全 文 ：第 源员 卷摇 第 缘 期
圆园员源 年 员园 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 缘
韵糟贼援 摇 圆园员源
摇
基金项目院 四川省教育厅课题渊员园在粤员圆怨冤
作者简介院 李姝江袁女袁员怨愿猿年生袁讲师袁研究方向为林木病害生物防治袁 耘鄄皂葬蚤造院 造蚤泽澡怎躁蚤葬灶早泽怎皂藻则岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 扎澡怎贼澡员圆圆苑岳 员圆远援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员源 原 园源 原 园员
松烂皮病内生拮抗细菌的筛选尧生防效果及
华山松的生理响应
李姝江摇 朱天辉鄢摇 谯天敏摇 韩摇 珊
渊四川农业大学林学院袁 雅安 远圆缘园员源冤
摘要院 为探究内生细菌对华山松烂皮病的生防效果及其生理响应袁采用平板涂布法和对峙培养法
从健康华山松树皮上分离筛选抗烂皮病菌 悦藻灶葬灶早蚤怎皂 枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂 的拮抗菌株袁运用形态学尧生理
生化及分子生物学对其进行鉴定曰并利用喷雾法研究其对华山松苗烂皮病的盆栽防治效果及苗木
各生理指标的变化袁观测其对田间发病华山松病斑的防治效果遥 结果显示袁分离得到具有优良拮抗
效果的菌株 月葬源袁经鉴定为解淀粉芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽曰其发酵原液盆栽防治效果可
达 怨园郾 员缘豫 袁稀释至 员园缘 防治效果也有 员苑郾 苑苑豫 袁发病率和病情指数均下降遥 接种病原菌 猿园 凿 后袁不
同浓度 月葬源 菌剂处理的苗木丙二醛含量均减少袁木质素尧可溶性蛋白和可溶性糖含量均增加曰丙二
醛含量与发病率和病情指数呈显著正相关袁与防治效果呈显著负相关曰木质素尧可溶性蛋白和可溶
性糖含量则与其相反遥 田间试验中原液和稀释倍液渊员园尧员园圆 和 员园猿冤的病斑治愈率均超过 愿园豫 遥
表明菌株 月葬源 对松烂皮病有良好的防治效果袁能调节华山松抗性物质的合成遥
关键词院 内生细菌曰 松烂皮病菌曰 生物防治曰 生理响应
杂糟则藻藻灶蚤灶早 燥枣 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 葬灶凿 蚤贼泽 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼
燥灶 凿蚤藻遭葬糟噪 枣怎灶早怎泽 悦藻灶葬灶早蚤怎皂 枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂 葬灶凿 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造
则藻泽责燥灶泽藻 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻 憎澡蚤贼藻 责蚤灶藻 孕蚤灶怎泽 葬则皂葬灶凿蚤蚤
蕴蚤 杂澡怎躁蚤葬灶早摇 在澡怎 栽蚤葬灶澡怎蚤鄢摇 匝蚤葬燥 栽蚤葬灶皂蚤灶摇 匀葬灶 杂澡葬灶
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 杂蚤糟澡怎葬灶 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 再葬爷葬灶 远圆缘园员源袁 杂蚤糟澡怎葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽燥 藻曾责造燥则藻 贼澡藻 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 燥枣 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤怎皂 燥灶 凿蚤藻遭葬糟噪 枣怎灶早怎泽 悦藻灶葬灶早蚤怎皂
枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂 葬灶凿 贼澡藻 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 则藻泽责燥灶泽藻 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻 憎澡蚤贼藻 责蚤灶藻 孕蚤灶怎泽 葬则皂葬灶凿蚤蚤袁 贼澡藻 葬灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟
遭葬糟贼藻则蚤葬造 泽贼则葬蚤灶 葬早葬蚤灶泽贼 悦援 枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂 憎葬泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 葬灶凿 泽糟则藻藻灶藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 澡藻葬造贼澡赠 遭葬则噪 燥枣 孕援 葬则皂葬灶凿蚤蚤 遭赠
怎泽蚤灶早 泽责则藻葬凿鄄责造葬贼藻 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 糟燥灶枣则燥灶贼葬贼蚤燥灶 糟怎造贼怎则藻 皂藻贼澡燥凿袁 葬灶凿 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭葬泽藻凿 燥灶 蚤贼泽
皂燥则责澡燥造燥早蚤葬造袁 责澡赠泽蚤燥造燥早赠鄄遭蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠袁 葬灶凿 皂燥造藻糟怎造葬则 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽援 栽澡藻 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 燥枣 孕援
葬则皂葬灶凿蚤蚤 泽藻藻凿造蚤灶早 凿蚤藻遭葬糟噪 葬灶凿 贼澡藻 糟澡葬灶早藻泽 燥枣 贼澡藻 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 蚤灶凿藻曾藻泽 憎藻则藻 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 遭赠 泽责则葬赠蚤灶早
皂藻贼澡燥凿 蚤灶 责燥贼 贼藻泽贼蚤灶早援 栽澡藻 藻枣枣蚤糟葬糟赠 燥灶 贼澡藻 泽责燥贼泽 燥枣 凿蚤泽藻葬泽藻凿 孕援 葬则皂葬灶凿蚤蚤 憎葬泽 燥遭泽藻则增藻凿 蚤灶 贼澡藻 枣蚤藻造凿援 栽澡藻
则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 葬 泽贼则葬蚤灶 渊月葬源冤 憎蚤贼澡 藻曾糟藻造造藻灶贼 藻枣枣藻糟贼 憎葬泽 燥遭贼葬蚤灶藻凿袁 葬灶凿 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 月葬糟蚤造造怎泽
葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽援 栽澡藻 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 燥枣 燥则蚤早蚤灶葬造 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶 泽燥造怎贼蚤燥灶 则藻葬糟澡藻凿 怨园郾 员缘豫 蚤灶 贼澡藻 责燥贼
藻曾责藻则蚤皂藻灶贼袁 葬灶凿 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 贼澡藻 凿蚤造怎藻灶贼 泽燥造怎贼蚤燥灶 渊伊 员园缘冤 憎葬泽 员苑郾 苑苑豫 袁 葬灶凿 贼澡藻 蚤灶糟蚤凿藻灶糟藻 葬灶凿 凿蚤泽藻葬泽藻
蚤灶凿藻曾 凿藻糟则藻葬泽藻凿援 粤枣贼藻则 猿园 凿葬赠泽 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶袁 皂葬造燥灶凿蚤葬造凿藻澡赠凿藻 渊 酝阅粤冤 糟燥灶贼藻灶贼泽 燥枣 贼澡藻
泽藻藻凿造蚤灶早泽 贼则藻葬贼藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 泽怎泽责藻灶泽蚤燥灶泽 葬造造 凿藻糟则藻葬泽藻凿袁 遭怎贼 造蚤早灶蚤灶袁 泽燥造怎贼蚤燥灶 责则燥贼藻蚤灶 葬灶凿
泽燥造怎贼蚤燥灶 泽怎早葬则 糟燥灶贼藻灶贼泽 蚤灶糟则藻葬泽藻凿援 酝阅粤 糟燥灶贼藻灶贼 澡葬凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 责燥泽蚤贼蚤增藻 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 蚤灶糟蚤凿藻灶糟藻 葬灶凿
凿蚤泽藻葬泽藻 蚤灶凿藻曾袁 遭怎贼 澡葬凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 灶藻早葬贼蚤增藻 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造袁 憎澡蚤造藻 造蚤早灶蚤灶袁 泽燥造怎贼蚤燥灶 责则燥贼藻蚤灶 葬灶凿
泽燥造怎贼蚤燥灶 泽怎早葬则 糟燥灶贼藻灶贼泽 蚤灶糟则藻葬泽藻凿援 陨灶 枣蚤藻造凿 贼藻泽贼泽袁 贼澡藻 糟怎则藻 则葬贼蚤燥泽 燥枣 凿蚤泽藻葬泽藻 泽责燥贼泽 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 燥则蚤早蚤灶葬造
泽燥造怎贼蚤燥灶 葬灶凿 凿蚤造怎藻灶贼 泽燥造怎贼蚤燥灶 渊 伊 员园袁 伊 员园圆袁 伊 员园猿冤 憎藻则藻 燥增藻则 愿园豫 援 栽澡藻泽藻 则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 月援
葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽 月葬源 澡葬凿 藻曾糟藻造造藻灶贼 糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 燥灶 责蚤灶藻 凿蚤藻遭葬糟噪 葬灶凿 糟燥怎造凿 责则燥皂燥贼藻 贼澡藻 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 燥枣
则藻泽蚤泽贼葬灶贼 泽怎遭泽贼葬灶糟藻 燥枣 孕援 葬则皂葬灶凿蚤蚤援
运藻赠 憎燥则凿泽院 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤怎皂曰 悦藻灶葬灶早蚤怎皂 枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂曰 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 糟燥灶贼则燥造曰 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 则藻泽责燥灶泽藻
摇 摇 松烂皮病是一种世界性松属植物幼龄病害袁可
为害黑松尧红松尧赤松尧油松尧云南松尧华山松等咱员暂 遥
该病是由子囊菌亚门铁锈薄盘菌 悦藻灶葬灶早蚤怎皂 枣藻则则怎早蚤鄄
灶燥泽怎皂 云则援 藻曾 云则援引起袁是一种针叶内生菌袁具有弱寄
生性且存在潜伏侵染遥 该病发生在 圆 耀 员园 年生松树
枝干上袁主要为害皮层袁苗木尧幼树到成年树均可受
害袁受害枝干形成枯枝袁重者枝干皮部腐烂尧脱落袁甚
至成片死亡袁在许多林区造成重大损失咱圆暂 遥 迄今袁
对其相关研究主要集中在病害调查咱员袁猿暂 尧病原鉴
定咱源暂和药剂试验咱圆袁缘暂等方面遥 虽然营林措施结合化
学防治效果显著袁但大多会产生药害咱缘暂 遥 随着无污
染尧成本低尧作用持久的生物农药在植物病害防治中
的广泛应用袁越来越多的学者采用有益微生物对松
树病害进行防治研究遥 但作为四川分布最广且最
为重要的造林树种之一的松树袁仅有利用绿木霉
栽则蚤糟澡燥凿藻则皂葬 增蚤则藻灶泽 对松烂皮病菌抑菌机理的初步
研究咱远暂 遥
植物内生细菌不同于外界环境微生物袁可与寄
主植物形成相互制约尧互惠共存的协同进化关系袁许
多研究表明袁内生细菌不仅对病害有控制作用袁且可
与植物联合对环境进行修复咱苑 原 怨暂 遥 芽胞杆菌作为自
然界分布最广泛且极易分离培养的一类内生细菌袁
具有广谱抗菌活性和极强的抗逆能力咱员园暂 遥 目前袁在
植物病害生物防治领域已得到广泛应用袁如在辣
椒咱员员暂 尧水稻咱员圆暂 尧小麦咱员猿暂 尧烟草咱员源暂 尧番茄咱员缘暂 尧荔枝咱员远暂
等多种植物上显示出良好的防治效果袁然而来自松
树植株的内生芽胞杆菌应用于烂皮病的防治尚未见
报道遥 内生芽胞杆菌有多种多样的作用方式袁包括
竞争尧拮抗尧促生尧诱导抗性咱员园暂 曰其中诱导植物抗病
性机制是研究的热点之一袁月藻灶澡葬皂燥怎 等咱员苑暂报道短
小芽胞杆菌 月葬糟蚤造造怎泽 责怎皂蚤造怎泽 杂耘猿源 接种番茄和豌豆
的根袁能诱导寄主的防御反应曰而植物生化响应机制
的研究主要集中在相关防御酶系上咱员员暂 袁未见其它生
理生化指标的报道遥 因此袁本研究在四川松烂皮病
发病区分离筛选华山松内生拮抗菌的基础上袁通过
盆栽试验测定其菌剂发酵原液和稀释液的防治效
果袁结合华山松苗各生理指标的响应袁明确其对田间
华山松烂皮病病斑的防治效果袁为其制作成新型生
物农药投放生产应用提供理论依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试样品院圆园员猿 年 远 月于四川康定跑马山烂皮
病发生林分渊员园员毅缘苑忆 耀 员园员毅缘愿忆 耘尧猿园毅猿忆 耀 猿园毅源忆 晕袁
年均温 苑郾 员 益袁年均降雨量 愿园园 皂皂冤袁随机 猿 点采
样袁每点选取健康华山松 孕蚤灶怎泽 葬则皂葬灶凿蚤蚤 云则葬灶糟澡 各 猿
株袁距地面 员 耀 员郾 圆 皂采集 员缘 糟皂 伊缘 糟皂树皮组织袁装
入无菌袋袁带回实验室用于内生拮抗细菌的分离遥 猿
年生华山松苗袁由四川康定跑马山林场提供袁用于盆
栽防治效果试验和生理指标测定遥
供试病菌院铁锈薄盘菌由四川农业大学森林保
护省级重点实验室提供遥
