全 文 ：新疆石河子尧伊宁地区黄瓜花叶病毒株系分化
程朝玲摇 向本春摇 崔百明摇 郑银英鄢
渊石河子大学生命科学学院袁 石河子大学农业生物技术重点实验室袁 石河子 愿猿圆园园猿冤
摘要院 为了研究新疆黄瓜花叶病毒渊悦怎糟怎皂遭藻则 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽袁悦酝灾冤分子变异及株系分化袁对从石河子
和伊宁地区采集的 圆园缘 个加工番茄尧圆猿 个辣椒尧源 个番茄尧圆 个南瓜样品进行酶联免疫检测和 砸栽鄄
孕悦砸检测遥 在 源 种寄主上均检出了亚组玉型 悦酝灾袁其中加工番茄的感染率高达 苑源援 员缘豫 遥 进一步
对来自辣椒的 再晕鄄远尧蕴允鄄源尧蕴允鄄员园袁加工番茄的 杂员鄄员尧杂员鄄员源袁番茄的 再晕鄄圆袁以及南瓜的 再晕鄄怨 等 苑 个样
品 悦孕尧砸晕粤猿尧酝孕核苷酸序列进行相似性和进化树分析遥 苑 个样品与 悦酝灾亚组玉月 株系分离物的
相似性较高尧亲缘关系最近袁均可归为 悦酝灾亚组玉月遥 而来自辣椒的 蕴允鄄源尧蕴允鄄员园 与其余 缘 个样品的
序列相似性较低袁亲缘关系较远袁在进化树上形成独立分支遥 说明在新疆加工番茄及其它蔬菜上广
泛流行的 悦酝灾存在分子变异遥
关键词院 黄瓜花叶病毒曰 血清学曰 砸栽鄄孕悦砸曰 株系分化
栽澡藻 悦酝灾 泽贼则葬蚤灶泽 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 贼燥皂葬贼燥袁
责怎皂责噪蚤灶 葬灶凿 责藻责责藻则泽 蚤灶 杂澡蚤澡藻扎蚤 葬灶凿 再蚤灶蚤灶早
悦澡藻灶早 悦澡葬燥造蚤灶早摇 载蚤葬灶早 月藻灶糟澡怎灶摇 悦怎蚤 月葬蚤皂蚤灶早摇 在澡藻灶早 再蚤灶赠蚤灶早鄢
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 燥枣 杂澡蚤澡藻扎蚤 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁
杂澡蚤澡藻扎蚤 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 杂澡蚤澡藻扎蚤 愿猿圆园园猿袁 载蚤灶躁蚤葬灶早 哉赠早怎则 粤怎贼燥灶燥皂燥怎泽 砸藻早蚤燥灶袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻 贼澡藻 皂燥造藻糟怎造葬则 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 葬灶凿 泽贼则葬蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 悦怎糟怎皂遭藻则 皂燥泽葬蚤糟 增蚤鄄
则怎泽 蚤灶 载蚤灶躁蚤葬灶早袁 圆园缘 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 贼燥皂葬贼燥 责造葬灶贼泽袁 圆猿 责藻责责藻则 责造葬灶贼泽袁 枣燥怎则 贼燥皂葬贼燥 责造葬灶贼泽袁 葬灶凿 贼憎燥 责怎皂责噪蚤灶
