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植物组织培养简报摘编



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期,2004 年 2 月74
收稿 2002-11-25
修定 2003-07-15
* 通讯作者(E-mail:
lwang2001@
elong.com,Tel:
028-84515754)。
植物材料、外植体 培养条件 结 果 作者(单位)
盾叶薯蓣(Dioscorea
zingiberensis)
顶芽和具节的幼茎
(1)芽分化培养基:
MS+6-BA 1.0 mg.L-1
(单位下同)+NAA 0.2;
( 2 ) 继 代 分 化 培 养
基:MS+6-BA 1.0~2.0+
IBA 0.2~0.8;(3)生
根培养基 1/2 M S + N A A
0.5。培养基均附加 3%
蔗糖、0 . 7 % 琼脂,p H
6.2。培养温度25~27℃,
光照12 h.d-1, 光照度
2 000 lx。
取薯蓣带顶芽嫩枝,先在加有洗衣粉的洗涤液中
漂洗 10 min,反复摇动,再用自来水冲洗 20 min。
然后在超净工作台上用75%的酒精消毒0.5~1 min,0.1%
的升汞表面消毒 8~10 min,最后用无菌水冲洗 6 次。
用刀切成带有 1 个侧芽的茎段,接种于培养基(1)
上。7 d 后腋芽启动,15 d 后长出小芽,底部长出黄
绿色愈伤组织。32 d 后新芽长成 4~5 cm 的芽苗。将
上述芽苗从原茎段上切成带腋芽的茎段,转接到新鲜
配制的芽繁殖培养基(2)上,促使幼茎长出更多的
芽苗。将初代培养的试管苗切割成带芽茎段,接种于
培养基(2)上,约 7 d 后枝条基部形成绿色愈伤组
织突起,20 d 后叶腋出现丛生芽。继代周期为30 d,
繁殖系数为 4。多次继代后,不仅生长随继代数的增
加而增快,增殖率也会逐渐增加。薯蓣芽的增殖受细
胞分裂素的调节控制。细胞分裂素中以 6-BA 作用较
好,生长素以 I B A 为好。将较健壮的无根苗分成单
株,去除基部的愈伤组织,接种在培养基(3 )上。
10 d 后苗基部分化出不定根,20 d 后生根率达到 90%
以上。待根长至 2~3 cm 时,将试管苗瓶盖打开,室
温下炼苗 3 d,洗去根部琼脂,移植到装有蛭石的育
苗盘中。每周喷 1 次营养液,盖膜保持 75% 以上的相
对湿度,成活率可以达到 8 0 % 以上。
王 慧* 唐雪松 叶
琴(成都农业科技职
业学院, 温江 611130)
收稿 2002-11-22
修定 2003-06-04
* E-mail:wang-
huisq8987@
sina.com,Tel:
028-82732142
洋桔梗(Eust o m a
sp.)日本品种“asuka
no sora”
叶片
愈伤组织诱导培养
基:(1)MS+6-BA 1.0 mg.
L - 1(单位下同)+N A A
0.2,(2)MS+6-BA 0.5+
NAA 0.2,(3)MS+KT
2 . 0 + I B A 0 . 5 ,(4 )
MS+KT 1.0+IBA 0.5;分
化培养基:(5 )M S +
6-BA 1.0+NAA 0.08,
(6 )M S + 6 - B A 0 . 1 ,
(7)M S + K T 1 . 0 + I B A
0 . 5 ;生根培养基:
(8)1/2MS+NAA 0.2,
(9)1/2MS+IBA 0.5。
各种培养基均附加 3 %
糖、0 . 8 % 琼脂粉,p H
5.8~6.0。培养温度为
(2 5 ± 2)℃,光照 1 6
h.d-1,光照度2 000 lx。
新长出的幼嫩叶片经水冲洗干净后用 75% 酒精消
毒 30 s,转入 0.1% HgCl2 浸泡 2 min,无菌水冲洗 2
次,接种于培养基(1)~(4)上。20 d左右,各
培养基中的外植体均诱导出愈伤组织,愈伤组织出现
在切口上,呈粒状淡绿色,诱导率为 100%。但培养
基(1 )上诱导的愈伤组织呈较松散的水浸状,
(2)~(4)上诱导的愈伤组织较为致密,(3 )上
形成的愈伤组织比(2 )、(4 )上的多,略显黄色。
将培养基(1)~(4)诱导的愈伤组织分别接种到
培养基(5 )~(7 )中。在培养基(1)诱导
的水浸状愈伤组织在培养基(5)上分化出的苗仍呈
水浸状,玻璃化极严重,即使增加琼脂浓度和光照强
度亦如此, 而接种在(6 )、(7 )上经 2 代培养后,
玻璃化消除,叶片浓绿肥大。在培养基(2)~
(4)诱导的致密愈伤组织接种到培养基(5 )上,
分化出的苗部分玻璃化,且随着继代次数的增多,玻
璃化加重;而接种在(6 )、(7 )上则分化出正常
的苗,增殖倍数10 倍左右。取长有2 对叶片的无根壮
苗接种于生根培养基(8)、(9)上,2 0 d 左右,
两种培养基上的小苗均长出短而粗壮的白色根。当根长
至 5~6 cm 时,敞瓶炼苗 5 d 后,取出苗,洗去根部
培养基,移栽到腐殖土和蛭石以 3∶1 混合的花钵中,
浇透水,1 周内覆盖塑料薄膜保湿(薄膜上有小孔),
温度在22℃。15 d 左右检查,成活率在95% 以上。
李 群1 刘光勇2 王
丽3,*(1四川师范大
学生命科学学院, 成
都 610066;2成都市
猛追湾双语学校, 成
都 610051;3四川大学
生命科学学院, 成都
610064)
悬垂秋海棠(Begonia
pendula)品种“龙
翅”(dragon wing)
幼嫩的叶片、茎尖、
花梗、花托或花蕾
(1)MS+6-BA 0.5 mg.
L - 1(单位下同);( 2 )
MS+6-BA 1.0;(3)MS+
6-BA 0.5+NAA 0.2 (4)
M S + 6 - B A 1 . 0 + N A A
0.2;(5)MS+6-BA 0.5+
NAA 0.1;(6)1/2MS+NAA
0.1。以上均加入 3% 蔗
糖、0.65% 卡拉胶,pH
5.8。培养温度(25±1)℃,
光照度3 000 lx,光照时
间10 h.d-1。
外植体切成1.5 cm×1.5 cm方块或1 cm小段,接
种于培养基(1 )中,叶片和茎尖开始膨大;花梗、
花托和花蕾需25 d 以上。30~35 d,在叶片和茎膨大
部位产生大量小芽,而花蕾只有少数能膨大和产生小
芽。45~55 d 后形成丛芽。切割丛芽转接到培养基
(5)中继续增殖,月繁殖系数为 6~ 8 倍。长成无根
苗后转接于培养基(6)上,约 10~13 d 开始生根,
25~30 d后均可形成健壮根系。平均根数4.2条.株-1,生
根率 100%。取出植株,洗净培养基,移栽于腐殖土
和珍珠岩(2∶1)的基质中。保持相对湿度 90 % 左
右。苗移栽成活率可达 9 5 % 以上。
廖俊杰1,* 夏时云2 许
继勇2 林玉兴2 麦瑜
林2(1 广东轻工职业
技术学院食品生物工
程 系 , 广 州
510300;2汕头市中
蔬花卉有限公司, 汕
头 515041)
收稿 2002-12-09
修定 2003-09-25
* E-mail:junjie-
liao@163.com,
Tel:020-34301955