培养基院营养琼脂渊灶怎贼则蚤藻灶贼 葬早葬则袁 晕粤冤培养基院
牛肉膏 猿 早尧蛋白胨 员园 早尧晕葬悦造 缘 早尧琼脂粉 员缘 耀 圆园 早尧
蒸馏水 员园园园皂蕴袁责匀 苑援 园曰晕粤培养液院按 员园园皂蕴液体
盛于 猿园园 皂蕴三角瓶比例渊通氧控制冤装瓶袁于 员圆员 益
高压灭菌 猿园 皂蚤灶 用于制作生防菌剂曰马铃薯葡萄糖
琼脂 渊 责燥贼葬贼燥 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则袁 孕阅粤冤培养基院马铃薯
圆园园 早尧葡萄糖 圆园 早尧琼脂粉 员缘 耀圆园 早尧蒸馏水 员园园园 皂蕴遥
试剂院试验所用试剂均为国产分析纯袁购自四川
奥瑞特化学试剂有限公司曰栽郧怎蚤凿藻 韵杂砸鄄酝缘园圆 细菌
基因组 阅晕粤提取试剂盒购自天根生化科技渊北京冤
有限公司曰通用引物由上海生工生物工程技术服务
有限公司合成遥
仪器院酝蚤糟则燥泽糟燥责藻 粤曾蚤燥泽糟燥责 圆园 光学显微镜袁德国
蔡司公司曰匀陨酝粤悦 悦砸 圆员耘高速冷冻离心机袁日本日
立公司曰杂员园园园 孕悦砸仪袁美国伯乐公司曰酝杂阅鄄圆园园园 凝
胶成像系统袁北京麦思奇高科技有限公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 内生拮抗细菌的分离及鉴定
根据王韬等咱员愿暂方法进行内生拮抗细菌的分离遥
样品用无菌水冲洗干净袁用无菌手术刀片在华山松
园苑缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
树皮上切取约 猿 早组织袁苑缘豫酒精消毒 猿 皂蚤灶袁无菌水
洗 猿 次袁将最后一次洗涤液涂抹平板袁圆愿 益培养
圆源 澡袁用于检查表面消毒是否彻底遥 已表面灭菌的
树皮组织剪碎袁放入无菌研钵袁加入灭菌石英砂和
猿园 皂蕴 无菌水袁充分研磨震荡培养 猿园 皂蚤灶袁稀释为
员园 原员尧员园 原圆尧员园 原猿尧员园 原源共 源 个梯度袁分别吸取 员园园 滋蕴
研磨液涂布平板袁每处理 猿 次重复袁圆愿 益培养 源愿 澡袁
挑取单菌落在平板上划线纯化袁转接斜面保存遥 采
用平板对峙法咱员怨暂筛选拮抗菌袁病原菌接种 孕阅粤 平
板上培养 源 凿袁以无菌打孔器在菌落边缘打取直径
缘 皂皂的菌饼袁将菌饼和内生细菌分别接种于 孕阅粤
平板距中心约 猿 糟皂 处袁以不接种细菌为对照袁每处
理 猿 次重复袁测量拮抗带宽度及病菌生长直径袁计算
菌落生长抑制率袁并筛选出拮抗效果最佳的细菌遥
菌落生长抑制率 越 渊对照菌落净生长直径 原处理菌
落净生长直径冤 辕对照菌落净生长直径 伊 员园园豫 遥
根据东秀珠和蔡妙英咱圆园暂鉴定方法对所得拮抗
菌株进行形态学及生理生化鉴定遥 分子生物学鉴定
渊员远杂 则阅晕粤冤院利用细菌 阅晕粤提取试剂盒提取 阅晕粤袁
并进行 孕悦砸 扩增袁采用细菌通用引物 孕则蚤皂藻则 云员源
渊缘忆鄄粤粤悦粤郧郧粤栽栽粤郧粤栽粤悦悦悦栽郧鄄猿忆冤和 孕则蚤皂藻则 砸员源怨圆
渊缘忆鄄郧郧栽栽粤悦悦栽栽郧栽栽粤悦郧粤悦栽栽鄄猿忆冤袁扩增程序参照
运蚤皂等咱圆员暂和 砸葬蚤灶藻赠 等咱圆圆暂方法袁回收产物送至上海
生工生物工程技术服务有限公司测序袁所得序列与
郧藻灶月葬灶噪 数据库中序列进行 月蕴粤杂栽 分析袁并用
悦造怎泽贼葬造 载 员郾 愿猿 软件进行多重序列比较袁再用 酝藻早葬
源援 园 软件以邻接法构建系统发育树遥
员援 圆援 圆 内生拮抗细菌对松烂皮病的盆栽防治效果
无菌状态接种拮抗菌斜面种子袁每瓶 晕粤 培养
液接种 圆 支斜面种子袁温度 圆远 耀 圆愿 益袁初始 责匀 值
苑援 园袁员圆园 则 辕 皂蚤灶振荡培养 猿远 澡袁制成生防菌剂遥 病原
菌接种于 孕阅粤 平板上袁圆缘 耀 圆愿 益培养袁产孢后用无
菌水配成 员园源 悦云哉 辕 皂蕴 的孢子悬浮液接种备用遥 用
上述生防菌剂采用喷雾法对盆栽华山松种苗进行喷
雾袁每 苑 天喷施 员 次袁共 猿 次袁设浓度梯度为原液
员园园袁依次稀释至 员园员尧员园圆尧员园猿尧员园源尧员园缘 悦云哉 辕 皂蕴袁以
无菌水为对照袁每处理 猿园 盆袁共计 圆员园 盆遥 员 个月
后采用针刺接种法咱圆猿暂将病原菌孢子悬浮液接种在
幼苗枝干处袁每处理接种 员园园 个点袁并对接种部位进
行保湿遥
病原菌接种 猿园 凿 后袁按下列标准进行病害调查
统计袁并计算发病率尧病情指数和防治效果遥 病害分
级标准院园 级院无病斑曰员 级院发病枝条比例或病斑横
径占树径周长比例为 员 辕 猿 以下曰圆 级院发病枝条比例
或病斑横径占树径周长比例为 员 辕 猿 至 圆 辕 猿曰猿 级院发
病枝条比例或病斑横径占树径周长比例为 圆 辕 猿 至
源 辕 缘曰源 级院整株死亡遥 发病率 越 渊发病部位数 辕总接
种部位数冤 伊 员园园豫 曰病情指数 越 移 渊各病级枝条
数 伊 代表级值冤 辕 渊总枝条数 伊 发病最高的病级
数冤 伊 员园园曰防治效果 越 渊对照病情指数 原处理病情
指数冤 辕对照病情指数 伊员园园豫 遥
员援 圆援 猿 华山松对内生拮抗细菌的生理响应
猿 年生盆栽华山松苗分别用浓度为 员园园尧员园员尧
员园圆尧员园猿尧员园源 悦云哉 辕 皂蕴生防菌剂喷施袁以无菌水为对
照袁每处理 猿园 盆袁共 员愿园 盆遥 苑 凿后在幼苗枝干处针
刺接种咱圆猿暂病原菌孢子悬浮液袁每处理接种 员园园 个
点袁并对接种部位进行保湿遥 分别于接种后 员尧圆尧源尧
愿尧员缘尧猿园 凿随机选取苗木枝条进行生理指标测定遥
丙二醛含量的测定采用硫代巴比妥酸比色
法咱圆源暂 袁取 园郾 缘 早 枝条袁加少许石英砂和 员园豫三氯乙
酸 愿 皂蕴袁冰浴研磨袁匀浆于 员园 园园园 则 辕 皂蚤灶 冷冻离心
员园 皂蚤灶袁取上清液 圆 皂蕴 加入 园郾 远豫 硫代巴比妥酸
圆 皂蕴混匀后袁于沸水浴反应 圆园 皂蚤灶袁迅速冷却袁离心遥
取上清液测定 韵阅缘猿圆尧韵阅远园园和 韵阅源缘园值袁用水作参比遥
悦酝阅粤越远郾 源缘渊韵阅缘猿圆 原 韵阅远园园 冤 原 园援 缘远韵阅源缘园袁酝阅粤含量 越
悦酝阅粤 伊样品提取液体积 辕样品鲜重遥
木质素含量的测定采用碘量法咱圆缘暂 袁无菌水洗净
枝条后用滤纸擦干袁放入铝盒袁立即放进烘箱袁于
员圆园 益快速杀青袁使细胞死亡后于 远园 益烘至恒重遥
载 越园郾 源猿猿运渊葬 原 遭冤 辕 阅宰袁其中 载为木质素含量渊豫冤袁
运为滴定用 晕葬圆杂圆韵猿 的浓度渊憎 辕 增冤袁阅宰 为样品干
重渊早冤袁葬和 遭 分别为滴定对照液和样品液所用的
园援 员 皂燥造 辕 蕴 晕葬圆杂圆韵猿 的量渊皂蕴冤遥
可溶性蛋白质含量的测定采用考马斯亮蓝染色
法咱圆远暂 袁取枝条 员 早袁液氮研磨袁加适量聚乙烯吡咯烷
酮和 圆 皂蕴 缘园 皂酝 责匀 苑援 缘 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液渊员豫 圆鄄巯
基乙醇冤袁摇匀后 源 益放置 员 澡遥 于 源 益下 员源 园园园 则 辕
皂蚤灶离心圆园 皂蚤灶袁转上清至新管袁按 员 颐 源 渊 增 辕 增冤加入
原圆园 益预冷丙酮袁摇匀袁 原 圆园 益放置 圆 澡袁沉降蛋白袁
取出后 缘 园园园 则 辕 皂蚤灶尧源 益离心 圆园 皂蚤灶袁去上清袁沉淀于
源 益放置袁使丙酮完全挥发遥 将沉淀溶解于 远园 皂酝
责匀 远援 愿 栽则蚤泽鄄匀悦造 缓冲液渊圆豫十二烷基硫酸钠尧缘豫