责造葬灶贼泽 憎藻则藻 糟燥造造藻糟贼藻凿 蚤灶 杂澡蚤澡藻扎蚤 葬灶凿 再蚤灶蚤灶早 枣燥则 悦酝灾 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 遭赠 阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤 葬灶凿 砸栽鄄孕悦砸援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽
泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 葬造造 悦酝灾 泽贼则葬蚤灶泽 责则藻泽藻灶糟藻 蚤灶 枣燥怎则 澡燥泽贼 泽责藻糟蚤藻泽 遭藻造燥灶早藻凿 贼燥 泽怎遭早则燥怎责玉葬灶凿 怎责 贼燥 苑源援 员缘豫 燥枣
责则燥糟藻泽泽蚤灶早 贼燥皂葬贼燥 责造葬灶贼泽 憎藻则藻 蚤灶枣藻糟贼藻凿援 酝燥则藻燥增藻则袁 砸晕粤猿 燥枣 悦酝灾 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 泽藻增藻灶 泽葬皂责造藻泽 憎藻则藻 泽藻鄄
择怎藻灶糟藻凿 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 再晕鄄远袁 蕴允鄄源袁 蕴允鄄员园 燥枣 责藻责责藻则袁 杂员鄄员袁 杂员鄄员源 燥枣 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 贼燥皂葬贼燥袁 再晕鄄圆 燥枣 贼燥皂葬贼燥 葬灶凿
再晕鄄怨 燥枣 责怎皂责噪蚤灶援 栽澡藻 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 遭葬泽藻凿 燥灶 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 砸晕粤猿袁 悦孕 葬灶凿 酝孕
泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 葬造造 燥枣 泽藻增藻灶 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶泽 憎藻则藻 糟造葬泽泽蚤枣蚤藻凿 葬泽 悦酝灾 泽怎遭早则燥怎责玉月援 匀燥憎藻增藻则袁 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶泽 枣则燥皂
责藻责责藻则 蕴允鄄源 葬灶凿 蕴允鄄员园 澡葬增藻 则藻造葬贼蚤增藻造赠 造燥憎 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠 枣则燥皂 燥贼澡藻则 枣蚤增藻 泽葬皂责造藻泽 葬灶凿 泽澡葬则藻 葬 泽藻责葬则葬贼藻 糟造葬凿藻援
栽澡蚤泽 泽贼怎凿赠 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 贼澡葬贼 悦酝灾 蚤灶枣藻糟贼蚤灶早 增藻早藻贼葬遭造藻泽 蚤灶 载蚤灶躁蚤葬灶早 遭藻造燥灶早 贼燥 泽怎遭早则燥怎责 玉月 葬灶凿 责则藻泽藻灶贼 泽燥皂藻
皂燥造藻糟怎造葬则 增葬则蚤葬贼蚤燥灶援
运藻赠 憎燥则凿泽院 悦酝灾曰 泽藻则燥造燥早蚤糟葬造曰 砸栽鄄孕悦砸曰 泽贼则葬蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
