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植物组织培养简报摘编



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月 473
植物组织培养简报摘编
植物材料和外植体 培养条件 结 果 作者(单位)
收稿 2003-07-14
修定 2003-11-03
资助 河 南 省 科
技 攻关项目
(0124180503、
971060404)。
* E-mail:liming-
jun2002@263.
net,Tel:0373-
3328189
怀菊花(Dendrant-
hema morifolium)
带腋芽的茎段
(1)无菌苗形成培
养基:MS;(2)分化
培养基:M S + N A A
0.5 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 2.0;(3)增殖
培养基:M S + N A A
0.5+KT 2.0;(4)生
根培养基:MS+PP333
0.5。以上培养基均
加入3%蔗糖、0.55%
琼脂,pH 6.0。培
养温度为(25±2)℃,
光照度2 000 lx,光
照时间 14 h·d-1。
  切取带腋芽的茎段在自来水下冲洗干净后,在超净台上用
70% 酒精消毒 30 s,再用 0.1% 的 HgCl2 溶液消毒 5 min,无
菌水冲洗 9次。将茎段切成2 cm 左右的小段,接种到培养基
(1)上,培养 15 d 后获得无菌苗。将获得的无菌苗切成2 cm
左右、至少含 1 个腋芽的茎段,放入培养基(2)中培养。5 d
后茎段切口处开始膨大,8 d左右开始形成黄绿色颗粒状愈伤
组织。其后在新增殖的颗粒状愈伤组织上出现嫩绿色水浸状芽
点,经过一段时间分化出许多绿叶和不定芽,14 d 左右发育
成丛生小苗。在每块愈伤组织上分化出的小苗数量不等。将
获得的丛生苗切成单个苗,接种到培养基(3)上,3 周左右即
可进行转接。试管苗的增殖系数为 5~8,繁殖方式为腋生枝
型。无菌苗长至3~4 cm时接种到培养基(4)中,4 d后即有根
生成,7 d 后试管苗生根率达 100%,并出现次级根。14 d
时,试管苗每株平均生根数为17.75个,平均根长为2.75 cm,
而且根比较粗壮。选择根长超过1 cm 的苗移入用蒸馏水淋透
的珍珠岩与蛭石混合(1∶1)的基质中,并在其上扣上透光、
通气且保湿的塑料杯,以防止小苗失水而枯死。每天不定期
喷洒 MS 营养液。1 周后去掉覆盖物,并逐渐减少营养液喷洒
量,15 d 后成活率可达 85% 以上。
李明军* 于相丽 刘志
刚 陈明霞 洪森荣(河
南师范大学生命科学
学院,新乡 453002)
一品红(Euphorbia
pulcherrima)
带叶柄的幼叶
愈伤组织诱导培
养基:(1) MS+2,4-D
2 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 0.1+NAA 0.1;
芽分化培养基:(2)
M S + 6 - B A 2 + N A A
0.2;(3) MS+6-BA
0.5+IAA 0.4;生根
培养基:(4)1/2MS +
NAA 1。上述培养基均
添加3% 蔗糖、0.5%
琼脂,pH 5.8。培
养温度为(25±1)℃,
光源为日光灯,光
照度为2 000~3 000 lx,
光照时间为12 h·d -1。
取带叶柄的幼叶,用流水冲洗30 min,再用0.2%的升汞
浸泡8~10 min,无菌水冲洗4~5次后,接种至培养基(1)中暗
培养。6 d 后叶片开始膨大、拱起,20 d 后叶片边缘及切口
处出现少量致密愈伤组织,诱导率达 100%。将生长良好的愈
伤组织转接到培养基(2)中光照培养,约2周后愈伤组织表面逐
