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DNA barcoding application to three species of rice planthoppers based on mtCOⅠ gene

基于mtCOⅠ基因的三种稻飞虱DNA条形码构建及应用



全 文 :基于 皂贼悦韵玉基因的三种稻飞虱 阅晕粤
条形码构建及应用
谢家楠摇 郭建军摇 汪学俭摇 金道超鄢
渊贵州大学昆虫研究所袁 贵州山地农业病虫害重点实验室袁 贵阳 缘缘园园圆缘冤
摘要院 为构建白背飞虱尧褐飞虱尧灰飞虱 猿 种稻飞虱 阅晕粤 条形码袁准确鉴定各虫态稻飞虱种类袁随
机选取 猿缘 个供试虫体提取全基因组 阅晕粤袁孕悦砸 扩增其中线粒体细胞色素氧化酶玉渊皂贼悦韵玉冤基
因袁分析所获得的基因组成特点袁计算 孕距离值袁构建系统发育树袁并对稻飞虱若虫尧卵进行种类鉴
定遥 孕悦砸扩增获得了长度为 苑园远 遭责的稻飞虱 皂贼悦韵玉基因片段袁碱基组成特点种内尧种间不同曰猿 种
稻飞虱的种间 孕距离值为 圆缘援 缘猿豫 耀猿源援 圆员豫 袁种内为 园 耀 园援 缘员豫 袁种间值明显高于种内曰系统发育
树显示同种个体聚集在同一分支曰同种卵尧若虫的 皂贼悦韵玉基因与已获得的成虫基因序列同源性最
高值为 员园园豫 袁孕距离值为 园遥 研究表明袁猿 种稻飞虱的 阅晕粤 条形码可基于 皂贼悦韵玉基因构建袁且可
准确鉴定各虫态遥
关键词院 稻飞虱曰 阅晕粤条形码曰 卵和若虫曰 鉴定
阅晕粤 遭葬则糟燥凿蚤灶早 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 贼燥 贼澡则藻藻 泽责藻糟蚤藻泽 燥枣 则蚤糟藻
责造葬灶贼澡燥责责藻则泽 遭葬泽藻凿 燥灶 皂贼悦韵玉 早藻灶藻
载蚤藻 允蚤葬灶葬灶摇 郧怎燥 允蚤葬灶躁怎灶摇 宰葬灶早 载怎藻躁蚤葬灶摇 允蚤灶 阅葬燥糟澡葬燥鄢
渊孕则燥增蚤灶糟蚤葬造 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 枣燥则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 孕藻泽贼 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼 燥枣 酝燥怎灶贼葬蚤灶燥怎泽 砸藻早蚤燥灶泽袁 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣
耘灶贼燥皂燥造燥早赠袁 郧怎蚤扎澡燥怎 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 郧怎蚤赠葬灶早 缘缘园园圆缘袁 郧怎蚤扎澡燥怎 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽燥 糟燥灶泽贼则怎糟贼 贼澡藻 阅晕粤 遭葬则糟燥凿蚤灶早 燥枣 贼澡则藻藻 泽责藻糟蚤藻泽 燥枣 皂葬蚤灶 则蚤糟藻 责藻泽贼 责造葬灶贼澡燥责责藻则泽袁 晕蚤造葬责葬则增葬贼葬
造怎早藻灶泽 渊杂贼覽造冤袁 杂燥早葬贼藻造造葬 枣怎则糟蚤枣藻则葬 渊匀燥则增仳贼澡冤 葬灶凿 蕴葬燥凿藻造责澡葬曾 泽贼则蚤葬贼藻造造怎泽 渊云葬造造伢灶冤 葬灶凿 蚤凿藻灶贼蚤枣赠 贼澡藻皂 糟燥则鄄
则藻糟贼造赠 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼葬早藻泽袁 猿缘 泽责藻糟蚤皂藻灶泽 憎藻则藻 泽藻造藻糟贼藻凿 则葬灶凿燥皂造赠 葬灶凿 贼澡藻蚤则 阅晕粤泽 憎藻则藻 藻曾贼则葬糟贼藻凿袁 枣则燥皂
