全 文 ：书色、褐色松软状，说明高浓度的细胞分裂素不利于愈伤组织的诱导。愈伤组织诱导率在一定范围内随着２，４Ｄ浓
度的增加而升高，当培养基中２，４Ｄ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ时，诱导的效果最佳。ＮＡＡ的浓度对愈伤组织诱导影响
不显著。因此根据植物生长调节剂浓度宜低不宜高的原则［１６］，诱导子叶节愈伤组织最适宜的培养基为：ＭＳ＋
１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ。
表２ 不同浓度激素配比对子叶节愈伤组织诱导的影响
犜犪犫犾犲２ 犈犳犳犲犮狋狅犳狏犪狉犻狅狌狊犺狅狉犿狅狀犲狉犪狋犻狅狀狊狅狀犮犪犾狌狊犻狀犱狌犮狋犻狅狀狅犳犮狅狋狔犾犲犱狅狀狀狅犱犲
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
植物激素
Ｐｌａｎｔｈｏｒｍｏｎｅ（ｍｇ／Ｌ）
６ＢＡ ２，４Ｄ ＮＡＡ
接种数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ
产生的愈伤组织数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆｇｅｎｅｒａｔｅｄ
ｃａｌｕｓ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ（％）
愈伤组织生长情况
Ｔｈｅｓｔａｔｕｓｏｆｃａｌｕｓ
１ ０．５ ０．０５ ０．０５ ６０ ４０ ６６．７±４．２ｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
２ ０．５ ０．１０ ０．１０ ６０ ４４ ７３．３±３．１ｂｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
３ ０．５ ０．５０ ０．５０ ６０ ５３ ８８．３±２．６ａｂ 乳白色，致密Ｉｖｏｒｙｗｈｉｔｅ，ｃｏｍｐａｃｔ
４ １．０ ０．０５ ０．１０ ６０ ４０ ６６．７±２．９ｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
５ １．０ ０．１０ ０．５０ ６０ ４８ ８０．０±３．５ａｂｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
６ １．０ ０．５０ ０．０５ ６０ ５９ ９８．３±３．３ａ 乳白色，致密Ｉｖｏｒｙｗｈｉｔｅ，ｃｏｍｐａｃｔ
７ １．５ ０．０５ ０．５０ ６０ １２ ２０．０±１．１ｄ 褐色，松软Ｂｒｏｗｎ，ｓｏｆｔ
８ １．５ ０．１０ ０．０５ ６０ １６ ２６．７±１．１ｄ 黄色，松软 Ｙｅｌｏｗ，ｓｏｆｔ
９ １．５ ０．５０ ０．１０ ６０ ２１ ３５．０±１．２ｄ 淡黄色，松软Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｓｏｆｔ
２．２．２ 不同浓度激素配比对叶片愈伤组织诱导的影响 将早开堇菜叶片接种至不同浓度激素配比的培养基
上，黑暗培养１５ｄ后叶片从切口处开始膨大，光照培养１５ｄ后叶片四周开始形成愈伤组织，刚诱导出时生长缓
慢，多次继代后生长旺盛。
表３ 不同浓度激素配比对叶片愈伤组织诱导的影响
犜犪犫犾犲３ 犈犳犳犲犮狋狅犳狏犪狉犻狅狌狊犺狅狉犿狅狀犲狉犪狋犻狅狀狊狅狀犮犪犾狌狊犻狀犱狌犮狋犻狅狀狅犳犾犲犪犳犫犾犪犱犲
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
植物激素
Ｐｌａｎｔｈｏｒｍｏｎｅ（ｍｇ／Ｌ）
６ＢＡ ２，４Ｄ ＮＡＡ
接种数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ
产生的愈伤组织数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆｇｅｎｅｒａｔｅｄ
ｃａｌｕｓ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ（％）
愈伤组织生长情况
Ｔｈｅｓｔａｔｕｓｏｆｃａｌｕｓ
１ ０．５ ０．０５ ０．０５ ６０ ３７ ６１．７±２．５ｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
２ ０．５ ０．１０ ０．１０ ６０ ３９ ６５．０±３．１ｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
３ ０．５ ０．５０ ０．５０ ６０ ５０ ８３．３±２．３ａ 乳白色，致密Ｉｖｏｒｙｗｈｉｔｅ，ｃｏｍｐａｃｔ
４ １．０ ０．０５ ０．１０ ６０ ３５ ５８．３±１．７ｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
５ １．０ ０．１０ ０．５０ ６０ ４５ ７５．０±２．２ｂ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
６ １．０ ０．５０ ０．０５ ６０ ５３ ８８．３±３．２ａ 乳白色，致密Ｉｖｏｒｙｗｈｉｔｅ，ｃｏｍｐａｃｔ
７ １．５ ０．０５ ０．５０ ６０ ８ １３．３±１．３ｆ 褐色，松软Ｂｒｏｗｎ，ｓｏｆｔ
８ １．５ ０．１０ ０．０５ ６０ １３ ２１．７±１．０ｅ 黄色，松软Ｙｅｌｏｗ，ｓｏｆｔ
９ １．５ ０．５０ ０．１０ ６０ １８ ３０．０±１．４ｄ 淡黄色，松软Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｓｏｆｔ
由表３可以看出在叶片愈伤组织诱导中，６ＢＡ、２，４Ｄ、ＮＡＡ３种植物生长调节剂对愈伤组织诱导率的影响
呈显著差异。当培养基中６ＢＡ浓度增加到１．５ｍｇ／Ｌ时，愈伤组织诱导率急剧下降；而叶片愈伤组织诱导率随
２，４Ｄ浓度的增加而升高；不同浓度ＮＡＡ对叶片愈伤组织诱导率的影响无显著差异。
６号和３号处理中叶片愈伤组织诱导率较高，两者的差异不显著，分别为８８．３％和８３．３％，愈伤组织生长健
７６１第１１期 李俊强 等：早开堇菜组织培养及植株再生体系的建立
康，呈白色或乳白色紧密状（图１Ｅ）。当６ＢＡ、２，４Ｄ、ＮＡＡ浓度分别为１．０，０．５０和０．０５ｍｇ／Ｌ时，叶片愈伤组
织诱导率最高，达８８．３％。因此，诱导叶片愈伤组织最适宜的培养基为：ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ
２，４Ｄ＋０．０５ｍｇ／ＬＮＡＡ。
２．２．３ 不同浓度激素配比对叶柄愈伤组织诱导的影响 将早开堇菜叶柄接种至不同浓度激素配比的培养基
上，黑暗培养１５ｄ后叶柄从切口处开始膨大，光照培养７ｄ后叶柄两端及表面形成大量愈伤组织。由表４可以看
出６号处理和３号处理中叶柄愈伤组织诱导率较高，分别为９６．７％和８８．３％，愈伤组织生长健康，呈白色或乳白
色紧密状（图１Ｆ）。
６ＢＡ、２，４Ｄ、ＮＡＡ３种植物生长调节剂对叶柄愈伤组织诱导呈显著差异。当６ＢＡ的浓度为１．５ｍｇ／Ｌ时，
叶柄愈伤组织诱导率最低，并且愈伤组织呈松软状，说明高浓度的细胞分裂素不利于愈伤组织的诱导。此外不同
浓度的ＮＡＡ对叶柄愈伤组织诱导的影响差异不显著，根据植物生长调节剂浓度宜低不宜高的原则，诱导早开堇
菜叶柄愈伤组织的最适ＮＡＡ浓度为０ｍｇ／Ｌ。因此，诱导早开堇菜叶柄愈伤组织最适培养基为：ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ
６ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ。