渐出现一些颗粒状小绿点,几天后明显观察到小绿点的地方开
始芽的分化,分化率为 100%。芽状物继续发育,形成丛生
芽。在高 6-BA 含量的培养基(2)上,幼苗呈丛生状态,只形
成叶而不形成茎,长不高。将丛生芽转移到低6-BA 含量的培
养基(3)上,25 d 左右芽逐渐长高,形成粗壮的茎叶。将丛
生芽切割在相同培养基上继代培养,即可得到大量粗壮丛生
芽。将增殖形成的高约3.0~5.0 cm的粗壮小芽切割成单芽,转
接到培养基(4)上诱导生根。3 周左右开始长根,一个半月即
可长出3~5条 1.0~1.5 cm 长的幼根,形成一株健壮完整的植
株。生根率达 90%。打开封口膜,炼苗 3~5 d 后,小心取
出分化苗,洗掉根部的培养基,将其根部浸泡在双蒸水中。
1 周后移栽到盛有土壤的瓦盆内,罩一玻璃罩,放在散射光
下,注意通风,保持环境温度20~25℃和相对湿度 75% 左右,
后期逐渐加大通风时间和次数,增加自然光照。其幼苗移栽
成活率达 7 5 %。
徐文华1,2 李毅1 王莉1
陈桂琛1,*(1 中国科学院
西北高原生物研究
所,西宁 810001; 2 中
国科学院研究生院,
北京 100039)
盾叶薯蓣(Dioscorea
zingiberensis)
带芽幼嫩茎段
  ( 1 ) 启动培养
基:MS+6-BA 2.0
mg·L-1 (单位下同)+
KT 0.5;(2)增殖培
养基:MS+6-BA 2.0
+NAA 0.2;(3)株芽
诱导培养基:M S +
6-BA 4.0 + IBA 1.0。
培养基(1) 和(2)中附加
琼脂7 g·L-1、蔗糖30
g· L-1, 培养基(3) 中
附加琼脂7 g·L-1、蔗
糖40~60 g·L-1。以上
培养基 pH 5.8。培
养温度为(26±2)℃,
光照14 h·d-1,光照
度为1 500~2 000 lx。
  取幼嫩带芽茎段接种于培养基(1)上。1 周后,外植体上
腋芽着生处开始膨大成浅绿色较致密愈伤组织球体。接种15 d
后切除膨大球体周边的褐化部分,转入新鲜培养基中。20 d
后致密愈伤组织块上开始产生许多新的绿色芽点。将带芽点的
致密愈伤组织块进行切割,转入培养基(2)中。芽点迅速生
长,形成数量较多的丛芽。待丛生芽长到约2.5~3.0 cm高时,
切割并转接到培养基(3)中。15 d后,试管苗原来的茎部和叶
片均枯黄、凋萎,而茎基部膨大成单个或多个各自独立的小
株芽,平均为 3~4 个。小株芽由银白色鳞片状芽苞所包被,
基部陆续长出不定根,生根率约为 95%。将试管株芽根部的
培养基洗净,转入混合培养基质,置于光照培养箱中,约 2
周顶芽开始萌发。再经过 1 周,将各独立的带根株芽分离并
转入营养土中进行培养。带根小株芽的移栽成活率可达到90%
以 上 。
彭晓英 周朴华﹡ 张良
波 蒋道松 彭尽晖(湖
南农业大学理学院,
长沙 410128)
收稿 2003-07-21
修定 2003-12-08
* 通讯作者 (E-
mail:gcchen@
mail.nwipb.ac.
cn,Tel:0971-
6143523)。
收稿 2003-09-24
修定 2004-01-04
资助  湖 南 省 重 点
科技攻关项目
(BK0272)。
* 通讯作者(E-
mail:xyp2000
@21cn.com,Tel:
0731-4617345)。
植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月 473
植物组织培养简报摘编
植物材料和外植体 培养条件 结 果 作者(单位)
收稿 2003-07-14
修定 2003-11-03
资助 河 南 省 科
技 攻关项目
(0124180503、
971060404)。
* E-mail:liming-
jun2002@263.
