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Cloning, Characterization and Expression of Alcohol Acyltransferase Gene which Responses to Exogenous Ethylene in Peach Fruit

桃果实醇酰基转移酶基因的克隆及对外源乙烯的响应表达



全 文 :林业科学研究摇 圆园员源袁圆苑渊圆冤院员缘愿 员远苑云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员源冤园圆鄄园员缘愿鄄员园
桃果实醇酰基转移酶基因的克隆及
对外源乙烯的响应表达
王贵章员袁 陈摇 新圆袁 赵天田员袁 梁丽松员袁 马庆华员袁 王贵禧员鄢
渊员郾 林木遗传育种国家重点实验室袁国家林业局林木培育重点实验室袁中国林业科学研究院林业研究所袁北京摇 员园园园怨员
圆郾 山东省果树研究所袁山东省果树生物技术育种重点实验室袁山东 泰安摇 圆苑员园园园冤
收稿日期院 圆园员猿鄄员员鄄圆苑
基金项目院 国家自然科学基金资助项目渊猿员园苑员愿猿源冤
作者简介院 王贵章袁女袁博士研究生袁主要从事经济林产品贮藏保鲜研究援 耘皂葬蚤造院憎憎早扎圆园园猿岳 贼燥皂援 糟燥皂援
鄢 通讯作者院王贵禧袁博士生导师援研究员援 耘皂葬蚤造院憎葬灶早早曾园员员源岳 员圆远援 糟燥皂
摘要院为研究桃果实酯类香气的生物合成袁克隆了桃醇酰基转移酶基因 粤粤栽袁并研究了外源乙烯对该基因 皂砸晕粤 转
录水平的影响遥 根据桃基因组测序结果袁采用 砸粤悦耘 和反转录 孕悦砸 技术克隆到 员 个与醇酰基转移酶基因同源的
糟阅晕粤袁序列全长 员 源愿远 遭责袁悦阅杂区长度为 员 猿缘猿 遭责袁编码 源缘园 个氨基酸袁命名为 孕责粤粤栽圆遥 孕责粤粤栽圆 蛋白属于 孕蕴晕园圆源愿员
超级家族袁含有植物转移酶基因 圆 个高度保守结构域 匀载载载阅和 阅渊晕冤云渊灾冤郧宰郧遥 基因位于桃第 缘 条染色体袁月粤悦
注释为 员 条包含 员 个内含子的 皂砸晕粤序列转录链袁悦阅杂区有 圆 处碱基突变袁其中袁缘缘缘 遭责处碱基由 悦突变为 郧袁导致
丙氨酸突变为缬氨酸遥 粤粤栽基因响应乙烯表达袁园 益冷藏桃施加外源乙烯促进 粤粤栽 基因表达水平曰该基因在叶片尧
花和成熟果肉中均表达袁且在叶片和花中的表达丰度比果实高袁推测其在不同的生理过程中均发挥作用遥
关键词院桃果实曰乙醇酰基转移酶基因曰酯类曰外源乙烯
中图分类号院杂远远圆援 员 文献标识码院粤
悦造燥灶蚤灶早袁 悦澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 粤造糟燥澡燥造 粤糟赠造贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻 郧藻灶藻
憎澡蚤糟澡 砸藻泽责燥灶泽藻泽 贼燥 耘曾燥早藻灶燥怎泽 耘贼澡赠造藻灶藻 蚤灶 孕藻葬糟澡 云则怎蚤贼
宰粤晕郧 郧怎蚤鄄扎澡葬灶早员袁 悦匀耘晕 载蚤灶圆袁 在匀粤韵 栽蚤葬灶鄄贼蚤葬灶员袁蕴陨粤晕郧 蕴蚤鄄泽燥灶早员袁 酝粤 匝蚤灶早鄄澡怎葬员袁 宰粤晕郧 郧怎蚤鄄曾蚤员鄢
渊员郾 杂贼葬贼藻 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 栽则藻藻 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 月则藻藻凿蚤灶早袁 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 栽则藻藻 月则藻藻凿蚤灶早 葬灶凿 悦怎造贼蚤增葬贼蚤燥灶袁 杂贼葬贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶袁 砸藻泽藻葬则糟澡
陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园怨员袁悦澡蚤灶葬曰 圆郾 杂澡葬灶凿燥灶早 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 孕燥皂燥造燥早赠袁 杂澡葬灶凿燥灶早 孕则燥增蚤灶糟蚤葬造
运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 云则怎蚤贼 栽则藻藻 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 月则藻藻凿蚤灶早袁 栽葬蚤葬灶摇 圆苑员园园园袁 杂澡葬灶凿燥灶早袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽澡蚤泽 则藻泽藻葬则糟澡 糟造燥灶藻凿 葬灶凿 葬灶葬造赠扎藻凿 贼澡藻 葬造糟燥澡燥造 葬糟赠造鄄贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻 早藻灶藻 粤粤栽 枣则燥皂 责藻葬糟澡袁 葬灶凿 凿藻贼藻糟贼藻凿 贼澡藻 则藻鄄
泽责燥灶泽藻 燥枣 贼澡藻 早藻灶藻 贼燥 藻曾燥早藻灶燥怎泽 藻贼澡赠造藻灶藻援 月葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 责藻葬糟澡 早藻灶燥皂藻 责怎遭造蚤泽澡藻凿 渊郧藻灶燥皂藻 陨阅院 责责葬园园缘远圆缘皂冤袁 贼澡藻
泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则泽 憎藻则藻 凿藻泽蚤早灶藻凿 葬灶凿 贼澡藻 枣怎造造鄄造藻灶早贼澡 燥枣 贼澡藻 早藻灶藻 憎葬泽 糟造燥灶藻凿 怎泽蚤灶早 砸粤悦耘 孕悦砸援 栽澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 藻泽贼藻则