憎澡蚤糟澡 皂贼悦韵玉 早藻灶藻 憎葬泽 葬皂责造蚤枣蚤藻凿 遭赠 孕悦砸袁 早藻灶藻 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 糟澡葬则葬糟贼藻则泽 葬灶葬造赠扎藻凿袁 孕鄄凿蚤泽贼葬灶糟藻泽 糟葬造糟怎造葬贼藻凿
葬灶凿 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 糟燥灶泽贼则怎糟贼藻凿援 粤贼 贼澡藻 泽葬皂藻 贼蚤皂藻袁 藻早早泽 葬灶凿 灶赠皂责澡泽 燥枣 贼澡藻泽藻 贼澡则藻藻 泽责藻糟蚤藻泽 憎藻则藻 蚤凿藻灶贼蚤鄄
枣蚤藻凿 怎泽蚤灶早 皂贼悦韵玉 早藻灶藻援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 皂贼悦韵玉 早藻灶藻 枣则葬早皂藻灶贼 燥遭贼葬蚤灶藻凿 憎葬泽 苑园远 遭责 蚤灶 造藻灶早贼澡援
栽澡藻 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 燥枣 遭葬泽藻 憎葬泽 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 蚤灶 蚤灶贼则葬鄄 葬灶凿 蚤灶贼藻则鄄泽责藻糟蚤藻泽援 孕鄄凿蚤泽贼葬灶糟藻泽 燥枣 蚤灶贼藻则鄄泽责藻糟蚤藻泽 憎藻则藻
圆缘援 缘猿豫 原猿源援 圆员豫 蚤灶 贼澡则藻藻 燥枣 贼澡燥泽藻 则蚤糟藻 责造葬灶贼澡燥责责藻则泽袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠袁 憎蚤贼澡 园 原 园援 缘员豫 燥枣 蚤灶贼则葬鄄泽责藻糟蚤藻泽援
孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 泽责藻糟蚤皂藻灶泽 燥枣 贼澡藻 泽葬皂藻 泽责藻糟蚤藻泽 憎藻则藻 糟造怎泽贼藻则藻凿 蚤灶 葬 泽蚤灶早造藻 糟造葬凿藻援 栽澡藻
皂贼悦韵玉 早藻灶藻 澡燥皂燥造燥早赠 遭藻贼憎藻藻灶 藻早早泽袁 灶赠皂责澡泽 燥枣 泽葬皂藻 泽责藻糟蚤藻泽 葬灶凿 燥遭贼葬蚤灶藻凿 葬凿怎造贼泽 憎葬泽 葬泽 澡蚤早澡 葬泽
员园园豫 袁 葬灶凿 孕鄄凿蚤泽贼葬灶糟藻 憎葬泽 园援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 皂藻贼澡燥凿 燥枣 阅晕粤 遭葬则糟燥凿蚤灶早 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 皂贼鄄
悦韵玉 早藻灶藻 泽澡燥怎造凿 遭藻 则藻糟燥皂皂藻灶凿藻凿 枣燥则 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 则蚤糟藻 责造葬灶贼澡燥责责藻则泽 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽贼葬早藻泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 则蚤糟藻 责造葬灶贼澡燥责责藻则曰 阅晕粤 遭葬则糟燥凿蚤灶早曰 藻早早 葬灶凿 造葬则增葬曰 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
基金项目院 贵州省科技攻关项目渊黔科合 晕再字咱圆园员园暂猿园远源 号冤袁贵州省科技厅自然科学研究项目渊黔教 圆园员园园员员冤袁国家野怨苑猿冶计划前