net,Tel:0373-
3328189
怀菊花(Dendrant-
hema morifolium)
带腋芽的茎段
(1)无菌苗形成培
养基:MS;(2)分化
培养基:M S + N A A
0.5 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 2.0;(3)增殖
培养基:M S + N A A
0.5+KT 2.0;(4)生
根培养基:MS+PP333
0.5。以上培养基均
加入3%蔗糖、0.55%
琼脂,pH 6.0。培
养温度为(25±2)℃,
光照度2 000 lx,光
照时间14 h·d-1。
  切取带腋芽的茎段在自来水下冲洗干净后,在超净台上用
70% 酒精消毒 30 s,再用 0.1% 的 HgCl2 溶液消毒 5 min,无
菌水冲洗 9次。将茎段切成2 cm 左右的小段,接种到培养基
(1)上,培养 15 d 后获得无菌苗。将获得的无菌苗切成2 cm
左右、至少含 1 个腋芽的茎段,放入培养基(2)中培养。5 d
后茎段切口处开始膨大,8 d左右开始形成黄绿色颗粒状愈伤
组织。其后在新增殖的颗粒状愈伤组织上出现嫩绿色水浸状芽
点,经过一段时间分化出许多绿叶和不定芽,14 d 左右发育
成丛生小苗。在每块愈伤组织上分化出的小苗数量不等。将
获得的丛生苗切成单个苗,接种到培养基(3)上,3 周左右即
可进行转接。试管苗的增殖系数为 5~8,繁殖方式为腋生枝
型。无菌苗长至3~4 cm时接种到培养基(4)中,4 d后即有根
生成,7 d 后试管苗生根率达 100%,并出现次级根。14 d
时,试管苗每株平均生根数为17.75个,平均根长为2.75 cm,
而且根比较粗壮。选择根长超过1 cm 的苗移入用蒸馏水淋透
的珍珠岩与蛭石混合(1∶1)的基质中,并在其上扣上透光、
通气且保湿的塑料杯,以防止小苗失水而枯死。每天不定期
喷洒 MS 营养液。1 周后去掉覆盖物,并逐渐减少营养液喷洒
量,15 d 后成活率可达 85% 以上。
李明军* 于相丽 刘志
刚 陈明霞 洪森荣(河
南师范大学生命科学
学院,新乡 453002)
一品红(Euphorbia
pulcherrima)
带叶柄的幼叶
愈伤组织诱导培
养基:(1) MS+2,4-D
2 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 0.1+NAA 0.1;
芽分化培养基:(2)
M S + 6 - B A 2 + N A A
0.2;(3) MS+6-BA
0.5+IAA 0.4;生根
培养基:(4)1/2MS +
NAA 1。上述培养基均
添加3% 蔗糖、0.5%
琼脂,pH 5.8。培
养温度为(25±1)℃,
光源为日光灯,光
照度为2 000~3 000 lx,
光照时间为12 h·d -1。
取带叶柄的幼叶,用流水冲洗30 min,再用0.2%的升汞
浸泡8~10 min,无菌水冲洗4~5次后,接种至培养基(1)中暗
培养。6 d 后叶片开始膨大、拱起,20 d 后叶片边缘及切口
处出现少量致密愈伤组织,诱导率达 100%。将生长良好的愈
伤组织转接到培养基(2)中光照培养,约2周后愈伤组织表面逐
渐出现一些颗粒状小绿点,几天后明显观察到小绿点的地方开
始芽的分化,分化率为 100%。芽状物继续发育,形成丛生
芽。在高 6-BA 含量的培养基(2)上,幼苗呈丛生状态,只形
成叶而不形成茎,长不高。将丛生芽转移到低6-BA 含量的培
养基(3)上,25 d 左右芽逐渐长高,形成粗壮的茎叶。将丛
生芽切割在相同培养基上继代培养,即可得到大量粗壮丛生
芽。将增殖形成的高约3.0~5.0 cm的粗壮小芽切割成单芽,转
接到培养基(4)上诱导生根。3 周左右开始长根,一个半月即
可长出3~5条 1.0~1.5 cm 长的幼根,形成一株健壮完整的植
株。生根率达 90%。打开封口膜,炼苗 3~5 d 后,小心取
出分化苗,洗掉根部的培养基,将其根部浸泡在双蒸水中。
1 周后移栽到盛有土壤的瓦盆内,罩一玻璃罩,放在散射光
下,注意通风,保持环境温度20~25℃和相对湿度 75% 左右,
后期逐渐加大通风时间和次数,增加自然光照。其幼苗移栽
成活率达 7 5 %。
徐文华1,2 李毅1 王莉1
陈桂琛1,*(1 中国科学院
西北高原生物研究
所,西宁 810001; 2 中
国科学院研究生院,
北京 100039)
盾叶薯蓣(Dioscorea
