全 文 ：云南葡萄产区葡萄炭疽病病原鉴定
及致病力分析
邓维萍摇 杨摇 敏摇 杜摇 飞摇 杨积忠摇 朱书生鄢
渊云南农业大学袁 农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室袁 昆明 远缘园圆园员冤
摘要院 为了明确引起云南葡萄产区炭疽病的病原种类袁利用形态鉴定和特异性引物分子检测相结
合的方法对从云南省主要葡萄产区采集的 远园 株炭疽病菌菌株进行了鉴定遥 葡萄炭疽病菌菌株的
菌落形态和生长速率与对照菌株尖孢炭疽菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂 差异不明显袁但其分生孢子大
小显著小于尖孢炭疽菌袁附着胞深褐色袁球形或不规则形遥 胶孢炭疽菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽
特异性引物 悦早陨灶贼 辕 陨栽杂源 从供试葡萄炭疽病菌菌株基因组 阅晕粤中扩增出 员 条约 缘园园 遭责 的特异性条
带袁而尖孢炭疽菌特异性引物 悦葬陨灶贼圆 辕 陨栽杂源 对葡萄炭疽病菌无扩增条带遥 研究表明袁引起云南葡萄
主产区炭疽病的病原为胶孢炭疽菌曰供试胶孢炭疽菌对红提葡萄均有致病力袁但菌株致病力差异较
大袁对番茄和草莓存在交叉侵染的能力袁且对多菌灵的敏感性较尖孢炭疽菌高遥
关键词院 葡萄炭疽病曰 胶孢炭疽菌曰 致病力曰 多菌灵
陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 糟葬怎泽蚤灶早 早则葬责藻 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻
蚤灶 再怎灶灶葬灶 葬灶凿 蚤贼泽 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠
阅藻灶早 宰藻蚤责蚤灶早摇 再葬灶早 酝蚤灶摇 阅怎 云藻蚤摇 再葬灶早 允蚤扎澡燥灶早摇 在澡怎 杂澡怎泽澡藻灶早鄢
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 粤早则燥鄄月蚤燥凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 孕藻泽贼 酝葬灶葬早藻皂藻灶贼 燥枣 耘凿怎糟葬贼蚤燥灶 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 悦澡蚤灶葬袁
再怎灶灶葬灶 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 运怎灶皂蚤灶早 远缘园圆园员袁 再怎灶灶葬灶 孕则燥增蚤灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 粤 贼燥贼葬造 燥枣 远园 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽责责援 蚤泽燥造葬贼藻泽 枣则燥皂 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 则燥贼 造藻泽蚤燥灶泽 燥枣 早则葬责藻泽 糟燥造造藻糟贼藻凿 枣则燥皂
皂葬蚤灶 早则葬责藻鄄早则燥憎蚤灶早 葬则藻葬泽 蚤灶 再怎灶灶葬灶 憎藻则藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 怎泽蚤灶早 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 泽责藻糟蚤藻泽鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟
责则蚤皂藻则泽 蚤灶 燥则凿藻则 贼燥 皂葬噪藻 泽怎则藻 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 糟葬怎泽蚤灶早 早则葬责藻 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻援 栽澡藻则藻 憎葬泽 灶燥 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则鄄
藻灶糟藻 蚤灶 糟燥造燥灶赠 皂燥则责澡燥贼赠责藻 葬灶凿 糟燥造燥灶赠 早则燥憎贼澡 则葬贼藻 遭藻贼憎藻藻灶 泽贼则葬蚤灶泽 枣则燥皂 早则葬责藻泽 葬灶凿 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬鄄
贼怎皂 允援 匀援 杂蚤皂皂燥灶凿泽 藻曾 允援 匀援 杂蚤皂皂燥灶凿泽 泽贼则葬蚤灶泽袁 遭怎贼 贼澡藻 糟燥灶蚤凿蚤葬造 泽蚤扎藻 燥枣 早则葬责藻 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 泽贼则葬蚤灶泽 泽蚤早鄄
灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 泽皂葬造造藻则 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 悦援 葬糟怎贼葬贼怎皂 泽贼则葬蚤灶泽援 栽澡藻 糟燥灶蚤凿蚤葬造 葬责责则藻泽泽燥则蚤葬 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽责责援 蚤泽燥造葬贼藻泽
枣则燥皂 早则葬责藻泽 憎藻则藻 遭则燥憎灶袁 泽责澡藻则蚤糟葬造 葬灶凿 蚤则则藻早怎造葬则造赠 造燥遭藻凿援 栽澡藻 早藻灶燥皂藻 燥枣 远园 蚤泽燥造葬贼藻泽 澡葬凿 遭藻藻灶 葬皂责造蚤枣蚤藻凿 贼燥
责则燥凿怎糟藻 阅晕粤 枣则葬早皂藻灶贼泽 燥枣 缘园园 遭责 憎蚤贼澡 泽责藻糟蚤藻泽鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则泽 悦早陨灶贼 辕 陨栽杂源 枣燥则 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤鄄
燥蚤凿藻泽 渊孕藻灶扎援 冤 孕藻灶扎援 驭 杂葬糟糟援 袁 憎澡蚤造藻 灶燥 枣则葬早皂藻灶贼泽 枣燥则 责则蚤皂藻则泽 悦葬陨灶贼圆 辕 陨栽杂源 燥枣 悦援 葬糟怎贼葬贼怎皂援 栽澡藻泽藻 则藻泽怎造贼泽
蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 燥枣 早则葬责藻 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 蚤灶 再怎灶灶葬灶 憎葬泽 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽援 粤凿凿蚤贼蚤燥灶葬造造赠袁 泽蚤早灶蚤枣蚤鄄
糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 憎藻则藻 枣燥怎灶凿 蚤灶 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 泽贼则葬蚤灶泽 憎澡蚤糟澡 憎藻则藻 葬造造 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 贼燥 灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬 糟增援
砸藻凿 郧造燥遭藻援 栽澡藻泽藻 蚤泽燥造葬贼藻泽 糟燥怎造凿 葬造泽燥 蚤灶枣藻糟贼 枣则怎蚤贼泽 燥枣 贼燥皂葬贼燥 葬灶凿 泽贼则葬憎遭藻则则赠袁 泽怎早早藻泽贼蚤灶早 贼澡葬贼 贼澡藻 责燥贼藻灶贼蚤葬造
枣燥则 糟则燥泽泽鄄蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 藻曾蚤泽贼藻凿 葬皂燥灶早 早则葬责藻袁 贼燥皂葬贼燥 葬灶凿 泽贼则葬憎遭藻则则赠援 粤造造 蚤泽燥造葬贼藻泽 憎藻则藻 皂燥则藻 泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 贼燥 糟葬则鄄
遭藻灶凿葬扎蚤皂 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 悦援 葬糟怎贼葬贼怎皂 泽贼则葬蚤灶泽援
基金项目院 云南省科技创新强省计划渊圆园园苑粤月园园苑冤袁国家自然科学基金渊猿园愿园园苑猿员冤袁国家野怨苑猿冶项目渊圆园员员悦月员园园源园园冤
作者简介院 邓维萍袁女袁员怨苑怨年生袁博士研究生袁研究方向为葡萄病害控制袁 耘鄄皂葬蚤造院 凿憎责圆员圆岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
鄢通讯作者渊粤怎贼澡燥则 枣燥则 糟燥则则藻泽责燥灶凿藻灶糟藻冤袁 耘鄄皂葬蚤造院 泽澡怎泽澡藻灶早扎澡怎苑怨岳 员圆远援 糟燥皂袁 栽藻造院 园愿苑员 原 缘圆圆园缘怨员
收稿日期院 圆园员圆 原 园怨 原 园猿
第 源园 卷摇 第 员 期
圆园员猿 年摇 圆 月
植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报
粤悦栽粤 孕匀再栽韵孕匀再蕴粤悦陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援 源园摇 晕燥援 员
云藻遭援 摇 圆园员猿
摇 摇 运藻赠 憎燥则凿泽院 早则葬责藻 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻曰 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽曰 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠曰 糟葬则遭藻灶凿葬扎蚤皂
摇 摇 炭疽菌属真菌引起的炭疽病是世界范围内农业
生产中发生普遍且危害较重的植物病害袁对许多林
木尧果树尧蔬菜尧花卉尧茶树尧药用植物以及大田作物
等造成严重的经济损失咱员暂 遥 葡萄是云南省重要的
经济作物袁但由于 苑要怨 月葡萄成熟期与雨季重叠袁
常导致葡萄炭疽病暴发流行袁造成葡萄果实腐烂脱
落袁严重影响产量和品质咱圆暂 遥 炭疽菌属约有 员园园 余
个种咱猿暂 袁其中造成葡萄果实腐烂的主要有胶孢炭疽
菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 渊 孕藻灶扎援 冤 孕藻灶扎援 驭
杂葬糟糟援 和尖孢炭疽菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂 允援 匀援
杂蚤皂皂燥灶凿泽 藻曾 允援 匀援 杂蚤皂皂燥灶凿泽咱源暂 遥 员愿怨员 年袁 杂燥怎贼澡鄄
憎燥则贼澡咱缘暂将引起美国葡萄炭疽病的病原鉴定为胶孢
炭疽菌遥 酝藻造噪泽澡葬皂 等咱远暂和 再葬皂葬皂燥贼燥 等咱苑暂报道袁引
起澳大利亚和日本葡萄炭疽病的病原为尖孢炭疽
菌遥 而 阅赠噪蚤灶 驭 酝蚤造澡燥造造葬灶凿咱愿暂及 运怎皂皂怎葬灶早 等咱怨暂分
别在美国圆叶葡萄 灾蚤贼蚤泽 则燥贼怎灶凿蚤枣燥造蚤葬和韩国葡萄炭疽
病病斑上同时分离到了胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌遥
我国北京尧山东尧河北尧河南尧广西尧新疆及辽宁等葡
萄产区炭疽病的病原均为胶孢炭疽菌咱员园 原 员员暂 袁目前尚
未见尖孢炭疽菌引起葡萄炭疽病的报道遥
传统炭疽病菌的分类鉴定主要依据形态和培养
性状袁但由于炭疽菌属种间形态较为相近袁且随着寄
主与病原菌之间相互协同进化袁形态学上的分类标
准更为模糊咱员圆暂 袁因此仅根据形态特征区分胶孢炭疽
菌和尖孢炭疽菌并不准确咱员猿暂 遥 近年来袁随着分子生
物学技术的发展袁分子技术已成为许多物种包括炭
疽菌属真菌鉴定及系统进化研究的工具遥 其中袁则阅鄄
晕粤内转录间隔区渊 蚤灶贼藻则灶葬造 贼则葬灶泽糟则蚤遭藻凿 泽责葬糟藻泽袁 陨栽杂冤
的序列信息已被广泛应用于鉴定不同的生物种及亚
种咱员源暂 遥 如基于 陨栽杂 序列差异设计的尖孢炭疽菌特
异性引物 悦葬陨灶贼圆 辕 陨栽杂源 和胶孢炭疽菌特异性引物
悦早陨灶贼 辕 陨栽杂源 已成功地用于橄榄和葡萄上炭疽病菌的
分子检测咱员缘暂 遥 此外袁胶孢炭疽菌对苯并咪唑类杀菌
剂的敏感性较尖孢炭疽菌高的特性也常被用于区分
这两种炭疽菌咱源暂 遥
本试验利用形态学鉴定结合特异性引物 孕悦砸
方法对云南省葡萄主产区的葡萄炭疽病菌进行鉴
定袁并对其培养性状尧致病力尧交叉侵染能力及对多菌
