全 文 ：书犇犗犐：１０．１１６８６／犮狔狓犫２０１５０２２ 犺狋狋狆：／／犮狔狓犫．犾狕狌．犲犱狌．犮狀
杨宏波，刘红，占今舜，林淼，赵国琦．不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃发酵参数和微生物的影响．草业学报，２０１５，２４（１２）：１３１１３８．
ＹＡＮＧＨｏｎｇＢｏ，ＬＩＵ Ｈｏｎｇ，ＺＨＡＮＪｉｎＳｈｕｎ，ＬＩＮ Ｍｉａｏ，ＺＨＡＯＧｕｏＱｉ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｅｔｐｅｌｅｔｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｒｏｕｇｈａｇｅｒａｔｉｏｓｏｎ
ｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍａｂｕｎｄａｎｃｅｉｎｗｅａｎｅｄｂｕｌｃａｌｖｅｓ．ＡｃｔａＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｅＳｉｎｉｃａ，２０１５，２４（１２）：１３１１３８．
不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃
发酵参数和微生物的影响
杨宏波，刘红，占今舜，林淼，赵国琦
（扬州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州２２５００９）
摘要：本试验旨在研究不同精粗比颗粒饲料对中国荷斯坦断奶公犊牛瘤胃微生物蛋白、发酵参数和微生物数量的
影响。选用１２头３月龄大的中国荷斯坦断奶公犊牛，按照日龄相近（１０３．９２±１．５ｄ）、体重相似（１２１．２５±４．１２
ｋｇ）的原则随机分成４组，每组３头，分别饲喂精粗比为７５∶２５（Ⅰ）、７０∶３０（Ⅱ）、６５∶３５（Ⅲ）、６０∶４０（Ⅳ）的４种
全价颗粒饲料。预试期１４ｄ，正试期５６ｄ。测定犊牛瘤胃微生物蛋白、发酵参数和微生物数量。结果表明，处理组
Ⅳ的总挥发性脂肪酸和乙酸浓度最低，且显著低于处理组Ⅰ（犘＜０．０５）；处理组Ⅳ的丁酸浓度最高，且显著高于处
理组Ⅰ、Ⅲ（犘＜０．０５）；处理组Ⅲ的乙酸／丙酸最大，且显著大于处理组Ⅳ（犘＜０．０５）。处理组Ⅳ的白色瘤胃球菌、溶
纤维丁酸弧菌和真菌的相对表达量最高，且显著高于其他各处理组（犘＜０．０５）；处理组Ⅲ的黄色瘤胃球菌的相对表
达量最高，且显著高于其他各处理组（犘＜０．０５）。综上所述，高精料全价颗粒饲料虽然能提高犊牛瘤胃总挥发性脂
肪酸和乙酸的水平，但会抑制瘤胃纤维降解菌和厌氧真菌的生长。
关键词：颗粒饲料；微生物蛋白；瘤胃发酵；瘤胃微生物；犊牛　　
犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犲狋狆犲犾犲狋狊狑犻狋犺犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狉狅狌犵犺犪犵犲狉犪狋犻狅狊狅狀狉狌犿犲狀犳犲狉犿犲狀狋犪
狋犻狅狀狆犪狉犪犿犲狋犲狉狊犪狀犱犿犻犮狉狅狅狉犵犪狀犻狊犿犪犫狌狀犱犪狀犮犲犻狀狑犲犪狀犲犱犫狌犾犮犪犾狏犲狊
ＹＡＮＧＨｏｎｇＢｏ，ＬＩＵＨｏｎｇ，ＺＨＡＮＪｉｎＳｈｕｎ，ＬＩＮＭｉａｏ，ＺＨＡＯＧｕｏＱｉ
犆狅犾犾犲犵犲狅犳犃狀犻犿犪犾犛犮犻犲狀犮犲犪狀犱犜犲犮犺狀狅犾狅犵狔，犢犪狀犵狕犺狅狌犝狀犻狏犲狉狊犻狋狔，犢犪狀犵狕犺狅狌２２５００９，犆犺犻狀犪
犃犫狊狋狉犪犮狋：Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｅｔｐｅｌｅｔｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｒｏｕｇｈａｇｅ
ｒａｔｉｏｓｏｎｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｔｅｉｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍａｂｕｎｄａｎｃｅｉｎｗｅａｎｅｄｂｕｌｃａｌｖｅｓ．
Ａｔｏｔａｌｏｆ１２ｈｅａｌｔｈｙ，ｗｅａｎｅｄＨｏｌｓｔｅｉｎｂｕｌｃａｌｖｅｓ（ａｇｅ＝１０３．９２±１．５ｄ；ｗｅｉｇｈｔ＝１２１．２５±４．１２ｋｇ）ｗｅｒｅｒａｎ
ｄｏｍｌｙａｓｓｉｇｎｅｄｔｏ４ｇｒｏｕｐｓ（Ⅰ，Ⅱ，ⅢａｎｄⅣ），ｗｉｔｈ３ｃａｌｖｅｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｄｉｅｔｓｗｅｒｅｃｏｍ
ｐｌｅｔｅｄｉｅｔｐｅｌｅｔｓｗｉｔｈｆｏｕｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｒｏｕｇｈａｇｅｒａｔｉｏｓ（７５∶２５，Ⅰ；７０∶３０，Ⅱ；６５∶３５，Ⅲ；６０∶４０，Ⅳ）．
Ｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｒａｎｆｏｒ７０ｄａｙｓｉｎｔｏｔａｌ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ１４ｄｆｏｒａｄａｐｔａｔｉｏｎａｎｄ５６ｄｆｏｒｔｈｅｔｒｉａｌｉｔｓｅｌｆ．Ｒｕｍｅｎｍｉ
ｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｔｅｉｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄｍｉｃｒｏｂｉａｌａｂｕｎｄａｎｃｅｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｏｔａｌ
ｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄｓ（ＶＦＡ）ａｎｄａｃｅｔａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｇｒｏｕｐⅣ ｗｅｒｅｔｈｅｌｏｗｅｓｔ，ａｎｄｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｌｏｗｅｒ
ｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎｇｒｏｕｐⅠ（犘＜０．０５）．ＴｈｅｂｕｔｙｒａｔｅｌｅｖｅｌｏｆｇｒｏｕｐⅣ ｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｇｒｏｕｐｓⅠａｎｄⅢ
（犘＜０．０５）．ＧｒｏｕｐⅢｈａｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔＡ∶Ｐ，ｗｈｉｃｈｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｇｒｅａｔｅｒｔｈａｎｇｒｏｕｐⅣ（犘＜０．０５）．Ｔｈｅ
ｒｅｌａｔｉｖｅａｂｕｎｄａｎｃｅｏｆ犚狌犿犻狀狅犮狅犮犮狌狊犪犾犫狌狊，犅狌狋狔狉犻狏犻犫狉犻狅犳犻犫狉犻狊狅犾狏犲狀狊ａｎｄｇｅｎｅｒａｌｆｕｎｇｉｉｎｇｒｏｕｐⅣ ｗａｓｓｉｇｎｉｆｉ
第２４卷　第１２期
Ｖｏｌ．２４，Ｎｏ．１２
草　业　学　报
ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ
２０１５年１２月
Ｄｅｃ，２０１５
收稿日期：２０１５０１１３；改回日期：２０１５０３３０
基金项目：江苏省科技支撑项目（ＢＥ２０１３３８７）和江苏省高校优势学科建设工程项目资助。
作者简介：杨宏波（１９８８），男，内蒙古包头人，硕士。Ｅｍａｉｌ：ｙａｎｇｈｏｎｇｂｏ３３３＠ｏｕｔｌｏｏｋ．ｃｏｍ
通信作者Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．Ｅｍａｉｌ：ｊｓｚｈａｏｇｕｏｑｉ＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
ｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｅｏｔｈｅｒｔｈｒｅｅｇｒｏｕｐｓ（犘＜０．０５）．犚狌犿犻狀狅犮狅犮犮狌狊犳犾犪狏犲犳犪犮犻犲狀狊ａｂｕｎｄａｎｃｅｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎ
ｇｒｏｕｐⅢｗｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｏｔｈｅｒｇｒｏｕｐｓ（犘＜０．０５）．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔｒｕｍｅｎｔｏｔａｌＶＦＡａｎｄａｃｅ
ｔａｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｃａｎｂｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｇｒｏｕｐｓ，ｗｈｉｌｅｉｔｗｉｌｉｎｈｉｂｉｔｇｒｏｗｔｈｏｆｔｈｅｆｉｂｒｅａｄｈｅｒｅｎｔ
ｒｕｍｅｎｂａｃｔｅｒｉａａｎｄａｎａｅｒｏｂｉｃｆｕｎｇｉ．
犓犲狔狑狅狉犱狊：ｐｅｌｅｔｆｅｅｄ；ｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｔｅｉｎ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ；ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ；ｃａｌｖｅｓ
断奶后３～６月龄是犊牛生长发育最强烈的时期，犊牛不仅体重逐渐增加，同时消化器官也在快速发育，各种
代谢特征发生变化。因此，这时期的犊牛日粮极为重要，不同精粗比和结构的日粮对犊牛的发育及瘤胃内环境都
会产生不同的影响。
瘤胃是反刍动物最主要的消化器官之一，成年动物主要靠瘤胃中纤毛虫、细菌和真菌等微生物作用，产生挥
发性脂肪酸并合成微生物蛋白，为机体提供能量和蛋白质。瘤胃微生物与动物形成了相互依赖又互相制约的关
系，微生物可以帮助动物降解粗饲料，从而为宿主的生长提供能量和营养物质，同时动物也为微生物的生存提供
了充足的养分和适宜的环境。
目前对颗粒饲料的研究主要集中在颗粒精料对肉牛［１３］、奶牛［４６］和家禽［７９］的生产性能及饲料转化率上。然
而，研究利用苜蓿（犕犲犱犻犮犪犵狅狊犪狋犻狏犪）和小黑麦（犔狅犾犻狌犿犿狌犾狋犻犳犾狅狉狌犿）草粉作为原料制成颗粒饲料对断奶犊牛瘤
胃发酵参数和微生物影响的报道很少［１０１６］。因此，研究不同精粗比颗粒饲料对犊牛瘤胃内环境和微生物的影响，
对颗粒饲料的运用及推广是非常重要的。本试验旨在研究不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃发酵参数和微生
物数量的影响，探求不同精粗比颗粒饲料影响断奶犊牛瘤胃微生物和瘤胃发酵的机理，并制定合理的断奶犊牛日
粮，为科学培育优良青年牛提供一定的参考依据。
１　材料与方法
１．１　试验日粮
根据ＮＲＣ（２００１）营养需要配制各试验组犊牛配
方。试验组Ⅰ、试验组Ⅱ、试验组Ⅲ和试验组Ⅳ分别饲
喂精料与粗料质量比为７５∶２５，７０∶３０，６５∶３５和
６０∶４０的颗粒饲料（以上各数值均按照风干样重量计
算）。４种试验日粮中粗蛋白、粗脂肪和常量元素等指
标一致，能量相近，粗料按照苜蓿和小黑麦３∶１组成。
所有原料经粉碎后在扬州大学农牧场采用２０型颗粒
饲料机组制成。各试验组颗粒料的配方见表１［１０］，营
养成分见表２。
１．２　试验设计及饲养管理
试验于２０１４年３月至２０１４年５月在扬州大学实
验农牧场进行。选择日龄相近（１０３．９２±１．５）ｄ、平均
体重为 （１２１．２５±４．１２）ｋｇ的中国荷斯坦断奶公犊牛
１２头，分为４组，每组３头，颗粒饲料每天于８：３０，
１４：３０，２０：３０饲喂３次，预试期１４ｄ，正试期５６ｄ。根
据３～６月龄犊牛采食量确定各试验组的饲喂量，平均
每周调整１次饲喂量，并保证每组犊牛的干物质采食
量基本一致。试验期每组犊牛分栏饲养，自由饮水，保
证犊牛每天有６～７ｈ户外活动时间，每日清晨犊牛饲
喂后打扫圈舍，并且每周至少对牛舍消毒２次。
表１　各试验组颗粒料配方组成（干物质基础）
犜犪犫犾犲１　犘犲犾犲狋犱犻犲狋犮狅犿狆狅狊犻狋犻狅狀狅犳犲犪犮犺
犵狉狅狌狆（犇犕犫犪狊犻狊） ％
原料Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
玉米Ｃｏｒｎ ３５．４２ ３４．５０ ３２．３９ ３０．９５
豆粕Ｓｏｙｂｅａｎｍｅａｌ １２．００ １１．５０ １１．２８ １１．００
ＤＤＧＳ ３．４０ ５．０２ ４．８０ ５．００
麸皮 ＷｈｅａｔＭｉｌＢｒａｎ ２１．００ １６．００ １３．５０ ９．９６
苜蓿Ａｌｆａｌｆａ １８．７５ ２２．５０ ２６．２５ ３０．００
小黑麦Ｔｒｉｔｉｃａｌｅ ６．２５ ７．５０ ８．７５ １０．００
食盐 ＮａＣｌ ０ ０．０７ ０．０９ ０．２４
磷酸氢钙ＣａＨＰＯ４ ０ ０．１７ ０．１７ ０．２８
碳酸钙ＣａＣＯ３ ０．４０ ０．０３ ０．０３ ０
小苏打ＮａＨＣＯ３ ０．２５ ０．１９ ０．２２ ０．０５
蛋氨酸 Ｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ ０．０３ ０．０２ ０．０２ ０．０２
预混料Ｐｒｅｍｉｘｅｒ ２．５０ ２．５０ ２．５０ ２．５０
合计 Ｔｏｔａｌ １００ １００ １００ １００
　预混料为每ｋｇ日粮提供：铁９０ｍｇ、铜１２．５ｍｇ、锰６０ｍｇ、锌１００
ｍｇ、碘１．５ｍｇ、硒０．３ｍｇ、钴１．０ｍｇ、维生素 Ａ１５０００ＩＵ、维生素Ｄ
５０００ＩＵ、维生素Ｅ５０ｍｇ。
　Ｐｒｅｍｉｘｐｒｏｖｉｄｅｄｔｈｅｆｏｌｏｗｉｎｇｐｅｒｋｉｌｏｇｒａｍｏｆｔｈｅｄｉｅｔ：Ｆｅ９０ｍｇ，
Ｃｕ１２．５ｍｇ，Ｍｎ６０ｍｇ，Ｚｎ１００ｍｇ，Ｉ１．５ｍｇ，Ｓｅ０．３ｍｇ，Ｃｏ１．０
ｍｇ，ＶＡ１５０００ＩＵ，ＶＤ５０００ＩＵ，ＶＥ５０ｍｇ．
２３１ 草　业　学　报 第２４卷
１．３　瘤胃液样品的采集与处理
正式实验后每２周最后１ｄ，在晨饲后４ｈ通过口
腔采液器（武汉科立博有限公司）从瘤胃不同位点采集
５０ｍＬ瘤胃液样（之前的唾液舍弃），立即测定其ｐＨ，
经４层纱布过滤摇匀后，分装于１０ｍＬ的离心管
中［１１］。
１份加入０．５ｍｏｌＨＣｌ保存于－２０℃冰箱中，待
测氨态氮（ＮＨ３Ｎ）含量；１份添加２５％偏磷酸，于
－２０℃冰箱中用于挥发性脂肪酸（ｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄ，
ＶＦＡ）浓度测定；１份混合１２．５％三氯乙酸（ｔｒｉｃｈｌｏｒｏ
ａｃｅｔｉｃａｃｉｄ，ＴＣＡ）用于瘤胃微生物蛋白（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＭＣＰ）合成分析；另一部分于－８０℃超
低温冰箱中保存，用于瘤胃液细菌定量分析，待测细菌
包括黄色瘤胃球菌（犚狌犿犻狀狅犮狅犮犮狌狊犳犾犪狏犲犳犪犮犻犲狀狊，ＲＦ）、
白色瘤胃球菌（犚狌犿犻狀狅犮狅犮犮狌狊犪犾犫狌狊，ＲＡ）、溶纤维丁
酸弧菌（犅狌狋狔狉犻狏犻犫狉犻狅犳犻犫狉犻狊狅犾狏犲狀狊，ＢＦ）、栖瘤胃普雷
沃氏菌（犘狉犲狏狅狋犲犾犾犪狉狌犿犻狀犻犮狅犾犪，ＰＲ）和真菌（ｇｅｎｅｒａｌ
ｆｕｎｇｉ）。
１．３．１　瘤胃液发酵指标及瘤胃 ＭＣＰ合成测定方法
　　氨态氮浓度测定采用苯酚－次氯酸钠比色法［１２］，
表２　各试验组日粮配方的营养水平
犜犪犫犾犲２　犖狌狋狉犻狋犻狅狀犾犲狏犲犾狅犳犲犪犮犺犵狉狅狌狆
营养水平Ｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌｓ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
精粗质量比Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ
ｒｏｕｇｈａｇｅｒａｔｉｏ
７５∶２５ ７０∶３０ ６５∶３５ ６０∶４０
干物质 ＤＭ （％） ８４．５０ ８４．８９ ８５．０５ ８５．２０
粗灰分 Ａｓｈ（％） ４．２２ ４．２２ ４．３１ ４．３５
粗蛋白质ＣＰ（％） １７．６１ １７．５４ １７．３６ １７．４２