增燥造葬贼蚤造藻泽 憎藻则藻 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 遭赠 郧悦鄄酝杂 枣则燥皂 贼澡藻 泽贼燥则葬早藻 责藻葬糟澡 枣则怎蚤贼泽援 栽澡藻 枣怎造造鄄造藻灶早贼澡 燥枣 粤粤栽 憎葬泽 燥遭贼葬蚤灶藻凿 憎蚤贼澡 员 源愿远
遭责 葬灶凿 贼澡藻 燥责藻灶 则藻葬凿蚤灶早 枣则葬皂藻 渊韵砸云冤 憎葬泽 员 猿缘猿 遭责援 月蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡蚤泽 早藻灶藻 藻灶糟燥凿藻凿 源缘园
葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿泽袁 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 贼澡则藻藻 糟燥灶泽藻则增藻凿 凿燥皂葬蚤灶泽 蕴载载再再孕蕴粤郧砸袁 匀载载载阅 葬灶凿 阅渊晕冤云渊灾冤郧宰郧 燥枣 责造葬灶贼 贼则葬灶泽枣藻则鄄
葬泽藻 早藻灶藻袁 憎澡蚤糟澡 遭藻造燥灶早蚤灶早 贼燥 孕蕴晕园圆源愿员 泽怎责藻则 枣葬皂蚤造赠援 栽澡藻 早藻灶藻 憎葬泽 灶葬皂藻凿 葬泽 孕责粤粤栽圆 葬灶凿 皂葬责责藻凿 蚤灶 贼澡藻 缘贼澡
责藻葬糟澡 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻援 月粤悦 葬灶灶燥贼葬贼蚤燥灶 责则藻泽藻灶贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 早藻灶藻 憎葬泽 贼澡藻 皂砸晕粤 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 糟澡葬蚤灶 糟燥灶贼葬蚤灶蚤灶早 圆 藻曾燥灶泽
泽藻责葬则葬贼藻凿 遭赠 员 蚤灶贼则燥灶泽 憎蚤贼澡 猿 源源苑 遭责援 悦 皂怎贼葬贼藻凿 贼燥 郧 蚤灶 孕责粤粤栽圆 燥灶 泽藻择 缘缘缘 遭责袁 则藻泽怎造贼蚤灶早 葬造葬灶蚤灶藻 贼燥 增葬造蚤灶藻援
孕责粤粤栽圆 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽藻凿 蚤灶 则藻泽责燥灶泽藻 贼燥 藻曾燥早藻灶燥怎泽 藻贼澡赠造藻灶藻 憎澡蚤糟澡 责则燥皂燥贼藻凿 孕责粤粤栽圆 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 造藻增藻造 蚤灶 园 益
糟燥造凿鄄泽贼则燥葬早藻 责藻葬糟澡 枣则怎蚤贼泽援 孕责粤粤栽圆 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽藻凿 蚤灶 造藻葬增藻泽袁 枣造燥憎藻则泽 葬灶凿 则蚤责藻 枣造藻泽澡袁 泽怎早早藻泽贼蚤灶早 贼澡葬贼 贼澡藻 早藻灶藻 责造葬赠藻凿
第 圆 期 王贵章等院桃果实醇酰基转移酶基因的克隆及对外源乙烯的响应表达
葬 则燥造藻 蚤灶 增葬则蚤燥怎泽 责澡赠泽蚤燥造燥早蚤糟葬造 责则燥糟藻泽泽藻泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 责藻葬糟澡 枣则怎蚤贼曰 葬造糟燥澡燥造 葬糟赠造鄄贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻 早藻灶藻 渊粤粤栽冤曰 藻泽贼藻则泽曰 藻曾燥早藻灶燥怎泽 藻贼澡赠造藻灶藻
桃渊孕则怎灶怎泽 责藻则泽蚤糟葬 蕴援 月葬贼泽糟澡冤是我国广泛种植的
重要园艺植物之一袁据联合国粮农组织渊云粤韵 圆园员员冤
最新统计数据显示袁在我国的栽培面积已逾 苑猿 万
噪皂圆袁产量达 员 员缘圆 万 贼遥 香气是桃果实特征风味品
质的重要组成部分袁在很大程度上影响着鲜食桃产
品及其制成品的品质袁而贮藏桃果实的香味是评价
其品质的一个重要因子袁也成为吸引消费者的重要
因素咱员暂 遥 研究发现袁耶大久保爷桃在采后 猿 凿 进入完
熟状态袁风味品质达到最佳咱圆暂 袁一旦完成后熟便不耐
贮藏袁很快腐烂变质遥 目前袁延长市场供应期的主要
措施之一是采用低温冷藏咱猿暂 曰但桃果实在低温下易
发生冷害袁一个明显的特征是香味变淡甚至丧失袁直
接导致食用品质下降咱源 原 缘暂 遥 因此袁研究低温贮藏桃
果实芳香成分的生物合成调节具有重要意义遥
不同水果的特有香味是不同挥发性成分组合的
结果咱远暂 袁它不仅取决于品种本身的遗传性状和发育
阶段咱苑 原 怨暂 袁而且受外界因素的调控袁如栽培管理措
施尧采收时间尧采后贮藏方式等遥 如采后贮藏温度会
影响草莓渊云则葬早葬则蚤葬 葬灶葬灶葬泽泽葬 阅怎糟澡藻泽灶藻冤的芳香物质
合成袁缘 益和 员园 益较 园 益贮藏条件能产生更多的芳
香族化合物咱员园暂 曰在桃果实采收前套袋袁可以促进果
香型物质尤其是 酌鄄癸内酯的合成咱员员暂 遥 桃果实中挥
发性香气成分复杂袁已鉴定出的有 员园园 种袁主要是酯
类尧内酯类尧醛类尧醇类尧酸酮类和烷烃类等咱员圆 原 员源暂 遥
酯类和内酯类使果实散发甜美的果香气息咱员缘 原 员远暂 袁而
乙醇酰基转移酶 粤粤栽渊粤造糟燥澡燥造 葬糟赠造贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻冤 渊耘悦
圆援 猿援 员援 愿源冤是酯类香气合成过程的关键酶袁它催化脂
肪酸途径中最后一个酰基由醇转化为酯咱员苑 原 员愿暂 遥
由于 粤粤栽酶在酯类香气生物合成中发挥重要
作用袁因此袁相应基因的研究对深入了解果实香气品
质具有很高的商业价值遥 目前袁果实中酯类合成相
关基因 粤粤栽 的研究取得了较大进展袁已陆续从杏
渊孕则怎灶怎泽 葬则皂藻灶蚤葬糟葬 酝葬曾蚤皂冤 咱员怨暂 尧 猕猴桃 渊 粤糟贼蚤灶蚤凿蚤葬
泽责责援 冤 咱圆园暂 尧甜瓜渊悦怎糟怎皂蚤泽 皂藻造燥 渊蕴援 冤 晕葬怎凿冤 咱圆员 原 圆圆暂 尧草
