全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 2期，2007年 4月314
收稿 2006-11-30 修定 　2007-03-09　
资助 科研院所社会公益研究专项(2005DIB4J045)。
* 通讯作者( E - m a i l：x l l z y @ 2 6 3 . n e t；T e l：0 8 9 8 -
2 3 3 0 0 5 2 2 )。
蝴蝶豆的组织培养
黄碧兰，徐立 *，李志英
中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所，海南儋州 571737
Tissue Culture of Centrosema pubescens Benth.
HUANG Bi-Lan, XU Li*, LI Zhi-Ying
Tropical Crops Genetic Resources Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Danzhou, Hainan 571737, China
1 植物名称 蝴蝶豆(C e n t ro s e m a p u b es c e n s
Benth.)，别名距瓣豆。
2 材料类别 下胚轴。
3 培养条件 (1)种子萌发培养基为MS；(2)诱导
增殖培养基：MS+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同)+ZT
1.0+IAA 0.1；(3)分化培养基：MS+6-BA 1.0+NAA
0.1；(4)生根培养基：MS+NAA 0.5。以上培养
基均加 3%蔗糖和 0.6%琼脂，pH 5.8。培养温
度为(25±2) ℃，光照时间 12 h·d-1，光照强度
30~40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 用0.1% HgCl2溶液浸泡保存
近 20年的种子 8~10 min，无菌水冲洗 5~6次，然
后用无菌吸水纸吸干表面水分，接种于培养基(1)
上。培养 2 周后，种子发芽率为 1 0 %。
4.2 愈伤组织诱导和增殖 取幼苗的下胚轴作材
料，接种于培养基(2)中。15 d后，材料的切口
处变得不规则；20 d后，有微小突起产生，呈
浓绿至淡绿色；2个月后，将愈伤组织转接新的
培养基上，愈伤组织可增殖，而不变褐。
4.3 分化培养 将诱导出的愈伤组织接种到培养基
(3)上。1个月后，愈伤组织开始分化出少量不定
芽，随着愈伤组织继代次数的增多，愈伤组织分
化出芽的能力逐渐加强，不定芽长势良好。
4.4 生根培养 将长至3~5 cm的不定芽由芽丛中单
个切下，转入培养基(4)中培养。1周左右在苗基
部有白色根突出，以后陆续长出根；15 d时生根
率达 100%，根系健壮；培养约 30 d后，小苗
长至 7~8 cm，即可移栽驯化(图 1)。
4.5 炼苗和移栽 将生根良好的瓶苗打开瓶盖，室
内炼苗 3 d左右，取出小苗，洗去培养基后，移
栽到准备好的苗床(2/3椰糠与 1/3土)上，保持湿
度 85%~90%，适当遮荫，小苗成活率为 90%左
右 。
5 意义与进展 蝴蝶豆是豆科距瓣豆属中的一个
种，多年生草质藤本植物。是胶园、油棕园及
牧场中的覆盖作物，兼作绿肥、牧草。原产热
带美洲，在我国广东、广西、云南和福建等省
(自治区)有较大面积的栽培。我们实验室保存了
80多份不同品种的种子，由于保存多年，常规催
芽，种子的发芽率为 0，很多品种面临绝种。为
了挽救种源，以种子的下胚轴进行愈伤组织诱导
和其组织分化为不定芽，进行组织培养和离体快
繁获得成功，从而为扩大繁殖蝴蝶豆，挽救这一
濒危物种提供了可能的途径。蝴蝶豆的组培快繁
未见报道。
图 1 蝴蝶豆的生根培养