表４ 不同浓度激素配比对叶柄愈伤组织诱导的影响
犜犪犫犾犲４ 犈犳犳犲犮狋狅犳狏犪狉犻狅狌狊犺狅狉犿狅狀犲狉犪狋犻狅狀狊狅狀犮犪犾狌狊犻狀犱狌犮狋犻狅狀狅犳狆犲狋犻狅犾犲
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
植物激素
Ｐｌａｎｔｈｏｒｍｏｎｅ（ｍｇ／Ｌ）
６ＢＡ ２，４Ｄ ＮＡＡ
接种数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ
产生的愈伤组织数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆｇｅｎｅｒａｔｅｄ
ｃａｌｕｓ
诱导率
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ（％）
愈伤组织生长情况
Ｔｈｅｓｔａｔｕｓｏｆｃａｌｕｓ
１ ０．５ ０．０５ ０．０５ ６０ ４１ ６８．３±３．５ｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
２ ０．５ ０．１０ ０．１０ ６０ ４３ ７１．７±２．７ｂｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
３ ０．５ ０．５０ ０．５０ ６０ ５３ ８８．３±３．８ａｂ 乳白色，致密Ｉｖｏｒｙｗｈｉｔｅ，ｃｏｍｐａｃｔ
４ １．０ ０．０５ ０．１０ ６０ ３９ ６５．０±２．２ｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
５ １．０ ０．１０ ０．５０ ６０ ４７ ７８．３±２．５ｂｃ 淡黄色，致密Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｃｏｍｐａｃｔ
６ １．０ ０．５０ ０．０５ ６０ ５８ ９６．７±３．９ａ 乳白色，致密Ｉｖｏｒｙｗｈｉｔｅ，ｃｏｍｐａｃｔ
７ １．５ ０．０５ ０．５０ ６０ １３ ２１．７±１．１ｄ 褐色，松软Ｂｒｏｗｎ，ｓｏｆｔ
８ １．５ ０．１０ ０．０５ ６０ １６ ２６．７±０．７ｄ 黄色，松软Ｙｅｌｏｗ，ｓｏｆｔ
９ １．５ ０．５０ ０．１０ ６０ ２３ ３８．３±１．５ｄ 淡黄色，松软Ｐａｌｅｙｅｌｏｗ，ｓｏｆｔ
２．３ 愈伤组织分化
将诱导产生的愈伤组织接种到分化培养基上，１５ｄ后愈伤组织开始增殖，且逐渐由白色或乳白色转变为绿
色，愈伤组织上陆续出现绿点。４０ｄ后开始有芽的分化，５０ｄ后芽开始大量分化（图１Ｉ）。
由表５可以看出，单独使用６ＢＡ或ＮＡＡ以及不添加任何植物生长调节剂时，愈伤组织不定芽分化率和平
均不定芽数均为０，且愈伤组织逐渐褐化，变黄。当６ＢＡ浓度为１．５ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ浓度为０．１ｍｇ／Ｌ时愈伤组织
不定芽分化率最高，达１００％，每块愈伤组织的平均不定芽数达８．０３。因此，诱导早开堇菜愈伤组织分化的最适
培养基为：ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ。
２．４ 不定芽增殖
将产生的不定芽转移到增殖培养基上进行增殖，２０ｄ后单芽基部相继出现新芽。表６可以看出２号培养基：
ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．０７５ｍｇ／ＬＮＡＡ的不定芽增殖效果最好，苗绿、健壮（图１Ｇ），增殖倍数达到６．７２；其次
为１号培养基：ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ，增殖倍数达４．６８。不定芽增殖培养中，适当降低ＮＡＡ
浓度有利于提高单芽的增殖倍数。将所有单芽转移到２号培养基上继代增殖，芽的生长状态极佳。因此，早开堇
