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Isolation, identification and activity analysis of antimicrobial compound from Bionectria ochroleuca strain Bo-1

淡色生赤壳菌Bo-1菌株拮抗物质的分离纯化、解析及活性分析



全 文 :第 源员 卷摇 第 员 期
圆园员源 年 圆 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源员摇 晕燥援 员
云藻遭援 摇 圆园员源

基金项目院 国家自然科学基金渊猿员圆苑园园远员冤
作者简介院 刘琴英袁女袁员怨愿愿年生袁硕士研究生袁研究方向为应用微生物学袁 耘鄄皂葬蚤造院 则噪猿苑员怨苑园苑源远岳 员远猿援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 躁凿澡岳 扎躁灶怎援 糟灶袁 栽藻造院 园缘苑怨 原 愿圆圆愿猿愿猿圆
收稿日期院 圆园员猿 原 园苑 原 员怨
淡色生赤壳菌 月燥鄄员菌株拮抗物质的分离
纯化尧解析及活性分析
刘琴英摇 蒋冬花鄢摇 齐育平摇 陈摇 璨摇 谢祥聪摇 孙摇 蕾
渊浙江师范大学化学与生命科学学院袁 金华 猿圆员园园源冤
摘要院 从浙江省金华市郊水稻内生菌中筛选到 员 株拮抗水稻白叶枯病菌渊载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 责增援
燥则赠扎葬藻袁载燥燥冤 孕远 生理小种的淡色生赤壳菌 月蚤燥灶藻糟贼则蚤葬 燥糟澡则燥造藻怎糟葬 月燥鄄员 菌株遥 该菌株的菌体和发酵液
对 载燥燥 孕远 生理小种均表现出较强的拮抗能力遥 以 孕远 生理小种作为指示菌进行活性跟踪袁通过分
步萃取尧硅胶柱层析尧高效液相色谱等袁分离纯化获得拮抗活性物质结晶曰对所获得的结晶物进行核
磁共振氢谱分析和质谱分析袁通过解析与比对袁该物质分子量为 猿源源援 园愿猿缘袁分子式为 悦员愿匀员远 韵苑袁鉴
定为松萝酸 渊 怎泽灶蚤糟 葬糟蚤凿冤遥 将纯化的松萝酸以 圆园豫 叶枯唑 渊 遭蚤泽皂藻则贼澡蚤葬扎燥造冤 和 猿豫 中生菌素
渊扎澡燥灶早泽澡藻灶早皂赠糟蚤灶冤为对照袁采用 怨远 孔板法测定对 载燥燥 孕远 生理小种的抑菌活性袁最低抑制浓度为
圆园园 滋早 辕 皂蕴袁表明松萝酸具有较强的抑菌活性袁但较中生菌素弱袁与 圆园豫叶枯唑效果相近遥
关键词院 淡色生赤壳菌曰 水稻白叶枯病菌曰 分离纯化曰 松萝酸
陨泽燥造葬贼蚤燥灶袁 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 葬糟贼蚤增蚤贼赠 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 葬灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造
糟燥皂责燥怎灶凿 枣则燥皂 月蚤燥灶藻糟贼则蚤葬 燥糟澡则燥造藻怎糟葬 泽贼则葬蚤灶 月燥鄄员
蕴蚤怎 匝蚤灶赠蚤灶早摇 允蚤葬灶早 阅燥灶早澡怎葬鄢摇 匝蚤 再怎责蚤灶早摇 悦澡藻灶 悦葬灶摇 载蚤藻 载蚤葬灶早糟燥灶早摇 杂怎灶 蕴藻蚤