灵敏感性进行了分析袁以期明确引起云南葡萄产区炭
疽病的病原种类袁为田间病害防治提供理论依据遥
员 材料与方法
员援 员 材料
供试菌株院于 圆园园苑要圆园园怨 年在云南葡萄主产区
弥勒县水晶葡萄园和宾川县尧富民县尧石林县及丘北
县红提葡萄园中随机采集水晶和红提炭疽病病果袁
撕下病健交界处果皮于 员援 缘豫次氯酸钠溶液中浸泡
消毒 圆 耀 猿 皂蚤灶袁无菌水冲洗 猿 次袁用灭菌滤纸吸干水
分袁于马铃薯葡萄糖琼脂渊责燥贼葬贼燥 凿藻曾贼则燥泽藻 葬早葬则袁孕阅粤冤
培养基上培养袁单孢纯化后于 圆缘 益恒温培养 缘 凿 后
保存遥 试验共分离获得 远园 株葡萄炭疽病菌菌株
渊表 员冤遥 对照菌株院远 株尖孢炭疽菌菌株 责员尧责圆尧责猿尧
责源尧澡员 和 造葬圆圆 由中国农业大学种子病理药理实验室
提供袁其中 责员尧责圆尧责猿 和 责源 分离自福建漳州枇杷病
样袁澡员 和 造葬圆圆 分离自湖南长沙辣椒病样遥 于 孕阅粤
培养基上纯化培养后保存备用遥
摇 摇 供试品种院红提葡萄尧番茄和草莓均从云南当地
农贸市场购得遥
摇 摇 供试药剂和仪器院怨愿援 怨豫多菌灵渊糟葬则遭藻灶凿葬扎蚤皂冤
原药袁由中国农业大学种子病理药理实验室提供袁将
表 员 云南葡萄炭疽病菌菌株主要采集信息
栽葬遭造藻 员 酝葬蚤灶 糟燥造造藻糟贼蚤燥灶 凿葬贼葬 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽贼则葬蚤灶泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 早则葬责藻 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 泽葬皂责造藻泽 蚤灶 再怎灶灶葬灶
采样地摇
韵则蚤早蚤灶摇
菌株数
晕燥援 燥枣 蚤泽燥造葬贼藻泽
菌株摇
陨泽燥造葬贼藻摇
采样时间
再藻葬则
寄主摇
匀燥泽贼摇
弥勒县 酝蚤造藻 悦燥怎灶贼赠 圆源 皂鄄凿鄄员 耀 皂鄄凿鄄圆源 圆园园苑 水晶 悦则赠泽贼葬造 早则葬责藻
愿 皂鄄憎鄄员 耀 皂鄄憎鄄愿 圆园园愿 水晶 悦则赠泽贼葬造 早则葬责藻
圆 皂鄄扎鄄员袁皂鄄扎鄄圆 圆园园愿 水晶 悦则赠泽贼葬造 早则葬责藻
宾川县 月蚤灶糟澡怎葬灶 悦燥怎灶贼赠 远 遭鄄躁鄄员 耀 遭鄄躁鄄远 圆园园愿 红提 砸藻凿 早造燥遭藻 早则葬责藻
富民县 云怎皂蚤灶 悦燥怎灶贼赠 缘 枣鄄员 耀 枣鄄缘 圆园园怨 红提 砸藻凿 早造燥遭藻 早则葬责藻
石林县 杂澡蚤造蚤灶 悦燥怎灶贼赠 苑 泽鄄员 耀 泽鄄苑 圆园园愿 红提 砸藻凿 早造燥遭藻 早则葬责藻
丘北县 匝蚤怎遭藻蚤 悦燥怎灶贼赠 愿 择鄄员 耀 择鄄远袁赠鄄曾鄄员袁赠鄄赠鄄员 圆园园怨 红提 砸藻凿 早造燥遭藻 早则葬责藻
圆远 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
其溶于 怨怨援 缘豫 晕袁 晕 原二甲基甲酰胺渊利安隆博华
渊天津冤医药化学有限公司冤配制为质量浓度 员 伊 员园源
皂早 辕 蕴的母液备用遥 徕卡 阅酝 圆园园园 显微镜袁德国徕
卡仪器有限公司曰怨苑园园 型 灾藻则蚤贼蚤 怨远 孔热循环 原梯度
孕悦砸仪袁美国应用生物系统公司曰陨皂葬早藻 匝怎葬灶贼 猿园园
凝胶成像分析系统袁美国通用公司遥
员援 圆 方法
员援 圆援 员 菌株鉴定院形态学鉴定院参照 悦澡燥蚤 等咱员远暂的方
法将采集分离到的葡萄炭疽病菌菌株和对照菌株尖
孢炭疽菌菌株纯化接种于 孕阅粤 平板上袁置于 圆缘 益
恒温培养箱黑暗培养 远 凿袁观察记录菌落正尧反面颜
色和菌落直径咱员圆暂 袁根据菌落颜色尧是否分泌色素及
是否有轮纹对 远园 株葡萄炭疽病菌菌株进行分组遥
菌株产孢后用无菌水将孢子洗脱并配制成孢子悬浮
液袁于显微镜下观察分生孢子形态袁每个菌株随机选
取 猿园 个孢子袁测量其横尧纵径遥 分子鉴定院采用
悦栽粤月法咱员苑暂提取供试菌株的基因组 阅晕粤袁分别用胶
孢炭疽菌特异性引物 悦早陨灶贼 渊缘忆鄄郧粤悦悦悦栽悦悦悦郧郧悦鄄
悦栽悦悦悦郧悦悦鄄猿忆冤鄄陨栽杂源 渊 缘忆鄄栽悦悦栽悦悦郧悦栽栽粤栽栽郧粤栽粤栽鄄
郧悦鄄猿忆冤 咱员愿暂和尖孢炭疽菌特异性引物 悦葬陨灶贼圆 渊缘忆鄄
郧郧郧郧粤粤郧悦悦栽悦栽悦郧悦郧郧鄄猿忆冤鄄陨栽杂源咱员怨暂对 远园 株葡萄
炭疽病菌菌株和 远 株尖孢炭疽菌菌株进行 孕悦砸 扩
增遥 每个 孕悦砸 体系为 圆缘 滋蕴袁其中包括 缘 哉 辕 滋蕴 栽葬择
酶 园援 员缘 滋蕴尧员园 伊 孕悦砸 月怎枣枣藻则 渊含 酝早圆 垣 冤 圆援 缘 滋蕴尧
凿晕栽孕泽 圆援 园 滋蕴尧圆园 滋皂燥造 辕 蕴 引物各 员 滋蕴尧模板 阅晕粤 员
滋蕴袁以灭菌 凿凿匀圆韵 补足 圆缘 滋蕴遥 孕悦砸 扩增程序院怨源益预变性 缘 皂蚤灶曰怨源 益变性 员 皂蚤灶袁远园 益退火 圆 皂蚤灶袁苑圆
益延伸 圆 皂蚤灶袁共 猿圆 个循环曰苑圆 益延伸 员园 皂蚤灶遥 取 圆
滋蕴反应产物袁用 圆豫琼脂糖凝胶电泳检测袁在凝胶
成像分析系统中分析 孕悦砸产物片段大小遥
员援 圆援 圆 菌株致病力测定院选择新鲜尧健康的红提葡
萄果实袁用 员援 缘豫次氯酸钠溶液浸泡消毒 圆皂蚤灶袁无菌
水冲洗 猿 次袁置于超净台上吹干遥 将供试葡萄炭疽
病菌和尖孢炭疽菌菌株在 孕阅粤平板上于 圆缘 益下培
养至产孢袁配制为 员园缘 个 辕 皂蕴 的孢子悬浮液袁用 圆园
滋蕴孢子悬浮液分别对红提果实进行非伤口接种袁然
后置于垫有吸水纸的塑料盒内渊砸匀 越 员园园豫 冤袁圆缘 益
黑暗培养袁以 圆园 滋蕴 无菌水接种为对照遥 每处理 员园
颗葡萄袁重复 猿 次遥 观察发病情况袁接种第 怨 天测定
病斑面积袁将病斑面积 杂分为 缘 个区间院杂 跃 源 糟皂圆袁猿
糟皂圆 约 杂臆源 糟皂圆袁圆 糟皂圆 约 杂臆猿 糟皂圆袁员 糟皂圆 约 杂臆圆 糟皂圆
和 杂臆员 糟皂圆袁分析菌株致病力差异遥
员援 圆援 猿 菌株交叉侵染能力测定院选择在红提葡萄上
不同致病力的葡萄炭疽病菌菌株和 远 株尖孢炭疽菌
菌株袁测定其对番茄和草莓果实的致病力遥 将菌株
在 孕阅粤平板上活化后袁于 圆缘 益黑暗培养袁产孢后用
无菌水将孢子洗脱袁分别配制成 员园缘 个 辕 皂蕴 孢子悬
浮液遥 选择新鲜尧健康的番茄和草莓果实袁用 员援 缘豫
次氯酸钠溶液浸泡消毒 圆 皂蚤灶袁无菌水冲洗 猿 次袁置
于超净台上吹干遥 用 圆园 滋蕴孢子悬浮液分别对处理