zingiberensis)
带芽幼嫩茎段
  ( 1 ) 启动培养
基:MS+6-BA 2.0
mg·L-1 (单位下同)+
KT 0.5;(2)增殖培
养基:MS+6-BA 2.0
+NAA 0.2;(3)株芽
诱导培养基:M S +
6-BA 4.0 + IBA 1.0。
培养基(1) 和(2)中附加
琼脂7 g·L-1、蔗糖30
g· L-1, 培养基(3) 中
附加琼脂7 g·L-1、蔗
糖40~60 g·L-1。以上
培养基 pH 5.8。培
养温度为(26±2)℃,
光照14 h·d-1,光照
度为1 500~2 000 lx。
  取幼嫩带芽茎段接种于培养基(1)上。1 周后,外植体上
腋芽着生处开始膨大成浅绿色较致密愈伤组织球体。接种15 d
后切除膨大球体周边的褐化部分,转入新鲜培养基中。20 d
后致密愈伤组织块上开始产生许多新的绿色芽点。将带芽点的
致密愈伤组织块进行切割,转入培养基(2)中。芽点迅速生
长,形成数量较多的丛芽。待丛生芽长到约2.5~3.0 cm高时,
切割并转接到培养基(3)中。15 d后,试管苗原来的茎部和叶
片均枯黄、凋萎,而茎基部膨大成单个或多个各自独立的小
株芽,平均为 3~4 个。小株芽由银白色鳞片状芽苞所包被,
基部陆续长出不定根,生根率约为 95%。将试管株芽根部的
培养基洗净,转入混合培养基质,置于光照培养箱中,约 2
周顶芽开始萌发。再经过 1 周,将各独立的带根株芽分离并
转入营养土中进行培养。带根小株芽的移栽成活率可达到90%
以 上 。
彭晓英 周朴华﹡ 张良
波 蒋道松 彭尽晖(湖
南农业大学理学院,
长沙 410128)
收稿 2003-07-21
修定 2003-12-08
* 通讯作者 (E-
mail:gcchen@
mail.nwipb.ac.
cn,Tel:0971-
6143523)。
收稿 2003-09-24
修定 2004-01-04
资助  湖 南 省 重 点
科技攻关项目
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0731-4617345)。
植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月 473
植物组织培养简报摘编
植物材料和外植体 培养条件 结 果 作者(单位)
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(0124180503、
971060404)。
* E-mail:liming-
jun2002@263.
net,Tel:0373-
3328189
怀菊花(Dendrant-
hema morifolium)
带腋芽的茎段
(1)无菌苗形成培
养基:MS;(2)分化
培养基:M S + N A A
0.5 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 2.0;(3)增殖
培养基:M S + N A A
0.5+KT 2.0;(4)生
根培养基:MS+PP333
0.5。以上培养基均
加入3%蔗糖、0.55%
琼脂,pH 6.0。培
养温度为(25±2)℃,
光照度2 000 lx,光
照时间14 h·d-1。
  切取带腋芽的茎段在自来水下冲洗干净后,在超净台上用
70% 酒精消毒 30 s,再用 0.1% 的 HgCl2 溶液消毒 5 min,无
菌水冲洗 9次。将茎段切成2 cm 左右的小段,接种到培养基
(1)上,培养 15 d 后获得无菌苗。将获得的无菌苗切成2 cm
左右、至少含 1 个腋芽的茎段,放入培养基(2)中培养。5 d
后茎段切口处开始膨大,8 d左右开始形成黄绿色颗粒状愈伤
组织。其后在新增殖的颗粒状愈伤组织上出现嫩绿色水浸状芽
点,经过一段时间分化出许多绿叶和不定芽,14 d 左右发育
成丛生小苗。在每块愈伤组织上分化出的小苗数量不等。将
获得的丛生苗切成单个苗,接种到培养基(3)上,3 周左右即
可进行转接。试管苗的增殖系数为 5~8,繁殖方式为腋生枝
型。无菌苗长至3~4 cm时接种到培养基(4)中,4 d后即有根
生成,7 d 后试管苗生根率达 100%,并出现次级根。14 d
时,试管苗每株平均生根数为17.75个,平均根长为2.75 cm,
而且根比较粗壮。选择根长超过1 cm 的苗移入用蒸馏水淋透
的珍珠岩与蛭石混合(1∶1)的基质中,并在其上扣上透光、