莓咱圆猿 原 圆源暂 尧苹果 渊酝葬造怎泽 凿燥皂藻泽贼蚤糟葬 杂糟澡灶藻蚤凿冤 咱圆缘暂 尧木瓜
渊悦澡葬藻灶燥皂藻造藻泽 泽蚤灶藻灶泽蚤泽 运燥藻澡灶藻冤 咱圆远暂 尧香蕉渊酝怎泽葬 泽葬责蚤藻灶鄄
贼怎皂 运怎灶贼扎藻冤 咱员苑暂 尧桃咱圆苑暂等水果中克隆尧分离得到 粤粤栽
基因遥 粤粤栽蛋白属于酰基转移酶 月粤匀阅 超级家族
成员袁在氨基酸序列中部有植物酰基转移酶高度保
守的 匀载载载阅活性位点咱圆员暂和 阅渊晕冤云渊灾冤郧宰郧 结构
域咱圆愿袁圆员暂 袁活性位点氨基酸的定点突变会导致酶的催
化功能缺失咱圆怨 原 猿园暂 遥 粤粤栽 基因在转录水平的表达通
常是随着果实的成熟而提高袁而在反义的 粤悦韵 甜瓜
品种中袁粤粤栽基因的表达并不随果实的成熟而有所
变化咱圆员暂 袁表明 粤粤栽 基因转录表达水平与乙烯合成
有关遥
关于乙烯对正常后熟果实酯类香气的调节不乏
报道袁研究表明袁乙烯通过调节乙醇酰基转移酶活
性袁从而调控苹果果实中酯类物质的合成咱圆缘袁 猿员暂 遥 木
瓜中大多数酯类的产生也依赖乙烯袁在果实成熟过
程中施加乙烯利可以促进酯类的产生咱猿圆暂 遥 载蚤 等咱猿猿暂
研究发现袁在 圆园 益条件下袁桃果实内酯类物质的产
生随着乙烯跃变的发生而快速积累曰但在冷藏条件
下袁桃果实的乙烯代谢受阻咱猿源暂 袁从而影响了香气成
份的释放遥 目前袁对桃果实香气的研究主要集中在
香气成份种类尧合成途径和限速关键酶方面袁关于贮
藏过程中影响香气合成的因素研究不多袁尤其是冷
藏过程中香气的变淡丧失问题目前仍无有效的解决
办法遥 本研究用外源乙烯处理 园 益冷藏条件下的
耶大久保爷桃果实袁对酯类合成相关基因 粤粤栽 的表达
水平进行分析袁以期揭示乙烯对冷藏桃果实酯类香
气合成在转录水平的调节作用遥
本实验室前期研究发现袁桃果实在贮藏过程中
香气成分发生变化袁园 益低温下某些重要香气物质
的合成受到抑制袁而用外源乙烯处理后能明显改善
果实品质袁唤醒某些香气成分的合成袁从而达到改善
果实风味品质的目的遥 本研究首次从桃果实中扩增
粤粤栽基因全长袁并进行序列分析遥 重点讨论外源乙
烯对 园 益冷藏桃果实中酯类香气合成代谢的关键基
因 粤粤栽在 皂砸晕粤 水平上的表达调控作用袁外源乙烯
处理能够通过调节 粤粤栽 的表达袁从而对低温抑制的
酯类香气合成起到一定的恢复作用袁研究结果为深
入探讨桃果实酯类香气代谢及调控机制丰富数据袁
也为今后桃果实采后保鲜技术的发展提供理论
指导遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 试验材料及处理方法
员援 员援 员摇 试验材料摇 试验以北京地区的主栽桃品种
耶大久保爷为材料袁于 圆园员园 年 愿 月 员猿 日果实商业成
怨缘员
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
熟期采自北京市平谷区袁采收后立即带回实验室遥
选取大小均匀尧果皮着色基本一致尧无明显缺陷的果
实进行处理遥 果实成熟度的划分参考 晕再 辕 栽圆源圆鄄
圆园园园渊中华人民共和国农业行业标准冤遥 在当年 源 月
花期袁于同一果园中采摘耶大久保爷的幼叶和花袁采
集后立即投入液氮中袁带回实验室置于 原 愿园 益冰箱
保存袁用于不同组织中的基因表达检测遥
员援 员援 圆 摇 处理方法 摇 根据本实验室前期研究结
果咱猿缘暂 袁设计 圆 个对照袁即常温贮藏桃渊圆源 益 依 园郾 缘 益
贮藏 猿 凿袁记为 悦运员冤和 园 益冷库贮藏桃 渊园 益 依
园郾 缘 益贮藏 猿园 凿袁记为 悦运圆冤遥 在 园 益冷库中贮藏至
员缘 凿后开始袁每日向贮藏袋内注射外源乙烯袁使袋内
乙烯的浓度保持在 缘园 愿园 滋蕴窑蕴 原员咱猿远暂 袁至贮藏结
束渊记为 栽冤遥 所有处理的果实均密封保存在
园郾 园源 皂皂聚乙烯塑料袋内袁每 圆源 澡 开袋换气 员 次袁
以保证袋内的氧气和二氧化碳浓度相同遥 取样时
从袋中随机取 员园 个果袁从去皮后的果实四面各取
员 糟皂厚的果肉切片混合袁鲜样用于测定芳香挥发
物成分袁其余果肉组织用液氮速冻后置于 原 愿园 益
冰箱袁用于研究 粤粤栽 基因响应外源乙烯的表达模
式袁重复 猿 次遥
员援 圆摇 砸晕粤提取和 糟阅晕粤合成
耶大久保爷桃叶片尧花和果肉组织总 砸晕粤 的提
取袁使用 耘粤杂再泽责蚤灶植物 砸晕粤快速提取试剂盒渊北京
艾德莱生物科技有限公司冤按照说明书进行操作遥
以不含 砸晕粤 酶的 阅晕葬泽藻陨 消化残留的基因组 阅晕粤
渊北京天根生化科技有限公司冤纯化 皂砸晕粤遥 总
砸晕粤纯度和浓度则通过 晕葬灶燥阅则燥责 晕阅鄄愿园园园 进行检
测袁并经 员援 园 豫的琼脂糖凝胶电泳鉴定 砸晕粤的完整
性遥 使用 杂酝粤砸栽栽酝 砸粤悦耘 试剂盒进行反转录袁得到
第 员 链 糟阅晕粤袁以备基因的 砸粤悦耘鄄孕悦砸扩增遥
员援 猿摇 基因的分离与序列分析
根 据 郧阅砸 渊 澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 则燥泽葬糟藻葬藻援 燥则早 辕 早遭 辕
早遭则燥憎泽藻 辕 责则怎灶怎泽赃责藻则泽蚤糟葬 辕 冤中公布的核苷酸序列袁使
用 孕则蚤皂藻则 孕则藻皂蚤藻则 缘 设计特异引物 粤粤栽鄄猿孕 和 粤粤栽鄄
缘孕袁 缘 爷 砸粤悦耘 正 向 引 物 栽郧粤栽郧郧郧悦郧粤郧悦栽栽栽粤鄄
粤郧栽悦悦栽悦 和 猿爷 砸粤悦耘 反向引物 悦栽悦悦郧粤郧粤栽悦栽郧鄄
郧粤悦郧粤郧悦均由试剂盒中提供遥 根据 砸粤悦耘 试剂盒
的说明书采用 栽燥怎糟澡 凿燥憎灶 孕悦砸 程序分别进行 猿爷末
端和 缘 爷 末端扩增袁将回收的 孕悦砸 产物克隆到
责酝阅员怨鄄栽 增藻糟贼燥则渊栽葬运葬砸葬 公司冤上袁热击法转化感受
态细胞 耘援 糟燥造蚤 阅匀缘倩渊孕则燥皂藻早葬公司冤袁通过蓝白斑筛
选获得重组子袁送上海美吉生物医药科技有限公司
渊北京分公司冤进行测序遥 将获得的序列进行人工