摇 摇 黄瓜花叶病毒渊悦怎糟怎皂遭藻则 皂燥泽葬蚤糟 增蚤则怎泽袁悦酝灾冤为
雀麦花叶病毒科 月则燥皂燥增蚤则蚤凿葬藻 黄瓜花叶病毒属 悦怎鄄
糟怎皂燥增蚤则怎泽的典型成员袁是已知病毒中寄主最多尧危
害最严重的一种植物病毒遥 悦酝灾 基因组为三分体
单链正义 砸晕粤病毒袁具有高度变异性和强适应性等
特点遥 它的基因组 砸晕粤员 编码 员葬蛋白袁 砸晕粤圆 编码
基金项目院 国际科技合作与交流专项渊圆园园苑圆园苑圆冤袁国家自然科学基金渊猿员圆远园源圆园冤
作者简介院 程朝玲袁女袁员怨愿缘年生袁硕士研究生袁研究方向为植物病毒学袁 耘鄄皂葬蚤造院 糟澡藻灶早糟澡葬燥造蚤灶早园员岳 员圆远援 糟燥皂
鄢通讯作者 渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 扎澡藻灶早赠蚤灶赠蚤灶早岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶
收稿日期院 圆园员猿 原 园员 原 园愿
第 源园 卷摇 第 圆 期
圆园员猿 年摇 源 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 圆
粤责则援 摇 圆园员猿
圆葬蛋白袁员葬 和 圆葬 蛋白参与病毒的复制咱员暂 曰圆遭 蛋白
由亚基因组 砸晕粤源粤 编码咱圆暂 袁借助 砸晕粤圆 完成长距
离移动咱猿暂 袁是病毒沉默抑制子咱源暂 曰砸晕粤猿 编码 猿葬 移
动蛋白 渊 皂燥增藻皂藻灶贼 责则燥贼藻蚤灶袁 酝孕冤和外壳蛋白 渊 糟燥葬贼
责则燥贼藻蚤灶袁悦孕冤袁酝孕决定病毒的移动咱缘 原 远暂 袁悦孕决定病毒
粒子的移动及病毒的蚜传活性咱苑 原 愿暂 遥 根据基因组
砸晕粤猿 的 缘忆端非编码区和 悦孕 基因序列袁悦酝灾 分为
亚组玉和亚组域袁其中亚组玉进一步分为亚组玉粤
和亚组玉月咱怨暂 遥
新疆单一农作物的大面积栽培模式尧气候尧环境
等诸多因素导致加工番茄等蔬菜受到多种病毒病
的侵害袁其中 悦酝灾 的危害最严重遥 圆园园远要圆园员园 年袁
新疆北疆加工番茄上悦酝灾的检出率为圆员 援 缘豫 耀
愿猿援 圆豫 袁严重影响了加工番茄的产量和质量袁以及加
工番茄产业的稳定尧健康发展咱员园 原 员员暂 遥
目前袁新疆 悦酝灾 的研究大多侧重于病毒检测袁
关于分子变异及株系分化方面的系统研究尚未见报
道遥 本研究利用 阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤 和一步法 砸栽鄄孕悦砸 方
法袁检测了石河子尧伊宁地区加工番茄尧辣椒尧番茄和
南瓜等 源 种蔬菜的 悦酝灾感染率袁并分析这些寄主上
悦酝灾 砸晕粤猿 基因组序列和鉴定其 悦酝灾 亚组袁以期
为有效防治 悦酝灾病害提供参考遥
员 材料与方法
员援 员 材料
样品院圆园员圆 年 苑 月 圆圆 日从新疆伊宁市奶牛场
采集表现疑似病毒病症状的 源 个番茄样品尧猿 个辣
椒样品和 圆 个南瓜样品遥 圆园员圆 年 苑 月 圆愿 日袁从新
疆石河子蔬菜花卉研究所随机采集 源缘 个加工番茄
样品袁苑 月 猿园 日随机采集 怨园 个加工番茄样品曰愿 月
源 日采集 苑园 个看似健康的加工番茄样品袁并随机采
集 圆园 个辣椒样品遥