后的番茄和草莓进行非伤口和伤口接种袁然后置于
垫有吸水纸的塑料盒内渊砸匀 为 员园园豫 冤袁圆缘 益黑暗
培养遥 每处理 员园 颗番茄或草莓袁重复 猿 次袁以 圆园 滋蕴
无菌水接种为对照 遥观察发病情况 袁接种第缘天
测定病斑面积杂袁不发病记为 原 曰杂臆员糟皂圆 袁记为 垣 曰
员 糟皂圆 约 杂臆缘 糟皂圆袁记为 垣垣 曰缘 糟皂圆 约 杂臆员园 糟皂圆袁记为
垣垣垣 曰杂 跃 员园 糟皂圆袁记为 垣垣垣垣 遥 从番茄和草莓发病部
位重新分离病原菌袁观察菌落特征及分生孢子形态袁
与接种菌株比较遥
员援 圆援 源 菌株对多菌灵敏感性测定院采用菌丝生长抑
制法咱圆园暂测定葡萄炭疽病菌和尖孢炭疽菌对多菌灵
的敏感性遥 测定葡萄炭疽病菌对多菌灵敏感性采用
多菌灵浓度为 园援 员尧园援 缘尧员援 园尧员援 缘 和 圆援 园 皂早 辕 蕴 的含
药平板袁测定尖孢炭疽菌对多菌灵敏感性采用
多菌灵浓度为园援 缘尧员援 园尧员援 缘尧圆援 园尧缘援 园尧员园援 园尧缘园援 园和
员园园 援 园皂早 辕 蕴的含药平板遥分别以加入等体积晕袁
晕 原二甲基甲酰胺的 孕阅粤平板为对照遥 于供试菌株
菌落边缘取直径 缘皂皂的菌饼袁菌丝面朝下接种于含
药 孕阅粤培养基平板中央袁置于 圆愿 益恒温培养箱内
黑暗培养袁源 凿后测量菌落直径遥 以药剂质量浓度的
对数为横坐标尧抑制率概率值为纵坐标袁计算毒力回
归方程及有效抑制中浓度 耘悦缘园值遥 胶孢炭疽菌和
尖孢炭疽菌对多菌灵的抗性划分标准为院耘悦缘园逸员园园皂早 辕 蕴为高抗曰员援 园 皂早 辕 蕴 约 耘悦缘园 约 员园园 皂早 辕 蕴 为抗性曰
耘悦缘园臆员援 园 皂早 辕 蕴为敏感咱圆员暂 遥
员援 猿 数据分析
数据处理采用 杂孕杂杂 员猿援 园 软件袁用 阅怎灶糟葬灶 氏多
重比较法进行差异显著性分析遥
圆 结果与分析
圆援 员 葡萄炭疽病菌形态特征
根据菌落在 孕阅粤培养基上形态可将 远园 株葡萄
炭疽病菌菌株分为 粤 耀 云 远 组渊表 圆冤遥 粤组院菌落正
面菌丝白色袁背面浅黄色袁有黑色素形成的围绕菌落
中心的同心轮纹或斑块曰月 组院菌落正面菌丝白色袁
背面浅黄色袁无黑色色素生成曰悦组院菌落正面菌丝
猿远员 期 邓维萍等院云南葡萄产区葡萄炭疽病病原鉴定及致病力分析
浅灰色袁背面橙色袁有黑色素形成的同心轮纹或斑
块曰阅组院菌落正面菌丝浅灰色袁背面橙色袁无黑色素
生成曰耘组院菌落正面菌丝鼠灰色袁背面棕黑色袁有浅
橙色同心轮纹曰云 组院菌落正面菌丝鼠灰色袁背面棕
黑色遥 供试的枇杷和辣椒尖孢炭疽菌菌落正面颜色
为白色尧浅灰色和鼠灰色袁背面颜色为浅黄色和橙
色遥 葡萄炭疽病菌 粤 耀 阅组及 云组菌株菌落生长速
率均大于供试的 远 株尖孢炭疽菌菌株袁耘 组菌株菌
落平均直径为 缘援 猿 依 圆援 猿 糟皂袁小于尖孢炭疽菌菌株
责圆 和 造葬圆圆 的的菌落直径袁但大于另外 源 株尖孢炭疽
菌菌株渊表 圆冤遥 故根据菌落形态和生长速率不能确
定云南葡萄炭疽病的病原遥
表 圆 葡萄炭疽病菌和尖孢炭疽菌菌落直径和孢子大小
栽葬遭造藻 圆 悦燥造燥灶赠 凿蚤葬皂藻贼藻则 葬灶凿 糟燥灶蚤凿蚤葬造 泽蚤扎藻 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 蚤泽燥造葬贼藻泽 枣则燥皂 早则葬责藻 葬灶凿 泽蚤曾 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂 蚤泽燥造葬贼藻泽
供试病原菌
孕葬贼澡燥早藻灶
菌落平均直径渊糟皂冤
悦燥造燥灶赠 葬增藻则葬早藻 凿蚤葬皂藻贼藻则
孢子大小 悦燥灶蚤凿蚤葬造 泽蚤扎藻 渊滋皂冤
纵径 蕴藻灶早贼澡 横径宰蚤凿贼澡
葡萄炭疽病菌 粤组 郧则燥怎责 粤 远援 远 依 员援 苑 葬遭 猿远援 怨源 依 圆援 圆园 遭 员员援 圆怨 依 园援 苑员 糟
悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽贼则葬蚤灶泽 月组 郧则燥怎责 月 远援 苑 依 员援 员 葬遭 猿远援 愿苑 依 苑援 缘远 遭 员圆援 圆苑 依 员援 愿怨 糟
蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 早则葬责藻 悦组 郧则燥怎责 悦 远援 员 依 员援 圆 遭糟 猿源援 源圆 依 猿援 愿愿 遭 员员援 缘缘 依 员援 园缘 糟
阅组 郧则燥怎责 阅 苑援 员 依 员援 猿 葬 猿怨援 园圆 依 员援 猿猿 遭 员圆援 缘愿 依 园援 园缘 糟
耘组 郧则燥怎责 耘 缘援 猿 依 圆援 猿 糟 员源援 远员 依 园援 缘苑 糟 员圆援 源远 依 员援 员怨 糟
云组 郧则燥怎责 云 远援 远 依 员援 圆 葬遭 圆愿援 缘源 依 员援 愿员 糟 员怨援 源源 依 员援 愿猿 遭
尖孢炭疽菌 责员 猿援 圆 依 园援 员 凿 缘猿援 远源 依 猿援 圆猿 葬 圆园援 猿圆 依 园援 苑远 遭
悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 责圆 缘援 怨 依 园援 缘 遭糟 缘愿援 员愿 依 员援 缘员 葬 圆圆援 怨怨 依 园援 苑猿 葬
葬糟怎贼葬贼怎皂 责猿 缘援 圆 依 园援 源 糟 缘猿援 远愿 依 猿援 园远 葬 员怨援 怨远 依 园援 远苑 遭
责源 猿援 苑 依 园援 猿 凿 源源援 猿圆 依 员援 怨猿 遭 圆圆援 苑猿 依 员援 园远 葬
造葬圆圆 缘援 源 依 园援 员 糟 缘园援 猿愿 依 圆援 圆怨 葬 圆园援 怨园 依 员援 猿苑 遭
澡员 圆援 员 依 园援 员凿 缘远援 源怨 依 员援 苑圆 葬 圆猿援 苑怨 依 园援 远圆 葬
摇 摇 注院数据为平均数 依标准误遥 同列数据后不同字母表示经 阅怎灶糟葬灶氏多重比较在 孕 约 园援 园缘 水平差异显著遥 晕燥贼藻院 阅葬贼藻 葬则藻 皂藻葬灶 依
杂耘援 阅葬贼葬 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 贼澡藻 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 葬则藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼 孕 约园援 园缘 遭赠 阅怎灶糟葬灶爷泽 皂怎造贼蚤责造藻 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶援