摇 摇 摇 摇 期研究专项渊圆园园怨悦月员圆缘怨园愿冤
作者简介院 谢家楠袁男袁员怨愿远年生袁博士研究生袁研究方向为昆虫生理生化及分子生物学袁 耘鄄皂葬蚤造院 躁灶曾蚤藻岳 枣燥曾皂葬蚤造援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 凿葬燥糟澡葬燥躁蚤灶岳 员圆远援 糟燥皂
收稿日期院 圆园员猿 原 园缘 原 员猿
第 源园 卷摇 第 远 期
圆园员猿 年摇 员圆 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 远
阅藻糟援 摇 圆园员猿
摇 摇 白背飞虱 杂燥早葬贼藻造造葬 枣怎则糟蚤枣藻则葬 渊匀燥则增仳贼澡冤尧褐飞虱
晕蚤造葬责葬则增葬贼葬 造怎早藻灶泽 渊杂贼覽造冤和灰飞虱 蕴葬燥凿藻造责澡葬曾 泽贼则蚤葬鄄
贼藻造造怎泽 渊云葬造造伢灶冤是稻飞虱中的 猿 个优势种咱员暂 遥 三者为
害时不仅刺吸破坏水稻组织结构袁而且传播多种水
稻病毒袁严重威胁水稻生产咱圆 原 源暂 遥 准确掌握田间种
类构成及虫口基数是制定有效防治对策的前提袁但
传统形态分类法仅能鉴定成虫袁对若虫尧卵等虫态的
鉴定有较大困难袁因此研究适用于各虫态的分子分
类方法进行辅助鉴定尤为迫切遥
阅晕粤 条形码技术作为分子分类方法袁在物种区
别和鉴定咱缘 原 远暂 尧发现新种和隐存种咱苑 原 愿暂等方面取得
了许多研究成果袁特别是在鉴定卵尧幼虫和外部形态
特征不明显的虫体时表现出很大的优势咱怨暂 遥 线粒
体细胞色素氧化酶玉渊皂贼悦韵玉冤基因片段常被选作
动物 阅晕粤 条形码目标基因袁但 皂贼悦韵玉基因是否符
合白背飞虱尧褐飞虱和灰飞虱这 猿 种典型稻飞虱的
阅晕粤条形码标准袁并满足对稻飞虱各虫态的鉴定等
相关研究尚未深入开展遥
本研究通过分析 猿 种稻飞虱 圆怨 个成虫 皂贼悦韵玉
基因片段组成特点袁从 孕 距离值渊基因序列间核苷
酸差异率冤和系统发育树角度探讨该基因作为稻飞
虱 阅晕粤条形码的可行性袁并构建 猿 种稻飞虱 阅晕粤
条形码袁为稻飞虱的若虫尧卵等虫态的准确鉴定提供
参考遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试虫体院稻飞虱 阅晕粤 条形码构建试验选用白
背飞虱尧褐飞虱和灰飞虱成虫虫体曰验证稻飞虱
阅晕粤条形码技术鉴定应用的有效性试验采用卵和
若虫虫体遥 以上供试虫体皆为 圆园员园 年 缘 月自贵州尧
云南尧广西等地水稻植株上采集遥 试验时随机选取
褐飞虱成虫 怨 只袁编号 晕蕴员 耀 晕蕴怨曰白背飞虱成虫 怨
只袁编号 杂云员 耀 杂云怨曰灰飞虱成虫 员员 只袁编号 蕴杂员 耀
蕴杂员员曰稻飞虱若虫 猿 只袁编号 载员 耀 载猿曰稻飞虱卵 猿
粒袁编号 载源 耀 载远遥
试剂及仪器院分子量标准 阅蕴圆园园园 阅晕粤 皂葬则噪藻则尧
栽葬择 阅晕粤 聚合酶和 凿晕栽孕等分子生物学试剂购自宝
生物工程渊大连冤公司曰血液 辕细胞 辕组织总基因组
阅晕粤提取试剂盒购自天根生化科技渊北京冤有限公
司曰引物委托生工生物工程渊上海冤股份有限公司合
成曰其它生化试剂均为国产分析纯曰蚤悦赠糟造藻则 栽澡藻则皂葬造
悦赠糟造藻则型 孕悦砸扩增仪袁月陨韵鄄砸粤阅公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 皂贼悦韵玉基因片段序列信息获得
总 阅晕粤提取院取 员援 缘 皂蕴离心管 猿缘 支袁标记后袁
将试验虫体分别置于离心管中袁加入液氮充分碾磨遥
参照血液 辕细胞 辕组织总基因组 阅晕粤 提取试剂盒操
作说明袁依次向离心管中加入试剂盒各组分院缓冲液