菌株院大肠杆菌 耘泽糟澡藻则蚤糟澡蚤葬 糟燥造蚤 阅匀缘琢 为本实验
室保存遥
试剂院 孕造葬灶贼 砸晕粤 孕怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 砸藻葬早藻灶贼尧 杂怎责藻则鄄
杂糟则蚤责贼襆芋 韵灶藻鄄杂贼藻责 砸栽鄄孕悦砸 杂赠泽贼藻皂 憎蚤贼澡 孕造葬贼蚤灶怎皂襆
栽葬择 阅晕粤 孕燥造赠皂藻则葬泽藻购自英潍捷基生物技术有限公
司曰 责郧耘酝鄄栽 耘葬泽赠尧 栽源 阅晕粤 连接酶尧 宰蚤扎葬则凿 阅晕粤
糟造藻葬灶鄄怎责 噪蚤贼凝胶回收试剂盒均购自普洛麦格生物技
术有限公司曰限制性内切酶袁购自 云藻则皂藻灶贼葬泽 公司曰
悦酝灾抗血清购自美国 晕藻燥早藻灶生物技术有限公司遥
引物院根据 郧藻灶月葬灶噪登录的不同分离物序列比
对分析后设计合成 猿 对引物院淤悦酝灾 检测上游引
物院缘忆鄄粤郧栽栽悦悦栽郧悦悦栽悦悦栽悦郧郧粤鄄猿忆袁下游引物院 缘忆鄄
悦栽郧郧粤栽郧郧粤悦粤粤悦悦悦郧栽栽悦鄄猿忆曰于扩增 悦孕片段上游
引物 悦酝灾猿杂孕员院缘忆鄄粤郧悦郧郧悦栽粤悦郧栽悦栽郧粤悦郧粤鄄猿忆袁下
游 引 物 悦酝灾猿粤杂孕猿院 缘忆鄄栽粤郧悦悦郧栽粤粤郧悦栽郧郧粤栽郧鄄
郧粤悦鄄猿忆曰盂扩增 砸晕粤猿 全基因组上游引物 砸晕粤猿鄄云院
缘忆鄄郧栽粤粤栽悦栽栽粤悦悦粤悦栽郧栽郧栽郧栽郧栽郧再郧栽郧栽郧栽郧栽郧栽鄄
郧栽郧栽悦鄄猿忆袁下游引物 砸晕粤猿鄄砸院缘忆鄄栽郧郧栽悦栽悦悦栽栽粤栽鄄
郧砸粤砸郧悦悦悦悦粤鄄猿忆遥 反转录引物为院 月月郧栽悦栽悦遥 引
物均由北京六合华大基因科技股份有限公司合成遥
员援 圆 酶联免疫检测
取新鲜样品叶片袁用 悦酝灾 亚组玉和 悦酝灾 亚组
域抗血清袁按照美国 晕藻燥早藻灶 生物技术有限公司
阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤检测试剂盒说明书操作遥 用包被缓冲
液稀释抗体袁每孔加 员园园 滋蕴袁室温避光放置 源 澡 后袁
用磷酸盐缓冲液 原 栽憎藻藻灶 圆园 渊责澡燥泽责澡葬贼藻 遭怎枣枣藻则 泽燥造怎鄄
贼蚤燥灶鄄贼憎藻藻灶 圆园袁孕月杂栽冤洗 猿 次袁缘 皂蚤灶 辕次曰每孔加 员园园
滋蕴样品袁源 益避光放置 员远 澡 后袁用 孕月杂栽 洗 猿 次袁缘
皂蚤灶 辕次曰每孔加入 员园园 滋蕴 酶标抗体袁室温避光 圆 澡袁
用 孕月杂栽洗 源 次袁缘 皂蚤灶 辕次曰最后每孔加入 员园园 滋蕴 底
物袁室温避光放置 员 澡袁用酶标仪在波长为 源园缘 灶皂 处
读取吸光度值袁孕 辕 晕逸圆 视为阳性样品遥
员援 猿 一步法 砸栽鄄孕悦砸检测
用 孕造葬灶贼 砸晕粤 孕怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 砸藻葬早藻灶贼 提取总 砸晕粤袁
杂怎责藻则杂糟则蚤责贼襆芋 韵灶藻鄄杂贼藻责 砸栽鄄孕悦砸 杂赠泽贼藻皂 憎蚤贼澡 孕造葬贼蚤鄄
灶怎皂襆 栽葬择 阅晕粤 孕燥造赠皂藻则葬泽藻 进行一步法 砸栽鄄孕悦砸遥
悦酝灾检测反应体系院总 砸晕粤 园援 缘 滋蕴尧员园 滋皂燥造 辕 蕴 上
下游引物各 园援 缘 滋蕴尧员 哉 栽葬择 阅晕粤 聚合酶尧圆 伊 砸藻葬糟鄄
贼蚤燥灶 月怎枣枣藻则 缘 滋蕴袁用纯水补充至 员园 滋蕴遥 悦孕 片段和