圆鄄巯基乙醇尧员园豫甘油冤袁源 益下 员猿 园园园 则 辕 皂蚤灶 离心
员园 皂蚤灶袁取上清 员园园 皂蕴与 缘 皂蕴考马斯亮蓝 郧鄄圆缘园 染
色剂进行显色袁测定 韵阅缘怨缘值袁以牛血清蛋白作标准
曲线查找浓度遥 蛋白质含量 越 悦 伊 灾 辕 宰袁其中 悦 为
由标准曲线查出的蛋白质含量渊滋早 辕 皂蕴冤袁灾 为提取
液定容后体积袁宰为样品重遥
员苑缘缘 期 李姝江等院 松烂皮病内生拮抗细菌的筛选尧生防效果及华山松的生理响应
可溶性糖含量的测定采用蒽酮法咱圆源暂 袁取 员 早 枝
条袁加入少量蒸馏水研磨成匀浆袁转入试管袁沸水浴
员园 皂蚤灶袁冷却过滤后蒸馏水定容遥 取 员 皂蕴 提取液加
员皂蕴蒸馏水和 园援 缘 皂蕴蒽酮袁并缓慢加入 缘皂蕴 匀圆杂韵源袁
加盖煮沸 员园 皂蚤灶袁冷却后测定 韵阅远圆园袁以葡萄糖作标
准曲线遥 可溶性糖含量 越 渊标准曲线对应糖含量 伊
稀释倍数冤 辕 渊样品重 伊员园远冤遥
员援 圆援 源 内生拮抗细菌对华山松烂皮病的田间防治效果
圆园员猿 年 苑 月在四川康定跑马山烂皮病发生林
分对发病华山松进行防治试验遥 按 员援 圆援 圆 生防菌剂
制作方法发酵后袁设浓度为 员园园尧员园员尧员园圆尧员园猿尧员园源
悦云哉 辕 皂蕴遥 将病斑刮除干净袁用无菌棉球蘸取菌剂
对发病部位进行涂抹袁以蘸取无菌水涂抹作对照遥
每样地设 员园园 个病斑袁每 苑 天涂抹 员 次袁共 缘 次袁每
处理 猿 次重复遥 在涂抹前和最后一次涂抹后的第
猿园 天进行调查统计袁记录发病植株数尧发病程度以
及治愈病斑数袁计算病斑治愈率遥 病斑治愈率 越
渊治愈病斑数 辕总病斑数冤 伊 员园园豫 遥
员援 猿 数据分析
采用 耘曾糟藻造 圆园园苑 和 杂孕杂杂 员猿援 园 软件进行数据分
析袁应用最小显著差异法渊蕴杂阅冤进行显著性检验遥
圆 结果与分析
圆援 员 内生拮抗细菌的筛选
在采集的健康华山松树皮样品中共分离获得内
生细菌 员园 株袁编号为 月葬员尧月葬圆尧月葬猿尧噎噎月葬员园遥 接
种 苑 凿后测得对照病原菌生长直径为 远援 缘 糟皂袁而 月葬圆尧
月葬源尧月葬缘 三株内生细菌的拮抗带宽度超过 员 糟皂袁且
对应的病原菌生长抑制率达 苑园豫以上曰其中菌株
月葬源 的拮抗带宽度为 员郾 愿 糟皂袁病菌生长抑制率高达
怨远郾 怨圆豫 渊表 员冤遥 表明 月葬源 为最优拮抗菌袁可将其作
为盆栽试验以及松烂皮病田间防治的生防菌遥
表 员 内生细菌对华山松烂皮病病菌的拮抗作用
栽葬遭造藻 员 粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 藻枣枣藻糟贼 燥枣 藻灶凿燥责澡赠贼蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 燥灶 悦藻灶葬灶早蚤怎皂 枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂
菌株编号
杂贼则葬蚤灶 灶燥援
拮抗带宽度 渊糟皂冤
粤灶贼葬早燥灶蚤泽贼蚤糟 遭葬灶凿 憎蚤凿贼澡
病菌生长直径 渊糟皂冤
阅蚤葬皂藻贼藻则 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶
病菌生长抑制率 渊豫 冤
陨灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 则葬贼蚤燥 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶
月葬员 园援 怨 依 园援 员 糟 猿援 缘 依 园援 猿 枣 源远援 员缘 依 员援 员苑 凿
月葬圆 员援 员 依 园援 圆 遭糟 员援 苑 依 园援 圆 早 苑猿援 愿缘 依 园援 愿愿 糟
月葬猿 园援 园 依 园援 园 枣 远援 缘 依 园援 员 葬 园援 园园 依 园援 园圆 蚤
月葬源 员援 愿 依 园援 圆 葬 园援 圆 依 园援 园 蚤 怨远援 怨圆 依 园援 园圆 葬
月葬缘 员援 圆 依 园援 员 遭 员援 员 依 园援 员 澡 愿猿援 园愿 依 园援 圆远 遭
月葬远 园援 员 依 园援 园 藻 远援 员 依 园援 圆 遭 远援 圆园 依 园援 愿员 澡
月葬苑 园援 缘 依 园援 员 凿 缘援 员 依 园援 猿 凿 圆员援 缘源 依 员援 圆猿 枣
月葬愿 园援 猿 依 园援 员 凿 缘援 远 依 园援 圆 糟 员猿援 愿缘 依 员援 园怨 早
月葬怨 园援 愿 依 园援 员 糟 源援 员 依 园援 源 藻 猿远援 怨圆 依 员援 圆缘 藻
月葬员园 园援 园 依 园援 园 枣 远援 缘 依 园援 员 葬 园援 园园 依 园援 园圆 蚤
摇 摇 表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同小写字母表示经 蕴杂阅 法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻
皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 蕴杂阅 贼藻泽贼援
圆援 圆 菌株 月葬源 的鉴定
显微观察菌株 月葬源 革兰氏染色呈阳性袁菌体呈
短杆状袁具运动性袁产芽孢袁芽孢卵圆形袁位于菌体中
央袁孢子囊呈椭圆形尧膨大袁具荚膜袁周生鞭毛遥 在
晕粤平板上培养 圆 凿 的菌株 月葬源 单菌落白色袁呈圆
形袁边缘不整齐袁表面干燥袁有褶皱袁无粘性袁不透明遥
生理生化结果表明渊表 圆冤袁接触酶尧硝酸盐还原尧灾鄄孕
反应尧脲酶尧淀粉和明胶水解尧糖醇类发酵试验均为
阳性袁硫化氢尧亚硝酸盐还原尧柠檬酸利用尧纤维素和
酪氨酸水解尧苯丙氨酸脱氢酶尧荧光色素尧吲哚试验
均为阴性袁初步判定菌株 月葬源属芽胞杆菌属 月葬糟蚤造造怎泽遥
分子生物学鉴定得到长度约为 员 源缘园 遭责的 阅晕粤
片段渊图 员冤袁将菌株 月葬源 的 员远杂 则阅晕粤 序列递交
郧藻灶月葬灶噪数据库进行 月蕴粤杂栽 分析袁构建系统发育树
渊图 圆冤遥 菌株 月葬源 与解淀粉芽胞杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻鄄
枣葬糟蚤藻灶泽渊匀酝园猿圆苑愿愿冤以 怨愿豫的 员远杂 则砸晕粤序列相似性
位于同一分支袁而与其它芽胞杆菌相距较远袁表明菌
株 月葬源 与解淀粉芽胞杆菌的亲缘关系最近袁结合其
形态学特征和生理生化指标袁初步鉴定其为解淀粉
芽胞杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽遥
圆援 猿 菌株 月葬源 对华山松烂皮病的盆栽防治效果
接种病原菌 猿园 凿后袁菌株 月葬源 对松树烂皮病菌
表现出良好的防治效果袁发病率和病情指数随稀释
倍数增加而增加袁防治效果随稀释倍数增加而降低遥
菌株 月葬源发酵原液的盆栽防治效果达到了 怨园郾 员缘豫袁
显著高于其余处理袁发病率明显降低袁仅为愿郾 苑猿豫
圆苑缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
表 圆 菌株 月葬源 的生理生化指标