通气且保湿的塑料杯,以防止小苗失水而枯死。每天不定期
喷洒 MS 营养液。1 周后去掉覆盖物,并逐渐减少营养液喷洒
量,15 d 后成活率可达 85% 以上。
李明军* 于相丽 刘志
刚 陈明霞 洪森荣(河
南师范大学生命科学
学院,新乡 453002)
一品红(Euphorbia
pulcherrima)
带叶柄的幼叶
愈伤组织诱导培
养基:(1) MS+2,4-D
2 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 0.1+NAA 0.1;
芽分化培养基:(2)
M S + 6 - B A 2 + N A A
0.2;(3) MS+6-BA
0.5+IAA 0.4;生根
培养基:(4)1/2MS +
NAA 1。上述培养基均
添加3% 蔗糖、0.5%
琼脂,pH 5.8。培
养温度为(25±1)℃,
光源为日光灯,光
照度为2 000~3 000 lx,
光照时间为12 h·d -1。
取带叶柄的幼叶,用流水冲洗30 min,再用0.2%的升汞
浸泡8~10 min,无菌水冲洗4~5次后,接种至培养基(1)中暗
培养。6 d 后叶片开始膨大、拱起,20 d 后叶片边缘及切口
处出现少量致密愈伤组织,诱导率达 100%。将生长良好的愈
伤组织转接到培养基(2)中光照培养,约2周后愈伤组织表面逐
渐出现一些颗粒状小绿点,几天后明显观察到小绿点的地方开
始芽的分化,分化率为 100%。芽状物继续发育,形成丛生
芽。在高 6-BA 含量的培养基(2)上,幼苗呈丛生状态,只形
成叶而不形成茎,长不高。将丛生芽转移到低6-BA 含量的培
养基(3)上,25 d 左右芽逐渐长高,形成粗壮的茎叶。将丛
生芽切割在相同培养基上继代培养,即可得到大量粗壮丛生
芽。将增殖形成的高约3.0~5.0 cm的粗壮小芽切割成单芽,转
接到培养基(4)上诱导生根。3 周左右开始长根,一个半月即
可长出3~5条 1.0~1.5 cm 长的幼根,形成一株健壮完整的植
株。生根率达 90%。打开封口膜,炼苗 3~5 d 后,小心取
出分化苗,洗掉根部的培养基,将其根部浸泡在双蒸水中。
1 周后移栽到盛有土壤的瓦盆内,罩一玻璃罩,放在散射光
下,注意通风,保持环境温度20~25℃和相对湿度 75% 左右,
后期逐渐加大通风时间和次数,增加自然光照。其幼苗移栽
成活率达 7 5 %。
徐文华1,2 李毅1 王莉1
陈桂琛1,*(1 中国科学院
西北高原生物研究
所,西宁 810001; 2 中
国科学院研究生院,
北京 100039)
盾叶薯蓣(Dioscorea
zingiberensis)
带芽幼嫩茎段
  ( 1 ) 启动培养
基:MS+6-BA 2.0
mg·L-1 (单位下同)+
KT 0.5;(2)增殖培
养基:MS+6-BA 2.0
+NAA 0.2;(3)株芽
诱导培养基:M S +
6-BA 4.0 + IBA 1.0。
培养基(1) 和(2)中附加
琼脂7 g·L-1、蔗糖30
g· L-1, 培养基(3) 中
附加琼脂7 g·L-1、蔗
糖40~60 g·L-1。以上
培养基 pH 5.8。培
养温度为(26±2)℃,
光照14 h·d-1,光照
度为1 500~2 000 lx。
  取幼嫩带芽茎段接种于培养基(1)上。1 周后,外植体上
腋芽着生处开始膨大成浅绿色较致密愈伤组织球体。接种15 d
后切除膨大球体周边的褐化部分,转入新鲜培养基中。20 d
后致密愈伤组织块上开始产生许多新的绿色芽点。将带芽点的
致密愈伤组织块进行切割,转入培养基(2)中。芽点迅速生
长,形成数量较多的丛芽。待丛生芽长到约2.5~3.0 cm高时,
切割并转接到培养基(3)中。15 d后,试管苗原来的茎部和叶
片均枯黄、凋萎,而茎基部膨大成单个或多个各自独立的小
株芽,平均为 3~4 个。小株芽由银白色鳞片状芽苞所包被,
基部陆续长出不定根,生根率约为 95%。将试管株芽根部的
培养基洗净,转入混合培养基质,置于光照培养箱中,约 2
周顶芽开始萌发。再经过 1 周,将各独立的带根株芽分离并
转入营养土中进行培养。带根小株芽的移栽成活率可达到90%
以 上 。
彭晓英 周朴华﹡ 张良
波 蒋道松 彭尽晖(湖
南农业大学理学院,
长沙 410128)
收稿 2003-07-21
修定 2003-12-08
* 通讯作者 (E-
mail:gcchen@
mail.nwipb.ac.
