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莳萝的组织培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月 485
收稿 2005-11-07 修定  2006-04-04
资助 辽宁师范大学教改项目(20050101123)。
* 通讯作者(E-mail: changyangjiang@126.com, Tel: 0411-
84258983)。
莳萝的组织培养和植株再生
曲典 赵玉杰 霍旺 姜长阳*
辽宁师范大学生命科学学院,辽宁大连116029
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Anethum graveolens Linn.
QU Dian, ZHAO Yu-Jie, HUO Wang, JIANG Chang-Yang*
College of Life Science, Liaoning Normal University, Dalian, Liaoning 116029, China
1 植物名称 莳萝(Anethum graveolens Linn.)。
2 材料类别 叶 片 。
3 培养条件 培养基:(1) MS+6-BA 0.2 mg·L-1 (单
位下同)+IAA 0.2; (2) MS+6-BA 0.4+NAA 0.2; (3)
MS+6-BA 0.6+IBA0.2; (4) MS+6-BA 0.8+2,4-D 0.2;
(5) MS+6-BA 0.1+NAA 0.1; (6) MS+6-BA 0.15+NAA
0.1; (7) MS+6-BA 0.2+NAA 0.1; (8) MS+6-BA 0.25 +
NAA 0.1; (9) MS+6-BA 0.3+NAA 0.1; (10) 1/2
MS+IAA 0.6; (11) 1/2MS+IAA 1.2。上述MS培养
基中加30 g·L-1蔗糖,1/2MS培养基中加10 g·L-1蔗
糖。所有琼脂固体培养基的胨力强度均为 1 8 0
g·cm-2 (姜长阳 1992),pH 5.8~6.0。光强 40~60
µmol·m-2·s-1,光照 12 h·d-1;温度 18~26℃。愈
伤组织分化培养光强60~100 µmol·m-2·s-1,光照
10~11 h·d-1,培养温度14~27℃。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 将莳萝叶片放入广口瓶中,
冲洗 10 min,加 0.05% 安利洗涤液振荡洗涤 4
min,再用水洗涤5次。70%乙醇灭菌10~15 s后,
无菌水清洗3次,0.05% 的 HgCl2 溶液振荡灭菌8
m i n,无菌水振荡清洗 5 次,即获得无菌材料。
4.2 愈伤组织的诱导 将无菌嫩叶切成0.3 cm左右
的块状,接种到培养基(1)~(4)上,进行愈伤组织
的诱导培养。30 d 时,培养基(1)、(3)上未形成
愈伤组织,(2)、(4)开始形成愈伤组织。70 d 时,
(2)、(4)诱导率为 59% 和 87%。培养基(4)诱导率
高,但愈伤组织白而松软,没有分化能力;(2)
上的愈伤组织呈黄绿色颗粒状,具分化能力。
4.2 分化培养 愈伤组织接种到培养基(5)~(9)上分
化培养。愈伤组织均缓慢生长,20 d 时,培养基
(5)~(8)上,愈伤组织的上部颗粒由浅黄色变成绿
色;再过 10 d 左右,长出绿色的芽点;60 d 左
右,分化出不定芽。
4.3 试管苗的生根 将高0.5 cm以上的不定芽剪下,
转接培养基(10)、(11)上进行生根培养。培养基
(10)上,10 d左右即形成可见根原基,根生长迅
速;培养基(11)上,约 15 d 才形成可见根原基,
根生长缓慢。40 d时,培养基(10)生根率为91%,
平均生根 4.6 条 · 株-1,根长 2~3 cm,生根试管
苗生长较为旺盛。
4.4 试管苗的移栽 将生根试管苗的三角瓶打开,
在80~100 µmol·m-2·s-1 的光强下炼苗3 d,用镊子
取出,洗去根部培养基后,移栽到分别装有炉灰
渣、河沙 2 种基质的花盆中,在温度 18~26℃、
湿度90%~95% 和没有直射光的条件下培养 10 d,
再恢复正常的日光温室条件培养,30 d时的成活
率分别为 84%、81%。移栽试管苗的长势与同期
播种的实生苗基本一致,但前者长势整齐。
5 意义与进展 莳萝属于伞形科莳萝属一年或二年
生草本植物,嫩茎叶可食,是近年来颇受人们欢
迎蔬菜。其种子不仅可入药,而且具有驱风、健
胃等多种疗效。但在辽宁南部地区的栽培存在着
不易获得种子,种子发芽率低,实生苗长势参差
不齐等问题。本试验为满足生产需要,提供长势
整齐的种苗奠定了基础。尽管目前已有伞形科植
物组织培养及无性系建立的报道(董玲等 2003),
但迄今未见莳萝组织培养及无性系建立的报道。
参考文献
姜长阳(1992). 培养基琼脂用量的商榷. 植物生理学通讯, 28 (2):
155
董玲, 陈静娴, 廖华俊, 潘美芳(2003). 水芹组织培养与快繁. 植物
生理学通讯, 39 (3): 235