栽葬遭造藻 圆 孕澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 蚤灶凿藻曾藻泽 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月葬源
项目 栽藻泽贼 结果 砸藻泽怎造贼 项目 栽藻泽贼摇 结果 砸藻泽怎造贼
生长温度试验
郧则燥憎贼澡 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 贼藻泽贼
接触酶试验 郧葬贼葬糟葬泽藻 贼藻泽贼
硫化氢试验 匀圆杂 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 贼藻泽贼
缘 益 原
圆园 益 垣
猿园 益 垣
源园 益 垣
缘园 益 原
垣
原
碳源利用试验
悦葬则遭燥灶 怎贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 贼藻泽贼
水解试验
匀赠凿则燥造赠泽蚤泽 贼藻泽贼
麦芽糖 酝葬造贼燥泽藻 垣
蔗糖 杂怎糟则燥泽藻 垣
阅鄄葡萄糖 阅鄄早造怎糟燥泽藻 垣
淀粉水解 杂贼葬则糟澡 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 垣
纤维素水解 悦藻造造怎造燥泽藻 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 原
明胶水解 郧藻造葬贼蚤灶 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 垣
酪氨酸水解 栽赠则燥泽蚤灶藻 澡赠凿则燥造赠泽蚤泽 原
硝酸盐还原试验
晕蚤贼则葬贼藻 则藻凿怎糟贼蚤燥灶 贼藻泽贼
垣 厌氧生长
粤灶葬藻则燥遭蚤糟 早则燥憎贼澡
垣
亚硝酸盐还原试验
晕蚤贼则蚤贼藻 则藻凿怎糟贼蚤燥灶 贼藻泽贼
原 苯丙氨基酸脱氨酶试验
孕澡藻灶赠造葬造葬灶蚤灶藻 凿藻葬皂蚤灶葬泽藻 贼藻泽贼
原
柠檬酸盐利用
悦蚤贼则葬贼藻 怎贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶
原 甲基红试验
酝援 砸援 贼藻泽贼
原
灾鄄孕试验
灾鄄孕 贼藻泽贼
垣 糖醇类发酵试验
杂怎早葬则鄄葬造糟燥澡燥造 枣藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶
垣
耐盐试验
杂葬造贼 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼藻泽贼
圆豫 垣 荧光色素试验
云造怎燥则藻泽糟藻灶贼 责蚤早皂藻灶贼泽 贼藻泽贼
原
脲酶试验
哉则藻葬泽藻 贼藻泽贼
垣 吲哚试验
陨灶凿燥造藻 则藻葬糟贼蚤燥灶 贼藻泽贼
原
摇 摇 垣 院 阳性曰 原 院 阴性曰 垣 院 孕燥泽蚤贼蚤增藻曰 原 院 灶藻早葬贼蚤增藻援
图 员 菌株 月葬源 的 员远杂 则阅晕粤 孕悦砸扩增电泳图
云蚤早援 员 孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 员远杂 则阅晕粤 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月葬源
渊表 猿冤遥 菌株 月葬源 原液经稀释后袁表现出不同的防
治效果袁在稀释到 员园员 和 员园圆 悦云哉 辕 皂蕴 时袁盆栽防治
效果均超过 缘园豫 袁而其余浓度低于 缘园豫 袁其中稀释
至 员园缘 悦云哉 辕 皂蕴防治效果仅为 员苑郾 苑苑豫 遥
圆援 源 华山松对菌株 月葬源 菌剂的生理响应
接种病原菌 猿园 凿后袁华山松幼苗对 月葬源 菌剂均
有不同程度的响应渊表 源冤遥 仅接种病菌的对照丙二
醛含量呈增加趋势袁不同浓度生防菌剂处理后均可
使丙二醛含量降低袁菌剂浓度越高丙二醛含量下降
越多袁原液处理显著低于其余各浓度袁且随着处理时
间的延长袁丙二醛含量下降减缓遥 缘 个浓度生防菌
剂处理的苗木木质素含量均升高袁而对照显著下降曰
菌剂浓度越高袁木质素含量增长越明显曰原液渊员园园冤尧
员园员 和 员园圆 悦云哉 辕 皂蕴 在处理 源 耀 员缘 凿 内增幅较大袁
员缘 耀 猿园 凿增幅减缓曰员园猿 和 员园源 悦云哉 辕 皂蕴 处理下增幅
不如高浓度的处理遥 不同浓度菌剂处理后可溶性蛋
白和可溶性糖含量均呈上升趋势袁均于原液处理下
在各个测试点达到最高袁但对照显著下降遥
圆援 缘 各生理指标与感病程度的相关性
丙二醛含量与发病率尧病情指数呈显著正相关袁
而与防治效果和处理时间呈显著负相关曰木质素尧可
溶性蛋白尧可溶性糖含量均与发病率尧病情指数呈显
著负相关袁与防治效果呈显著正相关曰木质素和可溶
性蛋白含量与处理时间相关性不显著遥 菌剂浓度与
发病率和病情指数显著负相关袁与防治效果显著正
相关渊表 缘冤遥
圆援 远 菌株 月葬源 对华山松烂皮病的田间防治效果
菌株 月葬源 发酵液原液治愈率高达 怨员豫 袁稀释
员园员尧员园圆尧员园猿尧员园源 倍的菌剂治愈率分别为 愿缘豫尧愿猿豫尧
愿园豫和 远猿豫 袁其中 员园员尧员园圆 和 员园猿 倍稀释液处理差
异不显著渊图 猿冤遥 表明田间防治效果与菌株 月葬源 发
酵液含菌量有关袁稀释倍数与防治效果成反比遥
猿苑缘缘 期 李姝江等院 松烂皮病内生拮抗细菌的筛选尧生防效果及华山松的生理响应
图 圆 基于 员远杂 则阅晕粤序列构建的菌株 月葬源 与相关细菌的系统发育树
云蚤早援 圆 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月葬源 葬灶凿 则藻造葬贼藻凿 遭葬糟贼藻则蚤葬 遭葬泽藻凿 燥灶 员远杂 则阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻泽
表 猿 菌株 月葬源 对华山松烂皮病的盆栽防治效果
栽葬遭造藻 猿 悦燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月葬源 燥灶 悦藻灶葬灶早蚤怎皂 枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂 蚤灶 责燥贼 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼泽
处理浓度 渊悦云哉 辕 皂蕴冤
栽则藻葬贼皂藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
发病率 渊豫冤
陨灶糟蚤凿藻灶糟藻
病情指数
阅蚤泽藻葬泽藻 蚤灶凿藻曾
防治效果 渊豫冤
悦燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼
员园园 愿援 苑猿 依 园援 源源 早 源援 苑缘 依 园援 缘园 早 怨园援 员缘 依 员援 员园 葬
员园员 员远援 猿源 依 园援 缘远 枣 愿援 怨源 依 园援 缘苑 枣 愿员援 缘源 依 园援 怨苑 遭
员园圆 圆怨援 远员 依 园援 苑员 藻 员愿援 缘远 依 员援 圆园 藻 远圆援 远远 依 园援 缘怨 糟
员园猿 源苑援 圆源 依 员援 园缘 凿 猿愿援 远苑 依 员援 员源 凿 源园援 怨园 依 园援 源远 凿
员园源 缘怨援 源员 依 员援 园员 糟 源怨援 缘圆 依 员援 圆猿 糟 圆怨援 远远 依 园援 远圆 藻
