公司, 广东潮州 515634
Tissue Culture of Vitex agnus-castus L.
LI Xu-Qun1,2,*, LI Xi1, SHI Xiao-Cong1, ZHANG Fen-Peng2, CHEN Lin-Lin2
1Shantou Chinese Traditional Medical Technical College, Shantou, Guangdong 515061, China; 2Chaozhou Zerun Pharmaceuticals
CO., LTD, Chaozhou, Guangdong 515634, China
1 植物名称 穗花牡荆(Vitex agnus-castus L.)。
2 材料类别 幼龄植株的顶芽及带节茎段。
3 培养条件 基本培养基为WPM。(1)启动培养基:
WPM+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.2+3%蔗
糖; (2)增殖培养基: WPM+6-BA 0.75+NAA 0.2+3%
蔗糖; (3)壮苗及生根培养基: WPM+NAA 0.25+3%
蔗糖。以上培养基中均加入 5 g·L-1琼脂, pH 5.8, 常
规高压灭菌。光照强度为 50~60 μmol·m-2·s-1, 光
照时间 10 h·d-1; 培养温度为(25±1) ℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 将干燥的穗花牡荆种子浸泡
24 h后, 以种子 1份泥炭土(30%含水量) 1份混合
均匀, 放入 4 ℃冰箱中, 低温处理 3个月, 以促其度
过休眠期。经低温处理后的种子, 播种在泥炭土
中, 15 d后种子萌发, 幼苗长出真叶后, 取幼龄植株
的顶芽及带节茎段作为外植体。在超净工作台上
用 75%酒精消毒 15 s, 再置于 0.1%的HgCl2中消
毒 3~5 min, 用无菌水冲洗 5~6遍。然后接入培养
基(1 )上。
4.2 芽的诱导 顶芽在培养基(1)上10 d开始萌发伸
长; 带节茎段培养 2周后, 腋芽开始萌发伸长; 4周
后最高可达 3 cm左右, 同时基部形成少量不定芽,
有少量愈伤组织形成, 但不影响芽的生长。
4.3 试管苗的增殖 30 d后, 将诱导所得试管苗切
段, 每段上留有 1~2个节间, 接种在培养基(2)上。
20 d后形成新的丛生芽, 增殖系数平均达 7~8。以
后每隔 25~30 d继代 1次。当幼苗长至 2~3 cm、
带有6~8个叶片时, 将其沿茎基部剪断接入培养基
(3)中, 进行生根培养。剩下的幼小芽体, 也可接
入培养基(3)中, 这些幼芽可继续生长, 部分芽能长
高到2 cm 以上并生根的, 可出瓶移栽; 过小的或未
生根的芽接入培养基(2)中继续增殖。
4.4 生根与移栽 试管苗在培养基(3)上培养20 d左
右, 从小苗基部切口处产生 4~5条根, 根长达 2 cm
左右, 生根率 90%。这些苗可移栽。幼苗移栽前,
先打开瓶塞, 置于室温下锻炼 1 d。洗去根部的琼
脂, 移入事先消过毒的泥炭土中, 置于温室内, 用塑
料薄膜罩保湿, 移栽后 7 d内注意遮荫。温度控制
在 25 ℃左右, 湿度在 85%左右。10 d后, 逐渐掀
去塑料薄膜, 成活率达 85%以上。
5 意义与进展 穗花牡荆为马鞭草科牡荆属植物,
原产于地中海地区, 它的果实长期以来一直用于治
疗女性疾病。在欧洲常广泛用于治疗雌激素失调
及经前期综合症(孟李和魏铁花 2005)。穗花牡荆
的气味芳香, 花朵美丽, 在园林绿化上也有广泛的
用途。穗花牡荆引进我国时间不久, 数量稀少。
繁殖所用的种子依靠进口, 价格昂贵, 发芽率低, 在
很大程度上限制了其在我国的推广和利用, 本文结
果可能有利于解决这个问题。穗花牡荆的组织培
养未见报道。
参考文献
孟李, 魏铁花(2005). 穗花牡荆的药理活性与临床应用. 国外医药 ·
植物药分册, 20 (4): 145~149
植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture