全 文 ：林业科学研究摇 圆园员猿袁圆远渊缘冤院远源怨 远缘源云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员猿冤园缘鄄园远源怨鄄园远
杨树生物钟节律基因 孕贼悦悦粤员的
克隆及表达模式研究
刘无双袁 杜明会袁 陶维康袁 杨摇 贞袁 诸葛强鄢
渊林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室袁南京林业大学袁江苏 南京摇 圆员园园猿苑冤
收稿日期院 圆园员猿鄄园缘鄄圆怨
基金项目院 国家自然科学基金项目渊猿园缘苑员缘员愿冤
作者简介院 刘无双渊员怨愿源要冤袁女袁山东青岛人袁博士研究生袁主要从事分子生物学研究援
鄢通讯作者院 教授袁博士生导师袁主要从事杨树遗传改良研究援 耘鄄皂葬蚤造院 择扎澡怎早藻岳 灶躁枣怎援 藻凿怎援 糟灶援
摘要院生物钟节律基因 悦悦粤员 在植物的光周期反应中起着重要的调控作用遥 利用 砸栽鄄孕悦砸方法克隆获得了一条包含
员 怨园圆 遭责开放阅读框的杨树 悦悦粤员 基因 糟阅晕粤序列袁其编码 远猿猿 个氨基酸残基袁蛋白的分子量约为 远愿援 怨园 噪阅葬袁等电
点为 远援 猿猿遥 分析显示含有 员 个 酝赠遭鄄造蚤噪藻 阅晕粤结合域及 圆 个蛋白跨膜结合域遥 实时荧光定量 孕悦砸分析发现袁孕贼悦悦粤员
基因主要在杨树叶组织中表达曰随着光照时间的变化袁该基因在杨树中的表达量呈现白昼不断降低而夜晚逐渐升高
的昼夜变化趋势遥 研究结果为进一步探索 孕贼悦悦粤员 基因在调控杨树光周期响应途径中的功能以及杨树光周期敏感
机制提供了科学基础遥
关键词院杨树曰孕贼悦悦粤员曰生物节律钟曰基因表达
中图分类号院 杂苑怨圆援 员员苑 文献标识码院粤
悦造燥灶蚤灶早 葬灶凿 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 悦蚤则糟葬凿蚤葬灶 悦造燥糟噪
郧藻灶藻 悦悦粤员 蚤灶 孕燥责怎造怎泽
蕴陨哉 宰怎鄄泽澡怎葬灶早袁 阅哉 酝蚤灶早鄄澡怎蚤袁 栽粤韵 宰藻蚤鄄噪葬灶早袁 再粤晕郧 在澡藻灶袁 在匀哉郧耘 匝蚤葬灶早
渊运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 云燥则藻泽贼 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠 燥枣 酝蚤灶蚤泽贼则赠 燥枣 耘凿怎糟葬贼蚤燥灶袁 晕葬灶躁蚤灶早 云燥则藻泽贼则赠 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶躁蚤灶早摇 圆员园园猿苑袁 允蚤葬灶早泽怎袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 悦悦粤员 早藻灶藻 责造葬赠泽 葬灶 蚤皂责燥则贼葬灶贼 则燥造藻 蚤灶 糟蚤则糟葬凿蚤葬灶 糟造燥糟噪 泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠 蚤灶 孕燥责怎造怎泽援 陨灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠袁 孕贼悦悦粤员 憎葬泽 蚤鄄
泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 孕燥责怎造怎泽 贼燥皂藻灶贼燥泽葬 遭赠 砸栽鄄孕悦砸援 陨贼 澡葬泽 葬灶 燥责藻灶 则藻葬凿蚤灶早 枣则葬皂藻 渊韵砸云冤 燥枣 员怨园圆 遭责 蚤灶 造藻灶早贼澡 葬灶凿 藻灶糟燥凿藻泽
葬 责则燥贼藻蚤灶 燥枣 远远猿 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 则藻泽蚤凿怎藻泽袁 憎蚤贼澡 责则燥贼藻蚤灶 皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 燥枣 远愿援 怨园 噪阅葬 葬灶凿 蚤泽燥藻造藻糟贼则蚤糟 责燥蚤灶贼 燥枣 远援 猿猿援 栽澡藻
葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻 糟燥灶贼葬蚤灶藻凿 燥灶藻 酝赠遭鄄造蚤噪藻 阅晕粤 遭蚤灶凿蚤灶早 凿燥皂葬蚤灶泽 葬灶凿 贼憎燥 责怎贼葬贼蚤增藻 贼则葬灶泽皂藻皂遭则葬灶藻 泽责葬灶灶蚤灶早 则藻鄄