员园缘 苑圆援 猿源 依 园援 怨怨 遭 远员援 圆远 依 员援 员愿 遭 员苑援 苑苑 依 园援 怨怨 枣
悦运 愿愿援 猿园 依 员援 圆圆 葬 远怨援 远苑 依 园援 缘怨 葬 ―
摇 摇 表中数据为平均数 依标准差遥 同列数据后不同小写字母表示经 蕴杂阅 法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 葬则藻
皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 蕴杂阅 贼藻泽贼援
猿 讨论
杂贼怎则扎等咱圆苑暂统计袁迄今已从多种植物中分离到
内生细菌超过 员圆园 种袁分属 远园 个属遥 在松属植物上
的研究却较少袁主要集中在芽胞杆菌属院谈家金
等咱圆愿暂 尧欧阳革成和张润杰咱圆怨暂分别从马尾松分离到
坚强芽胞杆菌 月援 枣蚤则皂怎泽 和多种芽胞杆菌袁但所得均
为松材线虫 月怎则泽葬责澡藻造藻灶糟澡怎澡 曾赠造燥责澡蚤造怎泽 伴生致病菌遥
松树内生有益芽胞杆菌的分离未见报道遥 本研究从
健康华山松树皮组织上筛选到 员园 株内生细菌袁仅有
员 株对烂皮病菌具有明显拮抗作用袁通过形态学观
察尧生理生化试验及 员远杂 则阅晕粤 序列分析袁鉴定其为
解淀粉芽胞杆菌 月援 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽遥 由于松树生
长环境和树龄是影响内生细菌种群的重要因子袁而
区域环境对华山松内生细菌种类的影响袁仍需进一
步研究遥
芽胞杆菌具有抗逆性强尧抗菌谱广等特点袁是植
物微生态体系中的优势微生物种群袁而且是理想的
植物病害生防细菌来源之一咱猿园暂 袁其中解淀粉芽胞杆
菌对病害生物防治的研究较广泛袁但主要应用在作
物和果蔬上咱员猿袁猿员暂 袁本研究对松烂皮病的生物防治属
首次报道遥 人工接种 猿 年生盆栽华山松苗木袁解淀
粉芽胞杆菌 月葬源 发酵原液与稀释 员园员尧员园圆 倍液对其
均表现出良好的防治效果袁超过 远园豫 袁与常用化学
杀菌剂 苑园豫甲基托布津 源园园 倍液尧源园豫多菌灵 缘园园
倍液和 苑缘豫百菌清可湿性粉剂 缘园园 倍液咱猿圆暂防治效
果相当遥 说明 月葬源 成功阻碍了病原菌的侵染袁有效
抑制了病原菌的繁殖和扩展袁降低了病原菌危害寄
主的几率遥 因此袁解淀粉芽胞杆菌 月葬源 在实际生产
应用中可替代化学农药袁作为华山松烂皮病生物防
治的资源菌被进一步开发利用遥
本研究中袁解淀粉芽胞杆菌 月葬源 处理感病华山
松苗木后袁丙二醛含量有所减少袁且与发病率尧病情
指数呈显著正相关袁而与防治效果呈显著负相关袁结
源苑缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
表 源 盆栽华山松对菌株 月葬源 的生理响应
栽葬遭造藻 源 孕澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 则藻泽责燥灶泽藻 燥枣 孕蚤灶怎泽 葬则皂葬灶凿蚤蚤 燥灶 泽贼则葬蚤灶 月葬源 蚤灶 责燥贼 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼泽
指标
陨灶凿藻曾
时间 渊凿冤
栽蚤皂藻
处理浓度 栽则藻葬贼皂藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 渊悦云哉 辕 皂蕴冤
悦运 员园园 员园员 员园圆 员园猿 员园源
丙二醛含量
酝阅粤 糟燥灶贼藻灶贼
渊滋皂燥造 辕 早冤
员 员苑援 苑猿 依 园援 缘缘 耘葬 员苑援 员缘 依 园援 源员 粤葬 员苑援 远远 依 园援 缘愿 粤葬 员苑援 缘源 依 园援 苑圆 粤葬 员苑援 缘苑 依 园援 缘缘 粤葬 员苑援 缘愿 依 园援 源缘 粤葬
圆 员怨援 怨源 依 园援 源苑 阅葬 员圆援 苑猿 依 园援 源远 粤遭 员源援 远猿 依 园援 缘远 月糟 员缘援 缘缘 依 园援 缘圆 月凿 员远援 远怨 依 园援 苑园 月藻 员苑援 怨怨 依 园援 源怨 月枣
源 圆圆援 园员 依 员援 园猿 悦葬 员园援 员远 依 园援 缘园 粤遭 员圆援 缘远 依 园援 缘源 月糟 员源援 园远 依 园援 苑源 悦凿 员远援 圆圆 依 园援 源圆 悦藻 员苑援 缘缘 依 园援 缘苑 悦枣
愿 圆远援 远员 依 园援 怨远 月葬 苑援 员猿 依 园援 缘缘 月遭 员园援 员愿 依 园援 缘园 悦糟 员圆援 苑员 依 园援 苑苑 阅凿 员源援 缘怨 依 园援 源远 阅藻 员远援 园圆 依 园援 缘圆 阅枣
员缘 圆愿援 远员 依 园援 苑圆 粤葬 远援 苑愿 依 园援 源园 月遭 愿援 圆猿 依 园援 缘缘 阅糟 员员援 苑员 依 园援 远愿 耘凿 员猿援 苑园 依 园援 缘园 耘藻 员缘援 愿愿 依 园援 远员 耘枣
猿园 圆愿援 猿园 依 园援 苑园 粤葬 远援 猿猿 依 园援 源员 月遭 愿援 圆园 依 园援 远苑 耘糟 员园援 缘员 依 园援 远园 云凿 员圆援 园源 依 园援 缘园 耘藻 员缘援 缘员 依 园援 远远 耘枣
木质素含量
蕴蚤早灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼
渊豫 冤
员 摇 圆援 猿远 依 园援 圆员 粤葬 摇 圆援 源圆 依 园援 员缘 阅葬 摇 圆援 猿源 依 园援 圆园 阅葬 摇 圆援 源愿 依 园援 圆圆 悦葬 摇 圆援 猿缘 依 园援 圆源 月葬 摇 圆援 猿苑 依 园援 圆园 月葬
圆 圆援 园员 依 园援 圆猿 粤遭 圆援 愿愿 依 园援 圆园 悦阅葬 圆援 苑苑 依 园援 员愿 悦阅葬 圆援 苑源 依 园援 圆园 悦葬 圆援 苑园 依 园援 圆远 月葬 圆援 缘园 依 园援 员怨 粤月葬
源 员援 怨愿 依 园援 圆圆 粤月糟 猿援 圆怨 依 园援 圆源 悦葬 猿援 员圆 依 园援 圆缘 悦葬 猿援 园愿 依 园援 圆源 悦葬 圆援 怨怨 依 园援 圆怨 月葬 圆援 苑愿 依 园援 圆缘 粤遭
愿 员援 缘远 依 园援 员苑 月枣 缘援 员愿 依 园援 猿猿 月葬 源援 愿远 依 园援 猿员 月遭 源援 员怨 依 园援 圆愿 月糟 猿援 苑缘 依 园援 圆猿 粤月凿 圆援 怨猿 依 园援 圆圆 粤藻
员缘 园援 缘苑 依 园援 员圆 悦枣 愿援 园苑 依 园援 猿园 粤葬 苑援 猿远 依 园援 猿远 粤遭 缘援 愿缘 依 园援 圆缘 粤糟 源援 圆源 依 园援 猿园 粤凿 猿援 园远 依 园援 猿圆 粤藻
猿园 园援 缘源 依 园援 员园 悦枣 愿援 圆苑 依 园援 猿员 粤葬 苑援 源苑 依 园援 圆愿 粤遭 缘援 怨猿 依 园援 圆缘 粤糟 源援 圆苑 依 园援 圆员 粤凿 猿援 员员 依 园援 圆愿 粤藻
可溶性蛋白
含量
杂燥造怎遭造藻 责则燥贼藻蚤灶
糟燥灶贼藻灶贼
渊滋早 辕 早冤
员 源圆援 怨怨 依 园援 缘缘 粤葬 源圆援 苑远 依 园援 缘苑 云葬 源圆援 猿远 依 园援 苑圆 耘葬 源圆援 远愿 依 园援 愿愿 云葬 源圆援 猿源 依 园援 远怨 耘葬 源圆援 怨猿 依 园援 缘愿 月葬