拼接袁得到基因的理论全长袁从两端分别设计特异引
物 粤粤栽鄄云 和 粤粤栽鄄砸袁使用 运韵阅云载 高保真酶渊栽韵再韵鄄
月韵公司冤扩增全长 糟阅晕粤 的 韵砸云袁反应体系如下院
孕悦砸缓冲液 员圆援 缘 滋蕴袁凿晕栽孕缘 滋蕴袁上游和下游引物各
园郾 苑缘 滋蕴袁糟阅晕粤 模板 源 滋蕴袁运韵阅 云载员 滋蕴袁凿凿匀圆韵 补
足至 圆缘 滋蕴遥 孕悦砸 扩增遵循如下程序院怨愿 益预变性
员 皂蚤灶曰怨愿 益变性 员园 泽袁缘园 益退火 员缘 泽袁远愿 益延伸
猿 皂蚤灶袁缘 个循环曰怨愿 益变性 员园 泽袁远愿 益延伸 猿 皂蚤灶袁猿园
个循环曰远愿 益延伸 苑 皂蚤灶曰源 益保存遥 孕悦砸 产物的回
收尧连接尧转化及测序方法同上遥
表 员摇 桃中 粤粤栽基因扩增及实时荧光定量 孕悦砸所需引物
引物名称 引物序列 渊缘爷寅猿爷冤 退火温度 辕 益 引物作用 目的片段长度 辕 遭责
粤粤栽鄄猿孕 栽悦郧悦悦栽郧粤悦粤栽郧栽郧郧粤郧郧悦栽栽悦粤栽悦 缘远 猿爷末端扩增 怨怨缘
粤粤栽鄄缘孕 粤郧栽郧郧粤悦栽栽郧悦粤悦粤悦粤郧粤粤郧栽栽悦悦粤悦 缘缘 缘爷末端扩增 员 园猿源
粤粤栽鄄云 粤栽郧郧郧郧粤郧栽悦粤栽栽栽栽郧栽栽郧悦粤粤栽 缘园 韵砸云扩增 员 猿缘猿
粤粤栽鄄砸 栽栽粤栽栽栽粤郧粤栽粤栽悦栽悦悦栽悦郧粤悦粤栽郧悦栽
粤粤栽匝云 郧郧粤栽粤粤粤郧粤郧栽粤悦粤栽郧悦粤粤栽悦粤悦 缘员 实时荧光定量 圆园园
粤粤栽匝砸 栽郧栽栽郧栽悦栽悦郧郧粤悦粤栽粤郧粤粤郧悦栽
栽耘云圆云 郧郧栽郧栽郧粤悦郧粤栽郧粤粤郧粤郧栽郧粤栽郧 缘猿 内参基因 员圆怨
栽耘云圆砸 栽郧粤粤郧郧粤郧粤郧郧郧粤粤郧郧栽郧粤粤粤郧
测序的核苷酸用 阅晕粤酝粤晕 软件进行拼接袁通过
晕悦月陨中提供的 韵砸云 云蚤灶凿藻则 查找开放阅读框袁孕则蚤皂藻则
孕则藻皂蚤藻则缘翻译成氨基酸序列曰通过 耘曾孕粤杂赠的 孕则燥贼孕葬则葬皂
及 孕则燥贼杂糟葬造藻在线工具完成对预测蛋白质的理化参数及
亲疏水性分析曰晕悦月陨 在线查找保守结构域咱猿苑暂袁使用在
线工具 悦澡造燥则燥孕预测蛋白质的叶绿体转运信号肽曰通过
孕则藻凿蚤糟孕则燥贼藻蚤灶分析蛋白质的二级结构遥
利用 酝耘郧粤缘 软件对 郧藻灶月葬灶噪 中收录的具代表
性的同源序列进行聚类分析袁并构建其同苹果尧草
莓尧杏等 圆园 个物种同源序列的系统进化树袁使用目
前普遍使用的基于距离矩阵的近邻相连法渊晕允冤构
建无根进化树咱猿愿暂 袁月燥燥贼泽贼则葬责重复计算 员 园园园 次遥
园远员
第 圆 期 王贵章等院桃果实醇酰基转移酶基因的克隆及对外源乙烯的响应表达
以稀释的反转录 糟阅晕粤 为模板袁进行实时荧光
定量 孕悦砸反应渊粤月陨苑缘园园袁美国冤袁用 孕则蚤皂藻则猿 在线软
件设计引物 粤粤栽匝云和 粤粤栽匝砸渊表 员冤袁以 栽耘云圆 作为
内参基因咱猿怨暂 袁分析外源乙烯对 粤粤栽 基因表达模式的
影响及该基因在不同组织中的表达特性遥 使用
栽葬运葬砸葬的实时荧光定量 孕悦砸试剂盒 杂再月砸襆 孕则藻皂蚤曾
耘曾 栽葬择栽酝袁用 圆缘 滋蕴反应体系袁方法参照说明书遥 表
达数据分析使用 粤月陨苑缘园园 系统软件袁用 圆 原吟吟悦栽法咱源园暂
分析靶基因的相对表达差异袁重复 猿 次遥
员援 源摇 酯类挥发物检测
耶大久保爷桃果实中酯类挥发物的提取采用顶
空固相微萃取渊 杂孕酝耘冤法袁萃取头型号为 孕阅酝杂员园园
滋皂渊美国 杂哉孕耘蕴悦韵公司冤 咱源员暂 遥 取 缘 早桃果肉组织鲜
样加入饱和的 晕葬悦造 溶液匀浆化袁源园 益顶空吸附 猿园
皂蚤灶遥 气相色谱鄄质谱分析使用美国 栽澡藻则皂燥 栽砸粤悦耘
郧悦员园园 气质联用仪遥 色谱条件院匀孕鄄缘 猿园 皂 伊园郾 员 皂皂
伊园郾 猿猿 滋皂毛细管柱袁进样口温度 圆圆园 益袁程序升温
模式为起始温度 缘园 益袁保留时间 圆 皂蚤灶袁以 远 益窑
皂蚤灶 原员升至 圆圆园 益袁保留 员园 皂蚤灶袁载气 晕圆遥 质谱条件院云蚤灶灶蚤早葬灶 栽则葬糟藻 郧悦 怎造贼则葬 辕 云蚤灶灶蚤早葬灶 栽则葬糟藻 阅杂匝袁电离方
式 耘陨袁电离电压 苑园 藻灾袁离子源温度 圆园园 益袁质谱接
口温度 圆缘园 益袁全扫描模式袁扫描范围院圆怨 缘源园
葬皂怎遥 经计算机检索及与质谱库渊晕陨杂栽园圆冤对照匹
配袁结合文献资料分析袁确定芳香物质袁利用峰面积
归一法袁计算酯类物质的相对质量百分含量遥
员援 缘摇 耶大久保爷桃果实贮藏过程中乙烯的产生及果
肉硬度测定
摇 摇 耶大久保爷桃果肉硬度用 栽粤鄄载栽孕蕴哉杂渊英国冤质
构仪进行测定袁探头直径 缘 皂皂咱源圆暂 曰参照胡花丽等咱源猿暂
的方法袁用 杂匝鄄圆园远 型气相色谱仪渊北京瑞利分析仪
器厂冤测定乙烯释放速率遥
员援 远摇 试验设计与统计分析
试验采用完全随机设计袁用 耘载悦耘蕴圆园园猿处理试验
数据袁运用 韵则蚤早蚤灶孕则燥愿郾 远渊韵则蚤早蚤灶蕴葬遭 悦燥援 袁 晕燥则贼澡葬皂责贼燥灶袁
酝粤袁 哉杂粤冤软件进行统计及作图袁数据的差异显著性分
析是基于 缘豫水平的最小差异显著渊蕴杂阅冤检验遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 粤粤栽基因克隆及序列分析
通过查找与比对袁以桃基因组 阅晕粤 数据库中注
释的转移酶序列 责责葬园园缘远圆缘 皂 为参考袁分别设计末
端扩增的特异引物袁以耶大久保爷桃果肉组织的 糟阅鄄
晕粤为模板进行 砸粤悦耘鄄孕悦砸 扩增袁孕悦砸 产物经过克
隆和测序袁获得长度分别为 怨怨缘 遭责 的 猿爷末端渊图 员
粤冤和 员 园猿源 遭责的 缘爷末端渊图 员 月冤袁将 圆 条序列进行
拼接袁发现 圆 条序列有一段完全重叠区域袁说明克
隆得到的是目地基因的 猿爷端和 缘爷端遥 利用 韵砸云
云蚤灶凿藻则工具对拼接序列进行分析袁得到基因的开放
读码框长度为 员 猿缘猿 遭责袁缘爷非编码区长度为 源圆 遭责袁
猿爷非编码区长度为 怨员 遭责遥 在拼接后序列 韵砸云 的
