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耳叶补血草的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第4期,2006年8月680
耳叶补血草的组织培养与快速繁殖
张瑞麟* 范敏 吴慧 黄斐斐 王娜
新疆农业大学园艺学院,乌鲁木齐830052
Tissue Culture and Rapid Propagation of Limonium otolepis Kuntze
ZHANG Rui-Lin*, FAN Min, WU Hui, HUANG Fei-Fei, WANG Na
College of Horticulture, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 830052, China
收稿 2005-12-02 修定  2006-05-08
*E-mail: zrl8763861@yahoo.com.cn
1 植物名称 耳叶补血草(Limonium otolepis
Kuntze)。
2 材料类别 花 茎 。
3 培养条件 愈伤组织诱导培养基:(1) MS+6-BA
0.5 mg·L-1 (单位下同); (2) MS+6-BA 1.0; (3) MS+6-
BA 2.0;(4) MS+6-BA 3.0。芽分化和增殖培养
基:(5) 6-BA 0.5;(6) 6-BA 1.0;(7) 6-BA 3.0;(8)
6-BA 3.0+NAA 0.2;(9) 6-BA 3.0+NAA 0.5。生根
培养基:(10) 1/2MS+NAA 0.1;(11) 1/2MS+NAA
0.2;(12) 1/2MS+NAA 0.5。以上培养基均加 2%
蔗糖、0.5% 琼脂,pH 5.8。培养温度(26±2)℃,
光照时间12 h·d-1,光强约30 mmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 从实验地选取生长健壮、无
病虫害的耳叶补血草花茎,用自来水冲洗干净,
剪成约 3 cm 的茎段,放入小烧杯中,先用 70%
的酒精消毒30 s,然后倒入0.1% HgCl2表面消毒
8~10 min,再用无菌水冲洗 3~4 次,以备接种。
4.2 愈伤组织的诱导 以花茎为外植体分别接种在
培养基(1)~(4)中培养。5 d后,培养基(4)的外植
体开始膨大,15 d后长出愈伤组织。培养基(3)的
茎基部和节膨大,有少量愈伤组织形成。而培养
基(1)和(2)仅仅表现为花茎基部膨大,无愈伤组织
形成。由此可见,高浓度的6-BA 利于愈伤组织的
形成,培养基(4)是诱导愈伤组织的最佳培养基。
4.3 不定芽的分化和增殖 将愈伤组织切成0.5 cm×
0.5 cm的小块,接入培养基(5)~(9)中。30 d后,
培养基(9)不分化;(8)愈伤组织块褪色,形成少
量芽;(7)愈伤组织块褐变,分化少量芽;(6)分
化形成芽丛,且愈伤块组织增大;(5)分化形成大
量芽丛。可见加入 NAA 的培养基均不利于分化,
抑制分生组织形成;仅用 6-BA 的处理,只有(5)
有大量芽丛产生,其余的除了分化芽丛外,继续
形成愈伤组织,同时有褐变产生。可见(5)是分化
最佳培养基。继代培养时将芽丛切开,接入培养
基(5),使其继续分化,表现为生长速度快,长
势 好 。
4.4 生根与移栽 切下培养基(5)中芽苗接入培养基
(10)~(12)中培养,20 d左右,培养基中均长出根
系。(10)长出白色细长根,生根率 35%;(11)有
短粗白色根系,生根率 56%;(12)长出多条短粗
根系,生根率达 9 0 %。( 1 2 )为理想的生根培养
基。30 d 后经炼苗移出瓶外,洗净根部培养基,
栽入0.1%高锰酸钾消毒过的基质中,塑料薄膜覆
盖,成活率达 9 0 % 。
5 意义与进展 补血草是一种重要的干花材料,人
们对其组织培养做了大量的研究(陈佳瀛和杜秀达
2002;李凤琴 1996;倪跃元等 1996;张小苹等
1998)。耳叶补血草属于蓝雪科补血草属多年生野
生花卉,是一种天然的干燥花资源,也是插花中
的填充材料,在新疆有野生分布。王磊等(1997)
已经将其引种驯化获得成功。本文采用离体培养
技术,在短期内快速繁殖出整齐一致、健壮的新
苗,对耳叶补血草的开发利用可能有一定的参考
价值。耳叶补血草的组织培养和快速繁殖未见报
道。
参考文献
陈佳瀛, 杜秀达(2002). 补血草的组织培养和快速繁殖. 植物生理
通讯, 38 (6): 594
李凤琴(1996). 黄花补血草的组织培养技术. 中国沙漠, 15 (2):
198~200
倪跃元, 朱锦文, 赵晓艺(1996). 大花补血草优株无性系的建立.
植物生理学通讯, 32 (3): 200
王磊, 周桂玲, 廖康, 关雪莲(1997). 耳叶补血草野生花卉引种成
功. 北方园艺, (2): 51~52  
张小苹, 马双马, 那淑芝, 薛秋生(1998). 二色补血草叶片组织培
养以及无性系的建立. 沈阳农业大学学报, 29 (1): 96~97