全 文 ：植物生理学通讯 第42卷 第6期，2006年12月 1147
紫叶水稻叶内丙二醛测定中花青素干扰的排除
戴高兴 张宗琼 邓国富*
广西农业科学院水稻研究所，广西南宁 530007
Exclusion of the Interference of Anthocyanidin in Measuring Malondialdehyde
Content in Purple Rice Leaves
DAI Gao-Xing, ZHANG Zong-Qiong, DENG Guo-Fu*
Rice Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning, Guangxi 530007, China
提要 以紫叶水稻 ‘IR1552’ 为材料，对经典的双组分分光光度法进行改进。结果表明，这种改进了的方法能有效去除紫
叶稻内中花青素的干扰而又不影响丙二醛含量。
关键词 紫叶水稻；丙二醛；花青素；排除
收稿 2006-10-08 修定 　2006-11-21
资助 广西农科院发展基金(2002018)和广西农科院水稻所青
年基金(2006001)。
*通讯作者(E-mail: dengguofu@gxaas.net, Tel: 0771-
3246189)。
双组分分光光度法由于简便易行且测定结果
较准确而成为测定植物组织中丙二醛(malondialde-
hyde，MDA)含量的经典方法。但我们应用此法
测定紫叶水稻(Oryza sativa O. glaberrima)‘IR1552’
叶中 M D A 含量时，由于受花青素干扰，结果出
现几十倍的偏差。水稻 ‘IR1552’ 的叶片、叶鞘、
叶环、茎节和稃尖均含有大量花青素，因而外观
呈现为紫色，来源于国际水稻所。花青素的吸收
峰位于530 nm (张志良1990)，与MDA吸收峰532
nm 很接近，其对 ‘IR1552’ 叶中 MDA 含量测定的
影响极大。为此，我们在经典的双组分分光光度
法基础上，对如何排除紫叶水稻 ‘IR1552’ 叶中花
青素干扰而又不影响 MDA 含量测定的方法进行了
探 讨 。
材料与方法
1 材料
实验材料为紫叶水稻(Oryza sativa O. glaber-
rima)品种 ‘IR1552’，以水稻(O. sativa L.)早籼品
种 ‘ 特优 63’ 为对照。
2 方法
2.1 材料的速冻 于分化盛期取顶部向下第2完全
展开叶，准确称取 1 g 剪碎的叶片，用液氮速冻
后备用。
2.2 花青素的提取 将速冻后的材料置于烧杯中，
杯中加入30 mL的95%乙醇和1.0 mol·L-1 HCl (85:
15)混合液，杯口蒙以透明纸以防水分蒸发，置
于室温下分别浸泡 12、24 和 36 h，过滤，留取
叶片残渣。
2.3 MDA的提取和显色 参照赵世杰等(1994)的方
法，从上述叶片残渣中提取 M D A ，用经典的双
组分分光光度法测定。
3 数据处理
实验设3个重复，采用SPSS 12.0 进行数据
处理及分析。
结果与讨论
1 液氮速冻处理对MDA 含量的影响
如表1所示，作为对照的水稻品种 ‘ 特优 63’
经液氮速冻后再用95%乙醇和 1.0 mol·L-1 HCl浸
泡 12、24 和 36 h 与经典的双组分分光光度法测
定的 M D A 含量无显著差异，而未经液氮速冻的
MDA 含量显著高于经典双组分分光光度法测定的
值 。
2 不同浸泡时间对MDA 含量的影响
如表1 所示，液氮处理后用乙醇和 HCl 混合
液浸泡 12、24 和 36 h 后测得水稻品种 ‘ 特优 63’
技术与方法 Techniques and Methods
植物生理学通讯 第42卷 第6期，2006年12月1148
的 MDA含量与经典双组分分光光度法测定值无显
著差异(P<0.05)，表明这样的处理方法对叶片中
M D A 含量无明显影响。而对紫叶水稻品种
‘IR1552’ 来说，浸泡12 h的受花青素的影响明显
减少，测得 M D A 含量由双组分分光光度法的
78.89 mmol·g-1 (FW)降为23.78 mmol·g-1 (FW)，说
明该法能有效去除花青素的干扰。浸泡 24 h 的
MDA测定值已经比较恒定，为4.23 mmol·g-1 (FW);
继续浸泡到36 h的 MDA测定值不再显著下降，这
显示浸泡24 h是比较合适的时间，基本上可排除
花青素的影响。
从上可以得出 2 个结论：
(1)未经液氮速冻处理直接用乙醇和HCl混合
液浸泡而测得的 MDA 含量显著高于经典双组分分
光光度法测定的值，其原因可能是叶片在乙醇和
HCl 浸泡时离体成活了一段时间，并且产生一定
量的 M D A，以致总 M D A 含量增加。因此我们认
为，在提取花青素之前叶片进行速冻是必要的。
(2)材料经液氮速冻后，再用乙醇和HCl混合
液浸泡24 h的效果最好，基本上可以排除花青素
的干扰，且不影响 M D A 含量。从作为对照的水
稻品种 ‘ 特优 63’ 叶中 MDA 含量来看，改进了的
方法也适用于其它水稻品种叶中 M D A 含量的测
定。此法缺点是实验步骤稍微复杂了一些，实验
时间也长些。
参考文献
赵世杰, 许长成, 邹琦, 孟庆伟(1994). 植物组织中丙二醛测定方
法的改进. 植物生理学通讯, 30 (3): 207~210
张志良主编(1990). 植物生理学实验指导. 第2版. 北京: 高等教
育出版社, 190~192
表 1 液氮处理和不同浸泡时间对水稻叶中MDA含量的影响
双组分分光光度法测得MDA 　 改良的方法测得MDA含量/mmol·g
-1 (FW) 　
水稻品种
　 含量/ mmol·g
-1 (FW) 浸泡时间/h 未经液氮处理 液氮处理
‘ 特优 63’ 3.78±0.13a 12 4.23±0.84b 3.82±0.12a
24 4.15±0.95c 3.84±0.09a
36 4.13±0.94c 3.81±0.11a
‘IR1552’ 78.89±4.78g 12 25.78±1.24f 23.78±2.35g
24 6.36±0.99d 4.23±0.14b
  36 6.29±0.97d 4.19±0.23bc
表中的不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。