起始密码子和终止密码子处分别设计特异引物袁扩
增并测序袁得到长 员 猿缘猿 遭责 的开放读码框序列渊图
员 悦冤遥 将该基因在桃全基因组数据库中进行相似
性搜索袁发现该 糟阅晕粤序列与数据库中参考序列的
猿爷和 缘爷非编码区一致袁在 悦阅杂 区有 圆 处碱基差异袁
缘缘缘 遭责处碱基由 悦突变为 郧袁导致丙氨酸渊粤冤突变为缬
氨酸渊灾冤袁在 远猿缘 遭责处为同义突变遥 该基因位于桃第 缘
条染色体的 员 怨愿员 缘愿园 员 怨愿远 怨远愿位置袁月粤悦注释为含
员个长 猿 源源苑 遭责内含子的 皂砸晕粤序列转录链遥
酝院阅圆园园园 皂葬则噪藻则曰粤院猿爷砸粤悦耘扩增产物曰
月院缘爷砸粤悦耘扩增产物曰悦院韵砸云扩增产物
图 员摇 耶大久保爷桃 孕责粤粤栽圆 基因 孕悦砸扩增电泳图
扩增到的序列其最大开放阅读框编码为 源缘园 个
氨基酸渊图 圆冤袁蛋白质分子量为 缘园郾 员苑 运阅袁理论等电
点 孕陨 越 缘援 苑苑袁命名为 孕责粤粤栽圆遥 通过 栽酝匀酝酝 圆援 园 的
跨膜预测发现院孕责粤粤栽圆 蛋白位于细胞膜外袁无明显
跨膜结构曰结合亚细胞定位预测结果袁推断 孕责粤粤栽圆
在细胞质中合成后不经转运肽转运袁直接在合成部
位行使催化作用遥
圆援 圆摇 推导氨基酸序列的分子进化分析
将推导的氨基酸与苹果尧草莓尧葡萄尧拟南芥
渊粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 匀藻赠灶澡冤尧杨树 渊孕燥责怎造怎泽 贼则蚤糟澡燥鄄
糟葬则责葬 栽燥则则援 驭 郧则葬赠冤等已完成基因组测序物种的酰
基转移酶及经过试验验证的 粤粤栽 序列进行比对袁发
现 孕责粤粤栽圆 属于 孕蕴晕园圆源愿员 超级家族袁具有植物酰基
转移酶家族的高度保守结构域 匀载载载阅渊员苑员鄄员苑缘 氨
基酸残基冤活性位点和 阅渊晕冤云渊灾冤郧宰郧渊猿怨圆鄄猿怨苑 氨
基酸残基冤结构域咱圆员暂 袁同时具有 月粤匀阅 酰基转移酶
员远员
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
家族的保守序列 蕴载载再再孕蕴粤郧砸咱圆源暂 渊苑猿鄄愿圆 氨基酸残 基冤渊图 猿冤遥
图中下划线字母为起始密码子曰鄢表示终止密码子曰斜体阴影为 粤粤栽推导氨基酸的保守结构域曰粗线边框为碱基和氨基酸突变位点遥
图 圆摇 孕责粤粤栽圆 基因 糟阅晕粤序列及推导的氨基酸序列分析
为进一步分析 孕责粤粤栽圆 与植物酰基转移酶基因
的进化关系袁笔者对 郧藻灶月葬灶噪 中登录的与 孕责粤粤栽圆
同源的杏尧苹果尧西洋梨等其它植物同源性较高的氨
基酸序列进行大分子进化分析袁通过酝耘郧粤缘援 员 软件
构建相应的系统发育树渊图 源冤遥 通过对 员怨 个物种
的 圆圆 条序列的同源氨基酸比对发现袁孕责粤粤栽圆 基因
的氨基酸序列与杏 孕葬粤粤栽 基因的同源性最高袁为
愿缘援 愿员豫 袁与苹果 酝凿粤粤栽 基因的同源性为 远园郾 圆远豫 遥
从图 源 还看出院这些物种的 粤粤栽 基因编码的蛋白质
共形成 源 个 分 支袁 桃 与 杏 渊 孕葬粤粤栽 冤 咱员怨暂 尧 草 莓
渊云葬粤粤栽冤 咱圆源暂 尧甜瓜渊悦皂粤粤栽员冤 咱圆员暂等水果中酯类合成
相关的 粤粤栽基因编码氨基酸聚为 员 枝袁康乃馨和葡
萄聚为 员 枝袁甜瓜渊悦皂粤粤栽猿冤尧蓖麻渊砸糟粤粤栽冤和毛果
杨渊孕贼则粤粤栽圆冤聚为 员 枝袁而高粱尧粟尧毛果杨尧苜蓿尧大
豆等作物为同一起源袁聚为 员 枝遥 由图 源 可见袁这些
基因存在较大的种内差异袁此结果与同源性分析结
果一致遥
圆援 猿摇 冷藏桃中 粤粤栽基因对外源乙烯的响应及不同
组织中的表达差异
由图 缘粤可见院低温下 孕责粤粤栽圆 基因的相对表达
量比常温贮藏桃渊悦运员冤中表达量高袁表明低温有助
于 粤粤栽基因在转录水平的表达袁而在 园 益条件下施
加外源乙烯后袁粤粤栽基因的表达量进一步增加袁是不
加乙烯处理桃果实中表达量的 猿援 缘 倍袁表明外源乙
烯对耶大久保爷桃果实中 孕责粤粤栽圆 基因的表达有促进
作用遥 通过对不同组织中 粤粤栽 基因的检测发现袁
粤粤栽在耶大久保爷桃叶片尧花和果实中均有表达袁叶片
和花中的表达量显著高于果实中的袁花中的表达量
最高袁是果实中的 缘 倍遥
圆远员
第 圆 期 王贵章等院桃果实醇酰基转移酶基因的克隆及对外源乙烯的响应表达
图 猿摇 孕责粤粤栽圆 与其它植物酰基转移酶蛋白序列的同源性分析渊植物酰基转移酶蛋白活性位点的保守结构域用方框标出冤
猿远员
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
图 源摇 耶大久保爷桃 孕责粤粤栽圆 氨基酸序列与其他植物转移酶家族蛋白的系统进化树分析
杏院孕葬粤粤栽渊耘哉苑愿源员猿愿冤曰苹果院酝凿粤粤栽渊粤粤杂苑怨苑怨苑冤曰西洋梨渊孕赠则怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽 蕴援 冤院孕糟粤粤栽渊粤再缘猿源缘猿园冤曰仙女扇渊悦造葬则噪蚤葬 遭则藻憎藻则蚤 郧则藻藻灶冤院
悦遭粤粤栽渊粤云缘园园圆园园冤曰拟南芥院粤贼粤粤栽渊晕酝赃员圆员苑远园冤曰草莓院云葬粤粤栽渊允晕园愿怨苑远远冤曰甜瓜院悦皂粤粤栽员渊悦粤粤怨源源猿圆冤曰甜瓜 悦皂粤粤栽圆渊耘哉源猿员猿猿源冤曰甜瓜
悦皂粤粤栽猿渊粤粤宰缘员员圆远冤曰康乃馨渊阅蚤葬灶贼澡怎泽 糟葬则赠燥责澡赠造造怎泽 月怎则皂冤院阅糟粤粤栽渊韵圆猿怨员苑冤曰葡萄渊灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬 运怎灶贼扎藻冤院灾增粤粤栽渊载孕赃园园圆圆远怨苑怨园冤曰高粱
渊杂燥则早澡怎皂 遭蚤糟燥造燥则 酝燥藻灶糟澡冤院杂遭粤粤栽渊载孕赃园园圆源源源怨园苑冤曰粟渊杂藻贼葬则蚤葬 蚤贼葬造蚤糟葬 月藻葬怎增冤院杂蚤粤粤栽渊载孕赃园园源怨苑圆源苑怨冤曰番茄渊蕴赠糟燥责藻则泽蚤糟燥灶 藻泽糟怎造藻灶贼怎皂 酝怎造造冤院