圆 源员援 猿源 依 园援 源怨 粤凿 源愿援 园源 依 园援 缘源 耘葬 源苑援 源苑 依 园援 缘怨 阅葬 源源援 源怨 依 园援 苑园 云遭 源源援 源园 依 园援 缘缘 耘糟 源猿援 园远 依 园援 缘园 月糟
源 猿愿援 愿愿 依 园援 源愿 月藻 缘苑援 源苑 依 园援 远怨 阅葬 缘源援 愿园 依 园援 苑愿 悦遭 源怨援 源怨 依 园援 苑怨 耘糟 源愿援 远苑 依 园援 远苑 阅糟 源缘援 员怨 依 园援 远园 粤月凿
愿 猿员援 园缘 依 园援 缘园 悦枣 苑员援 猿缘 依 员援 员园 悦葬 远猿援 缘圆 依 园援 苑园 月遭 缘远援 愿远 依 园援 怨员 阅糟 缘园援 员源 依 园援 苑员 悦凿 源远援 园苑 依 园援 苑苑 粤藻
员缘 圆苑援 猿园 依 园援 缘圆 阅枣 苑怨援 远怨 依 员援 园源 月葬 苑远援 怨愿 依 员援 员缘 粤遭 远圆援 源怨 依 园援 愿圆 月糟 缘缘援 猿远 依 园援 苑猿 月凿 源苑援 员愿 依 园援 远员 粤藻
猿园 圆猿援 苑怨 依 园援 缘园 耘枣 愿圆援 苑圆 依 员援 园愿 粤葬 苑怨援 猿愿 依 员援 员苑 粤遭 远苑援 愿员 依 员援 园圆 粤糟 缘愿援 苑圆 依 员援 园员 粤凿 源愿援 圆圆 依 园援 远愿 粤藻
可溶性糖
含量
杂燥造怎遭造藻 泽怎早葬则
糟燥灶贼藻灶贼
渊滋早 辕 早冤
员 猿怨援 远园 依 园援 苑园 粤葬 猿愿援 苑园 依 园援 苑缘 耘葬 猿怨援 员园 依 园援 缘缘 耘葬 猿怨援 源园 依 园援 缘园 耘葬 猿愿援 怨园 依 园援 远园 阅葬 猿怨援 员园 依 园援 缘园 悦葬
圆 圆苑援 圆园 依 园援 缘园 月糟 源圆援 圆园 依 园援 缘缘 阅葬 源圆援 园园 依 园援 缘园 阅遭 源园援 远园 依 园援 远缘 耘遭 源园援 圆园 依 园援 苑园 阅遭 猿怨援 愿园 依 园援 缘缘 悦遭
源 圆猿援 苑园 依 园援 源缘 悦枣 缘愿援 远园 依 园援 远园 悦葬 缘缘援 圆园 依 园援 缘缘 悦遭 源愿援 怨园 依 园援 远园 阅糟 源缘援 员园 依 园援 远缘 悦凿 源圆援 苑园 依 园援 远园 月藻
愿 圆园援 员园 依 园援 缘缘 阅枣 苑园援 猿园 依 园援 缘园 月葬 远源援 猿园 依 园援 远园 月遭 缘远援 愿园 依 园援 远缘 悦糟 缘圆援 猿园 依 园援 缘缘 月凿 源苑援 远园 依 园援 缘缘 粤藻
员缘 员怨援 圆园 依 园援 源园 阅耘枣 苑缘援 远园 依 园援 缘园 粤葬 远怨援 苑园 依 园援 源缘 粤遭 远园援 圆园 依 园援 缘缘 月糟 缘缘援 缘园 依 园援 远园 粤凿 源愿援 员园 依 园援 源缘 粤藻
猿园 员苑援 缘园 依 园援 缘园 耘枣 苑远援 怨园 依 园援 远缘 粤葬 苑员援 圆园 依 园援 愿园 粤遭 远猿援 源园 依 园援 缘缘 粤糟 缘远援 苑园 依 园援 远缘 粤凿 源怨援 远园 依 园援 缘园 粤藻
摇 摇 表中数据为平均数 依标准差遥 同列不同大写字母尧同行不同小写字母表示经 蕴杂阅法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 葬则藻 皂藻葬灶 依
杂阅援 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 怎责责藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 葬灶凿 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 则燥憎 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠
蕴杂阅 贼藻泽贼援
表 缘 华山松盆栽试验各生理指标与感病程度的相关性
栽葬遭造藻 缘 悦燥则则藻造葬贼蚤燥灶泽 遭藻贼憎藻藻灶 凿蚤泽藻葬泽藻 凿藻早则藻藻 葬灶凿 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 蚤灶凿藻曾藻泽 燥枣 孕蚤灶怎泽 葬则皂葬灶凿蚤蚤 蚤灶 责燥贼 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼泽
指标
陨灶凿藻曾
丙二醛含量
酝阅粤 糟燥灶贼藻灶贼
木质素含量
蕴蚤早灶蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼
可溶性蛋白含量
杂燥造怎遭造藻 责则燥贼藻蚤灶泽
糟燥灶贼藻灶贼
可溶性糖含量
杂燥造怎遭造藻 泽怎早葬则
糟燥灶贼藻灶贼
菌剂浓度
杂怎泽责藻灶泽蚤燥灶
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
发病率 陨灶糟蚤凿藻灶糟藻 园援 怨圆园远鄢 原 园援 怨员远源鄢 原 园援 怨猿缘苑鄢 原 园援 怨圆愿源鄢 原 园援 怨愿员远鄢
病情指数 阅蚤泽藻葬泽藻 蚤灶凿藻曾 园援 怨猿源源鄢 原 园援 怨苑园远鄢 原 园援 怨缘缘员鄢 原 园援 怨远源圆鄢 原 园援 怨员缘缘鄢
防治效果 悦燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼 原 园援 怨远员苑鄢 园援 怨圆员源鄢 园援 怨猿愿猿鄢 园援 怨圆缘园鄢 园援 怨圆员员鄢
处理时间 栽则藻葬贼皂藻灶贼 贼蚤皂藻 原 园援 怨员怨园鄢 园援 愿苑园远 园援 愿缘员源 园援 怨员员圆鄢 ―
摇 摇 鄢表示在 孕 约 园援 园缘水平上显著相关遥 鄢 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造援
合外源物质诱导抗性所得相似结果的报道咱猿猿暂 袁推测
菌剂可能降低了华山松苗的膜脂过氧化程度袁增强
其抵抗病菌的能力遥 但随着处理时间的延长袁丙二
醛含量下降减缓袁可能病菌和生防菌在寄主体内达
到一定程度的平衡袁菌剂有效控制了病菌的繁殖和
病害的发展遥 李伟等咱猿源暂研究表明袁寄主的代谢物木
质素的形成和积累有助于增加细胞壁厚度和组织木
质化程度袁形成病原菌入侵的机械屏障遥 基于此袁本
研究结果揭示 月葬源 可刺激华山松苗产生木质素袁将
病原菌限制在一定的细胞范围内阻止其进一步扩散
缘苑缘缘 期 李姝江等院 松烂皮病内生拮抗细菌的筛选尧生防效果及华山松的生理响应
图 猿 菌株 月葬源 对华山松烂皮病田间防治效果
云蚤早援 猿 悦燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽贼则葬蚤灶 月葬源 燥灶 悦藻灶葬灶早蚤怎皂 枣藻则则怎早蚤灶燥泽怎皂 蚤灶 贼澡藻 枣蚤造藻凿
摇 摇 图中数据为平均数 依标准差遥 不同小写字母表示经 蕴杂阅法检验在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 阅葬贼葬 蚤灶 贼澡藻 枣蚤早怎则藻 葬则藻 皂藻葬灶 依 杂阅援 阅蚤枣鄄
枣藻则藻灶贼 造燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 燥灶 贼澡藻 遭葬则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 葬贼 孕 约 园援 园缘 造藻增藻造 遭赠 蕴杂阅 贼藻泽贼援