郧粤尧蛋白酶 运尧缓冲液 郧月尧无水乙醇尧漂洗液 孕宰 和
缓冲液 栽耘 等袁并分别进行水浴尧离心等操作袁获得
员园园 滋蕴总 阅晕粤 提取物遥 取 缘 滋蕴 提取物在 员豫琼脂
糖凝胶中电泳检测袁其余保存于 原 圆园 益备用遥
孕悦砸扩增院引物参照 阅晕粤 条形码技术扩增 皂贼鄄
悦韵玉基因片段通用引物序列咱员园暂 袁分别为 蕴悦韵员源怨园院
缘忆鄄郧郧栽悦粤粤悦粤粤粤栽悦粤栽粤粤粤郧粤栽粤栽栽郧郧鄄猿忆曰 蕴悦韵圆员怨愿院
缘忆鄄栽粤粤粤悦栽栽悦粤郧郧郧栽郧粤悦悦粤粤粤粤粤粤栽悦粤鄄猿忆遥孕悦砸反
应体系院员园 伊 孕悦砸缓冲液渊含 酝早圆 垣 冤猿 滋蕴尧员园 皂皂燥造 辕 蕴
凿晕栽孕 园援 苑缘 滋蕴尧员园 滋皂燥造 辕 蕴 正反向引物各 员 滋蕴尧缘 哉 辕
滋蕴 栽葬择酶 园援 猿 滋蕴尧模板 阅晕粤 员 滋蕴渊缘园 灶早冤袁双蒸水补
足 猿园 滋蕴遥 孕悦砸 程序院怨源 益预变性 源 皂蚤灶曰怨源 益变性
猿园 泽袁缘园 益退火 源园 泽袁苑圆 益延伸 猿园 泽袁猿缘 个循环曰苑圆 益
总延伸 员园 皂蚤灶袁源 益保存遥
测序及处理院孕悦砸 扩增产物在 员豫琼脂糖凝胶
中电泳检测后进行双向测序遥 测序结果经 悦澡则燥皂葬泽
软件观察序列峰图质量尧晕悦月陨网站渊澡贼贼责院 辕辕 憎憎憎援 灶糟鄄
遭蚤援 灶造皂援 灶蚤澡援 早燥增 辕 蚤灶凿藻曾援 澡贼皂造冤的 月蕴粤杂栽 模块进行同
源性比对咱员员暂 尧阅晕粤杂贼葬则 软件 杂藻择酝葬灶 模块进行校正
和拼接处理袁最终获得准确尧可信的目的 阅晕粤序列遥
员援 圆援 圆 猿 种稻飞虱 阅晕粤条形码构建与应用
阅晕粤 条形码构建院由编号 晕蕴员 耀 晕蕴怨尧 杂云员 耀
杂云怨尧蕴杂员 耀 蕴杂员员 试验材料获得的 圆怨 条目的 阅晕粤 序
列使用 酝藻早葬 源援 员 软件进行种内尧种间 阅晕粤 序列碱
基组成差异分析曰种内尧种间 孕 距离值计算曰构建系
统发育树渊邻接法袁晕允冤袁进行种内尧种间聚集分析遥
使用 晕悦月陨网站 杂怎遭皂蚤泽泽蚤燥灶泽 模块渊澡贼贼责院 辕辕 憎憎憎援 灶糟遭蚤援
灶造皂援 灶蚤澡援 早燥增 辕 早怎蚤凿藻 辕 澡燥憎贼燥 辕 泽怎遭皂蚤贼鄄凿葬贼葬冤将 圆怨 条目的
阅晕粤序列上传至 晕悦月陨核酸数据库共享遥
应用院由编号 载员 耀 载远 试验材料获得的 远 条目
的 阅晕粤序列使用 晕悦月陨 网站的 月蕴粤杂栽 模块与已上
传 晕悦月陨核酸数据库的 圆怨 条序列进行同源性比对袁
并使用 酝藻早葬 源援 员 软件计算其与同源性最高序列间
的 孕距离值袁根据 孕距离值范围进行稻飞虱卵及若
虫的鉴定袁以验证构建的稻飞虱 阅晕粤条形码应用的
有效性遥
员源缘远 期 谢家楠等院基于 皂贼悦韵玉基因的三种稻飞虱 阅晕粤条形码构建及应用
圆 结果与分析
圆援 员 皂贼悦韵玉基因片段序列信息获得分析
采用试剂盒法成功提取了稻飞虱总 阅晕粤遥 以
提取物为模板进行 孕悦砸扩增袁获得长度为 苑员园 遭责 左
右的特异产物渊图 员冤遥 经测序及同源性比对袁扩增
产物为飞虱科 皂贼悦韵玉基因片段袁长度为 苑园远 遭责遥 测
序结果经校正尧拼接尧截取袁获得所有供试虫体 皂贼悦韵
玉片段基因序列信息遥
圆援 圆 猿 种稻飞虱 阅晕粤条形码构建
圆援 圆援 员 序列碱基组成
种内院褐飞虱个体间碱基组成相同曰白背飞虱尧
灰飞虱种内个体间碱基组成不同曰猿 种稻飞虱腺嘌
呤与胸腺嘧啶渊粤 垣 栽冤之和皆明显高于鸟嘌呤与胞
嘧啶渊郧 垣 悦冤之和渊表 员冤遥
图 员 孕悦砸扩增电泳图
云蚤早援 员 粤早葬则燥泽藻鄄早藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣
孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽
摇 摇 员院对照曰 圆院细胞色素氧化酶 陨基因片段 孕悦砸扩增产物曰 酝院
圆 园园园 遭责 阅晕粤标准分子量遥 员院 悦燥灶贼则燥造曰 圆院 孕悦砸 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿鄄
怎糟贼 燥枣 皂贼悦韵玉 早藻灶藻 则藻早蚤燥灶曰 酝院 阅蕴 圆园园园 阅晕粤 皂葬则噪藻则援
表 员 皂贼悦韵玉基因片段序列碱基组成及 郧藻灶月葬灶噪登录号
栽葬遭造藻 员 月葬泽藻 糟燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶 葬灶凿 郧藻灶月葬灶噪 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶 灶怎皂遭藻则泽 燥枣 皂贼悦韵玉 早藻灶藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽
物种
杂责藻糟蚤藻泽
样本编号
杂葬皂责造藻
糟燥凿藻
序列长度
杂藻择怎藻灶糟藻
泽蚤扎藻
渊遭责冤
腺嘌呤
含量
粤 糟燥灶贼藻灶贼
渊豫 冤
胸腺嘧啶
含量
栽 糟燥灶贼藻灶贼
渊豫 冤
鸟嘌呤
含量
郧 糟燥灶贼藻灶贼
渊豫 冤
胞嘧啶
含量
悦 糟燥灶贼藻灶贼
渊豫 冤
腺嘌呤与胸腺
嘧啶和含量
粤 垣 栽 糟燥灶贼藻灶贼
渊豫 冤
鸟嘌呤与
胞嘧啶和含量
郧 垣 悦 糟燥灶贼藻灶贼
渊豫 冤
郧藻灶月葬灶噪登录号
郧藻灶月葬灶噪
葬糟糟藻泽泽蚤燥灶
灶怎皂遭藻则
褐飞虱 晕蕴 员 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿愿苑
晕援 造怎早藻灶泽 晕蕴 圆 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿愿愿
晕蕴 猿 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿愿怨
晕蕴 源 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿怨园
晕蕴 缘 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿怨员
晕蕴 远 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿怨圆
晕蕴 苑 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿怨猿
晕蕴 愿 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿怨源
晕蕴 怨 缘怨源 猿员援 远 猿缘援 怨 员圆援 愿 员怨援 苑 远苑援 缘 猿圆援 缘 运悦源苑远猿怨缘
白背飞虱 杂云 员 缘怨源 圆怨援 缘 猿源援 员 员缘援 园 圆员援 源 远猿援 远 猿远援 源 运悦源苑远猿苑愿
杂援 枣怎则糟蚤枣藻则葬 杂云 圆 缘怨源 圆怨援 缘 猿源援 员 员缘援 园 圆员援 源 远猿援 远 猿远援 源 运悦源苑远猿苑怨
杂云 猿 缘怨源 猿园援 园 猿源援 员 员源援 缘 圆员援 源 远源援 员 猿缘援 怨 运悦源苑远猿愿园
杂云 源 缘怨源 猿园援 园 猿源援 员 员源援 缘 圆员援 源 远源援 员 猿缘援 怨 运悦源苑远猿愿员