杂造粤粤栽渊载孕赃 园园源圆猿员愿缘愿 冤曰毛果杨院 孕贼则粤粤栽员 渊 粤月运怨源怨愿远 冤曰毛果杨 孕贼则粤粤栽圆 渊 载孕 赃 园园圆猿员苑缘圆员 冤曰可可 渊 栽澡藻燥遭则燥皂葬 糟葬糟葬燥 阅怎糟噪藻冤院 栽糟粤粤栽
渊耘韵载怨员源愿园冤曰鹰嘴豆渊悦蚤糟藻则 葬则蚤藻贼蚤灶怎皂 月燥则灶皂冤院悦葬粤粤栽渊载孕赃园园源缘园怨员圆苑冤曰大豆渊郧造赠糟蚤灶藻 皂葬曾 宰葬灶早冤院郧皂粤粤栽渊载孕赃园园猿缘缘园园缘缘冤曰苜蓿渊酝藻凿蚤糟葬早燥
贼则怎灶糟葬贼怎造葬 郧葬藻则贼灶冤院酝贼粤粤栽渊载孕赃园园猿远园源怨怨怨冤曰蓖麻渊砸蚤糟蚤灶怎泽 糟燥皂皂怎灶蚤泽 蕴援 冤院砸糟粤粤栽渊载孕赃园园圆缘圆怨缘愿苑冤曰耶大久保爷桃院孕责粤粤栽圆袁用荫标出遥
圆援 源摇 不同处理桃果实酯类挥发物分析
粤粤栽是调控 蕴韵载 途径中酯类物质合成的最后
一个环节袁催化脂酰辅酶 粤中的酰基袁使醇转化为相
应的酯咱员苑袁源源 原 源缘暂 袁本研究对不同处理桃果实酯类物质
的含量进行了测定袁以进一步确定 粤粤栽 与桃果实酯
类物质合成的关系遥 从常温贮藏桃渊悦运员冤尧园 益冷
库贮藏桃渊悦运圆冤和外源乙烯处理桃渊栽冤果实中共检
测到 源 种酯类芳香挥发物质袁分别是乙酸己酯尧渊邻冤
氨基苯甲酸鄄员袁缘鄄二甲基鄄员鄄乙烯基鄄源鄄己烯酯尧戊二酸
二丁酯与乙酸乙酯袁在不同贮藏条件下的桃果实中 源
种物质的含量渊表 圆冤表明院低温对乙酸乙酯的合成有
促进作用袁外源乙烯处理后乙酸乙酯的含量在贮藏至
猿园 凿时没有升高反而低于不加乙烯处理的桃果实曰
渊邻冤氨基苯甲酸鄄员袁缘鄄二甲基鄄员鄄乙烯基鄄源鄄己烯酯在外
源乙烯作用下袁其含量比 悦运圆有明显的上升曰乙酸己
摇 摇 误差棒为试验重复 猿 次产生的标准误差袁柱形图上方标注的不
同字母表示差异显著渊孕 约园郾 园缘冤袁相同字母表示差异不显著袁下同曰月
图中的果实与 粤图中 悦运员为相同样品袁都为常温下贮藏 猿 凿 的桃果
实曰粤图中 悦运圆和 栽分别代表 园 益贮藏 猿园 凿和 园 益贮藏 员缘 凿加外源
乙烯处理至 猿园 凿的桃果实曰月图中叶片和花分别为同年 源 月采摘于
同一果园中样品遥
图 缘摇 不同贮藏条件及组织器官中 孕责粤粤栽圆基因的表达差异
酯和戊二酸二丁酯的合成在低温下均被抑制袁外源乙
烯作用后其合成有回升袁但趋势不明显遥
表 圆摇 不同贮藏条件下耶大久保爷桃果实中 源 种酯类芳香挥发物的含量
酯类挥发物质 相对质量分数 辕 豫悦运员 悦运圆 栽
乙酸己酯 猿援 园源 依 园郾 员员葬 园郾 怨园 依 园郾 园愿遭 园郾 怨员 依 园郾 园远遭
渊邻冤氨基苯甲酸鄄员袁缘鄄二甲基鄄员鄄乙烯基鄄源鄄己烯酯 园郾 缘远 依 园郾 员缘葬 园郾 员远 依 园郾 园猿遭 园郾 猿缘 依 园郾 园远葬遭
戊二酸二丁酯 远援 源猿 依 园郾 猿猿葬 园郾 猿愿 依 园郾 员源遭 园郾 源园 依 园郾 园缘遭
乙酸乙酯 圆援 园苑 依 园郾 圆猿葬遭 猿援 远缘 依 园郾 猿苑葬 圆援 愿怨 依 园郾 猿圆葬遭
摇 摇 注院悦运员 代表常温贮藏 猿 凿袁悦运圆 代表 园 益贮藏 猿园 凿袁栽代表 园 益贮藏 员缘 凿加外源乙烯处理至 猿园 凿遥 表中数值为平均值 依标准误差袁同行不
同字母表示处理间差异显著袁相同字母表示差异不显著遥
源远员
第 圆 期 王贵章等院桃果实醇酰基转移酶基因的克隆及对外源乙烯的响应表达
圆援 缘摇 不同处理对桃果实乙烯产生及果实硬度的
影响
对不同处理桃果实乙烯释放量和果实硬度的测
定渊图 远粤冤可见院常温贮藏 猿 凿的耶大久保爷桃果实中
乙烯的释放量显著高于 园 益贮藏 猿园 凿的桃果实袁二
者相差近 愿园 倍袁可见袁园 益低温贮藏导致果实中乙
烯释放量大幅降低遥 此外袁外源乙烯处理的桃果实
不能代表自身的乙烯释放量袁故数据没有列出遥 对
桃果肉硬度进行测定渊图 远月冤发现院与常温贮藏 猿 凿
渊悦运员冤的桃果肉硬度相比袁低温贮藏桃渊悦运圆冤的果
肉硬度较高袁而施加外源乙烯处理渊栽冤的桃果肉硬
度略低于 悦运圆袁表明外源乙烯处理对促进冷藏桃果
实的软化有一定作用遥
图 远摇 不同贮藏条件下果实中乙烯的释放量及果肉硬度差异
猿摇 结论与讨论
乙烯与果实成熟的密切关系已为人熟知咱源远 原 源怨暂 袁
乙烯在转录水平调控果实软化相关基因的表达袁从
而促进桃果实的后熟和软化咱缘园暂 遥 常温贮藏 猿 凿 时袁
耶大久保爷桃的乙烯释放量达到高峰袁此时袁果肉变
软袁达到最佳食用状态咱猿缘暂 遥 本研究发现袁桃于 园 益
贮藏 猿园 凿时袁果肉仍保持较高的硬度袁当施加外源
乙烯后袁果肉硬度相应降低袁适当浓度的外源乙烯可
以促进冷藏桃果实软化遥 韵则贼蚤扎等咱缘员暂研究发现袁乙烯
水平影响桃果实香气尤其是酯类物质的合成遥 在
园 益贮藏 猿园 凿时袁桃内源乙烯释放量较对照渊悦运员冤
显著降低遥 在检测到的 源 种酯类挥发成分中袁乙酸
己酯尧渊邻冤氨基苯甲酸鄄员袁缘鄄二甲基鄄员鄄乙烯基鄄源鄄己烯
酯和戊二酸二丁酯在 园 益贮藏 猿园 凿 时含量比常温对
照渊悦运员冤低曰而施加外源乙烯后袁上述 猿 种酯类物质
的含量比 悦运圆有不同程度的增加遥 乙烯与酯类挥发
物质存在正相关性袁表明耶大久保爷桃果实在贮藏过程
中酯类物质的产生受乙烯的调节袁低温抑制乙烯的释
放进而抑制酯类物质的产生袁而外源乙烯可唤醒受低
温抑制的酯类物质释放遥 乙酸乙酯的变化趋势与其
它 猿种酯类相反袁施加外源乙烯处理至 猿园 凿时其含量
比 悦运圆低遥 乙烯并不是抑制乙酸乙酯的合成袁而是低
温延缓了其合成高峰出现的时间咱圆暂 遥 本文仅测定了
冷藏 猿园 凿时酯类物质的释放袁今后尚需对低温下乙烯
与乙酸乙酯合成的关系进行研究遥
挥发性酯类物质使果实散发出香甜气息咱缘圆暂 遥
研究认为袁果实中的酯类物质主要是通过脂肪酸途
径合成咱圆愿袁员愿暂 袁进一步的研究证实亚麻酸和亚油酸等
前体物质经过多种酶的催化袁最终在乙醇酰基转移
酶渊粤粤栽冤作用下分别以脂酰辅酶 粤 和醇作为底物
