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云南越桔的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 2期,2007年 4月320
云南越桔的组织培养
和加卫 1,徐中志 1,唐开学 2,*,毕海林 1,李燕 1,朱映安 1
1云南省农业科学院高山经济植物所,云南丽江 674100;2云南省农业科学院,昆明 650231
Tissue Culture of Vaccinium duclouxii (Lévl.) Hand.-Mazz.
HE Jia-Wei1, XU Zhong-Zhi1, TANG Kai-Xue2,*, BI Hai-Lin1, LI Yan1, ZHU Ying-An1
1Alpine Economic Plants Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Lijiang, Yunnan 674100, China; 2Yunnan Academy of
Agricultural Sciences, Kunming 650231, China
收稿 2006-12-13 修定  2007-03-13
资助  云南省自然科学基金重点项目(2003C0015Z)和云南省
农业科学院基金(2006YAAS05)。
* 通讯作者(E-mai l:kxtang@public .km.yn.cn;Tel:
08 71 -5 12 08 70 )。
1 植物名称 云南越桔[Vaccinium duclouxii (Lévl.)
Hand.-Mazz.]。
2 材料类别 腋芽。
3 培养条件 基本培养基为改良的WPM培养基:
以水合硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O] 684 mg·L-1 (单位下
同)、KNO3 190、C10H13FeN2NaO8 74.3和盐酸硫胺
素 0.1代替原WPM培养基中的 K2SO4、CaCl2、
FeSO4和乙二胺四乙酸钠(Na2EDTA)。诱导芽萌发
及分化培养基:(1) WPM+ZT 0.5;丛生芽的诱
导和增殖培养基:(2) WPM+ZT 2.0;生根培养
基:(3) 1/2WPM+NAA 0.05。以上培养基均附加
2.0%蔗糖、6 g·L-1琼脂,pH 5.8。培养温度(23±2)
℃,光照 12 h·d-1,光照强度 40~50 µmol·m-2·s-1 。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 以当年生休眠枝条的腋芽为
外植体,将外植体置于烧杯中,用自来水冲冼 30
min,再用洗衣粉液清洗 5 min,在超净工作台上
用 75%酒精浸泡 30 s,无菌水冲洗 2次,0.1%
HgCl2消毒 8 min,无菌水冲洗 5次,吸干水分。
剥去芽鳞,切去基部的受损组织,接种于诱导芽
萌发的培养基(1)中。2周后开始萌发;5周后芽
长成 4~5 cm左右的新梢,侧芽同时也萌发出 2~4
个不定芽。
4.2 丛生芽的诱导和增殖 不定芽形成后,不切
割转接于培养基(2)上。经过 4周培养,在不定芽
基部长出许多小的不定芽,形成不定芽丛。把丛
生芽分割成 2~3个为一丛的芽丛,转接到培养基
(2)中进行继代培养,6周左右可继代增殖 1次。
4.3 生根与移栽 取继代培养的芽苗转接于培养基
(3)中,5周后基部可长出 2~4条 1~1.5 cm长的不
定根,生根率 7 8 %。培养 2 ~ 3 周,打开瓶盖,
炼苗 3 d,然后从培养瓶中取出,洗去根部培养
基,移入蛭石和腐殖土(1:2)混合的基质中,保湿
遮阴,成活率可达 90 % 以上。
5 意义与进展 云南越桔属杜鹃花科越桔属植物,
为多年生落叶或常绿灌木或小灌木树种,与现在
人工栽培的蓝莓是同科同属的植物。越桔是一种
新兴的保健水果,在医药、化妆、食用色素和
食品加工等方面有广泛用途。越桔果实深蓝色,
抗氧化能力名列果蔬之首,对防止人体细胞衰
老、预防老年性疾病如心脏病、白内障、癌症、
记忆力衰退具有特殊的功效,因而被国际粮农组
织列为人类五大健康食品之一。果实所含的花青
素是迄今已被利用的最佳天然色素,加工稳定性
高,色泽呈深红、紫红或蓝紫,作为药物或高
级化妆品的原料均具有十分广阔的前景。近几
年,其鲜果和加工品风靡欧美等发达国家,虽然
价格昂贵但仍供不应求。北美地区的产量已远不
能满足本地和国际市场的需求,为此荷兰、加拿
大、澳大利亚、日本、智利等国家先后引种栽
培,现已初具商品产量。我国具有丰富的越桔植
物资源,特别是云南分布的种类约占全国的一
半。云南越桔是西南地区特有种,仅分布于云南
和四川。采用组织培养技术,对保存我国的越桔
种质资源和开发利用可能有一定的应用价值。云
南越桔的组织培养尚未见报道。