菜不定芽增殖的最适培养基为：ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．０７５ｍｇ／ＬＮＡＡ。
８６１ 草 业 学 报 第２４卷
表５ 不同浓度激素配比对愈伤组织分化的影响
犜犪犫犾犲５ 犈犳犳犲犮狋狅犳狏犪狉犻狅狌狊犺狅狉犿狅狀犲狉犪狋犻狅狀狊狅狀犮犪犾狌狊犱犻犳犳犲狉犲狀狋犻犪狋犻狅狀
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
植物激素Ｐｌａｎｔｈｏｒｍｏｎｅ（ｍｇ／Ｌ）
６ＢＡ ＮＡＡ
愈伤组织数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆｃａｌｕｓ
分化率
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｒａｔｅ（％）
平均不定芽数Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅ
ｎｕｍｂｅｒｏｆａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｓ
１ ０ ０ ６０ ０．０±０．０ｊ ０．００±０．００ｉ
２ ０ ０．０５０ ６０ ０．０±０．０ｊ ０．００±０．００ｉ
３ ０ ０．０７５ ６０ ０．０±０．０ｊ ０．００±０．００ｉ
４ ０ ０．１００ ６０ ０．０±０．０ｊ ０．００±０．００ｉ
５ １．０ ０ ６０ ０．０±０．０ｊ ０．００±０．００ｉ
６ １．０ ０．０５０ ６０ ５８．３±１．４ｇ ２．７７±０．０９ｇ
７ １．０ ０．０７５ ６０ ４１．７±２．５ｈ １．４０±０．０２ｈ
８ １．０ ０．１００ ６０ ３０．０±０．７ｉ １．２２±０．０１ｈ
９ １．５ ０ ６０ ０．０±０．０ｊ ０．００±０．００ｉ
１０ １．５ ０．０５０ ６０ ８１．７±３．２ｃ ６．１８±０．１３ｃ
１１ １．５ ０．０７５ ６０ ９１．７±３．７ｂ ６．６９±０．１５ｂ
１２ １．５ ０．１００ ６０ １００．０±０．２ａ ８．０３±０．１２ａ
１３ ２．０ ０ ６０ ０．０±０．０ｊ ０．００±０．００ｉ
１４ ２．０ ０．０５０ ６０ ６３．３±２．４ｆ ３．５３±０．０７ｆ
１５ ２．０ ０．０７５ ６０ ７０．０±３．１ｅ ４．１４±０．１２ｅ
１６ ２．０ ０．１００ ６０ ７６．７±２．３ｄ ５．５７±０．１１ｄ
表６ 不同浓度激素配比对不定芽增殖的影响
犜犪犫犾犲６ 犈犳犳犲犮狋狅犳狏犪狉犻狅狌狊犺狅狉犿狅狀犲狉犪狋犻狅狀狊狅狀犪犱狏犲狀狋犻狋犻狅狌狊犫狌犱狆狉狅犾犻犳犲狉犪狋犻狅狀
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
植物激素
Ｐｌａｎｔｈｏｒｍｏｎｅ（ｍｇ／Ｌ）
６ＢＡ ＮＡＡ
接种数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ
增殖数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇ
增殖倍数
Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｔｉｍｅｓ
长势
Ｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ
１ １．５ ０．１００ ６０ ２８１ａ ４．６８±０．１５ａ 苗绿，健壮Ｇｒｅｅｎａｎｄｒｏｂｕｓｔ
２ １．５ ０．０７５ ６０ ４０３ｂ ６．７２±０．２１ｂ 苗绿，健壮Ｇｒｅｅｎａｎｄｒｏｂｕｓｔ
２．５ 不同培养基和植物生长调节剂组合对组培苗生根的影响
直接将小苗转接于不添加任何激素的 ＭＳ培养基中，１５ｄ后有效苗率高达９８．３％，有效苗植株生长健壮，叶