摇 摇 葡萄炭疽病菌菌株分生孢子盘黑色袁丛生袁无刚
毛遥 分生孢子梗无色至褐色袁具分隔袁顶生分生孢子
渊图 员鄄葬尧遭冤遥 分生孢子无色尧单胞袁有隔袁具 员 耀 圆 个
油球袁圆柱形尧棒状或椭圆形袁大多两端钝圆遥 分生
孢子萌发时产生的附着胞深褐色袁球形或不规则形
渊图 员鄄糟冤遥 供试尖孢炭疽菌分生孢子除 责源 为两端
均尖的纺锤形外袁其它 缘 株均为一端渐尖的圆柱形遥
比较分析表明 袁供试葡萄炭疽病菌孢子大小为
员源援 远员 耀 猿怨援 园圆 滋皂 伊 员员援 圆怨 耀 员怨援 源源 滋皂袁显著小于尖
孢炭疽菌渊孕 约 园援 园缘冤 渊表 圆冤遥 从附着孢形态尧孢子
形态和大小初步推断云南葡萄炭疽病的病原菌是胶
孢炭疽菌 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 渊孕藻灶扎援 冤 孕藻灶扎援 驭 杂葬糟糟援 遥
图 员 葡萄炭疽病菌分生孢子盘及附着孢形态
云蚤早援 员 栽澡藻 葬糟藻则增怎造怎泽 葬灶凿 葬责责则藻泽泽燥则蚤怎皂 皂燥则责澡燥造燥早赠 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽贼则葬蚤灶泽 燥灶 早则葬责藻泽
摇 摇 注院葬尧遭院 分生孢子盘曰 糟院 附着孢遥 晕燥贼藻院 葬袁 遭院 粤糟藻则增怎造怎泽曰 糟院 葬责责则藻泽泽燥则蚤怎皂援
圆援 圆 菌株特异性引物扩增
胶孢炭疽菌特异性引物 悦早陨灶贼 辕 陨栽杂源 能从 远园 株
葡萄炭疽病菌菌株基因组 阅晕粤 中扩增出 员 条约
缘园园 遭责的特异性条带袁而对 远 株尖孢炭疽菌无特异
性扩增曰尖孢炭疽菌特异性引物 悦葬陨灶贼圆 辕 陨栽杂源 对葡萄
炭疽病菌菌株无特异性扩增袁但能从远株尖孢炭疽
源远 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
菌基因组 阅晕粤 中扩增出约 缘园园 遭责 的特异性条带
渊图 圆冤遥 据此可进一步确定云南葡萄炭疽病由胶孢
炭疽菌 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽引起遥
圆援 猿 菌株致病力差异比较
致病力测定结果显示袁尖孢炭疽菌非伤口接种
红提后没有明显症状袁而葡萄胶孢炭疽菌菌株非伤
口接种红提均出现典型的炭疽病症状遥 接种第 远 天
在接种点周围出现浅褐色水渍状斑点袁之后斑点逐
步连成暗褐色不规则形大病斑袁第 怨 天各菌株接种
红提的发病率达 员园园豫 袁后期病斑迅速扩大并凹陷袁
表面有粘稠状橙色孢子堆遥 病斑大小分析表明袁供
试菌株间致病力差异较大袁接种第 怨 天在红提上病
斑面积 杂渊糟皂圆袁余同冤为 园援 圆缘 耀 源援 愿源遥 皂鄄凿鄄员愿 和 择鄄远
在红提上 杂 跃 源袁致病力相对最强曰缘 株菌株 猿 约 杂臆
源袁致病力中等曰苑 株菌株 圆 约 杂臆猿袁致病力稍弱曰远 株
菌株 员 约 杂臆圆袁致病力较弱曰剩余 源园 株菌株 杂臆员袁致
病力最弱遥 除宾川外袁杂臆员 的菌株占各采样地菌群
的比例均大于 远园豫 袁富民甚至达 员园园豫 袁仅弥勒和丘
北分别有 圆援 怨源豫和 员圆援 缘园豫的菌株 杂 跃 源遥 而宾川
各有 猿猿援 猿猿豫的菌株 园 约 杂臆员尧圆 约 杂臆猿 和 猿 约 杂臆源遥
取发病组织再次进行病原分离袁均得到与原接种菌
性状一致的培养物遥
图 圆 葡萄炭疽病菌和尖孢炭疽菌菌株基因组 阅晕粤特异性引物扩增产物
云蚤早援 圆 孕燥造赠皂藻则葬泽藻 糟澡葬蚤灶 则藻葬糟贼蚤燥灶 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则燥凿怎糟贼泽 燥枣 早藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽贼则葬蚤灶泽 枣则燥皂
早则葬责藻 葬灶凿 泽蚤曾 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂 蚤泽燥造葬贼藻泽 怎泽蚤灶早 泽责藻糟蚤藻泽鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则泽
摇 摇 注院酝院分子量标记曰员 耀 员苑院葡萄炭疽病菌菌株曰责员 耀 责源院枇杷上分离的尖孢炭疽菌菌株曰造葬圆圆尧澡员院辣椒上分离的尖孢炭疽菌菌株遥
晕燥贼藻院 酝院 酝葬噪藻则曰 员 原 员苑院 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽贼则葬蚤灶泽 枣则燥皂 早则葬责藻曰 责员 原 责源院 悦援 葬糟怎贼葬贼怎皂 泽贼则葬蚤灶泽 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 造燥择怎葬贼曰 造葬圆圆袁 澡员院 悦援 葬糟怎贼葬贼怎皂 泽贼则葬蚤灶泽 蚤鄄
泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 糟澡蚤造造蚤援
圆援 源 菌株交叉侵染能力
选择在红提葡萄上致病力相对最强的菌株 皂鄄
凿鄄员愿袁致病力中等的菌株 遭鄄躁鄄源袁致病力稍弱的菌株
皂鄄凿鄄员员袁致病力较弱的菌株 皂鄄凿鄄员猿 和 缘 株致病力最
弱的菌株 皂鄄凿鄄愿尧皂鄄凿鄄员圆尧皂鄄憎鄄愿尧枣鄄缘 和 泽鄄源 对番茄和
草莓果实进行伤口和非伤口接种遥 伤口接种 缘 凿 后
病斑面积测定表明袁怨 株葡萄胶孢炭疽菌菌株对番
茄和草莓均有致病力袁且对草莓致病力较强袁草莓上
杂 跃 员园曰非伤口接种 缘 凿后袁怨 株胶孢炭疽菌菌株对草
莓均有较强致病力袁但仅对红提具有较弱致病力菌
株 皂鄄凿鄄员猿 和弱致病力菌株 泽鄄源尧皂鄄憎鄄愿 对番茄有致
病力袁而对红提有较强致病力菌株并不能使番茄产
生明显病症渊表 猿冤遥 非伤口接种时袁远 株尖孢炭疽
菌菌株中仅 责猿 对番茄和草莓致病袁杂 约 园援 园缘遥 进行
伤口接种时袁尖孢炭疽菌菌株对番茄和草莓均有致
病力袁但致病力较弱袁杂 约 园援 猿缘渊表 猿冤遥
圆援 缘 供试菌株对多菌灵的敏感性
供试 远园 株葡萄胶孢炭疽菌中有 源圆 个菌株对多