杂云 缘 缘怨源 圆怨援 缘 猿源援 员 员缘援 园 圆员援 源 远猿援 远 猿远援 源 运悦源苑远猿愿圆
杂云 远 缘怨源 圆怨援 缘 猿源援 员 员缘援 园 圆员援 源 远猿援 远 猿远援 源 运悦源苑远猿愿猿
杂云 苑 缘怨源 圆怨援 缘 猿源援 员 员缘援 园 圆员援 源 远猿援 远 猿远援 源 运悦源苑远猿愿源
杂云 愿 缘怨源 猿园援 园 猿源援 员 员源援 缘 圆员援 源 远源援 员 猿缘援 怨 运悦源苑远猿愿缘
杂云 怨 缘怨源 猿园援 园 猿源援 员 员源援 缘 圆员援 源 远源援 员 猿缘援 怨 运悦源苑远猿愿远
灰飞虱 蕴杂 员 缘怨源 猿圆援 圆 猿猿援 园 员猿援 猿 圆员援 缘 远缘援 圆 猿源援 愿 运悦源苑远猿远苑
蕴援 泽贼则蚤葬贼藻造造怎泽 蕴杂 圆 缘怨源 猿圆援 圆 猿圆援 愿 员猿援 猿 圆员援 苑 远缘援 园 猿缘援 园 运悦源苑远猿远愿
蕴杂 猿 缘怨源 猿圆援 园 猿圆援 苑 员猿援 缘 圆员援 愿 远源援 苑 猿缘援 猿 运悦源苑远猿远怨
蕴杂 源 缘怨源 猿圆援 圆 猿猿援 园 员猿援 猿 圆员援 缘 远缘援 圆 猿源援 愿 运悦源苑远猿苑园
蕴杂 缘 缘怨源 猿圆援 园 猿圆援 苑 员猿援 缘 圆员援 愿 远源援 苑 猿缘援 猿 运悦源苑远猿苑员
蕴杂 远 缘怨源 猿圆援 圆 猿猿援 园 员猿援 猿 圆员援 缘 远缘援 圆 猿源援 愿 运悦源苑远猿苑圆
蕴杂 苑 缘怨源 猿圆援 园 猿圆援 苑 员猿援 缘 圆员援 愿 远源援 苑 猿缘援 猿 运悦源苑远猿苑猿
蕴杂 愿 缘怨源 猿圆援 圆 猿猿援 园 员猿援 猿 圆员援 缘 远缘援 圆 猿源援 愿 运悦源苑远猿苑源
蕴杂 怨 缘怨源 猿圆援 园 猿圆援 苑 员猿援 缘 圆员援 愿 远源援 苑 猿缘援 猿 运悦源苑远猿苑缘
蕴杂 员园 缘怨源 猿圆援 园 猿圆援 愿 员猿援 缘 圆员援 苑 远源援 愿 猿缘援 圆 运悦源苑远猿苑远
蕴杂 员员 缘怨源 猿圆援 圆 猿猿援 园 员猿援 猿 圆员援 缘 远缘援 圆 猿源援 愿 运悦源苑远猿苑苑
摇 摇 粤院 粤凿藻灶蚤灶藻曰 栽院 贼澡赠皂蚤灶藻曰 郧院 早怎葬灶蚤灶藻曰 悦院 糟赠贼燥泽蚤灶藻援
圆源缘 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
摇 摇 种间院猿 种稻飞虱腺嘌呤渊粤冤平均含量为灰飞
虱 跃褐飞虱 跃白背飞虱曰胸腺嘧啶渊栽冤平均含量为
褐飞虱 跃白背飞虱 跃灰飞虱曰鸟嘌呤渊郧冤平均含量
为白背飞虱 跃灰飞虱 跃褐飞虱曰胞嘧啶渊悦冤平均含
量为灰飞虱 跃白背飞虱 跃褐飞虱曰腺嘌呤与胸腺嘧
啶渊粤 垣 栽冤之和的平均含量为褐飞虱 跃灰飞虱 跃白
背飞虱渊表 员冤遥
圆援 圆援 圆 种内尧种间 孕距离值及系统发育树
种内 孕距离值范围院褐飞虱个体间序列组成相
同袁其值为 园曰白背飞虱为 园 耀 园援 缘员豫 曰灰飞虱为 园 耀
园援 缘员豫 遥 种间 孕距离值范围院褐飞虱与灰飞虱间为
圆怨援 远愿豫耀猿园援 园远豫曰灰飞虱与白背飞虱间为 圆缘援 缘猿豫耀
圆苑援 圆圆豫曰白背飞虱与褐飞虱间为 猿圆援 怨远豫耀 猿源援 圆员豫遥
种间 孕距离值明显高于种内遥
邻接法构建 猿 种飞虱共 圆怨 个个体的系统发育
树袁其聚集成三大支袁 蕴杂员 耀 蕴杂员员尧杂云员 耀 杂云怨 和 晕蕴员 耀
晕蕴怨各为一支渊图 圆冤遥 表明种间尧种内聚集程度不
同袁种内明显高于种间袁同种的个体均聚在同一个大
支遥 皂贼悦韵玉基因符合稻飞虱 阅晕粤 条形码标准袁可
基于该基因构建 猿 种稻飞虱的 阅晕粤条形码遥
图 圆 基于 皂贼悦韵玉基因序列构建的 猿 种稻飞虱系统发育树