粗脂肪ＥＥ（％） ３．６７ ３．７１ ３．５８ ３．５０
中性洗涤纤维 ＮＤＦ（％） ２８．９４ ３１．５４ ３４．７２ ３７．６８
酸性洗涤纤维 ＡＤＦ（％） １３．３８ １４．３１ １５．４１ １６．６２
钙Ｃａ（％） ０．５８ ０．５８ ０．５８ ０．５８
磷Ｐ（％） ０．４０ ０．４０ ０．４０ ０．４０
赖氨酸Ｌｙｓ（％） ０．７３ ０．７３ ０．７３ ０．７３
蛋氨酸 Ｍｅｔ（％） ０．２６ ０．２６ ０．２６ ０．２６
能量 ＮＥＬ（ＭＪ／ｋｇ） ６．４９ ６．３６ ６．３６ ６．３２
　营养水平除能量、钙、磷、赖氨酸和蛋氨酸外均为实测值。ＮＥＬ、Ｃａ、
Ｐ、ＬｙｓａｎｄＭｅｔｗａｓａｃａｌｃｕｌａｔｅｄｖａｌｕｅ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｏｔｈｅｒｓｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ
ｖａｌｕｅｓ．ＤＭ：Ｄｒｙｍａｔｔｅｒ；Ａｓｈ：Ｃｒｕｄｅａｓｈ；ＣＰ：Ｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎ；ＥＥ：
Ｃｒｕｄｅｆａｔ；ＮＤＦ：Ｎｅｕｔｒａｌｄｅｔｅｒｇｅｎｔｆｉｂｅｒ；ＡＤＦ：Ａｃｉｄｄｅｔｅｒｇｅｎｔｆｉｂｅｒ．
瘤胃 ＭＣＰ浓度参照凯氏微量定氮法进行测定［１３］，ＶＦＡ含量按照Ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎ［１４］所述方法用气相色谱测定。
１．３．２　瘤胃液微生物总ＤＮＡ的提取与检验　　瘤胃液样品于冰上溶解后振摇３０次以混合均匀，取２００μＬ瘤
胃液样品，采用粪便基因组提取试剂盒提取瘤胃液微生物总ＤＮＡ（Ｔｉａｎｇｅｎ生物科技有限公司），提取方法参照
试剂盒说明书。用超微量分光光度计（ＮａｎｏＤｒｏｐ１０００，美国赛默飞世尔科技公司）检测总ＤＮＡ的浓度和纯度
（ＯＤ２６０／２８０和ＯＤ２６０／２３０），用琼脂糖凝胶电泳法检测ＤＮＡ的质量。然后将总ＤＮＡ于－２０℃冰箱中保存备用。
表３　荧光定量犘犆犚引物
犜犪犫犾犲３　犘狉犻犿犲狉狊狌狊犲犱犳狅狉狉犲犪犾狋犻犿犲犘犆犚狇狌犪狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀
基因名称Ｇｅｎｅｎａｍｅ 上、下游引物Ｆｏｒｗａｒｄ／ｒｅｖｅｒｓｅｐｒｉｍｅｒ 序列Ｓｅｑｕｅｎｃｅ（５′－３′） 大小Ｓｉｚｅ（ｂｐ） 来源Ｓｏｕｒｃｅ
总细菌 ＧｅｎＢａｃＦ ＣＧＧＣＡＡＣＧＡＧＣＧＣＡＡＣＣＣ １３０ ［１５］
Ｇｅｎｅｒａｌｂａｃｔｅｒｉａ ＧｅｎＢａｃＲ ＣＣＡＴＴＧＴＡＧＣＡＣＧＴＧＴＧＴＡＧＣＣ
黄色瘤胃球菌 ＲｕｍＦｌａ１Ｆ ＣＧＡＡＣＧＧＡＧＡＴＡＡＴＴＴＧＡＧＴＴＴＡＣＴＴＡＧＧ １３２ ［１５］
犚狌犿犻狀狅犮狅犮犮狌狊犳犾犪狏犲犳犪犮犻犲狀狊 ＲｕｍＦｌａ１Ｒ ＣＧＧＴＣＴＣＴＧＴＡＴＧＴＴＡＴＧＡＧＧＴＡＴＴＡＣＣ
白色瘤胃球菌 ＲｕｍＡｌｂ１Ｆ ＣＣＣＴＡＡＡＡＧＣＡＧＴＣＴＴＡＧＴＴＣＧ １７６ ［１７］
犚狌犿犻狀狅犮狅犮犮狌狊犪犾犫狌狊 ＲｕｍＡｌｂ１Ｒ ＣＣＴＣＣＴＴＧＣＧＧＴＴＡＧＡＡＣＡ
溶纤维丁酸弧菌 ＢｕｔＦｉｂ２Ｆ ＡＣＣＧＣＡＴＡＡＧＣＧＣＡＣＧＧＡ ６５ ［１８］
犅狌狋狔狉犻狏犻犫狉犻狅犳犻犫狉犻狊狅犾狏犲狀狊 ＢｕｔＦｉｂ２Ｒ ＣＧＧＧＴＣＣＡＴＣＴＴＧＴＡＣＣＧＡＴＡＡＡＴ
栖瘤胃普雷沃氏菌 ＰｒｅＲｕｍ９２８６２Ｆ ＧＣＧＡＡＡＧＴＣＧＧＡＴＴＡＡＴＧＣＴＣＴＡＴＧ ７８ ［１９］
犘狉犲狏狅狋犲犾犾犪狉狌犿犻狀犻犮狅犾犪 ＰｒｅＲｕｍ９２８６２Ｒ ＣＣＣＡＴＣＣＴＡＴＡＧＣＧＧＴＡＡＡＣＣＴＴＴＧ
真菌 ＧＡＧＧＡＡＧＴＡＡＡＡＧＴＣＧＴＡＡＣＡＡＧＧＴＴＴＣ １２０ ［１５］
Ｇｅｎｅｒａｌｆｕｎｇｉ ＣＡＡＡＴＴＣＡＣＡＡＡＧＧＧＴＡＧＧＡＴＧＡＴＴ
　引物设计是基于细菌的１６ＳｒＲＮＡ基因。Ｐｒｉｍｅｒｓｗｅｒｅｂａｓｅｄｏｎ１６ＳｒＲＮＡｇｅｎｅｓｆｏｒｂａｃｔｅｒｉａｌｇｒｏｕｐｓ．
３３１第１２期 杨宏波　等：不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃发酵参数和微生物的影响
１．３．３　引物设计与合成　　引物参照文献设计，由
Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司合成，具体引物序列见表３。
１．３．４　瘤胃细菌定量方法　　本试验采用相对定量
法［１５］对瘤胃液中部分微生物进行定量。
荧光定量ＰＣＲ分析采用罗氏ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ９６和
序列检测软件（Ｖｅｒｓｉｏｎ１．１）进行。每个样品３个重
复，ＰＣＲ扩增采用２０μＬ反应体系，体系组成如表４
所示。
ＰＣＲ扩增反应程序为：１）９５℃ 预变性３０ｓ；２）
９５℃变性５ｓ，６０℃退火／延伸２０ｓ并采集荧光信号，
共４０个循环；３）溶解曲线分析，以２０℃／ｓ的速度从
表４　荧光定量犘犆犚扩增体系
犜犪犫犾犲４　犚犲犪犾狋犻犿犲犘犆犚狉犲犪犮狋犻狅狀狊狔狊狋犲犿
试剂Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ 使用量Ｖｏｌｕｍｅ（μＬ）
ＳＹＢＲ?ＰｒｅｍｉｘＥｘＴａｑⅡ（ＴｌｉＲＮａｓｅＨＰｌｕｓ）
（２×）（ＴａＫａＲａ，Ｓｈｉｇａ，Ｊａｐａｎ）
１０．０
ＰＣＲ正向引物ＦｏｒｗａｒｄＰｒｉｍｅｒ（１０μｍｏｌ／Ｌ） ０．８
ＰＣＲ反向引物ＲｅｖｅｒｓｅＰｒｉｍｅｒ（１０μｍｏｌ／Ｌ） ０．８
ＤＮＡ模板Ｔｅｍｐｌａｔｅ（＜１００ｎｇ）２ ２．０
ｄＨ２Ｏ（灭菌蒸馏水Ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄｄｉｓｔｉｌｅｄｗａｔｅｒ） ６．４
总计Ｔｏｔａｌ ２０．０
９５℃降至６５℃，再以２０℃／ｓ的速度缓慢加热至９５℃，在９５℃保持０ｓ，在６５℃保持１５ｓ，结束时４℃保存。
１．３．５　目的基因相对定量的计算　　目的基因相对定量用２－ΔΔ犆狋法计算，以瘤胃液总细菌（ｇｅｎｅｒａｌｂａｃｔｅｒｉａ，
ＧＢ）ＤＮＡ作为内参基因，用对照组的基因进行校正［１６］。荧光定量ＰＣＲ基因相对表达量表示成目的基因相对于
ＧＢ的倍数。Δ犆狋值表示某样品目的基因临界循环数（犆狋）与内参基因犆狋值的差值，而ΔΔ犆狋值表示试验组样品
平均Δ犆狋与对照组平均Δ犆狋的差值。结果以平均倍数±标准误表示。
１．４　数据处理与统计分析
采用ＳＰＳＳ软件进行单因素方差分析，采用Ｄｕｎｃａｎ氏法进行差异显著者多重比较，以犘＜０．０５作为差异显
著的判断标准，试验结果以平均值±标准误表示。
２　结果与分析
２．１　不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃 ＭＣＰ浓度的影响
由表５可知，不同精粗比颗粒饲料对各处理组瘤胃 ＭＣＰ浓度均无显著影响（犘＞０．０５）。
表５　不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃微生物蛋白浓度的影响
犜犪犫犾犲５　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犲狋狆犲犾犲狋狊狑犻狋犺犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狉狅狌犵犺犪犵犲狉犪狋犻狅狅狀狉狌犿犲狀犿犻犮狉狅犫犻犪犾狆狉狅狋犲犻狀狊（犕犆犘）狅犳狑犲犪狀犲犱犫狌犾犮犪犾狏犲狊
项目Ｉｔｅｍｓ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
微生物蛋白 ＭＣＰ（ｍｇ／ｍＬ） １．６６±０．２０ １．９５±０．２９ １．７２±０．２８ １．６２±０．３３
２．２　不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃发酵参数的影响
由表６可知，处理组Ⅳ的总挥发性脂肪酸和乙酸浓度最低，且显著低于处理组Ⅰ（犘＜０．０５）；处理组Ⅳ的丁