而合成相应的酯咱圆缘袁源源暂 遥 本研究从耶大久保爷桃果肉
中克隆到 员 个与 粤粤栽 高度同源的基因袁该基因编码
区长度为 员 猿缘猿 遭责袁编码 源缘园 个氨基酸袁蛋白质分子
量为 缘园郾 员苑 运阅袁理论等电点 孕陨 越 缘援 苑苑袁命名为
孕责粤粤栽圆遥 将不同种属 粤粤栽 基因编码的氨基酸序列
进行聚类后发现袁桃 孕责粤粤栽圆 与杏咱员怨暂 尧甜瓜咱圆员暂 尧草
莓咱圆源暂等 粤粤栽编码的氨基酸聚为一簇袁为直系同源基
因袁已经研究报道这三者中的 粤粤栽 与酯类合成关系
密切袁暗示本研究获得的 孕责粤粤栽圆 基因可能是与桃酯
类合成相关的基因袁关于该基因调控酯类合成的功
能尚需进一步的实验验证遥 在 园 益低温下袁孕责粤粤栽圆
的表达水平比常温高袁但乙酸己酯尧渊邻冤氨基苯甲酸鄄
员袁缘鄄二甲基鄄员鄄乙烯基鄄源鄄己烯酯尧戊二酸二丁酯释放量
降低袁推测这可能与 粤粤栽底物特异性有关袁桃中可能
存在其它 粤粤栽基因家族成员调控酯类合成袁外源乙烯
促进了调控基因的表达袁从而提高了相应 猿 种酯类物
质的含量遥 体外酶促反应实验证实袁桃 孕责粤粤栽员 能特
异的将乙酰辅酶 粤 与醇结合形成乙酸酯类物
质咱圆苑袁源缘暂 袁证明了桃 粤粤栽基因是以家族的形式存在袁且
它们的反应底物具有特异性遥 草莓中也得出类似的
结果袁粤粤栽通过催化多种底物特异结合形成不同的酯
类如丁酸己酯尧乙酸辛酯尧己酸甲酯等咱圆猿暂 遥 粤粤栽催化
合成酯的含量除受相关基因的表达调控外袁还受限于
底物的供应遥 本研究发现袁在 猿 个不同贮藏条件下袁
孕责粤粤栽圆的相对表达水平为 悦运员 约 悦运圆 约 栽袁而乙酸乙
酯的释放量则为 悦运圆 跃 栽 跃 悦运员曰低温冷藏桃果实施
加外源乙烯后袁尽管 孕责粤粤栽圆 基因相对表达水平较单
纯低温贮藏高 猿援 缘倍袁但乙酸乙酯的释放量却比单纯
低温贮藏桃的低袁且常温贮藏桃中乙酸乙酯含量也比
单纯低温贮藏桃的少遥 据报道袁桃果实在成熟前以
野青草型冶香气醇类和醛类为主袁成熟后以野果香型冶
香气酯类和内酯类为主袁而果实成熟后芳香物质的变
化主要是含量发生变化袁合成的醇类和醛类物质的比
重降低咱源缘暂 遥 常温下袁乙酸乙酯合成量比单纯 园 益贮
缘远员
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆苑 卷
藏少袁推测可能与常温贮藏桃果实中酯类合成的前体
物质缺失有关遥 研究发现袁在桃果实采后成熟过程
中袁与醇合成密切相关的乙醇脱氢酶渊粤阅匀冤表达水平
降低咱员愿袁 缘猿暂 袁醇类减少袁使酯类合成的前体物质减少遥
此结论在苹果果实中得到验证袁当醇缺乏时袁相应的
酯类合成受到影响袁醇类和乙酰 悦燥粤的供应量对酯类
合成起着重要作用咱缘源暂 遥 施加外源乙烯渊栽冤后袁乙酸乙
酯的含量比 悦运圆贮藏桃的低袁可能是由于乙烯的反馈
抑制作用遥 此外袁本文通过对该基因进行组织特异性
检测发现袁孕责粤粤栽圆 在果实尧花及叶片中均有表达袁且
叶片中表达量显著高于果实袁推测 粤粤栽可能参与不同
的生理过程袁是控制多性状的基因遥 运蚤灶早 等咱缘缘暂研究
表明袁粤粤栽与矮牵牛花瓣表皮覆盖的阻断水分流失的
蜡酯合成有关遥
采用冷藏结合适宜浓度的外源乙烯处理可唤醒
低温代谢障碍的重要香气物质释放袁从而改善桃果
实品质袁提高贮藏保鲜效果遥 该结果可为明确桃
粤粤栽圆 基因的生物学功能奠定基础袁同时也为提高桃
果实的采后贮藏品质提供一定的理论依据遥
参考文献院
咱员暂 杂糟澡憎葬遭 宰袁 阅葬增蚤凿燥增蚤糟澡鄄砸蚤噪葬灶葬贼蚤 砸袁 蕴藻憎蚤灶泽燥澡灶 耘援 月蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽 燥枣
责造葬灶贼鄄凿藻则蚤增藻凿 枣造葬增燥则 糟燥皂责燥怎灶凿泽咱 允暂 援 栽澡藻 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造袁 圆园园愿袁 缘源
渊源冤院 苑员圆 原 苑猿圆
咱圆暂 李杨昕援 大久保桃果实特征香气物质低温代谢障碍的基础研究
咱阅暂援 北京院中国林业科学研究院袁 圆园员园
咱猿暂 蔡摇 琰袁 余美丽袁 邢宏杰袁 等援低温预贮处理对冷藏水蜜桃冷害
和品质的影响咱允暂 援 农业工程学报袁 圆园员园袁 圆远渊远冤院 猿猿源 原 猿猿愿
咱源暂 蕴怎则蚤藻 杂袁 悦则蚤泽燥泽贼燥 悦 匀援 悦澡蚤造造蚤灶早 蚤灶躁怎则赠 蚤灶 责藻葬糟澡 葬灶凿 灶藻糟贼葬则蚤灶藻咱 允暂 援
孕燥泽贼澡葬则增藻泽贼 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园缘袁 猿苑渊猿冤院 员怨缘 原 圆园愿
咱缘暂 悦葬灶贼侏灶 悦 酝袁 悦则蚤泽燥泽贼燥 悦 匀袁 韵早怎灶凿蚤憎蚤灶 耘 粤袁 藻贼 葬造援 悦澡蚤造造蚤灶早 蚤灶躁怎则赠
泽怎泽糟藻责贼蚤遭蚤造蚤贼赠 蚤灶 葬灶 蚤灶贼则葬鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟 责藻葬糟澡 渊渊 孕则怎灶怎泽 责藻则泽蚤糟葬 渊 蕴援 冤
月葬贼泽糟澡冤 责则燥早藻灶赠咱 允暂 援 孕燥泽贼澡葬则增藻泽贼 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园员园袁
缘愿渊圆冤院 苑怨 原 愿苑
咱远暂 蕴藻憎蚤灶泽燥澡灶 耘袁 杂糟澡葬造藻糟澡藻贼 云袁 宰蚤造噪蚤灶泽燥灶 允袁 藻贼 葬造援 耘灶澡葬灶糟藻凿 蕴藻增藻造泽 燥枣
贼澡藻 粤则燥皂葬 葬灶凿 云造葬增燥则 悦燥皂责燥怎灶凿 杂鄄蕴蚤灶葬造燥燥造 遭赠 酝藻贼葬遭燥造蚤糟 耘灶早蚤灶藻藻则鄄
蚤灶早 燥枣 贼澡藻 栽藻则责藻灶燥蚤凿 孕葬贼澡憎葬赠 蚤灶 栽燥皂葬贼燥 云则怎蚤贼泽咱 允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥鄄
早赠袁 圆园园员袁 员圆苑渊猿冤院员圆缘远 原 员圆远缘
咱苑暂 耘灶早藻造 运 匀袁 砸葬皂皂蚤灶早 允 阅 宰袁 云造葬贼澡 砸 粤袁 藻贼 葬造援 陨灶增藻泽贼蚤早葬贼蚤燥灶 燥枣 灾燥造鄄
葬贼蚤造藻 悦燥灶泽贼蚤贼怎藻灶贼泽 蚤灶 晕藻糟贼葬则蚤灶藻泽援 圆援 悦澡葬灶早藻泽 蚤灶 粤则燥皂葬 悦燥皂责燥泽蚤贼蚤燥灶
凿怎则蚤灶早 晕藻糟贼葬则蚤灶藻 酝葬贼怎则葬贼蚤燥灶咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 葬灶凿 云燥燥凿
悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 员怨愿愿袁 猿远渊缘冤院 员园园猿 原 员园园远
咱愿暂 杂贼葬怎凿贼 酝 袁 允葬糟噪泽燥灶 月袁 耘造鄄葬燥怎灶蚤 匀袁 藻贼 葬造援 灾燥造葬贼蚤造藻 燥则早葬灶蚤糟 糟燥皂责燥怎灶凿
藻皂蚤泽泽蚤燥灶泽 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 贼澡藻 葬责澡蚤凿 酝赠扎怎泽 责藻则泽蚤糟葬藻 凿蚤枣枣藻则 葬皂燥灶早 则藻泽蚤泽贼葬灶贼
葬灶凿 泽怎泽糟藻责贼蚤遭造藻 责藻葬糟澡 糟怎造贼蚤增葬则泽 葬灶凿 葬 憎蚤造凿 则藻造葬贼蚤增藻咱 允暂 援 栽则藻藻 孕澡赠泽蚤鄄
燥造燥早赠袁 圆园员园袁 猿园渊员园冤院 员猿圆园 原 员猿猿源
咱怨暂 蕴燥皂遭葬则凿燥 灾 粤袁 韵泽燥则蚤燥 杂袁 月燥则泽葬灶蚤 允袁 藻贼 葬造援 酝藻贼葬遭燥造蚤糟 孕则燥枣蚤造蚤灶早 凿怎则鄄
蚤灶早 孕藻葬糟澡 云则怎蚤贼 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿 砸蚤责藻灶蚤灶早 砸藻增藻葬造泽 贼澡藻 酝藻贼葬遭燥造蚤糟
晕藻贼憎燥则噪泽 栽澡葬贼 哉灶凿藻则责蚤灶 耘葬糟澡 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 杂贼葬早藻咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕澡赠泽鄄
蚤燥造燥早赠袁 圆园员员袁 员缘苑渊源冤院 员远怨远 原 员苑员园
咱员园暂 粤赠葬造葬鄄在葬增葬造葬 允 云袁 宰葬灶早 杂 再袁 宰葬灶早 悦 再袁 藻贼 葬造援 耘枣枣藻糟贼 燥枣 泽贼燥则葬早藻
贼藻皂责藻则葬贼怎则藻泽 燥灶 葬灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 糟葬责葬糟蚤贼赠 葬灶凿 葬则燥皂葬 糟燥皂责燥怎灶凿泽 蚤灶
泽贼则葬憎遭藻则则赠 枣则怎蚤贼咱允暂 援 蕴宰栽鄄云燥燥凿 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园园源袁 猿苑
渊苑冤院 远愿苑 原 远怨缘
咱员员暂 蕴蚤 月蚤灶袁 允蚤葬匀怎蚤鄄躁怎葬灶袁 在澡葬灶早 载蚤葬燥鄄皂藻灶早援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 云则怎蚤贼 孕则藻鄄澡葬则增藻泽贼
月葬早早蚤灶早 燥灶 云则怎蚤贼 匝怎葬造蚤贼赠 燥枣 孕藻葬糟澡 渊孕则怎灶怎泽 责藻则泽蚤糟葬 月葬贼泽糟澡 糟增援 匀怎鄄
躁蚤灶早皂蚤造怎冤咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠 葬灶凿 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁
圆园园远袁 猿圆渊猿冤院圆愿苑 原 圆怨圆
咱员圆暂 宰葬灶早 再 允袁 再葬灶早 悦 载袁 蕴蚤 杂 匀袁 藻贼 葬造援 灾燥造葬贼蚤造藻 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 缘园
责藻葬糟澡藻泽 葬灶凿 灶藻糟贼葬则蚤灶藻泽 藻增葬造怎葬贼藻凿 遭赠 匀孕鄄杂孕酝耘 憎蚤贼澡 郧悦鄄酝杂咱 允暂 援
云燥燥凿 悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 圆园园怨袁 员员远渊员冤院 猿缘远 原 猿远源
咱员猿暂 耘凿怎葬则凿燥 陨袁 悦澡蚤藻贼藻则葬 郧袁 月葬泽泽蚤 阅袁 藻贼 葬造援 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 噪藻赠 燥凿燥则
增燥造葬贼蚤造藻 糟燥皂责燥怎灶凿泽 蚤灶 贼澡藻 藻泽泽藻灶贼蚤葬造 燥蚤造 燥枣 灶蚤灶藻 责藻葬糟澡 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶泽咱允暂 援
允燥怎则灶葬造 燥枣 贼澡藻 杂糟蚤藻灶糟藻 燥枣 云燥燥凿 葬灶凿 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 圆园员园袁 怨园 渊苑冤院
员员源远 原 员员缘源
咱员源暂 李摇 明袁 王利平袁 张摇 阳袁 等援 水蜜桃品种间果香成分的固相
微萃取鄄气质联用分析咱允暂 援园艺学报袁圆园园远袁猿猿渊缘冤院员园苑员 原 员园苑源
咱员缘暂 灾藻则灶蚤灶 郧袁 灾藻则灶蚤灶 耘袁 灾藻则灶蚤灶 悦袁 藻贼 葬造援 耘曾贼则葬糟贼蚤燥灶 葬灶凿 郧悦鄄酝杂鄄
杂孕耘悦酝粤 凿葬贼葬 遭葬灶噪 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 葬则燥皂葬 燥枣 孕泽蚤凿蚤怎皂 早怎葬躁葬增葬 蕴援
枣则怎蚤贼 枣则燥皂 耘早赠责贼咱允暂 援 云造葬增燥怎则 葬灶凿 云则葬早则葬灶糟藻 允燥怎则灶葬造袁 员怨怨员袁 远渊圆冤院
员源猿 原 员源愿
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