云蚤早援 圆 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 贼澡则藻藻 则蚤糟藻 责造葬灶贼澡燥责责藻则泽 遭葬泽藻凿 燥灶 皂贼悦韵玉 早藻灶藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽
圆援 猿 稻飞虱 阅晕粤条形码应用
由 载员 耀 载远 供试虫体获得的 皂贼悦韵玉基因序列
与已上传 晕悦月陨 核酸数据库的 圆怨 条序列进行同源
性比对及 孕 距离值分析袁载员尧载缘 与样本 杂云员尧杂云圆尧
杂云缘尧杂云远尧杂云苑 序列相同袁孕 距离值为 园袁同源性为
员园园豫 曰载圆尧载源 与样本 晕蕴员 耀 晕蕴怨 序列相同袁孕 距离
值为 园袁同源性为 员园园豫 曰载猿尧载远 与样本 蕴杂员尧蕴杂源尧
蕴杂远尧蕴杂愿尧蕴杂员员 序列相同袁孕 距离值为 园袁同源性为
员园园 豫 遥 由此鉴定 载员尧载缘 为白背飞虱曰载圆尧载源 为褐
飞虱曰载猿尧载远 为灰飞虱遥 表明基于 皂贼悦韵玉基因片
段构建的稻飞虱 阅晕粤 条形码能够对稻飞虱若虫及
卵进行准确鉴定遥
猿 讨论
白背飞虱尧灰飞虱尧褐飞虱成虫虫体可依据葛钟
麟等咱员圆暂形态分类方法进行准确鉴定袁但其卵尧若虫
难以通过形态方法予以鉴定遥 本研究中袁皂贼悦韵玉基
因片段在 猿 种稻飞虱的不同虫态间序列变异率很小
渊园 耀 园援 缘员豫 冤袁且几乎完全相同袁表明依据遗传基因
建立的分类方法渊阅晕粤条形码冤通用于各虫态的鉴
猿源缘远 期 谢家楠等院基于 皂贼悦韵玉基因的三种稻飞虱 阅晕粤条形码构建及应用
定袁可弥补形态分类的不足遥 猿 种稻飞虱种间 孕 距
离值明显高于种内遥系统发育树显示种内的聚集程
度高于种间袁同种的个体汇聚在同一分支上袁表明
皂贼悦韵玉基因可作为 猿 种稻飞虱的 阅晕粤 条形码袁这
与 匀藻遭藻则贼等咱员园暂及 月葬造造 等咱员猿暂关于 皂贼悦韵玉基因可用
作动物 阅晕粤条形码的结论一致遥 杨聪慧等咱员源暂对夜
蛾科 阅晕粤条形码的研究表明袁种内平均遗传距离为
园援 园猿豫 袁种间为 员员援 圆怨豫 袁其种间 孕 距离也明显高于
种内袁而种间和种内 孕 距离值均低于本研究袁说明
皂贼悦韵玉基因在不同类群中变异程度不同袁因此利用
阅晕粤条形码技术对某一类群鉴定前袁需要分析 皂贼鄄
悦韵玉基因在该类群中的遗传变异程度袁即种内尧种
间遗传距离变化范围袁建立该类群物种 阅晕粤条形码
并应用遥 本试验建立了 猿 种稻飞虱 阅晕粤条形码袁且
能成功应用于若虫和卵的鉴定袁为飞虱类农业害虫
的鉴定提供了新的技术手段袁也为飞虱科昆虫的分
类研究提供借鉴遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 巫国瑞袁胡萃援 稻飞虱援 北京院农业出版社袁员怨愿苑
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稻飞虱和稻纵卷叶螟防治效果的影响援 植物保护学报袁
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同翅目飞虱科援 北京院科学出版社袁员怨愿源
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咱员源暂 杨聪慧袁韩辉林袁迟美妍袁等援 阅晕粤条形码技术在北京百花
山地区夜蛾科物种鉴定中的应用援 昆虫学报袁圆园员圆袁缘缘渊怨冤院
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