酸浓度最高，且显著高于处理组Ⅰ、Ⅲ（犘＜０．０５）；处理组Ⅲ的乙酸与丙酸比值最大，且显著大于处理组Ⅳ（犘＜
０．０５）。此外，不同精粗比颗粒饲料对各处理组ｐＨ、氨态氮、丙酸、异丁酸、异戊酸和戊酸的浓度无显著影响（犘＞
０．０５）。
２．３　不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃细菌的影响
由表７可知，处理组Ⅳ的白色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌和真菌的相对表达量最高，且显著高于其他各处理
组（犘＜０．０５）；不同精粗比颗粒饲料对各处理组栖瘤胃普雷沃氏菌的数量无显著影响（犘＞０．０５）；此外，处理组Ⅲ
的黄色瘤胃球菌的相对表达量最高，且显著高于其他各处理组（犘＜０．０５）。
３　讨论
３．１　不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃 ＭＣＰ浓度的影响
能量和蛋白质是维持瘤胃微生物代谢最主要的营养来源。其中瘤胃微生物是反刍动物最主要的氮源，它能
４３１ 草　业　学　报 第２４卷
够为反刍动物提供４０％～８０％的蛋白需要量［２０］。然而，ＭＣＰ的高产是以瘤胃内氮源和能量的有效同步为基础
的［２１］。也有研究表明，瘤胃 ＭＣＰ合成量与瘤胃稀释率呈正相关［２２２３］。鲁林等［２４］采用单外流连续培养系统研究
不同精料水平（２０％，８０％）与稀释率对瘤胃 ＭＣＰ合成效率的影响，研究发现提高精料水平和稀释率，均能明显
提高瘤胃微生物氮日产生量与微生物蛋白质的合成效率。本研究中，各处理组瘤胃细菌蛋白合成量无显著差异，
可能与各处理组日粮的能量和蛋白供应基本一致有关。
表６　不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃发酵参数的影响
犜犪犫犾犲６　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犲狋狆犲犾犲狋狊狑犻狋犺犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狉狅狌犵犺犪犵犲狉犪狋犻狅狅狀狉狌犿犲狀
犳犲狉犿犲狀狋犪狋犻狅狀狆犪狉犪犿犲狋犲狉狅犳狑犲犪狀犲犱犫狌犾犮犪犾狏犲狊
项目Ｉｔｅｍｓ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
ｐＨ ６．１７±０．１５ ６．１９±０．１６ ６．２０±０．２３ ６．２１±０．１２
氨态氮ＮＨ３Ｎ（ｍｇ／ｄＬ） １１．９６±０．８５ １０．３５±１．７４ １１．２８±２．３０ １３．５２±４．４５
总挥发性脂肪酸ＴＶＦＡ（ｍｍｏｌ／Ｌ） ７７．８４±５．１４ａ ７４．７０±４．８６ａｂ ７４．８４±４．２３ａｂ ６９．６３±４．４６ｂ
乙酸Ａｃｅｔａｔｅ（Ａ，ｍｍｏｌ／Ｌ） ５４．２３±３．１３ａ ５０．２０±４．６５ａｂ ５２．４８±３．２５ａ ４３．２５±２．４４ｂ
丙酸Ｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ（Ｐ，ｍｍｏｌ／Ｌ） ６．２５±１．５３ ６．０２±０．７９ ５．６９±０．７２ ６．１１±０．４８
异丁酸Ｉｓｏｂｕｔｙｒａｔｅ（ｍｍｏｌ／Ｌ） ４．９１±０．１９ ５．８７±０．５５ ５．３２±０．４３ ６．１１±０．７５
丁酸Ｂｕｔｙｒａｔｅ（ｍｍｏｌ／Ｌ） ４．８７±２．８０ｂ ５．９１±１．３８ａｂ ４．３８±０．７８ｂ ７．８６±１．１０ａ
异戊酸Ｉｓｏｖａｌｅｒａｔｅ（ｍｍｏｌ／Ｌ） ４．６０±０．５５ ４．０６±０．５８ ４．２３±０．６５ ４．０１±０．６１
戊酸Ｖａｌｅｒａｔｅ（ｍｍｏｌ／Ｌ） ２．９８±０．５１ ２．６４±０．２１ ３．０４±０．３８ ２．３０±０．２５
乙酸∶丙酸Ａ∶Ｐ ８．７１±１．１２ａｂ ８．２９±１．３２ａｂ ９．３２±１．７８ａ ７．１６±１．０３ｂ
　注：同行不同小写字母表示差异显著 （犘＜０．０５），下同。
　Ｎｏｔｅ：Ｉｎｔｈｅｓａｍｅｒｏｗ，ｖａｌｕｅｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｓｍｅａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ（犘＜０．０５），ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．
表７　不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃细菌相对表达量的影响
犜犪犫犾犲７　犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犲狋狆犲犾犲狋狊狑犻狋犺犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲狉狅狌犵犺犪犵犲狉犪狋犻狅狅狀狋犺犲狀狅狉犿犪犾犻狕犲犱
狉犪狋犻狅狅犳狉狌犿犲狀犫犪犮狋犲狉犻犪狊狅犳狑犲犪狀犲犱犫狌犾犮犪犾狏犲狊
项目Ｉｔｅｍｓ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
黄色瘤胃球菌犚．犳犾犪狏犲犳犪犮犻犲狀狊 １．００±０．０６ｃ ０．７６±０．０３ｃ ８．１０±０．２４ａ ２．３７±０．１０ｂ
白色瘤胃球菌犚．犪犾犫狌狊 １．００±０．０４ｃ １．０８±０．０４ｃ ２．７１±０．１６ｂ ５．７４±０．１８ａ
溶纤维丁酸弧菌犅．犳犻犫狉犻狊狅犾狏犲狀狊 １．００±０．０５ｃ ０．４５±０．０１ｃ ５．０５±１．４８ｂ ７．８１±１．６４ａ
栖瘤胃普雷沃氏菌犘．狉狌犿犻狀犻犮狅犾犪 １．００±０．０５ ０．８９±０．０３ ０．９３±０．０５ ０．９１±０．０８
真菌Ｇｅｎｅｒａｌｆｕｎｇｉ １．００±０．０６ｃ １．４１±０．３０ｃ ５．８２±０．３２ｂ ８．８９±０．４０ａ
３．２　不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃发酵参数的影响
瘤胃ｐＨ是反映瘤胃微生物代谢平衡状况和瘤胃发酵状况的综合指标之一，影响其最主要的一个因素是与
反刍活动呈正相关的唾液缓冲液的分泌量［２５］。本试验中，各处理组间的瘤胃ｐＨ无显著差异，虽然各处理组颗
粒饲料中粗饲料含量不同，但所有原料经过统一粉碎后制成颗粒，使各组犊牛反刍次数相近而导致进入瘤胃中的
唾液量相同，最终使瘤胃ｐＨ无显著差异。日粮中粗蛋白水平和微生物蛋白质的降解是瘤胃ＮＨ３Ｎ重要的两种
来源［２６］。瘤胃微生物生长所需要的氮主要来源于ＮＨ３Ｎ，它为微生物提供１８％～１００％的氮源［２７］。对微生物
的生长，瘤胃内ＮＨ３Ｎ浓度不宜过高或过低，所以保持最适浓度的 ＮＨ３Ｎ是保证瘤胃 ＭＣＰ产量最重要的条
件。影响瘤胃ＮＨ３Ｎ浓度的主要原因是饲料中粗蛋白的水平以及蛋白质的降解速度。Ｍｉｃｈａｌｓｋｉ等［２８］研究发
现，日粮中非纤维性碳水化合物是限制瘤胃微生物对ＮＨ３Ｎ利用的主要因素，适当提高日粮中非纤维性碳水化
合物的水平，能促进瘤胃微生物对ＮＨ３Ｎ的利用。Ａｇｌｅ等［２９］研究指出，奶牛采食高粗料日粮时会导致瘤胃中
５３１第１２期 杨宏波　等：不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃发酵参数和微生物的影响
氨氮水平的降低，原因是结构性碳水化合物可以降低氨的产量，进而能提高瘤胃微生物对瘤胃中氨的利用率。本
实验各处理组间ＮＨ３Ｎ的浓度无显著差异，原因可能是各组瘤胃 ＭＣＰ合成量相近，微生物对ＮＨ３Ｎ的利用率
相同引起的。此外，各组颗粒饲料中蛋白水平相近也可能是造成瘤胃ＮＨ３Ｎ浓度无显著差异的原因之一。
挥发性脂肪酸能为动物机体提供７０％～８０％的可消化能，是反刍动物赖以生存、保持正常活动的主要能源，
同时它参与各种机体代谢［３０］。瘤胃液ＶＦＡ主要由乙酸、丙酸、丁酸以及少量超过四碳的酸和支链脂肪酸组成。
通常根据乙、丙、丁酸相对比例的高低，将瘤胃发酵类型分为乙酸发酵、丙酸发酵、丁酸发酵３种，一般用乙酸／丙
酸来表示瘤胃发酵类型的变化。有研究表明，日粮精粗比对瘤胃总挥发性脂肪酸（ｔｏｔａｌｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄ，ＴＶ