砸晕粤猿 基因组片段扩增反应体系院总 砸晕粤 园援 缘 滋蕴尧员园
滋皂燥造 辕 蕴上下游引物各 员滋蕴尧员援 愿 哉 栽葬择 阅晕粤 聚合酶尧
圆 伊 砸藻葬糟贼蚤燥灶 月怎枣枣藻则 员园 滋蕴袁用纯水补充至 圆园 滋蕴遥
孕悦砸扩增程序院缘园益 员缘皂蚤灶袁怨源益变性 圆皂蚤灶袁怨源益变
性 员缘 泽袁远园益退火 猿园 泽袁远愿益延伸 圆皂蚤灶 渊悦酝灾检测延
伸时间为 猿园 泽冤袁源园 个循环曰远愿 益延伸 缘 皂蚤灶遥
员援 源 目的片段克隆与测序
将预期大小的 孕悦砸 产物回收尧纯化后袁按普洛
麦格生物技术有限公司 责郧耘酝鄄栽 耘葬泽赠 载体试剂盒
说明进行连接反应袁转化大肠杆菌 阅匀 缘琢 感受态细
胞遥 在含 缘园 滋早 辕 蕴 氨苄青霉素的 蕴月 固体培养基上
猿苑 益培养 员远 澡袁挑取单菌落袁碱法提取质粒 阅晕粤袁酶
切鉴定重组质粒袁由上海英骏生物技术有限公司进
行序列测定遥
远员员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
员援 缘 序列分析
用 阅晕粤杂栽粤砸 蕴葬泽藻则早藻灶藻 增苑援 员 软件分析本研究
获得的 苑 个样品 悦酝灾 砸晕粤猿 序列与 郧藻灶月葬灶噪 中已
登录 悦酝灾分离物序列相似性曰用 酝耘郧粤 缘 软件构建
系统进化树院邻接法渊灶藻蚤早澡遭燥则鄄躁燥蚤灶蚤灶早袁晕允冤计算序列
间的遗传距离袁员园园园 次 月燥燥贼泽贼则葬责重抽样统计评价置
信度遥 所用分离物在 郧藻灶月葬灶噪中的登录号院悦酝灾亚
组玉粤 分离物 云灶赠尧蕴藻早尧酝枣尧再尧韵 分别为 阅员园缘猿愿尧
阅员远源园缘尧粤允圆苑远源愿员尧阅员圆源怨怨尧阅园园猿愿缘曰悦酝灾 亚组玉月
分离物 晕贼怨尧栽枣灶尧御尧杂阅尧玉粤尧孕澡赠 分别为 阅圆愿苑愿园尧
再员远怨圆远尧哉圆园圆员怨尧粤月园园愿苑苑苑尧粤月园源圆圆怨源尧阅匝源员圆苑猿圆曰
悦酝灾亚组域分离物 匝尧蕴再尧杂尧蕴杂尧栽则噪苑尧载遭 分别为
酝圆员源远源尧粤云员怨愿员园猿尧粤云园远猿远员园尧粤云源员圆苑怨苑远尧蕴员缘猿猿远尧
粤云圆远愿缘怨愿曰耘砸 渊花生矮化病毒 孕藻葬灶怎贼 泽贼怎灶贼 增蚤则怎泽袁
孕杂灾冤袁为 哉员缘苑猿园遥
圆 结果与分析
圆援 员 悦酝灾血清学检测
从新疆伊宁市奶牛场采集的番茄尧南瓜尧辣椒上
悦酝灾 亚组玉 阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤 检出率分别为 苑缘豫 渊猿 辕
源冤尧员园园豫 渊圆 辕 圆冤尧园 渊园 辕 猿冤曰从新疆石河子蔬菜花卉
研究所采集的加工番茄尧辣椒上 悦酝灾 亚组玉 阅粤杂鄄
耘蕴陨杂粤检出率分别为 苑源援 员缘豫 渊员缘圆 辕 圆园缘冤尧员园豫 渊圆 辕
圆园冤袁其中 苑 月 圆愿 日尧苑 月 猿园 日尧愿 月 源 日采集加工
番茄样品 悦酝灾 亚组玉 阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤 检出率分别为
远园豫 渊圆苑 辕 源缘 冤尧愿愿援 愿愿豫 渊愿园 辕 怨园 冤尧 远源援 圆怨豫 渊源缘 辕
苑园冤遥 然而这些样品与 悦酝灾 亚组域 阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤 检