菌灵敏感袁其耘悦缘园小于员 援 园皂早 辕 蕴袁平均为园 援 远苑 依园援 圆员皂早 辕 蕴袁占全部菌株的苑园豫 曰员远个菌株耘悦缘园在员援 园 耀 员园园援 园 皂早 辕 蕴 之间袁 平均为 员援 缘愿 依 园援 远园 皂早 辕 蕴袁
为抗性菌株曰仅有 圆 个菌株为 耘悦缘园大于 员园园 皂早 辕 蕴的
高抗菌株 遥远株尖孢炭疽菌中除 造葬 圆 圆的 耘悦缘园为员愿援 园源 皂早 辕 蕴外袁其余菌株的 耘悦缘园均大于 员园园 皂早 辕 蕴遥
可见袁葡萄胶孢炭疽菌菌株对多菌灵较敏感袁而尖孢
炭疽菌菌株对多菌灵的敏感性较低遥
缘远员 期 邓维萍等院云南葡萄产区葡萄炭疽病病原鉴定及致病力分析
表 猿 葡萄胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌对番茄和草莓果实的致病力比较
栽葬遭造藻 猿 悦燥皂责葬则藻 燥枣 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠 燥枣 怨 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 蚤泽燥造葬贼藻泽 枣则燥皂 早则葬责藻泽 葬灶凿 泽蚤曾
悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂 蚤泽燥造葬贼藻泽 贼燥 枣则怎蚤贼泽 燥枣 贼燥皂葬贼燥 葬灶凿 泽贼则葬憎遭藻则则赠
供试病原菌
孕葬贼澡燥早藻灶
菌株
陨泽燥造葬贼藻
番茄 栽燥皂葬贼燥
非伤口接种
晕燥灶鄄憎燥怎灶凿 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶
伤口接种
宰燥怎灶凿 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶
草莓 杂贼则葬憎遭藻则则赠
非伤口接种
晕燥灶鄄憎燥怎灶凿 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶
伤口接种
宰燥怎灶凿 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶
胶胞炭疽菌 皂鄄凿鄄员愿 原 垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 遭鄄躁鄄源 原 垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
皂鄄凿鄄员员 原 垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
皂鄄凿鄄员猿 垣 垣垣垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
枣鄄缘 原 垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
皂鄄凿鄄愿 原 垣垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
皂鄄凿鄄员圆 原 垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
泽鄄源 垣 垣垣 垣垣垣垣 垣垣垣垣
皂鄄憎鄄愿 垣 垣 垣垣垣 垣垣垣垣
尖孢炭疽菌 责员 原 垣 原 垣
悦援 葬糟怎贼葬贼怎皂 责圆 原 垣 原 垣
责猿 垣 垣 垣 垣
责源 原 垣 原 垣
造葬圆圆 原 垣 原 垣
澡员 原 垣 原 垣
摇 摇 注院 原 院不发病曰 垣 院病斑面积渊糟皂圆冤杂臆员曰 垣垣 院员 约 杂臆缘曰 垣垣垣 院缘 约 杂臆员园曰 垣垣垣垣 院杂 跃 员园遥 晕燥贼藻院 原 院 晕燥 泽赠皂责贼燥皂曰 垣 院 造藻泽蚤燥灶 葬则藻葬
渊糟皂圆冤 杂臆员曰 垣垣 院 员 约 杂臆缘曰 垣垣垣 院 缘 约 杂臆员园曰 垣垣垣垣 院 杂 跃 员园援
猿 讨论
杂怎贼贼燥灶咱圆圆暂研究表明袁胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌
在形态学特征如菌落形态和颜色尧菌丝生长速率尧分
生孢子和附着胞形态等方面有区别遥 胶孢炭疽菌菌
丝一般为灰色袁菌落生长较快袁而尖孢炭疽菌菌丝常
为浅粉色尧肉色尧橙色或橄榄绿色袁生长较慢咱员暂 遥 本
试验中葡萄炭疽病菌与尖孢炭疽菌在 孕阅粤 上菌落
均呈白色尧浅灰色和鼠灰色袁两者颜色无明显差异遥
这在有关澳大利亚葡萄尖孢炭疽菌咱员缘暂 尧山药胶孢炭
疽菌咱圆猿暂和韩国葡萄胶孢炭疽菌咱圆源暂的研究中也曾发
现遥 另外袁本试验中虽绝大多数供试葡萄炭疽病菌
菌株在 圆缘 益尧孕阅粤平板上黑暗培养 远 凿 后菌落平均
直径大于尖孢炭疽菌袁但按菌落形态分组的 耘 组菌
落平均直径比尖孢炭疽菌 责圆 和 造葬圆圆 小袁这与尖孢
炭疽菌比胶孢炭疽菌生长速率慢的结论并不完全一
致咱圆源 原 圆缘暂 遥 胶孢炭疽菌分生孢子通常为圆柱形或棒
形袁大多两端钝圆袁部分一端稍尖袁而尖孢炭疽菌分
生孢子呈两端均尖的纺锤形咱圆源暂 遥 本试验分离的葡
萄炭疽病菌分生孢子为一端稍尖的圆柱形尧棒形或
椭圆形袁而尖孢炭疽菌分生孢子形态与之差异不明
显袁既有两端均尖的纺锤形袁也有一端稍尖的圆柱
形遥 但葡萄炭疽病菌孢子大小明显小于尖孢炭疽
菌遥 同时袁葡萄炭疽病菌分生孢子萌发时形成的附
着孢为球形和不规则形袁而尖孢炭疽菌为球形袁这与
匀燥灶早 等咱圆源暂对葡萄胶孢炭疽菌附着孢的描述一致遥
本试验利用胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌特异性引物对
所有供试菌株进行检测袁远园 株葡萄炭疽病菌菌株仅
对胶孢炭疽菌特异性引物有扩增条带袁证明云南省
主要葡萄产区的炭疽病菌为胶孢炭疽菌遥
苯并咪唑类杀菌剂是控制炭疽病最为有效的杀
菌剂之一咱员源暂 遥 有研究表明袁绝大多数胶孢炭疽菌对
苯并咪唑类杀菌剂的敏感性较尖孢炭疽菌高咱源袁 圆员暂 遥
本试验结果表明袁葡萄胶孢炭疽菌对多菌灵的敏感
性显著高于尖孢炭疽菌袁这与柑橘胶孢炭疽菌及橡
胶胶孢炭疽菌对苯并咪唑类杀菌剂的敏感性均高于
其尖孢炭疽菌的表现一致咱圆员袁 圆远暂 遥
弄清病原菌群体内致病性的分化或变异情况袁
对制定防治对策和指导抗病育种具有重要意义遥 本
试验结果表明袁所有葡萄胶孢炭疽菌菌株对红提均