为害遥 可溶性蛋白与植株体内抗性蛋白尧防卫酶系
等的合成代谢有关咱猿缘暂 袁本试验中可溶性蛋白含量与
发病率尧病情指数呈显著负相关袁与防治效果呈显著
正相关袁可能是该生防菌液诱导了华山松的抗性系
统反应袁但是否包含病程相关蛋白或抗病基因有待
进一步研究遥 本研究中菌液处理后可溶性糖含量增
加袁说明参与植物呼吸代谢或合成保护性物质的来
源有所增加袁植物提高生理强度以抵御病原菌的侵
染遥 下一步还需排除无菌培养液对华山松的作用袁
并深入研究生理响应与解淀粉芽胞杆菌 月葬源 诱导华
山松防御反应的作用机制遥
本试验在四川康定跑马山华山松烂皮病发生林
区进行田间防治袁将已有病斑刮除后施用解淀粉芽
胞杆菌 月葬源 菌液取得了良好的防治效果袁发酵原液
渊员园园冤和稀释倍液渊员园员尧员园圆 和 员园猿 冤的治愈率均在
愿园豫以上袁如应用于实践生产袁从经济角度考虑袁应
在 员园 倍至 员 园园园 倍稀释液处理中进行选择遥 茹祥
等咱猿远暂认为通过多次长期施用和改善生防菌的施用
方式能逐渐提高其生防效果袁因此袁为探明 月葬源 菌剂
的持效性袁采用不同施用次数和施用方式等手段可
印证该菌剂的生防潜力遥 结合 月葬源 菌剂对松烂皮病
的盆栽尧田间防治效果及华山松的生理响应结果袁将
其进一步开发作为高效尧稳定尧环保的生物农药用于
松烂皮病的防治具有良好的应用前景遥
参 考 文 献 渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 李幼君援 华山松烂皮病的观察及防治援 辽宁林业科技袁 员怨怨缘
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咱圆暂 黄国强袁 李超袁 王庆华袁 等援 松烂皮病发生规律与防治对
策援 山东林业科技袁 圆园园猿渊源冤院 猿猿
咱猿暂 杨秀卿袁 王桂清袁 邓力琴袁 等援 大连地区日本黑松发生枯黄
枯死原因的调查援 沈阳农业大学学报袁 员怨怨怨袁 猿园渊猿冤院 圆远园 原圆远圆
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咱缘暂 孙美清袁 杨秀卿袁 赵伟袁 等援 松树枝枯病的研究进展援 中国
森林病虫袁 圆园园员渊源冤院 圆苑 原 猿员
咱远暂 焦喜来袁 邓勋袁 尹大川袁 等援 绿木霉菌株 栽源猿对松烂皮病菌
的抑制效果及其抑菌机理援 林业科技袁 圆园员猿袁 猿愿渊猿冤院 员远 原员怨
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咱员园暂 杨瑞先袁 蔡学清袁 范晓静袁 等援 内生芽孢杆菌防治植物病
害的应用及作用机制研究进展援 武夷科学袁 圆园员圆袁 圆愿渊员冤院
员园远 原 员员猿
咱员员暂 邱思鑫袁 何红袁 阮宏椿袁 等援 内生芽孢杆菌 栽月圆 防治辣椒
疫病效果及其机理初探援 植物病理学报袁 圆园园源袁 猿源渊圆冤院
员苑猿 原 员苑怨
咱员圆暂 蔡学清袁 林彩萍袁 何红袁 等援 内生枯草芽孢杆菌 月杂鄄圆 对水
稻苗生长的效应援 福建农业大学学报渊自然科学版冤袁 圆园园缘袁
猿源渊圆冤院 员愿怨 原 员怨源
咱员猿暂 罗晶袁 张鑫袁 黄海袁 等援 解淀粉芽胞杆菌 月葬鄄员远愿 菌株对小
麦全蚀病的防治及其机制援 植物保护学报袁 圆园员猿袁 源园渊缘冤院
源苑缘 原 源苑远
远苑缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
咱员源暂 刘伟袁 沈小英袁 段军娜袁 等援 抗烟草青枯病菌的芽胞杆菌
筛选和鉴定援 植物保护学报袁 圆园员猿袁 源园渊员冤院 怨缘 原 怨远
咱员缘暂 段军娜袁 黄海袁 罗晶袁 等援 皮尔瑞俄类芽胞杆菌 月悦鄄猿怨 对
番茄灰霉病的防治效果及防腐保鲜作用援 植物保护学报袁
圆园员源袁 源员渊员冤院 远员 原 远远
咱员远暂 蔡学清袁 陈炜袁 林娜袁 等援 内生细菌在荔枝体内的定殖及
其防病保鲜功能援 应用生态学报袁 圆园员员袁 圆圆渊愿冤院 圆员源园 原
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咱员愿暂 王韬袁李永袁朴春根袁等援 圆种杨树可培养内生细菌的多样
性和季节动态变化援 林业科学袁 圆园员猿袁 源怨渊缘冤院 员猿缘 原 员源远
咱员怨暂 方中达援 植病研究方法渊第 猿 版冤援 北京院 中国农业出版
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咱圆园暂 东秀珠袁 蔡妙英援 常见细菌系统鉴定手册援 北京院 科学出
版社袁 圆园园员
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咱圆源暂 王晶英袁 敖红袁 张杰袁 等援 植物生理生化实验技术与原理援
哈尔滨院 东北林业大学出版社袁 圆园园猿
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咱圆愿暂 谈家金袁 向红琼袁 冯志新援 马尾松内生细菌与松材线虫病
关系的初步研究援 植物病理学报袁 圆园园猿袁 猿猿渊缘冤院 源苑源 原 源苑远
咱圆怨暂 欧阳革成袁 张润杰援 植物内生菌 月葬糟蚤造造怎泽 泽责责援 与松材线虫
病的关系研究援 中山大学学报渊自然科学版冤袁 圆园园缘袁 源源
渊圆冤院 愿圆 原 愿缘
咱猿园暂 李姝江袁 梁漫袁 朱天辉袁 等援 杂交竹梢枯病拮抗菌的筛选
及抗菌蛋白分析援 南京林业大学学报 渊自然科学版冤袁
圆园员猿袁 猿苑渊远冤院 猿员 原 猿远
咱猿员暂 洪鹏袁 安国栋袁 胡美英袁 等援 解淀粉芽孢杆菌防治果蔬采
后病害研究进展援 中国农学通报袁 圆园员猿袁 圆怨渊员圆冤院 员远愿 原
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咱猿圆暂 张成丕袁 刘晓东袁 童晓彤援 黑松枝枯病的综合防治技术援
防护林科技袁 圆园园园渊猿冤院 员员猿 原 员员源
咱猿猿暂 李姝江袁 朱天辉袁 黄艳娜袁 等援 水杨酸诱导山茶抗灰斑病
的作用及生理生化响应援 林业科学袁 圆园员圆袁 源愿渊圆冤院 员园猿 原员园怨
咱猿源暂 李伟袁 熊谨袁 陈晓阳援 木质素代谢的生理意义及其遗传控
制研究进展援 西北植物学报袁 圆园园猿袁 圆猿渊源冤院 远苑缘 原 远愿员
咱猿缘暂 酝葬造燥造藻责泽扎葬 哉援 陨灶凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤泽藻葬泽藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 遭赠 葬糟蚤遭藻灶扎燥造葬则鄄
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贼燥皂葬贼燥 责造葬灶贼泽援 悦则燥责 孕则燥贼藻糟贼蚤燥灶袁 圆园园远袁 圆缘渊怨冤院 怨缘远 原 怨远圆
咱猿远暂 茹祥袁 曾涛袁 莫坤联袁 等援 海南吊罗山原始林区抗香蕉枯
萎病土壤放线菌的分离及田间防治效果试验援 中国农学通
报袁 圆园员圆袁 圆愿渊员猿冤院 怨苑 原 员园圆
渊责任编辑院李美娟冤
苑苑缘缘 期 李姝江等院 松烂皮病内生拮抗细菌的筛选尧生防效果及华山松的生理响应