ＦＡ）的产生影响不大［３１３２］，然而也有研究发现瘤胃ＴＶＦＡ的产量与日粮精粗比和组成有关［３３］。本试验结果表
明，瘤胃ＴＶＦＡ和乙酸的产量随颗粒饲料中精料水平的降低而减少，原因可能是由于高精料组能为微生物提供
更多的可发酵底物而造成的。此外，处理组Ⅳ的乙酸／丙酸与其他处理组相比降低，且丙酸比例与其他处理组相
比有增加的趋势，这说明随着颗粒饲料中粗料水平的升高，犊牛瘤胃的发酵类型会由乙酸发酵型往丙酸发酵型转
变，这是因为增加日粮中精料水平会降低瘤胃中乙酸浓度，苜蓿的含量逐渐升高且动物采食苜蓿比采食其他干草
会产生更多的丙酸［３１］。
３．３　不同精粗比颗粒饲料对断奶犊牛瘤胃细菌的影响
Ｇｒｕｂｂ和Ｄｅｈｏｒｉｔｙ［３４］研究表明，在干物质采食量相同的条件下，随着绵羊日粮中精粗比的增大，其中细菌的
数量会显著升高，而纤维降解菌的数量会降低。Ｌｅｅｄｌｅ和Ｂｒｙａｎｔ［３５］研究发现，给绵羊分别饲喂精粗比为６８∶３２
和２３∶７７的两种日粮，绵羊采食高粗料日粮时，在特异性菌群中纤维分解菌的数量较少，而分解木聚糖和胶质菌
的数量较多，两种日粮中总细菌的数量是没有差异性的。也有报道称［３６３７］，随着日粮精粗比的改变，瘤胃纤维降
解菌的数量不会产生显著性的改变。然而本实验结果表明，瘤胃中黄色瘤胃球菌、白色瘤胃球菌和溶纤维丁酸弧
菌等纤维分解菌的数量随着颗粒饲料中粗饲料水平的升高而显著升高。这与Ｖａｒｅｌ和Ｄｅｈｏｒｉｔｙ［３８］的研究结果一
致。溶纤维丁酸弧菌不仅有降解纤维物质产生ＶＦＡ的功能，而且能吸收乙酸转化成丁酸的作用，因此也可以解
释处理组Ⅳ的乙酸浓度最低而丁酸浓度最高。黄色瘤胃球菌和白色瘤胃球菌是瘤胃中主要的纤维降解菌，能产
生大量的纤维素酶和半纤维素酶，其中主要为木聚糖酶，从而对纤维的降解起着重要的作用。黄色瘤胃球菌发酵
的产物主要为琥珀酸、乙酸和甲酸，还有少量的氢气、乙醇和乳酸，而白色瘤胃球菌几乎不产生琥珀酸，但可以产
生大量的氢气和乙醇。处理组Ⅲ的黄色瘤胃球菌的数量显著高于处理组Ⅳ，这是由于这两种纤维分解菌具有相
互抑制的作用，白色瘤胃球菌可产生细菌素，对黄色瘤胃球菌的生长产生抑制作用［３９］，本试验中处理组Ⅳ的白色
瘤胃球菌数量显著高于处理组Ⅲ，因此导致对处理组Ⅳ的黄色瘤胃球菌生长的抑制作用强于处理组Ⅲ，最终使处
理组Ⅳ的黄色瘤胃球菌的数量显著低于处理组Ⅲ。
栖瘤胃普雷沃氏菌是瘤胃中主要蛋白降解菌之一，本实验中各处理组间的栖瘤胃普雷沃氏菌的数量无显著
差异，这可能是由于各组颗粒饲料中粗蛋白水平一致造成的。此外，各处理组真菌的数量随着颗粒饲料中粗饲料
水平的增加而显著升高，这说明日粮精粗比过高会显著抑制瘤胃真菌的生长［４０］。原因可能是瘤胃厌氧真菌一般
是附着于细胞壁厚、木质化程度较高的组织进行生长［４１］，然而木质化程度较高组织的含量会随着颗粒饲料中粗
饲料添加量的升高而增加，所以才会导致真菌数量的显著升高。
从本试验结果来看，当犊牛采食等能等蛋的不同精粗比颗粒饲料时，对瘤胃ＴＶＦＡ、乙酸、丁酸和乙酸／丙酸
均有显著影响，其中ＴＶＦＡ、乙酸和乙酸／丙酸基本上表现为随精料水平的降低而减少。此外，高精料的颗粒饲
料对犊牛瘤胃纤维降解菌和厌氧真菌的生长有显著的抑制作用。
犚犲犳犲狉犲狀犮犲狊：
［１］　ＤｉａｏＱＹ，ＹａｎｇＺＭ，ＣｈｅｎＪＦ，犲狋犪犾．Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｉｎｒｕｍｅｎａｎｄｆｅｅｄｉｎｇｖａｌｕｅｏｆｐｅｌｅｔｉｚｅｄｆｏｒａｇｅａｎｄｆｏｄｄｅｒｆｏｒｂｅｅｆｃａｔｔｌｅｓ．
ＰｒａｔａｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２０１１，１８（６）：４３４７．
［２］　ＧａｏＪ，ＤｉｎｇＬＹ，ＣｈｅｎＬＭ．ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｎｔｈｅｆａｔｔｅｎｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｏｆＴＭＲｐｅｌｅｔｆｅｅｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｐｅｃｉｅｓｏｆｇｒｏｗｉｎｇｃａｔｔｌｅ．
ＡｃｔａＥｃｏｌｏｇａｅＡｎｉｍａｌｉｓＤｏｍａｓｔｉｃｉ，２０１３，３４（５）：７１７４．
［３］　ＣｈｅｎＬ，ＺｈａｎｇＬＱ，ＨｏｎｇＬ．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｆｏｒｆｅｅｄｉｎｇ犆犪狉犪犵犪狀犪犻狀狋犲狉犿犲犱犻犪ｐｅｌｅｔｓａｎｄｔｈｅｔｅｓｔｆｏｒｔｈｅ
６３１ 草　业　学　报 第２４卷
ｆａｔｔｅｎｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｎｂｅｅｆｃａｔｔｌｅ．ＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４，１１：９５９８．
［４］　ＨｅｉｎＭ，ＧｒｉｎｇｓＥ，ＲｏｆｆｌｅｒＲ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｐｅｌｅｔｆｏｒｍｕｌａｔｅｄｔｏｒｅｐｌａｃｅｗｈｏｌｅｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄｉｎｔｈｅｄｉｅｔｏｆｄａｉｒｙｃｏｗｓｉｎｅａｒｌｙ
ｌａｃｔａｔｉｏｎ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，１９９０，３（９）：２４６９２４７２．
［５］　ＭａｒｓｔｏｎＳＰ，ＣｌａｒｋＧＷ，ＡｎｄｅｒｓｏｎＧＷ，犲狋犪犾．ＭａｘｉｍｉｚｉｎｇｐｒｏｆｉｔｏｎＮｅｗＥｎｇｌａｎｄｏｒｇａｎｉｃｄａｉｒｙｆａｒｍｓ：Ａｎｅｃｏｎｏｍｉｃｃｏｍ
ｐａｒｉｓｏｎｏｆ４ｔｏｔａｌｍｉｘｅｄｒａｔｉｏｎｓｆｏｒｏｒｇａｎｉｃＨｏｌｓｔｅｉｎｓａｎｄＪｅｒｓｅｙｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，２０１１，９４（６）：３１８４３２０１．
［６］　ＬａｉＪＴ，ＬｉＮ，ＭａＳＣ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅａｎｄｆｏｒａｇｅｍｉｘｅｄｐｅｌｅｔｆｅｅｄｏｎｔｈｅａｐｐａｒｅｎｔｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｆｉｂｅｒａｎｄ
ｐｒｏｔｅｉｎｏｆｄａｉｒｙｃｏｗｓ．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆａｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２００７，１３（１）：３５３６．
［７］　ＦｒｉｋｈａＭ，ＳａｆａａＨ Ｍ，ＪｉｍｅｎｅｚｍｏｒｅｎｏＥ，犲狋犪犾．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｅｎｅｒｇｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄｆｅｅｄｆｏｒｍｏｆｔｈｅｄｉｅｔｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒ
ｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｄｉｇｅｓｔｉｖｅｔｒａｉｔｓｏｆｂｒｏｗｎｅｇｇｌａｙｉｎｇｐｕｌｅｔｓｆｒｏｍ１ｔｏ１２０ｄａｙｓｏｆａｇｅ．ＡｎｉｍａｌＦｅｅｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，
２００９，１５３（３）：２９２３０２．
［８］　ＡｂｄｏｌａｈｉＭＲ，ＲａｖｉｎｄｒａｎＶ，ＳｖｉｈｕｓＢ．Ｐｅｌｅｔｉｎｇｏｆｂｒｏｉｌｅｒｄｉｅｔｓ：Ａｎｏｖｅｒｖｉｅｗｗｉｔｈｅｍｐｈａｓｉｓｏｎｐｅｌｅｔｑｕａｌｉｔｙａｎｄｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ
ｖａｌｕｅ．ＡｎｉｍａｌＦｅｅｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１３，１７９（１）：１２３．
［９］　ＭａｒｓｔｏｎＳＰ，ＣｌａｒｋＧＷ，ＡｎｄｅｒｓｏｎＧＷ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｐｅｌｅｔｉｎｇｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｎｇｒｏｗｔｈｐｅｒ
ｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｂｒｏｉｌｅｒｓｆｅｄｍａｉｚｅ／ｓｏｙｂａｓｅｄｄｉｅｔｓ．ＡｎｉｍａｌＦｅｅｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１３，１８０（１）：
５５６３．
［１０］　ＹｕＡＢ，ＺｈｕａｎｇＴ，ＺｈａｎｇＪＧ．ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃＮＦＣ／ｃＮＤＦｒａｔｉｏｏｎｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｒａｔｅａｎｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｒｕｍｅｎ
ｏｆｗｅａｎｅｄｃａｌｖｅｓ．ＣｈｉｎａＦｅｅｄ，２０１２，（１４）：２２２６．
［１１］　ＸｕＪ，ＨｏｕＹＪ，ＹａｎｇＨＢ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｆｏｒａｇｅｓｏｕｒｃｅｓｏｎｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，ａｎｄｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏ
ｔｅｉｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓｉｎｍｉｄｌａｃｔａｔｉｏｎｃｏｗｓ．ＡｓｉａｎＡｕｓｔｒａｌａｓｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２０１４，２７（５）：６６７６７３．
［１２］　ＷｅａｔｈｅｒｂｕｒｎＭ Ｗ．Ｐｈｅｎｏｌｈｙｐｏｃｈｒｏｌｉｔｅｒｅａｃｔｉｏｎｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｍｍｏｎｉａ．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９６７，３９：９７１９７４．
［１３］　Ｈａｌ ＭＢ，ＨｅｒｅｊｋＣ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｙｉｅｌｄｓｏｆｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｒｕｄｅｐｒｏｔｅｉｎｆｒｏｍ犻狀狏犻狋狉狅ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ
ＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，２００１，８４：２４８６２４９３．
［１４］　ＫｒｉｓｔｅｎｓｅｎＮＢ．Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄｓｈｏｒｔｃｈａｉｎｆａｔｔｙａｃｉｄｓｂｙｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐｌａｓｍａ２ｃｈｌｏ
ｒｏｅｔｈｙｌｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｎｄｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎｆｏｒｄｉｌｕｔｉｏｎｓｐａｃｅｉｎｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ．ＡｃｔａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＡｃａｎｄｉｎａｖｉｃａＳｅｃｔｉｏｎＡＡｎｉｍａｌＳｃｉ
ｅｎｃｅ，２０００，５０：２３１２３６．
［１５］　ＤｅｎｍａｎＳＥ，ＭｃＳｗｅｅｎｅｙＣＳ．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲａｓｓａｙｆｏｒｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇａｎａｅｒｏｂｉｃｆｕｎｇａｌａｎｄｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉ
ａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｗｉｔｈｉｎｔｈｅｒｕｍｅｎ．ＦｅｍｓＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＥｃｏｌｏｇｙ，２００６，５８：５７２５８２．
［１６］　ＬｉｖａｋＫＩ，ＳｃｈｍｉｔｔｇｅｎＴＤ．ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｒｅｌａｔｉｖｅｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｄａｔａｕｓｉｎｇｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲａｎｄｔｈｅ２ｍｅｔｈ
ｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２５：４０２４２８．
［１７］　ＷａｎｇＲＦ，ＣａｏＷ Ｗ，ＣｅｒｎｉｇｌｉａＣＥ．ＰＣＲｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ犚狌犿犻狀狅犮狅犮犮狌狊ｓｐｐ．ｉｎｈｕｍａｎａｎｄａｎｉｍａｌｆａｅｃａｌｓａｍｐｌｅｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ａｎｄＣｅｌｕｌａｒＰｒｏｂｅｓ，１９９７，１１：２５９２６５．
［１８］　ＳｔｅｖｅｎｓｏｎＤＭ，ＷｅｉｍｅｒＰＪ．Ｄｏｍｉｎａｎｃｅｏｆ犘狉犲狏狅狋犲犾犾犪ａｎｄｌｏｗａｂｕｎｄａｎｃｅｏｆｃｌａｓｓｉｃａｌｒｕｍｉｎａｌｂａｃｔｅｒｉａｌｓｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅｂｏｖｉｎｅ
ｒｕｍｅｎｒｅｖｅａｌｅｄｂｙｒｅｌａｔｉｖｅｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ．ＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７，７５：１６５１７４．
［１９］　ＥｈｓａｎＫ，ＬｉＳ，ＰｌａｉｚｉｅｒＪＣ，犲狋犪犾．Ｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｕｓｉｎｇｔｗｏｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｍｏｄｅｌｓｏｆｓｕｂａｃｕｔｅｒｕ
ｍｉｎａｌａｃｉｄｏｓｉｓ．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００９，７５：７１１５７１２４．
［２０］　ＣｈｕｒｃｈＫ．Ａｓｔｏｃｈａｓｔｉｃｐａｒｔｓｐｒｏｇｒａｍｍｅａｎｄｎｏｕｎｐｈａｓｅｐａｒｓｅｒｆｏｒｕｎｒｅｓｔｒｉｃｉｔｅｄｔｅｘｔ．Ｓｅｃｏｎｄｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ．ＡｐｐｌｉｅｄＮａｔｕｒａｌ
ＬａｎｇｕａｇｅＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，１９８８，２３：２１４２１６．
［２１］　ＭｏｓｃａｒｄｉｎｉＳ，ＷｒｉｇｈｔＴＣ，ＬｕｉｍｅｓＰＨ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｕｍｅｎｕｎｄｅｇｒａｄａｂｌｅｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｆｅｅｄｉｎｔａｋｅｏｎｐｕｒｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅａｎｄ
ｕｒｅａｎｉｔｒｏｇｅｎ：Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｗｉｔｈｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｓｆｒｏｍｔｈｅｃｏｒｎｅｌｎｅｔｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｓｙｓｔｅｍ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，
１９９８，８１：２４２１２４２９．
［２２］　ＭｅｎｇＱＸ，ＫｅｒｌｅｙＭＳ．Ｐｒｏｔｅｉｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｂｙｒｕｍｉｎａｌｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓａｎｄｍｉｃｒｏｂｉａｌｇｒｏｗｔｈｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙａｓａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｄｉｌｕ
ｔｉｏｎｒａｔｅｉｎｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｃｕｌｔｕｒｅ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９９８，３１：１４．
［２３］　ＴｈｏｍｓｏｎＤＪ，ＢｅｅｖｅｒＤＥ，ＬａｔｈａｍＭＪ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｉｎｃｌｕｓｉｏｎｏｆｍｉｎｅｒａｌｓａｌｔｓｉｎｔｈｅｄｉｅｔｏｎｄｉｌｕｔｉｏｎｒａｔｅ，ｔｈｅｐａｔｔｅｒｎ
ｏｆｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｆｌｏｒａ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９７８，９１：１７．
［２４］　ＬｕＬ，ＸｉａＺＧ，ＭｅｎｇＱＸ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅａｎｄｄｉｌｕｔｉｏｎｒａｔｅｏｎｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｂｉａｌａｎｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ．ＦｅｅｄＲｅｓｅａｒｃｈ，
２００７，４：５２５５．
［２５］　ＡｎａｎｔａｓｏｏｋＮ，ＷａｎａｐａｔＭ，ＣｈｅｒｄｔｈｏｎｇＡ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｐｌａｎｔｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｓｅｃｏｎｄａｒｙｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｉｔｈｐａｌｍｏｉｌｏｎｆｅｅｄｉｎ
ｔａｋｅ，ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ，ｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｔｅｉｎｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｉｎｄａｉｒｙｃｏｗｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２０１３，
２６（６）：８２０８２６．
［２６］　ＳｒｉｎｉｖａｓＢ，ＧｕｐｔａＢ．Ｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ｂａｃｔｅｒｉａｌａｎｄｔｏｔａｌｖｏｌａｔｉｌｅｆａｔｔｙａｃｉｄ（ＴＶＦＡ）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅｓｉｎｃａｔｔｌｅｆｅｄｏｎｕ
ｒｅａｍｏｌａｓｓｅｓｍｉｎｅｒａｌｂｌｏｃｋｌｉｃｋｓｓｕｐｐｌｅｍｅｎ．ＡｎｉｍａｌＦｅｅｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１９９７，６５（１）：２７５２８６．
［２７］　ＳａｌｔｅｒＤＮ，ＤａｎｅｓｈｖａｒＫ，ＳｍｉｔｈＲＨ．Ｔｈｅｏｒｉｇｉｎｏｆｎｉｔｒｏｇｅｎｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄｉｎｔｏｃｏｍｐｏｕｎｄｓｉｎｔｈｅｒｕｍｅｎｂａｃｔｅｒｉａｏｆｓｔｅｅｒｓ
７３１第１２期 杨宏波　等：不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃发酵参数和微生物的影响
ｇｉｖｅｎｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｕｒｅａｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｄｉｅｔｓ．ＴｈｅＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，１９７９，４１（１）：１９７２０９．
［２８］　ＭｉｃｈａｌｓｋｉＪ，ＫｏｗａｌｃｚｙｋＪ，ＣｚａｕｄｅｒｎａＭ，犲狋犪犾．Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｕｒｅａｎｉｔｒｏｇｅｎｉｎｔｏｔｈｅａｍｉｎｏａｃｉｄｓｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌ
ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｈｅｒｕｍｅｎｏｆｇｏａｔｓｆｅｄｄｉｅｔｓｗｉｔｈｖａｒｉｏｕｓｐｒｏｔｅｉｎｌｅｖｅｌｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２０１３，５１６：４９．
［２９］　ＡｇｌｅＭ，ＨｒｉｓｔｏｖＡ，ＺａｍａｎＳ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｅｔａｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｏｎｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄｎｉｔｒｏｇｅｎｌｏｓｓｅｓ
ｉｎｄａｉｒｙｃｏｗｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＤａｉｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，２０１０，９３（９）：４２１１４２２２．
［３０］　ＶａｎＨ Ｍ．ＣｈａｌｅｎｇｉｎｇｔｈｅｒｅｔｉｎａｌｆｏｒａｌｔｅｒｉｎｇＶＦＡｒａｔｉｏｓｉｎｇｒｏｗｉｎｇｒｕｍｉｎａｔｅｓ．ＦｅｅｄＭｉｘ，１９９６，４（１）：８１２．