色嫩绿。将有效单苗转入生根培养基中，接种２５ｄ左右，多数处理中的幼苗开始生根，根系呈黄白色辐射状（图
１Ｊ，Ｋ）。
由表７可以看出，６号处理的生根率最高、平均生根数最多、平均根长最长，分别为９２．３％，５．４，４．８ｃｍ。５
号处理次之；而在没有添加任何植物激素的１号处理中无根的分化。培养基的类型对生根率、平均生根数、平均
根长均有显著影响，１／２ＭＳ培养基明显优于 ＭＳ和１／４ＭＳ培养基，因此早开堇菜生根最适宜的基本培养基为
１／２ＭＳ培养基。不同激素对生根影响不同。生根率、平均生根数、平均根长在一定的范围内随着６ＢＡ浓度的
增加而升高。当６ＢＡ浓度为１．０ｍｇ／Ｌ时，所有指标均达到最大值，植物生长良好，叶色嫩绿，叶片数多；ＮＡＡ
的浓度对试验结果影响不显著，根据植物生长调节剂浓度宜低不宜高的原则，ＮＡＡ选择最低浓度０ｍｇ／Ｌ。综
合数据分析，最有利于早开堇菜幼苗生根的培养基组合为：１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ。
２．６ 不同基质对组培苗移栽的影响
待组培苗生长至１０ｃｍ左右时，开盖炼苗７ｄ后移植到１（珍珠岩）∶２（河沙）∶２（腐殖质）的混合基质上，植
株成活率最高，生长良好（表８）（图１Ｌ）。
９６１第１１期 李俊强 等：早开堇菜组织培养及植株再生体系的建立
表７ 不同培养基和植物生长调节剂组合对组培苗生根的影响
犜犪犫犾犲７ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋犮狌犾狋狌狉犲犿犲犱犻狌犿犪狀犱狆犾犪狀狋犵狉狅狑狋犺狉犲犵狌犾犪狋狅狉狊犮狅犿犫犻狀犪狋犻狅狀狊狅狀狉狅狅狋犻狀犵狅犳狋犺犲狆犾犪狀狋狊
处理
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
培养基类型／植物生长调节剂
Ｔｙｐｅｓｏｆｍｅｄｉｕｍ／Ｐｌａｎｔｈｏｒｍｏｎｅ（ｍｇ／Ｌ）
Ｍｅｄｉｕｍ ６ＢＡ ＮＡＡ
接种数
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇｒａｔｅ
（％）
平均生根数
Ａｖｅｒａｇｅｎｕｍｂｅｒ
ｏｆｒｏｏｔｉｎｇ
平均根长
Ｌｅｎｇｔｈｏｆｒｏｏｔ
（ｃｍ）
１ ＭＳ ０ ０ ６０ ０．０±０．０ｅ ０．００±０．００ｆ ０．００±０．００ｇ
２ ＭＳ ０．５ ０．３ ６０ ８．６±０．６ｄｅ １．２１±０．０２ｅｆ ０．６２±０．０２ｆｇ
３ ＭＳ １．０ ０．５ ６０ ３４．９±１．２ｃｄ ２．５２±０．１４ｃｄｅ １．９１±０．０３ｄｅ
４ １／２ＭＳ ０ ０．３ ６０ ６１．４±２．１ａｂｃ ３．２１±０．２１ｂｃ ２．９５±０．０１ｂｃ
５ １／２ＭＳ ０．５ ０．５ ６０ ８４．７±２．３ａｂ ４．１３±０．５９ａｂ ３．７２±０．１３ｂ
６ １／２ＭＳ １．０ ０ ６０ ９２．３±１．８ａ ５．４１±０．７６ａ ４．８１±０．０９ａ
７ １／４ＭＳ ０ ０．５ ６０ ２０．０±１．０ｄｅ １．５３±０．１１ｄｅ １．２３±０．０５ｅｆ
８ １／４ＭＳ ０．５ ０ ６０ ３２．８±１．０ｃｄ ２．８５±０．０９ｂｃｄ １．７２±０．１０ｄｅ
９ １／４ＭＳ １．０ ０．３ ６０ ５４．１±２．１ｂｃ ３．６２±０．１４ｂｃ ２．４３±０．０７ｃｄ
３ 讨论
３．１ 外植体类型对早开堇菜植株再生的影响
在组织培养过程中，植物的种类、同一植物生理状
态、生长季节、器官和部位的不同，其再生能力是有差
异的［１７１９］。有研究者发现：芽的再生能力＞胚状体再
生能力＞愈伤组织再生能力＞营养体组织再生能
力［２０］。邹永 梅 和 黄 雪 芳［２１］以 带 腋 芽 的 万 寿 菊
（犜犪犵犲狋犲狊犲狉犲犮狋犪）茎段为外植体在添加不同浓度的６
ＢＡ和ＮＡＡ的 ＭＳ培养基上诱导芽再生，其芽诱导率
均超过９０％，并建立了万寿菊茎段离体再生体系。齐
