全 文 ：植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期，2004 年 6 月 343
怀牛膝愈伤组织的诱导和植株再生
李明军* 于相丽 陈明霞 杨明俊 张晓丽
河南师范大学生命科学学院, 新乡 453002
Induction of Callus and Plantlet Regeneration of Achyranthes bidentata
LI Ming-Jun*, YU Xiang-Li, CHEN Ming-Xia, YANG Ming-Jun, ZHANG Xiao-Li
College of Life Sciences, Henan Normal University, Xinxiang 453002
收稿 2003-07-14 修定 　 2003-11-03
资助　 河南省科技攻关项目(0124180503、971060404)。
* E-mail: limingjun2002@263.net, Tel: 0373-3328189
1 植物名称 怀牛膝(Achyranthes bidentata)种子由
河南省温县农业科学研究所提供。
2 材料类别 子叶。
3 培养条件 以MS为基本培养基。诱导愈伤组织
及再分化的培养基：(1)MS+2,4-D 1.0 mg·L-1(单位
下同)+6-BA 0.1；(2)MS+2,4-D 1.0+6-BA 1.0。生
根培养基：(3)MS+NAA 0.05。以上培养基均添加
3%蔗糖、0.60% 琼脂，pH 5.8~6.2，培养温度为
(25±2)℃，光照度2 000 lx，光照时间14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取种子经流水冲洗1 h，将
其平铺于放有浸湿滤纸的培养皿内，培养出苗。
在无菌条件下，将幼苗在70% 酒精中浸泡30 s，
再用0.1% HgCl2 浸泡3.5 min，无菌水冲洗6次。
4.2 愈伤组织的诱导和植株再生 将子叶从幼苗上
切离并接种于诱导愈伤组织的培养基上，放在培
养室中培养。2 d 后子叶普遍膨大并翘起；5 d
后，子叶与培养基接触处开始形成淡黄色颗粒状
愈伤组织，其中培养基( 2 ) 上出愈率较高，达
8 7 % ，在此培养基上，愈伤组织继续膨大；培
养 24 d 左右，愈伤组织上部变绿，有突起的嫩
绿色芽点；30 d 时芽长 1.0 cm 左右，同时有对
生叶的分化。
4.3 生根与移栽 将高约2~3 cm的再生苗接种于生
根培养基上，11 d 后开始生根。根呈白色，其上
着生细小的根毛。生根率为100%。每苗生根数平
均可达6条(图1)。将根长为1.0~1.5 cm的生根小
苗移入经过消毒的珍珠岩和蛭石(1︰1)的基质中，
遮阴，喷雾保湿，2 周后即可移入土壤，成活率
为 95% 以上(图 2)。
5 意义与进展 怀牛膝为苋科牛膝属多年生草本植
物，主产于河南沁阳、武陟、修武、温县一带，
为我国著名的“四大怀药”之一。其根含皂甙
元、齐墩果酸、蜕皮激素、牛膝多糖等有效成
分，具有补肝肾、强筋骨、通血脉、降血压、
镇痛、引药下行和泻浊通淋等功效。因此，它
越来越受到人们的青睐，具有广阔的开发利用前
景。目前，怀牛膝的研究多集中于成分分析、药
理作用及栽培技术等，以其子叶为外植体进行愈
伤组织诱导和植株再生的研究尚未见报道。
图1 再生植株的生根
图2 移栽后成活的再生植株