［３１］　ＣａｎｔａｌａｐｉｅｄｒａＨＧ，ＹａｎｅｚＲＤ，ＭａｒｔｉｎＧＡ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｏｒａｇｅ：ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｒａｔｉｏａｎｄｆｏｒａｇｅｔｙｐｅｏｎａｐｐａｒｅｎｔｄｉｇｅｓｔｉ
ｂｉｌｉｔｙ，ｒｕｍｉｎａｌｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ，ａｎｄｍｉｃｒｏｂｉａｌｇｒｏｗｔｈｉｎｇｏａｔｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，２００９，８７（２）：６２２６３１．
［３２］　ＣｅｒｒｉｌｏＭ，ＲｕｓｓｅｌＪ，ＣｒｕｍｐＭ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｈａｙｍａｔｕｒｉｔｙａｎｄｆｏｒａｇｅｔｏｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｒａｔｉｏｏｎｄｉｇｅｓｔｉｏｎｋｉｎｅｔｉｃｓｉｎｇｏａｔｓ．
ＳｍａｌＲｕｍｉｎａｎｔＲｅｓｅａｒｃｈ，１９９９，３２（１）：５１６０．
［３３］　ＷａｎｇＳＰ，ＷａｎｇＷＪ，ＷａｎｇＪＱ，犲狋犪犾．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｅｔａｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｔｏｆｏｒａｇｅｒａｔｉｏｏｎｒｕｍｅｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄｐｅｒｆｏｒｍ
ａｎｃｅｏｆｄａｉｒｙｃｏｗｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆ＦＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００７，３５（６）：４４５０．
［３４］　ＧｒｕｂｂＪＡ，ＤｅｈｏｒｉｔｙＢＡ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｎａｂｒｕｐｔｃｈａｎｇｅｉｎｒａｔｉｏｎｆｒｏｍａｌｒｏｕｇｈａｇｅｔｏｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｕｐｏｎｒｕｍｅｎｍｉｃｒｏｂｉａｌ
ｎｕｍｂｅｒｓｉｎｓｈｅｅｐ．ＡｐｐｌｉｅｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９７５，３０：４０４４１２．
［３５］　ＬｅｅｄｌｅＪＡＺ，ＢｒｙａｎｔＭＰ．Ｄｉｕｒｎａｌｖａｒｉａｔｉｏｎｓｉｎｂａｃｔｅｒｉａｌｎｕｍｂｅｒｓａｎｄｆｌｕｉｄｐａｒａｍｅｔｅｒｓｉｎｒｕｍｉｎａｌｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｎｉｍａｌｓｆｅｄ
ｌｏｗｏｒｈｉｇｈｆｏｒａｇｅｄｉｅｔｓ．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８２，４４（２）：４０２４１２．
［３６］　ＤｅｈｏｒｉｔｙＢＡ，ＴｉｒａｂａｓｓｏＰＡ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｒｕｍｉｎａｌｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｎ犻狀狊犻狋狌ｄｉｇｅｓｔｉｏｎｏｆｆｏｒａｇｅｃｅｌｕｌｏｓｅ．
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９９８，７６：２９０５２９１１．
［３７］　ＭａｃｋｉｅＲＩ，ＧｉｌｃｈｒｉｓｔＭＣ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｉｎｔｈｅｒｕｍｅｎｄｕｒｉｎｇｔｈｅｓｔｅｐｗｉｓｅａｄａｐｔａｔｉｏｎｏｆｓｈｅｅｐｔｏ
ｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄｉｅｔｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，１９７８，９０：２４１２５４．
［３８］　ＶａｒｅｌＶＨ，ＤｅｈｏｒｉｔｙＢＡ．Ｒｕｍｉｎａｌｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｐｒｏｔｏｚｏａｆｒｏｍｂｉｓｏｎ，ｃａｔｔｌｅｂｉｓｏｎｈｙｂｒｉｄｓ，ａｎｄｃａｔｔｌｅｆｅｄｔｈｒｅｅａｌ
ｆａｌｆａｃｏｒｎｄｉｅｔｓ．ＡｐｐｌｉｅｄａｎｄＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１９８９，５５：１４８１５３．
［３９］　ＳｕｎＹＺ，ＭａｏＳＹ，ＹａｏＷ，犲狋犪犾．Ｔｈｅｄｙｎａｍｉｃｓｏｆｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓａｎｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｓｏｆｃｏｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆ
ｒｕｍｅｎｆｕｎｇｉａｎｄｃｅｌｕｌｏｌｙｔｉｃｂａｃｔｅｒｉａｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．ＡｃｔａＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，２００６，４６（３）：４２２４２６．
［４０］　ＦｅｎｇＹＬ．ＲｕｍｉｎａｎｔＮｕｔｒｉｔｉｏｎ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＳｃｉｅｎｃｅＰｒｅｓｓ，２００４：２１０．
［４１］　ＷｉｌｉａｍｓＡＧ，ＪｏｂｌｉｎＫＮ，ＦｏｎｔｙＧ．ＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅＲｕｍｅｎＣｈｙｔｒｉｄＦｕｎｇｉａｎｄｏｔｈｅｒＭｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ［Ｍ］．Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ：ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，１９９５．
参考文献：
［１］　刁其玉，杨茁萌，陈荆芬，等．草颗粒饲料在牛瘤胃内的降解与饲养价值．草业科学，２００１，１８（６）：４３４７．
［２］　高健，丁洛阳，陈连民．颗粒饲料对不同品种生长期牛育肥效果的比较研究．家畜生态学报，２０１３，３４（５）：７１７４．
［３］　陈亮，张凌青，洪龙．饲喂柠条颗粒饲料营养成分分析及对肉牛育肥效果试验．黑龙江畜牧兽医，２０１４，１１：９５９８．
［６］　赖景涛，李宁，马松成，等．精粗配合颗粒饲料对奶牛纤维性物质和蛋白质表观消化率的影响．中国畜牧杂志，２００７，
１３（１）：３５３６．
［１０］　禹爱兵，庄涛，张建刚．不同ｃＮＦＣ／ｃＮＤＦ日粮在断奶犊牛瘤胃内的降解规律及对瘤胃发酵参数的影响．中国饲料，２０１２，
（１４）：２２２６．
［２４］　鲁琳，夏兆刚，孟庆翔．精料与稀释率对瘤胃发酵与微生物蛋白的影响．饲料研究，２００７，４：５２５５．
［３３］　汪水平，王文娟，王加启，等．日粮精粗比对奶牛瘤胃发酵及泌乳性能的影响．西北农林科技大学学报，２００７，３５（６）：４４
５０．
［３９］　孙云章，毛胜勇，姚文，等．不同精粗比底物下瘤胃真菌和纤维降解细菌共培养发酵特性及菌群变化．微生物学报，２００６，
４６（３）：４２２４２６．
［４０］　冯仰廉．反刍动物营养学［Ｍ］．北京：科学出版社，２００４：２１０．
８３１ 草　业　学　报 第２４卷