测均呈阴性遥
圆援 圆 悦酝灾 砸栽鄄孕悦砸检测
从新疆石河子蔬菜花卉研究所采集的 圆园缘 个加
工番茄样品中随机选取的 愿员 个样品 悦酝灾的检出率
为 苑远援 缘豫 遥 其中 苑 月 圆愿 日采集样品 悦酝灾 检出率
为 愿员援 愿豫 渊圆苑 辕 猿猿冤尧苑 月 猿园 日采集样品检出率为
愿园豫 渊圆源 辕 猿园冤尧愿 月 源 日采集样品检出率为 远员援 员豫
渊员员 辕 员愿冤遥 对样品中血清学检测结果为阴性的进行
砸栽鄄孕悦砸检测袁可以检测到 猿怨源 遭责 目的片段袁如 再晕鄄
远尧蕴允鄄员园曰阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤 检测结果为阳性的样品袁也有
部分检测不到目的片段袁如 杂圆鄄员圆尧杂圆鄄远源遥
圆援 猿 砸晕粤猿 相关序列克隆
选取 悦酝灾 玉型 阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤检测结果呈阳性的
缘 个样品和 圆 个阴性样品袁分别用 砸晕粤猿鄄云 辕 砸晕粤猿鄄砸
和 悦酝灾猿杂孕员 辕 悦酝灾猿粤杂孕猿 引物进行 砸栽鄄孕悦砸 扩增袁
再晕鄄圆尧再晕鄄怨尧杂员鄄员源 猿 个样品获得 砸晕粤猿 基因组全
长袁其它样品获得长约 员援 愿 噪遭 含有 远缘苑 遭责 全长 悦孕
和 苑怨缘 遭责的 酝孕 猿忆端序列 渊表 员冤遥
表 员 悦酝灾 砸晕粤猿 测序样品
栽葬遭造藻 员 杂葬皂责造藻泽 枣燥则 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 燥枣 砸晕粤猿 燥枣 悦酝灾
采样地点摇
杂葬皂责造蚤灶早 造燥糟葬贼蚤燥灶摇
寄主摇 摇
匀燥泽贼摇 摇
样品摇
杂葬皂责造藻摇
悦酝灾亚组玉
悦酝灾 泽怎遭早则燥怎责 玉
悦酝灾亚组域
悦酝灾 泽怎遭早则燥怎责 域
序列长度 渊遭责冤
杂藻择怎藻灶糟藻 造藻灶早贼澡
伊宁 再蚤灶蚤灶早 番茄 栽燥皂葬贼燥 再晕鄄圆 垣 原 圆 圆员苑
辣椒 孕藻责责藻则 再晕鄄远 原 原 员 愿苑愿
南瓜 杂择怎葬泽澡 再晕鄄怨 垣 原 圆 圆员苑
石河子 杂澡蚤澡藻扎蚤 加工番茄 杂员鄄员 垣 原 员 愿苑苑
孕则燥糟藻泽泽蚤灶早 贼燥皂葬贼燥 杂员鄄员源 垣 原 圆 圆员源
辣椒 孕藻责责藻则 蕴允鄄源 垣 原 员 愿苑源
辣椒 孕藻责责藻则 蕴允鄄员园 原 原 员 愿苑源
摇 摇 注院 垣 院阳性曰 原 院阴性遥 晕燥贼藻院 垣 院 孕燥泽蚤贼蚤增藻曰 原 院 灶藻早葬贼蚤增藻援
圆援 源 序列分析
本研究获得的 苑 个样品的 悦孕 核苷酸序列与
悦酝灾亚组域株系分离物相似性较低袁为 苑缘援 圆豫 耀
苑远援 源豫 曰与 悦酝灾 亚组玉粤 株系分离物的相似性较
高袁为 怨员援 圆豫 耀怨源援 苑豫 曰与 悦酝灾 亚组玉月 株系分离
物的相似性最高袁为 怨圆援 源豫 耀 怨愿援 愿豫 遥 蕴允鄄源 和 蕴允鄄
员园 的 悦孕核苷酸序列与其余 缘 个样品的相似性较
低袁为怨圆 援 远豫 耀 怨圆 援 苑豫 曰且其余缘个样品间相似
性 高达怨愿 援 远豫 耀 怨怨 援 愿豫 遥苑个样品的悦孕氨基酸
序列与悦酝灾亚组域株系分离物相似性较低 袁为
愿园援 愿豫 耀愿源援 园豫 曰与 悦酝灾亚组玉粤株系分离物的相
似性较高袁为 怨缘援 缘豫 耀 怨苑援 苑豫 曰与 悦酝灾 亚组玉月 株
系分离物的相似性最高袁为 怨缘援 怨豫 耀 怨怨援 缘豫 遥 蕴允鄄源
和 蕴允鄄员园 的 悦孕 氨基酸序列与其余 缘 个样品的相似
性较低袁为 怨远援 源豫 耀 怨远援 愿豫 曰且其余 缘 个样品间相
似性高达 怨愿援 远豫 耀员园园豫 遥
苑员员圆 期 程朝玲等院新疆石河子尧伊宁地区黄瓜花叶病毒株系分化
摇 摇 进化树分析结果显示袁苑 个样品 悦孕核苷酸序列
均处于 悦酝灾亚组玉月 株系大分支袁其中 再晕鄄圆尧再晕鄄
远尧再晕鄄怨尧杂员鄄员尧杂员鄄员源 处于 员 个分支袁且与中国烟草上
分离物 杂阅 的亲缘关系较近曰蕴允鄄源 和 蕴允鄄员园 与以上 缘
个样品亲缘关系较远袁与美国番茄上分离物御的亲
缘关系最近袁处于 员 个分支 渊图 员冤遥 悦孕 氨基酸序
列系统进化树分析结果与核苷酸序列一致遥
图 员 悦酝灾 悦孕基因核苷酸序列系统进化树
云蚤早援 员 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 悦酝灾 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 悦孕 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽
摇 摇 砸晕粤猿 序列的比较结果显示院再晕鄄圆尧再晕鄄怨尧杂员鄄员源
猿个样品间核苷酸序列相似性高达怨 愿 援 缘 豫 耀
怨怨援 远豫 曰与 悦酝灾 亚组域株系分离物相似性较低袁为
苑猿援 愿豫 耀苑源援 远豫 曰与 悦酝灾亚组玉粤株系分离物的相
似性较高袁为 怨圆援 缘豫 耀 怨猿援 园豫 曰与 悦酝灾 亚组玉月 株
系分离物的相似性最高袁为 怨员援 园豫 耀怨愿援 圆豫 遥
酝孕 猿忆端 苑怨缘 遭责序列比较结果显示院 蕴允鄄源 和 蕴允鄄
员园 核苷酸与氨基酸序列与其余 缘 个样品的相似性
较低袁分别为 怨缘援 源豫 耀 怨缘援 怨豫和 怨缘援 怨豫 耀 怨苑援 苑豫 曰
其余 缘 个样品间相似性较高袁分别为 怨怨援 圆豫 耀
员园园豫与 怨苑援 苑豫 耀 员园园豫 袁其中 再晕鄄圆尧再晕鄄远尧再晕鄄怨 氨
基酸序列相似性为 员园园豫 遥 这些样品与 悦酝灾 亚组
域株系分离物的相似性较低袁核苷酸与氨基酸序列
相似性分别为 苑愿援 圆豫 耀苑愿援 怨豫与 愿园援 愿豫 耀 愿员援 远豫 曰
与 悦酝灾亚组玉粤株系分离物的相似性较高袁序列相
似性分别为 怨猿援 怨豫 耀怨源援 园豫与 怨猿援 远豫 耀 怨源援 园豫 曰与
悦酝灾亚组玉月株系分离物的相似性最高袁序列相似
性分别为 怨圆援 员豫 耀怨愿援 怨豫与 怨源援 园豫 耀怨怨援 远豫 遥
砸晕粤猿尧酝孕 猿忆端核苷酸序列的系统进化树分析
结果显示院再晕鄄圆尧再晕鄄远尧再晕鄄怨尧杂员鄄员尧杂员鄄员源 在进化树
上处于同一分支袁且与 杂阅 的亲缘关系较近曰蕴允鄄源 和
蕴允鄄员园 与获得的其余样品亲缘关系较远袁形成独立的
分支 渊图 圆袁猿冤遥
猿 讨论
新疆是典型的内陆性气候袁夏季日照时间长尧天
气炎热袁苑 月平均气温一般为 圆源援 员 耀 圆缘援 远益袁昼气温
一般 圆苑 耀 猿愿 益袁这种自然条件有利于传毒蚜虫种群