有致病性袁但菌株间致病力差异较大袁除宾川外各采
样地致病力较弱菌株所占菌群比例均超过 远园豫 遥
这可能与胶孢炭疽菌具有广泛的寄主范围有关遥
粤造葬澡葬噪燥燥灶等咱圆苑暂研究表明袁在人工接种的条件下各
种热带尧亚热带和温带水果上的胶孢炭疽菌之间存
在交叉侵染的能力遥 本试验中对红提致病力较弱的
远远 植摇 物摇 保摇 护摇 学摇 报 源园 卷
菌株对番茄的致病能力相对较强袁各菌株对草莓均
有较强致病力遥 炭疽菌属对最适寄主的可塑性较
强袁对红提弱致病力菌株在自然选择和协同进化过
程中有可能更适应番茄和草莓遥 葡萄胶孢炭疽菌对
番茄和草莓的交叉侵染能力使得葡萄园周围种植的
番茄和草莓成为葡萄炭疽病翌年的孢子接种源袁从
而加剧该病的发生和危害袁因此在葡萄园周围尽量
不要种植可作为炭疽病病原菌替代寄主的植物遥
参 考 文 献渊砸藻枣藻则藻灶糟藻泽冤
咱员暂 杂怎贼贼燥灶 月 悦援 栽澡藻 早藻灶怎泽 郧造燥皂藻则藻造造葬 葬灶凿 蚤贼泽 葬灶葬皂燥则责澡 悦燥造造藻贼燥贼则蚤鄄
糟澡怎皂援 辕辕 月葬蚤造藻赠 允 粤袁 允藻早藻则 酝 允援 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 遭蚤燥造燥早赠袁 责葬鄄
贼澡燥造燥早赠 葬灶凿 糟燥灶贼则燥造援 哉运院 悦粤月 陨灶贼藻则灶葬贼蚤燥灶葬造袁 宰葬造造蚤灶早枣燥则凿袁
员怨怨圆院 员 原 圆远
咱圆暂 穆玉侠援 葡萄炭疽病的发生与防治援 安徽农学通报袁圆园园缘袁
员员渊源冤院员园远
咱猿暂 阅葬皂皂 哉袁 悦葬灶灶燥灶 孕 云袁 宰燥怎凿藻灶遭藻则早 允 匀 悦援 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂
遭燥灶蚤灶藻灶泽藻 泽责藻糟蚤藻泽 糟燥皂责造藻曾援 杂贼怎凿蚤藻泽 蚤灶 酝赠糟燥造燥早赠袁 圆园员圆袁 苑猿
渊员冤院 员 原 猿远
咱源暂 宰澡葬则贼燥灶 孕 杂袁 阅蚤伢早怎藻扎鄄哉则蚤遭藻燥灶凿燥 允援 栽澡藻 遭蚤燥造燥早赠 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤鄄
糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂援 粤灶葬造藻泽 凿藻造 允葬则凿蚤灶 月燥贼葬灶蚤糟燥 凿藻 酝葬凿则蚤凿袁 圆园园源袁
远员渊员冤院 猿 原 圆圆
咱缘暂 杂燥怎贼澡憎燥则贼澡 耘 粤援 砸蚤责藻 则燥贼 燥枣 早则葬责藻泽 葬灶凿 葬责责造藻泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 酝赠鄄
糟燥造燥早赠袁 员愿怨员袁 远渊源冤院 员远源 原 员苑猿
咱远暂 酝藻造噪泽澡葬皂 运 允袁 宰藻糟噪藻则贼 酝 粤袁 杂贼藻藻造 悦 悦援 粤灶 怎灶怎泽怎葬造 遭怎灶糟澡 则燥贼
燥枣 早则葬责藻泽 蚤灶 泽怎遭鄄贼则燥责蚤糟葬造 则藻早蚤燥灶泽 燥枣 粤怎泽贼则葬造蚤葬 糟葬怎泽藻凿 遭赠 悦燥造造藻贼燥鄄
贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂援 粤怎泽贼则葬造葬泽蚤葬灶 孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠袁 圆园园圆袁 猿员渊圆冤院
员怨猿 原 员怨源
咱苑暂 再葬皂葬皂燥贼燥 允袁 杂葬贼燥 栽袁 栽燥皂蚤燥噪葬 运援 韵糟糟怎则则藻灶糟藻 燥枣 则蚤责藻 则燥贼 燥枣
早则葬责藻泽 渊 灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬 蕴援 冤 糟葬怎泽藻凿 遭赠 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂
杂蚤皂皂燥灶凿泽 藻曾 杂蚤皂皂燥灶凿泽援 粤灶灶葬造泽 燥枣 孕澡赠贼燥责葬贼澡燥造燥早蚤糟葬造 杂燥糟蚤藻贼赠 燥枣
允葬责葬灶袁 员怨怨怨袁 远缘渊员冤院 愿猿 原 愿远
咱愿暂 阅葬赠噪蚤灶 酝 耘袁 酝蚤造澡燥造造葬灶凿 砸 阅援 陨灶枣藻糟贼蚤燥灶 燥枣 遭造怎藻遭藻则则赠 枣则怎蚤贼 遭赠
悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻袁 员怨愿源袁 远愿渊员员冤院
怨源愿 原 怨缘园
咱怨暂 运怎皂皂怎葬灶早 晕袁 杂皂蚤贼澡 月 允袁 阅蚤藻澡造 杂 灾袁 藻贼 葬造援 酝怎泽糟葬凿蚤灶藻 早则葬责藻
遭藻则则赠 则燥贼 凿蚤泽藻葬泽藻泽 蚤灶 酝蚤泽泽蚤泽泽蚤责责蚤院 凿蚤泽藻葬泽藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 蚤灶糟蚤鄄
凿藻灶糟藻援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻援 员怨怨远袁 愿园渊猿冤院 圆猿愿 原 圆源猿
咱员园暂 雷百战袁 李国英援 新疆葡萄炭疽病病原的鉴定及其生物学
特性的研究援石河子大学学报袁圆园园源袁圆圆 渊源冤院圆怨愿 原 猿园园
咱员员暂 李洋袁刘长远袁陈秀蓉袁等援 辽宁省葡萄炭疽菌鉴定及对多
菌灵敏感性研究援 植物保护袁圆园园怨袁猿缘 渊源冤院苑源 原 苑苑
咱员圆暂 悦葬蚤 蕴袁 匀赠凿藻 运 阅袁 栽葬赠造燥则 孕 宰 允袁 藻贼 葬造援 粤 责燥造赠责澡葬泽蚤糟 葬责鄄
责则燥葬糟澡 枣燥则 泽贼怎凿赠蚤灶早 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂援 云怎灶早葬造 阅蚤增藻则泽蚤贼赠袁 圆园园怨袁
猿怨院 员愿猿 原 圆园源
咱员猿暂 杂则藻藻灶蚤增葬泽葬责则葬泽葬凿 杂袁 酝蚤造造泽 孕 砸袁 酝藻藻澡葬灶 月 酝袁 藻贼 葬造援 孕澡赠造燥早藻鄄
灶赠 葬灶凿 泽赠泽贼藻皂葬贼蚤糟泽 燥枣 员愿 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽责藻糟蚤藻泽 遭葬泽藻凿 燥灶 则蚤鄄
遭燥泽燥皂葬造 阅晕粤 泽责葬糟藻则 泽藻择怎藻灶糟藻泽援 郧藻灶燥皂藻袁 员怨怨远袁 猿怨 渊猿冤院
源怨怨 原 缘员圆