cn,Tel:0971-
6143523)。
收稿 2003-09-24
修定 2004-01-04
资助  湖 南 省 重 点
科技攻关项目
(BK0272)。
* 通讯作者(E-
mail:xyp2000
@21cn.com,Tel:
0731-4617345)。
植物生理学通讯 第 40 卷 第 4期,2004 年 8 月 473
植物组织培养简报摘编
植物材料和外植体 培养条件 结 果 作者(单位)
收稿 2003-07-14
修定 2003-11-03
资助 河 南 省 科
技 攻关项目
(0124180503、
971060404)。
* E-mail:liming-
jun2002@263.
net,Tel:0373-
3328189
怀菊花(Dendrant-
hema morifolium)
带腋芽的茎段
(1)无菌苗形成培
养基:MS;(2)分化
培养基:M S + N A A
0.5 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 2.0;(3)增殖
培养基:M S + N A A
0.5+KT 2.0;(4)生
根培养基:MS+PP333
0.5。以上培养基均
加入3%蔗糖、0.55%
琼脂,pH 6.0。培
养温度为(25±2)℃,
光照度2 000 lx,光
照时间14 h·d-1。
  切取带腋芽的茎段在自来水下冲洗干净后,在超净台上用
70% 酒精消毒 30 s,再用 0.1% 的 HgCl2 溶液消毒 5 min,无
菌水冲洗 9次。将茎段切成2 cm 左右的小段,接种到培养基
(1)上,培养 15 d 后获得无菌苗。将获得的无菌苗切成2 cm
左右、至少含 1 个腋芽的茎段,放入培养基(2)中培养。5 d
后茎段切口处开始膨大,8 d左右开始形成黄绿色颗粒状愈伤
组织。其后在新增殖的颗粒状愈伤组织上出现嫩绿色水浸状芽
点,经过一段时间分化出许多绿叶和不定芽,14 d 左右发育
成丛生小苗。在每块愈伤组织上分化出的小苗数量不等。将
获得的丛生苗切成单个苗,接种到培养基(3)上,3 周左右即
可进行转接。试管苗的增殖系数为 5~8,繁殖方式为腋生枝
型。无菌苗长至3~4 cm时接种到培养基(4)中,4 d后即有根
生成,7 d 后试管苗生根率达 100%,并出现次级根。14 d
时,试管苗每株平均生根数为17.75个,平均根长为2.75 cm,
而且根比较粗壮。选择根长超过1 cm 的苗移入用蒸馏水淋透
的珍珠岩与蛭石混合(1∶1)的基质中,并在其上扣上透光、
通气且保湿的塑料杯,以防止小苗失水而枯死。每天不定期
喷洒 MS 营养液。1 周后去掉覆盖物,并逐渐减少营养液喷洒
量,15 d 后成活率可达 85% 以上。
李明军* 于相丽 刘志
刚 陈明霞 洪森荣(河
南师范大学生命科学
学院,新乡 453002)
一品红(Euphorbia
pulcherrima)
带叶柄的幼叶
愈伤组织诱导培
养基:(1) MS+2,4-D
2 mg·L-1(单位下同)
+6-BA 0.1+NAA 0.1;
芽分化培养基:(2)
M S + 6 - B A 2 + N A A
0.2;(3) MS+6-BA
0.5+IAA 0.4;生根
培养基:(4)1/2MS +
NAA 1。上述培养基均
添加3% 蔗糖、0.5%
琼脂,pH 5.8。培
养温度为(25±1)℃,
光源为日光灯,光
照度为2 000~3 000 lx,
光照时间为12 h·d -1。
取带叶柄的幼叶,用流水冲洗30 min,再用0.2%的升汞
浸泡8~10 min,无菌水冲洗4~5次后,接种至培养基(1)中暗