广勋等［２２］以白三叶（犜狉犻犳狅犾犻狌犿狉犲狆犲狀狊）子叶节为外植
表８ 不同移栽基质对组培苗成活率的影响
犜犪犫犾犲８ 犈犳犳犲犮狋狊狅犳犱犻犳犳犲狉犲狀狋狋狉犪狀狊狆犾犪狀狋犻狀犵狊狌犫狊狋狉犪狋犲狊
狅狀狊犲犲犱犾犻狀犵狊狌狉狏犻狏犪犾狉犪狋犲
编号
Ｃｏｄｅ
移栽基质比例（珍珠岩∶河
沙∶腐殖质）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ
ｍａｔｒｉｘ（ｐｅｒｌｉｔｅ∶
ｓａｎｄ∶ｈｕｍｕｓ）
移栽植株
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ
ｐｌａｎｔ
成活植株
Ｎｕｍｂｅｒｏｆ
ｓｕｒｖｉｖｅｄ
ｐｌａｎｔｓ
成活率
Ｓｕｒｖｉｖａｌ
ｒａｔｅ
（％）
１ １∶１∶３ ６０ ４９ ８１．７±３．２ｂ
２ １∶２∶２ ６０ ６０ １００．０±２．２ａ
３ ２∶２∶１ ６０ ３２ ５３．３±１．２ｃ
体，诱导产生了优质的丛生芽。本研究以野生早开堇菜子叶节、叶片、叶柄为外植体诱导芽，诱导率从高到低分别
为子叶节、叶柄和叶片。叶片的诱导率最低，不适合作为直接诱导早开堇菜产生不定芽的外植体，其原因可能与
叶片的分化程度有关；而子叶节和叶柄是诱导早开堇菜产生不定芽的最佳选择。
３．２ 基本培养基的类型对早开堇菜植株再生的影响
在植物组织培养的过程中，植物种类不同其对营养成分的要求也不同；甚至是同一植物不同培养阶段，其所
需的营养成分也不尽相同。基本培养基是影响植物组织培养的重要因素，在选择基本培养基时除依据植物的遗
传特性、生物及生态学特性以外，还应考虑基本培养基的无机盐浓度、营养元素的种类等。一般来讲，无机盐浓度
高，有利于植株的茎叶生长，无机盐浓度低，有利于根的生长［２３］。ＭＳ培养基中无机盐浓度高，且钾离子和铵离子
含量丰富，元素比例适当，具有较强的缓冲性，能够满足快速增长的组织对营养元素的需求，是目前使用最广的培
养基［２４］。早开堇菜的组织培养表明：基本培养基是影响早开堇菜生根的主导因素。１／２ＭＳ培养基中早开堇菜
的生根率、平均生根数、平均根长明显优于 ＭＳ和１／４ＭＳ培养基，这可能是因为基本培养基中Ｎ元素的浓度不
同影响生根。Ｍａｅｎｅ和Ｄｅｂｅｒｇｈ［２５］报道离体培养植物生根时，培养基中的盐类浓度减少会促进植物的生根；
ＬóｐｅｚＢｕｃｉｏ等［２６］在根系发育研究中提出，减少培养基中的Ｎ元素或增加Ｐ元素均可促进根系发育与生长。因
此早开堇菜生根最适宜的基本培养基为１／２ＭＳ培养基。此外本实验前期的预试验表明，早开堇菜的初代培养、
继代增殖培养、愈伤组织分化培养以及壮苗培养最适宜的基本培养基为 ＭＳ培养基。
０７１ 草 业 学 报 第２４卷
３．３ 不同激素配比对早开堇菜组织培养的影响
植物细胞分化和生长方向主要受激素调控，不同激素配比能够有效的控制植物形态建成的发展方向。细胞
分裂素的主要作用是引起植物细胞分裂，诱导芽的形成和促进芽的生长；而生长素主要促进植物细胞伸长和根的
分化。在一定浓度范围内，细胞分裂素与生长素的比值决定着芽和根的分化。通常情况下，细胞分裂素与生长素
比值在１左右时，促进愈伤组织的诱导和分化；当两者的比值低时，促进根的生长；两者的比值高时，则促进芽的
生长［２７］。本研究结果表明合理的６ＢＡ、ＮＡＡ以及２，４Ｄ配比能有效诱导早开堇菜子叶节、叶片、叶柄产生不定
芽及愈伤组织。本研究中１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ的激素配比是诱导早开堇菜子叶节和叶柄的愈伤
组织的最适激素配比，其愈伤组织诱导率分别为９８．３％，９６．７％；而１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ＋０．０５
ｍｇ／ＬＮＡＡ激素配比是诱导早开堇菜叶片愈伤组织的最适激素配比，其愈伤组织诱导率为８８．３％；乔琦等［２８］也
在０．５ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ＋０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ以及１．０ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的培养基上诱导了紫花地丁的愈
伤组织，本研究与其结果基本一致，说明同属植物之间其生长对激素的需求具有相似性。
ＮＡＡ是植物组织培养中常用的生长素类激素之一，在诱导愈伤组织分化时使用较多，其使用的浓度范围是
０．１～１．０ｍｇ／Ｌ。本研究中发现当ＮＡＡ浓度为０．１ｍｇ／Ｌ时，早开堇菜愈伤组织分化率最高，达１００％。生长素
浓度低于细胞分裂素浓度时会促进植物芽的形成，且细胞分裂素起主导作用，６ＢＡ是促进植物细胞分裂分化的
激素，在愈伤组织分化中起主导作用，其浓度使用范围为１．０～３．０ｍｇ／Ｌ，本研究中发现１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１
ｍｇ／ＬＮＡＡ的激素配比是诱导早开堇菜愈伤组织分化的最适激素配比，乔琦等［２８］也在０．５ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ＋１．０
ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的分化培养基上诱导了紫花地丁的愈伤组织的分化，能有效再生成苗。本研究中早开堇菜不定芽增
殖的最佳培养基为：ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．０７５ｍｇ／ＬＮＡＡ。这与许多植物通过愈伤组织再生和外植体上直
接发生芽的研究报道［２９３１］基本一致，再次表明生长素浓度低于细胞分裂素浓度时会促进植物芽的形成，且细胞分
裂素起主导作用。
许多植物组织培养的研究证实，无任何激素的１／２ＭＳ培养基是组培苗生根的最适培养基，而且植物激素中
生长素浓度高于细胞分裂素的浓度时才有利于根的分化，而本研究中却得到了相反的结果：在１／２ＭＳ培养基基
础上添加１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ最有利于早开堇菜生根，生根率为９２．３％。
４ 结论
以早开堇菜子叶节、叶柄为外植体，诱导其愈伤组织的最适培养基为：ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ
２，４Ｄ；诱导不定芽的最适培养基为：ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ；以叶片为外植体诱导愈伤组织的
最适培养基为：ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４Ｄ＋０．０５ｍｇ／ＬＮＡＡ；愈伤组织分化的最适培养基为：
ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ；不定芽增殖的最适培养基为：ＭＳ＋１．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．０７５ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ；生根培养基为１／２ＭＳ＋１．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ；把组培苗移栽到１（珍珠岩）∶２（河沙）∶２（腐殖质）的混合基质
上，全部成活。
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３７１第１１期 李俊强 等：早开堇菜组织培养及植株再生体系的建立