咱员源暂 孕藻则藻泽 晕 粤 砸袁 杂燥怎扎葬 晕 蕴袁 在蚤贼噪燥 杂 耘袁 藻贼 葬造援 粤糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 遭藻灶燥鄄
皂赠造 枣燥则 糟燥灶贼则燥造 燥枣 责燥泽贼遭造燥燥皂 枣则怎蚤贼 凿则燥责 燥枣 糟蚤贼则怎泽 糟葬怎泽藻凿 遭赠 悦燥造鄄
造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻袁 圆园园圆袁 愿远渊远冤院 远圆园 原 远圆源
咱员缘暂 宰澡蚤贼藻造葬憎鄄宰藻糟噪藻则贼 酝 粤袁 悦怎则贼蚤灶 杂 允袁 匀怎葬灶早 砸袁 藻贼 葬造援 孕澡赠造燥早藻鄄
灶藻贼蚤糟 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 葬灶凿 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂
蚤泽燥造葬贼藻泽 枣则燥皂 早则葬责藻 蚤灶 泽怎遭贼则燥责蚤糟葬造 粤怎泽贼则葬造蚤葬援 孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠袁
圆园园苑袁 缘远渊猿冤院 源源愿 原 源远猿
咱员远暂 悦澡燥蚤 再 宰袁 匀赠凿藻 运 阅袁 匀燥 宰 匀援 杂蚤灶早造藻 泽责燥则藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 枣怎灶鄄
早蚤援 云怎灶早葬造 阅蚤增藻则泽蚤贼赠袁 员怨怨怨袁 猿院 圆怨 原 猿愿
咱员苑暂 酝糟郧葬则增藻赠 孕袁 运葬责藻则 允 酝援 粤 泽蚤皂责造藻 葬灶凿 则葬责蚤凿 皂藻贼澡燥凿 枣燥则
泽糟则藻藻灶蚤灶早 贼则葬灶泽早藻灶蚤糟 责造葬灶贼泽 怎泽蚤灶早 贼澡藻 孕悦砸援 月蚤燥贼藻糟澡灶蚤择怎藻泽袁
员怨怨员袁 员员渊源冤院 源圆愿 原 源猿园袁 源猿圆
咱员愿暂 酝蚤造造泽 孕 砸袁 杂则藻藻灶蚤增葬泽葬责则葬泽葬凿 杂袁 月则燥憎灶 粤 耘援 阅藻贼藻糟贼蚤燥灶 葬灶凿 凿蚤枣鄄
枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 蚤泽燥造葬贼藻泽 怎泽蚤灶早 孕悦砸援
云耘酝杂 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠 蕴藻贼贼藻则泽袁 员怨怨圆袁 怨愿渊员 辕 猿冤院 员猿苑 原 员源猿
咱员怨暂 杂则藻藻灶蚤增葬泽葬责则葬泽葬凿 杂袁 杂澡葬则葬凿葬 运袁 月则燥憎灶 粤 耘袁 藻贼 葬造援 孕悦砸鄄
遭葬泽藻凿 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂 燥灶 泽贼则葬憎遭藻则则赠援
孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠袁 员怨怨远袁 源缘渊源冤院 远缘园 原 远缘缘
咱圆园暂 匝怎蚤则燥早葬 耘 晕袁 杂葬皂责蚤藻贼则燥 粤 砸袁 灾葬贼贼怎燥灶藻 酝 粤援 杂糟则藻藻灶蚤灶早 葬灶贼蚤鄄
枣怎灶早葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 泽藻造藻糟贼藻凿 皂藻凿蚤糟蚤灶葬造 责造葬灶贼泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 耘贼澡灶燥鄄
责澡葬则皂葬糟燥造燥早赠袁 圆园园员袁 苑源渊员冤院 愿怨 原 怨远
咱圆员暂 孕藻则藻泽 晕 粤 砸袁 杂燥怎扎葬 晕 蕴袁 孕藻藻增藻则 栽 蕴袁 藻贼 葬造援 月藻灶燥皂赠造 泽藻灶泽蚤鄄
贼蚤增蚤贼赠 燥枣 蚤泽燥造葬贼藻泽 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 葬糟怎贼葬贼怎皂 葬灶凿 悦援 早造燥藻燥泽责燥则蚤鄄
燥蚤凿藻泽 枣则燥皂 糟蚤贼则怎泽援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻袁 圆园园源袁 愿愿渊圆冤院 员圆缘 原 员猿园
咱圆圆暂 杂怎贼贼燥灶 月 悦援 栽澡藻 悦燥藻造燥皂赠糟藻贼藻泽院 枣怎灶早蚤 蚤皂责藻则枣藻糟贼蚤 憎蚤贼澡 责赠糟灶蚤凿蚤葬
葬糟藻则增怎造蚤 葬灶凿 泽贼则燥皂葬贼葬援 运藻憎袁 杂怎则则藻赠院 悦燥皂皂燥灶憎藻葬造贼澡 酝赠糟燥造燥早蚤鄄
糟葬造 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻袁 员怨愿园
咱圆猿暂 粤遭葬灶早 酝 酝袁 宰蚤灶贼藻则 杂袁 郧则藻藻灶 运 砸袁 藻贼 葬造援 酝燥造藻糟怎造葬则 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤鄄
糟葬贼蚤燥灶 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 早造燥藻燥泽责燥则蚤燥蚤凿藻泽 糟葬怎泽蚤灶早 赠葬皂 葬灶贼澡则葬糟鄄
灶燥泽藻 蚤灶 晕蚤早藻则蚤葬援 孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠袁 圆园园圆袁 缘员渊员冤院 远猿 原 苑员
咱圆源暂 匀燥灶早 杂 运袁 运蚤皂 宰 郧袁 再怎灶 匀 运袁 藻贼 葬造援 酝燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 增葬则蚤葬鄄
贼蚤燥灶泽袁 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂 泽责藻鄄
糟蚤藻泽 糟葬怎泽蚤灶早 早则葬责藻 则蚤责藻 则燥贼 蚤灶 运燥则藻葬援 栽澡藻 孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠 允燥怎则鄄
灶葬造袁 圆园园愿袁 圆源渊猿冤院 圆远怨 原 圆苑愿
咱圆缘暂 杂怎 再 再袁 晕燥蚤则藻怎灶早 孕袁 蕴蚤怎 云袁 藻贼 葬造援 耘责蚤贼赠责蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 悦燥造造藻贼燥鄄
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