培养。6 d 后叶片开始膨大、拱起,20 d 后叶片边缘及切口
处出现少量致密愈伤组织,诱导率达 100%。将生长良好的愈
伤组织转接到培养基(2)中光照培养,约2周后愈伤组织表面逐
渐出现一些颗粒状小绿点,几天后明显观察到小绿点的地方开
始芽的分化,分化率为 100%。芽状物继续发育,形成丛生
芽。在高 6-BA 含量的培养基(2)上,幼苗呈丛生状态,只形
成叶而不形成茎,长不高。将丛生芽转移到低6-BA 含量的培
养基(3)上,25 d 左右芽逐渐长高,形成粗壮的茎叶。将丛
生芽切割在相同培养基上继代培养,即可得到大量粗壮丛生
芽。将增殖形成的高约3.0~5.0 cm的粗壮小芽切割成单芽,转
接到培养基(4)上诱导生根。3 周左右开始长根,一个半月即
可长出3~5条 1.0~1.5 cm 长的幼根,形成一株健壮完整的植
株。生根率达 90%。打开封口膜,炼苗 3~5 d 后,小心取
出分化苗,洗掉根部的培养基,将其根部浸泡在双蒸水中。
1 周后移栽到盛有土壤的瓦盆内,罩一玻璃罩,放在散射光
下,注意通风,保持环境温度20~25℃和相对湿度 75% 左右,
后期逐渐加大通风时间和次数,增加自然光照。其幼苗移栽
成活率达 7 5 %。
徐文华1,2 李毅1 王莉1
陈桂琛1,*(1 中国科学院
西北高原生物研究
所,西宁 810001; 2 中
国科学院研究生院,
北京 100039)
盾叶薯蓣(Dioscorea
zingiberensis)
带芽幼嫩茎段
  ( 1 ) 启动培养
基:MS+6-BA 2.0
mg·L-1 (单位下同)+
KT 0.5;(2)增殖培
养基:MS+6-BA 2.0
+NAA 0.2;(3)株芽
诱导培养基:M S +
6-BA 4.0 + IBA 1.0。
培养基(1) 和(2)中附加
琼脂7 g·L-1、蔗糖30
g· L-1, 培养基(3) 中
附加琼脂7 g·L-1、蔗
糖40~60 g·L-1。以上
培养基 pH 5.8。培
养温度为(26±2)℃,
光照14 h·d-1,光照
度为1 500~2 000 lx。
  取幼嫩带芽茎段接种于培养基(1)上。1 周后,外植体上
腋芽着生处开始膨大成浅绿色较致密愈伤组织球体。接种15 d
后切除膨大球体周边的褐化部分,转入新鲜培养基中。20 d
后致密愈伤组织块上开始产生许多新的绿色芽点。将带芽点的
致密愈伤组织块进行切割,转入培养基(2)中。芽点迅速生
长,形成数量较多的丛芽。待丛生芽长到约2.5~3.0 cm高时,
切割并转接到培养基(3)中。15 d后,试管苗原来的茎部和叶
片均枯黄、凋萎,而茎基部膨大成单个或多个各自独立的小
株芽,平均为 3~4 个。小株芽由银白色鳞片状芽苞所包被,
基部陆续长出不定根,生根率约为 95%。将试管株芽根部的
培养基洗净,转入混合培养基质,置于光照培养箱中,约 2
周顶芽开始萌发。再经过 1 周,将各独立的带根株芽分离并
转入营养土中进行培养。带根小株芽的移栽成活率可达到90%
以 上 。
彭晓英 周朴华﹡ 张良
波 蒋道松 彭尽晖(湖
南农业大学理学院,
长沙 410128)
收稿 2003-07-21
修定 2003-12-08
* 通讯作者 (E-
mail:gcchen@
mail.nwipb.ac.
cn,Tel:0971-
6143523)。
收稿 2003-09-24
修定 2004-01-04
资助  湖 南 省 重 点
科技攻关项目
(BK0272)。
* 通讯作者(E-
mail:xyp2000
@21cn.com,Tel:
0731-4617345)。