的增长与迁移遥 在新疆 苑 月小麦收获后袁大量蚜虫
迁移到棉花尧加工番茄及其它蔬菜继续危害袁尤其高
温年份以及蚜虫暴发年份的 苑 月下旬至 愿 月中旬袁
病毒病大面积暴发流行咱员园 原 员圆暂 遥
由于 悦酝灾易通过蚜虫和汁液摩擦接种传播袁且
其基因组序列变异较大袁株系繁多袁分离自不同地
愿员员 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
图 圆 悦酝灾 砸晕粤猿 核苷酸序列系统进化树
云蚤早援 圆 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 悦酝灾 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 砸晕粤猿 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽
图 猿 悦酝灾 酝孕 猿忆端核苷酸序列系统进化树
云蚤早援 猿 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 悦酝灾 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 酝孕 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽
区尧不同寄主的 悦酝灾 生物学和基因组序列差异较
大袁使得抗 悦酝灾育种的难度大为增加袁对 悦酝灾进行
亚组鉴定袁可为有效防治 悦酝灾 导致的病害提供依
据咱员猿暂 遥 本研究发现加工番茄尧辣椒尧番茄尧南瓜寄主
上广泛流行的 悦酝灾属于 悦酝灾亚组玉遥
本研究采集的 圆猿 个辣椒样品用 悦酝灾 玉检测试
怨员员圆 期 程朝玲等院新疆石河子尧伊宁地区黄瓜花叶病毒株系分化
剂盒检出率较低袁然而 再晕鄄远尧蕴允鄄员园 等血清学检测为
阴性的样品袁用一步法 砸栽鄄孕悦砸 检测到 猿怨源 遭责 目的
片段遥 因此选取 再晕鄄远尧蕴允鄄员园袁以及来源于不同地域
和寄主的血清学检测为阳性的 蕴允鄄源尧再晕鄄圆尧再晕鄄怨尧
杂员鄄员尧杂员鄄员源 等 缘 个样品袁通过 砸栽鄄孕悦砸 扩增 砸晕粤猿
基因组序列遥 悦孕 序列比对分析发现袁蕴允鄄员园 样品与
血清学检测为阳性的 蕴允鄄源 样品 悦孕 序列完全一致袁
再晕鄄远 与血清学检测为阳性的 再晕鄄圆尧再晕鄄怨尧杂员鄄员尧杂员鄄
员源 相比较袁悦孕氨基酸序列未见特异位点的变异袁说
明辣椒中 悦酝灾病毒含量较低是 阅粤杂鄄耘蕴陨杂粤 检测结
果为阴性的主要原因遥
本研究获得的 苑 个样品的 砸晕粤猿尧悦孕尧酝孕 猿忆端
序列相似性和系统进化树分析显示袁这些样品均可
归为 悦酝灾 亚组玉月袁但至少可分为 圆 个组群袁且其
序列与寄主无明显的相关性袁说明新疆 悦酝灾存在分
子变异和株系分化趋势遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
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物外壳蛋白基因的序列分析与比较援 病毒学报袁 员怨怨怨袁 员缘
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