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 悦澡藻皂蚤泽贼则赠 葬灶凿 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 在澡藻躁蚤葬灶早 晕燥则皂葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 允蚤灶澡怎葬 猿圆员园园源袁 在澡藻躁蚤葬灶早 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 粤 泽贼则葬蚤灶 月燥鄄员 燥枣 月蚤燥灶藻糟贼则蚤葬 燥糟澡则燥造藻怎糟葬 憎蚤贼澡 葬灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 贼燥 载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 责增援
燥则赠扎葬藻 渊载燥燥冤 则葬糟藻 孕远 憎葬泽 泽糟则藻藻灶藻凿 枣则燥皂 则蚤糟藻 蚤灶 贼澡藻 泽怎遭怎则遭 燥枣 允蚤灶澡怎葬援 杂贼则葬蚤灶 月燥鄄员 葬灶凿 蚤贼泽 枣藻则皂藻灶贼 枣造怎蚤凿
澡葬凿 泽贼则燥灶早 葬灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 贼燥 载燥燥 则葬糟藻 孕远援 哉泽蚤灶早 则葬糟藻 孕远 葬泽 贼澡藻 蚤灶凿蚤糟葬贼燥则 遭葬糟贼藻则蚤怎皂袁 葬灶 葬糟贼蚤增藻
皂燥灶燥皂藻则 糟燥皂责燥怎灶凿 憎葬泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 葬灶凿 责怎则蚤枣蚤藻凿 遭赠 皂藻葬灶泽 燥枣 枣则葬糟贼蚤燥灶葬造 藻曾贼则葬糟贼蚤燥灶袁 泽蚤造蚤糟葬 早藻造 糟燥造怎皂灶
糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 泽藻责葬则葬贼蚤燥灶袁 葬灶凿 澡蚤早澡 责藻则枣燥则皂葬灶糟藻 造蚤择怎蚤凿 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶援 栽澡则燥怎早澡 泽贼则怎糟贼怎则葬造
葬灶葬造赠泽蚤泽 葬灶凿 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶袁 贼澡藻 贼葬则早藻贼 糟燥皂责燥怎灶凿 憎葬泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 葬泽 怎泽灶蚤糟 葬糟蚤凿 憎蚤贼澡 皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 燥枣
猿源源郾 园愿猿缘 葬灶凿 枣燥则皂怎造葬 燥枣 悦员愿 匀员远 韵苑 燥灶 贼澡藻 遭葬泽蚤泽 燥枣 皂葬泽泽 泽责藻糟贼则怎皂 葬灶凿 灶怎糟造藻葬则 皂葬早灶藻贼蚤糟 则藻泽燥灶葬灶糟藻葬灶葬造赠泽藻泽援 哉泽蚤灶早 猿豫 扎澡燥灶早泽澡藻灶早皂赠糟蚤灶 葬灶凿 圆园豫 遭蚤泽皂藻则贼澡蚤葬扎燥造 葬泽 糟燥灶贼则燥造泽袁 贼澡藻 葬灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣
怎泽灶蚤糟 葬糟蚤凿 贼燥 载燥燥 则葬糟藻 孕远 憎葬泽 贼藻泽贼藻凿 遭赠 怨远鄄憎藻造造 责造葬贼藻 皂藻贼澡燥凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 蚤造造怎泽贼则葬贼藻凿 贼澡葬贼 怎泽灶蚤糟 葬糟蚤凿
泽澡燥憎藻凿 遭藻贼贼藻则 葬灶贼蚤遭葬糟贼藻则蚤葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 贼燥 载燥燥 则葬糟藻 孕远 憎蚤贼澡 酝陨悦 增葬造怎藻 燥枣 圆园园 滋早 辕 皂蕴袁 遭怎贼 造燥憎藻则 贼澡葬灶 猿豫
扎澡燥灶早泽澡藻灶早皂赠糟蚤灶 葬灶凿 藻择怎葬造 贼燥 圆园豫 遭蚤泽皂藻则贼澡蚤葬扎燥造援
运藻赠 憎燥则凿泽院 月蚤燥灶藻糟贼则蚤葬 燥糟澡则燥造藻怎糟葬曰 载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 责增援 燥则赠扎葬藻曰 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 怎泽灶蚤糟 葬糟蚤凿
摇 摇 水稻白叶枯病又称为白叶瘟尧茅草瘟尧地火烧
等袁是由水稻黄单胞杆菌渊载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 责增援
燥则赠扎葬藻袁载燥燥冤通过水稻叶片的水孔或伤口侵入并于
维管束内大量繁殖和扩展而引起的一种细菌性病
害袁可导致水稻减产 圆园豫 耀 猿园豫 袁严重时甚至颗粒
无收咱员 原 圆暂 遥 目前袁对于水稻白叶枯病防治的研究主
要集中于筛选培育具有抗性基因的水稻品种和施
用化学农药咱猿暂 遥 但是袁筛选具有抗性的水稻品种耗
时较长袁不能满足农业生产的需要遥 另外袁许多已
选育出的水稻抗病基因抗菌谱狭窄或是隐性基因
等特点不能克隆和利用遥 极少数克隆和利用的抗
病基因又由于长期尧反复地使用袁造成病原菌致病
机制发生改变袁优良抗病品种的抗病性状不断丧
失袁继而造成抗病品种的再次感病咱源暂 遥 而大量施加
诸如杀枯净尧噻枯唑等化学农药易造成农药残留尧
生态环境破坏尧病原菌抗性增强尧有益生物被杀等
问题咱缘暂 遥 因此袁从自然环境中筛选对白叶枯病菌具
有拮抗作用的微生物农药是防治白叶枯病的重要
方向咱远暂 遥
本实验室以 载燥燥 孕远 生理小种为指示菌袁筛选得
到一株对白叶枯病菌抑菌效果明显的淡色生赤壳
菌 月蚤燥灶藻糟贼则蚤葬 燥糟澡则燥造藻怎糟葬 月燥鄄员 菌株遥 生赤壳属 月蚤燥灶藻糟鄄
贼则蚤葬是 员怨怨怨 年 砸燥泽泽皂葬灶 等咱苑暂根据形态学及分子生
物学特征将一部分丛赤壳科 晕藻糟贼则蚤葬糟藻葬藻 菌种独立
出来建立的一个属袁被归类为生赤壳科肉座菌目子
囊菌纲子囊菌门遥 据相关研究报道袁某些生赤壳菌
月蚤燥灶藻糟贼则蚤葬 泽责责援所产生的抗生素类物质可以对一些
病原菌起特异性拮抗作用袁如曹晋忠等咱愿暂从黄芩内
分离出的淡色生赤壳菌 晕援 杂月粤猿缘 对枯草芽胞杆菌
月葬糟蚤造造怎泽 泽怎遭贼蚤造蚤泽尧大肠埃希氏菌 耘泽糟澡藻则蚤糟澡蚤葬 糟燥造蚤尧镰孢
霉 云怎泽葬则蚤怎皂等具有较好抑菌效果遥 本研究依据活
性跟踪法袁利用硅胶柱色谱尧制备高效液相色谱等
多种色谱方法袁从 月燥鄄员 菌株发酵液乙酸乙酯提取物
中筛选高效抑菌活性物质袁用于白叶枯病的生物防
治袁以期为开发新型生物农药奠定基础遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试菌株院淡色生赤壳菌 月燥鄄员 菌株由本实验室
从浙江省金华市郊水稻田健康水稻叶片内分离获
得袁保藏在中国典型培养物保藏中心渊悦悦栽悦悦冤袁保
藏号为院酝圆园员猿园圆苑遥 水稻白叶枯病菌 孕远 生理小种袁
具有很强的毒性袁由本校生化学院遗传室提供遥
药剂及仪器院圆园豫 叶枯唑 渊 遭蚤泽皂藻则贼澡蚤葬扎燥造冤 宰孕尧
猿豫中生菌素渊扎澡燥灶早泽澡藻灶早皂赠糟蚤灶冤宰孕袁金华医药公司遥
高效液相色谱渊匀孕蕴悦冤试验所用试剂均为色谱纯袁
其它所有试剂均为分析纯遥 柱层析硅胶渊圆园园 耀 猿园园
目冤袁青岛海洋化工厂曰栽蕴悦 层析板 郧云圆缘源 渊员园 耀
圆园 滋皂冤袁酝藻则糟噪公司曰旋转蒸发仪尧冷却水循环装置袁
上海爱郎有限公司曰高效液相色谱仪袁安捷伦科技
有限公司曰月则燥噪藻则 阅砸载鄄源园园 核磁共振仪袁瑞士 月则燥噪藻则
公司曰月孕郧鄄怨园苑园 粤 电热鼓风干燥箱袁上海一恒科学
仪器有限公司遥
培养基院孕阅粤培养基院马铃薯 圆园园 早尧葡萄糖圆园 早尧
蛋白胨 员 早尧琼脂粉 员愿 早尧水 员园园园 皂蕴袁责匀 远援 园 耀 远援 缘
渊液体培养基不加琼脂粉袁简写为 孕阅冤曰改良 孕阅 液
体培养基院马铃薯 猿园园 早尧蛋白胨 缘 早尧蔗糖 员缘 早尧
悦葬渊晕韵猿冤圆 窑源匀圆韵 园援 缘 早尧晕葬匀孕韵源 窑员圆匀圆韵 圆 早尧水员园园园 皂蕴袁责匀 远援 园 耀 远援 缘渊固体培养基加琼脂粉 员愿 早冤遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 月燥鄄员 菌株乙酸乙酯提取物的制备
采用液体发酵的方法遥 挑取已纯化菌丝体接
种到装有约 员园园 皂蕴 孕阅 液体培养基的 圆缘园 皂蕴 锥形
瓶中袁于摇床上 圆愿 益尧圆圆园 则 辕 皂蚤灶 振荡培养袁共发酵
猿园 蕴袁培养约 苑 凿 后袁获得发酵液遥 所得发酵液在室
温下经 源 层纱布过滤后得滤液袁滤液经乙酸乙酯萃
取多次袁直至上层乙酸乙酯层无色为止遥 将得到的
乙酸乙酯层溶液合并袁在旋转蒸发仪上 源缘 益蒸发浓
缩至干即得 月燥鄄员 菌株乙酸乙酯提取物遥
员援 圆援 圆 抑菌活性测定
参照刘冬梅等咱怨暂方法袁用牛津杯法分别测定
月燥鄄员菌株发酵液乙酸乙酯提取物尧硅胶柱层析物尧制
备 匀孕蕴悦等各流分对白叶枯病菌抑菌活性遥 具体操
作如下院取保藏于 原愿园 益冰箱白叶枯病菌 孕远 生理小
种接种于改良 孕阅液体培养基袁摇床 圆愿 益尧员圆园 则 辕 皂蚤灶
活化培养袁当菌悬液浓度达到韵阅值园援 远时袁取员园园滋蕴
菌液均匀涂布到 孕阅粤 固体培养基上袁待用曰把分离
出的各流分用乙酸乙酯稀释成浓度为 圆园园 滋早 辕 皂蕴或
员 皂早 辕 皂蕴 的药液袁待用曰采用牛津杯法测定抑菌效
果袁并用十字交叉法测量抑菌圈的大小咱员园 原 员员暂 遥 以乙
酸乙酯溶液作为对照袁每处理重复 猿 次遥
员援 圆援 猿 月燥鄄员 菌株抗菌活性物的分离纯化
硅胶柱层析院选用 远园 糟皂 伊 圆援 远 糟皂 玻璃层析柱袁
圆园园 耀 猿园园 目硅胶进行湿法填柱咱员圆暂 遥 用甲醇溶解乙
酸乙酯提取物袁过滤除去少量的不溶物袁将滤液上
硅胶柱进行动态吸附袁用二氯甲烷 颐甲醇为 员园园 颐 园尧
员园园 颐 员尧员园园 颐 圆尧员园园 颐 源尧员园园 颐 愿渊 增 颐 增冤等作为洗脱剂
进行梯度洗脱袁流速为 员援 园 皂蕴 辕 皂蚤灶袁每 员缘 皂蚤灶 收集
一管袁每管 员缘 皂蕴袁在旋转蒸发仪上 源缘益蒸发浓缩至
干遥 通过 栽蕴悦 点板合并后共得 愿 个组分 渊 粤员 耀
粤愿冤袁采用牛津杯法咱员园 原 员员暂分别测定其抑菌活性遥
匀孕蕴悦分离院将硅胶柱层析后有活性的洗脱物
用甲醇溶解袁用 匀孕蕴悦 进一步分离尧制备遥 匀孕蕴悦 的
制备条件为院色谱柱为 孕葬糟噪藻凿 悦燥造怎皂灶 缘 悦员愿 鄄酝杂鄄域
圆源 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源员 卷
渊员园 陨阅 伊 圆缘园 皂皂冤袁柱温为 圆愿 益曰流动相为甲醇 颐磷
酸盐缓冲液渊责匀 缘援 园冤 越 缘园 颐 缘园渊 增 颐 增冤袁流速为 员援 园
皂蕴 辕 皂蚤灶曰紫外检测波长 圆愿源 灶皂曰手动进样袁每次进样
量为 缘园 滋蕴遥 分别收集图谱中各吸收峰所对应的洗
脱液并采用 员援 圆援 圆 方法进行活性测定遥
员援 圆援 源 抗菌活性物的结构分析
采用质谱渊酝杂冤尧氢核磁共振谱渊员匀鄄晕酝砸冤尧碳
核磁共振谱渊员猿悦鄄晕酝砸冤等方法分析上述活性物的分
子量及化学结构遥
员援 圆援 缘 抗菌活性物最低抑菌浓度测定
采用 怨远 孔板法咱员猿暂测定抗菌活性物对白叶枯病
菌的最低抑制浓度渊酝陨悦 值冤遥 具体操作如下院取保
藏于 原 愿园 益冰箱的白叶枯病菌 孕远 生理小种接种于
改良 孕阅 液体培养基袁摇床 圆愿 益尧员圆园 则 辕 皂蚤灶 活化培
养 员圆 澡袁将菌悬液梯度稀释至麦氏比浊度为 园援 缘 酝糟云袁
待用曰将活性物以二甲基亚砜渊阅酝杂韵冤配置成 愿 皂早 辕
皂蕴的母液袁再以 孕阅 培养基将母液稀释成 园援 愿 皂早 辕
皂蕴的抑菌液袁待用曰取无菌 怨远 微孔板袁第 圆 孔加入
圆园园 滋蕴的 孕阅培养液渊不含活性物冤检验是否污染袁
第 猿 耀 员园 孔分别加入 员园园 滋蕴的经 孕阅培养液 圆 倍稀
释的抑菌液袁使各孔药物的最终浓度为 源园园尧圆园园尧
员园园尧缘园尧圆缘尧员圆援 缘尧远援 圆缘尧猿援 员圆缘 滋早 辕 皂蕴袁第 员员 孔中加
入 员园园 滋蕴含 员园豫 阅酝杂韵的 孕阅培养液作为对照曰第
猿 耀 员员 孔分别加入 园援 缘 酝糟云渊麦氏比浊浓度冤孕远 菌悬
液 员园园 滋蕴遥 此外袁以 圆园豫叶枯唑和 猿豫中生菌素作
为阳性对照药物袁并按以上方法进行处理遥 最低抑
菌浓度的结果判断参照美国临床试验标准委员会
渊晕悦悦蕴杂冤的标准进行咱员源暂 遥
圆 结果与分析
圆援 员 月燥鄄员 菌株抑菌活性物的分离纯化
硅胶柱层析院活性组分主要集中在二氯甲烷 颐
甲醇 越 员园园 颐 员渊 增 颐 增冤的洗脱物 粤圆 中遥 当供试浓度
为 圆园园 滋早 辕 皂蕴时袁其抑菌圈直径为 猿园援 员 皂皂遥 将洗
脱物 粤圆 减压浓缩至干袁得黄色粉末状固体遥
匀孕蕴悦分离纯化院将硅胶柱层析后的活性洗脱
物 粤圆 用甲醇溶解袁经制备型 匀孕蕴悦 分离纯化袁各组
份的 匀孕蕴悦图谱如图 员 所示遥 在保留时间 猿园援 圆怨尧
猿愿援 苑源 皂蚤灶出现 圆 个显著的吸收峰袁分别记为 粤圆鄄员尧
粤圆鄄圆遥 分别收集各个吸收峰并检测其对白叶枯病菌
的抑菌活性袁粤圆鄄员 吸收峰具有明显的抑菌活性袁当
供试浓度为 员 皂早 辕 皂蕴袁其抑菌圈直径为 圆圆援 圆 皂皂遥
图 员 月燥鄄员 菌株产生抗菌活性物的 匀孕蕴悦分离图谱
云蚤早援 员 匀孕蕴悦 泽责藻糟贼则怎皂 燥枣 葬灶贼蚤皂蚤糟则燥遭蚤葬造 泽怎遭泽贼葬灶糟藻泽 责则燥凿怎糟藻凿 遭赠 泽贼则葬蚤灶 月燥鄄员
圆援 圆 抗菌活性物的结构解析
活性组分 粤圆鄄员院淡黄色粉末袁易溶于乙酸乙酯尧
丙酮尧二甲基亚砜袁微溶于乙醇尧水遥 粤圆鄄员 的波普数
据如下院耘杂陨鄄酝杂院皂 辕 扎 猿源猿援 园愿猿缘咱酝 垣 匀暂 原 袁由此得出
粤圆鄄员 的分子量为 猿源源援 园愿猿缘袁确定分子式 悦员愿 匀员远 韵苑曰
员匀鄄晕酝砸渊源园园援 员猿 酝匀扎袁悦阅悦造猿 冤 啄院员援 苑愿渊猿匀袁泽冤尧圆援 员猿
渊猿匀袁泽冤尧圆援 远愿鄢渊猿匀袁泽冤尧圆援 苑园鄢渊猿匀袁泽冤尧远援 园园渊员匀袁
泽冤尧苑援 猿园渊员匀袁泽冤尧员员援 园缘渊员匀袁泽冤尧员猿援 猿猿渊员匀袁泽冤曰员猿 悦鄄
晕酝砸渊源园园援 员猿 酝匀扎袁悦阅悦造猿 冤 啄院苑援 缘缘尧圆苑援 怨员尧猿员援 圆怨尧
猿圆援 员猿尧缘怨援 园愿尧怨愿援 猿源尧员园员援 缘猿尧员园猿援 怨远尧员园缘郾 圆猿尧员园怨援 猿猿尧
员缘缘援 圆员尧员缘苑援 缘员尧员远猿援 愿怨尧员苑怨援 猿愿尧员怨员援 苑圆尧员怨愿援 园远尧
圆园园援 猿猿尧圆园员援 苑愿遥 比对文献咱员缘暂 袁发现其波普数据与
松萝酸渊怎泽灶蚤糟 葬糟蚤凿冤一致袁并将 粤圆鄄员 鉴定为松萝酸袁
其结构如图 圆 所示遥
圆援 猿 抗菌活性物对白叶枯病菌的 酝陨悦值
活性组分 粤圆鄄员 对白叶枯病菌的 酝陨悦 值为 圆园园
滋早 辕 皂蕴袁高于阳性对照 猿豫中生菌素的 缘园 滋早 辕 皂蕴袁但
与 圆园豫叶枯唑效果相当遥
猿源员 期 刘琴英等院淡色生赤壳菌 月燥鄄员 菌株拮抗物质的分离纯化尧解析及活性分析
图 圆 活性组分 粤圆鄄员 的分子结构
云蚤早援 圆 酝燥造藻糟怎造葬则 泽贼则怎糟贼怎则藻 燥枣 葬糟贼蚤增藻 皂燥灶燥皂藻则 糟燥皂责燥怎灶凿 粤圆鄄员
猿 讨论
目前袁生产上用于防治水稻白叶枯病的药剂种
类较少袁主要有噻枯唑尧克菌壮尧叶枯唑及其复配
剂袁以及中生菌素和噻森铜等药剂咱员远 原 员苑暂 袁这些药剂
在水稻白叶枯病发病初期有一定的防治效果袁但在
田间发病较重时效果较差袁因此有必要寻找新的
药剂遥
本研究结果表明袁月燥鄄员 菌株乙酸乙酯提取物对
水稻白叶枯病菌具有较强抑菌活性遥 作为生物制
剂袁月燥鄄员 菌株乙酸乙酯提取物高效尧安全尧无污染遥
在自然环境下具有很高的稳定性和良好的耐热性袁
长期贮存不影响其抑菌活性遥
月燥鄄员 菌株乙酸乙酯提取物经硅胶柱层析尧蕴匀鄄
圆园 及 匀孕蕴悦 等多种色谱方法袁分离得到活性单体物
松萝酸袁当供试浓度为 员 皂早 辕 皂蕴袁其抑菌圈直径为
圆圆援 圆皂皂袁弱于乙酸乙酯粗提物遥 该结果表明抗菌活
性物可能不是由单一物质组成袁而是由多种物质组成
的混合物袁且各物质间可能存在一定的协同作用咱员愿暂 遥
此外袁怨远 孔板法测得活性单体物松萝酸对白叶枯病
菌的 酝陨悦值为 圆园园 滋早 辕 皂蕴袁与骆海玉等咱员怨暂报道的部
分针对白叶枯病菌的杀菌剂抑菌活性相当遥
本试验主要针对 月燥鄄员 菌株发酵液中抑菌活性
较强的化合物进行了分离纯化和结构解析遥 虽然
直接利用该化合物作为杀菌剂会受到资源和成本
的限制袁但可通过化学手段对其进行改进及合成袁
开发出新型真菌源杀菌剂咱圆园暂 遥 另外袁有关 月燥鄄员 菌
株的大田生物防治试验尚未进行袁相关研究还有待
开展遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 粤凿澡蚤噪葬则蚤 栽 月袁 悦则怎扎 悦 酝 宰袁 在澡葬灶早 匝袁 藻贼 葬造援 郧藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠
燥枣 载葬灶贼澡燥皂燥灶葬泽 燥则赠扎葬藻 责增援 燥则赠扎葬藻 蚤灶 粤泽蚤葬援 粤责责造蚤藻凿 葬灶凿 耘灶增蚤鄄
则燥灶皂藻灶贼葬造 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠袁 员怨怨缘袁 远员渊猿冤院 怨远远 原 怨苑员
咱圆暂 向妙莲袁 何永明袁 付永琦袁 等援 茉莉酸甲酯对水稻白叶枯病
的诱导抗性及相关防御酶活性的影响援 植物保护学报袁
圆园员猿袁 源园渊圆冤院 怨苑 原 员园员
咱猿暂 郑崇珂袁 王春连袁 于元杰袁 等援 水稻抗白叶枯病新基因
载葬猿圆渊 贼冤的鉴定和初步定位援 作物学报袁 圆园园怨袁 猿缘 渊苑冤院
员员苑猿 原 员员愿园
咱源暂 李显志援 抗生素耐药基因古老起源与现代进化及其警示援
中国抗生素杂志袁 圆园员猿袁 猿愿渊圆冤院 愿员 原 愿怨
咱缘暂 沈光斌袁 周明国援 水稻白叶枯病菌噻枯唑抗药突变体生物
学性质研究援 南京农业大学学报袁 圆园员员袁 圆源渊源冤院 猿猿 原 猿远
咱远暂 功能援 生物农药发展的机遇与挑战援 中国生物防治袁 圆园园员袁
员苑渊源冤院 员愿源 原 员愿缘
咱苑暂 砸燥泽泽皂葬灶 粤 再袁 杂葬皂怎藻造泽 郧 允袁 砸燥早藻则泽燥灶 悦 栽袁 藻贼 葬造援 郧藻灶藻则葬 燥枣
月蚤燥灶藻糟贼则蚤葬糟藻葬藻袁 匀赠责燥糟则藻葬糟藻葬藻 葬灶凿 晕藻糟贼则蚤葬糟藻葬藻 渊匀赠责燥糟则藻葬造藻泽袁
粤泽糟燥皂赠糟藻贼藻泽冤援 杂贼怎凿蚤藻泽 蚤灶 酝赠糟燥造燥早赠袁 员怨怨怨袁 源圆院 员 原 圆源愿
咱愿暂 曹晋忠袁 郑朝辉袁 刘艳云袁 等援 源 个黄芩内生真菌菌株的鉴
定及抗菌活性研究援 安徽农业大学学报袁 圆园员员袁 猿愿
渊猿冤院 猿怨猿 原 猿怨怨
咱怨暂 刘冬梅袁 李理袁 杨晓泉援 用牛津杯法测定益生菌的抑菌活
力援 食品研究与开发袁 圆园园远袁 圆苑渊猿冤院 员员园 原 员员员
咱员园暂 宋益民袁 印建峰援 银杏链格孢菌生物学特性研究援 长江大
学学报渊自然科学版冤袁 圆园园愿袁 缘渊猿冤院 员 原 源
咱员员暂 郝捷袁 李莉袁 陈飞袁 等援 菌株 月员园 对食用菌木霉病的拮抗
作用及菌株鉴定援 微生物学杂志袁 圆园员员袁 猿员渊源冤院 源圆 原 源远
咱员圆暂 丁娜袁 刘忠珍袁 徐建明援 土壤样品中痕量丁草胺的分析方
法援 土壤通报袁 圆园员员袁 源圆渊员冤院 圆员员 原 圆员猿
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缘员渊圆冤院 圆圆源 原 圆猿圆
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药敏试验操作方法和判断标准渊圆园园缘 年修订版冤援 中华医
学杂志袁 圆园园缘袁 愿缘渊员苑冤院 员员愿圆 原 员员愿源
咱员缘暂 耘蚤枣造藻则鄄蕴蚤皂葬 灾 蕴袁 杂责藻则则赠 粤袁 杂蚤灶遭葬灶凿澡蚤贼 杂袁 藻贼 葬造援 晕酝砸 泽责藻糟贼则葬造
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