早蚤燥灶泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 枣造怎燥则藻泽糟藻灶糟藻 择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 砸栽鄄孕悦砸 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 孕贼悦悦粤员 早藻灶藻 憎葬泽 藻曾责则藻泽泽藻凿 皂葬蚤灶造赠 蚤灶 造藻葬枣
贼蚤泽泽怎藻泽援 粤造燥灶早 憎蚤贼澡 贼澡藻 糟澡葬灶早藻 燥枣 蚤造造怎皂蚤灶葬贼蚤燥灶 贼蚤皂藻袁 贼澡藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬皂燥怎灶贼 燥枣 孕贼悦悦粤员 早藻灶藻 凿藻糟则藻葬泽藻凿 凿怎则蚤灶早 贼澡藻 凿葬赠
遭怎贼 早则葬凿怎葬造造赠 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 凿怎则蚤灶早 贼澡藻 灶蚤早澡贼援 栽澡蚤泽 泽贼怎凿赠 责则燥增蚤凿藻泽 泽燥皂藻 则藻枣藻则藻灶糟藻泽 枣燥则 枣怎则贼澡藻则 泽贼怎凿赠 燥枣 孕贼悦悦粤员 枣怎灶糟贼蚤燥灶 蚤灶
则藻早怎造葬贼蚤灶早 责澡燥贼燥责藻则蚤燥凿 泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠 葬灶凿 贼澡藻 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 糟蚤则糟葬凿蚤葬灶 泽赠灶糟澡则燥灶蚤扎葬贼蚤燥灶 蚤灶 责燥责造葬则泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院 孕燥责怎造怎泽曰 孕贼悦悦粤员曰 糟蚤则糟葬凿蚤葬灶 糟造燥糟噪曰 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶
由于地球以约 圆源 澡为周期的自转袁光线尧温度尧
紫外线强度等环境因素也都周期性地改变袁地球上
许多生物历经了漫长的进化袁形成了自己的计时系
统即昼夜节律系统袁可以预测这些环境因子的周期
性变化袁并周期性地改变生物体内的生理尧生化反应
及代谢过程袁从而与外界的环境变化相适应咱员 原 猿暂 遥
植物昼夜节律系统调控了植物的诸多生理活动袁如
光合作用尧光周期调控的开花时间等袁对植物正常的
生长发育过程至关重要咱源 原 远暂 遥 如拟南芥渊粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽
贼澡葬造蚤葬灶葬 渊 蕴援 冤 匀藻赠灶澡援 冤 悦悦粤员 渊 悦陨砸悦粤阅陨粤晕 悦蕴韵悦运
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
粤杂杂韵悦陨粤栽耘阅 员冤基因编码一个 酝再月结合蛋白咱苑暂 袁它
是光周期振荡器的重要组分袁如果发生突变袁植物体
的昼夜节律振幅将会变短咱愿暂 遥
目前袁拟南芥 粤贼悦悦粤员尧大麦 渊 匀燥则凿藻怎皂 增怎造早葬则藻
蕴蚤灶灶援 冤月葬悦悦粤员 和玉米渊在藻葬 皂葬赠泽 蕴蚤灶灶援 冤在皂悦悦粤员 基
因研究中呈现节律性表达袁杨树渊孕燥责怎造怎泽 泽责责援 冤中
悦悦粤员 基因的研究尚未报道咱怨 原 员员暂 遥 本研究利用 砸栽鄄
孕悦砸方法袁从毛白杨渊孕援 贼燥皂藻灶贼燥泽葬 悦葬则则援 冤中克隆杨
树 孕贼悦悦粤员 基因袁并对其进行序列分析尧同源性比较尧
遗传进化和启动子顺式作用元件分析袁另外对其组
织表达模式及在不同光照周期处理过程中各时间点
的表达规律进行了研究袁探索该基因对杨树光周期
的响应规律袁旨在为阐明杨树光周期敏感现象的分
子机制提供科学依据遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 植物材料
毛白杨植株继代于 宰孕酝 培养基袁在光照培养
箱中培养渊光照 员圆 澡 辕黑暗 员圆 澡袁圆缘益冤遥
员援 圆摇 砸晕粤提取与 糟阅晕粤第 员 链的合成
参照 砸晕藻葬泽赠 孕造葬灶贼 酝蚤灶蚤 运蚤贼 渊匝蚤葬早藻灶公司袁美国冤
说明书进行总 砸晕粤 的纯化及 阅晕葬泽藻 陨 消化遥 采用
陨灶增蚤贼则燥早藻灶公司的反转录酶渊酝鄄酝蕴灾冤进行反转录袁合
成 糟阅晕粤 第 员 链遥
员援 猿摇 目的基因克隆及序列测定
利用报道的拟南芥 悦悦粤员 基因序列作为靶序
列袁通过 晕悦月陨 渊 澡贼贼责院 辕 辕 遭造葬泽贼援 灶糟遭蚤援 灶造皂援 灶蚤澡援 早燥增 辕
月造葬泽贼援 糟早蚤冤及 允郧陨渊澡贼贼责院 辕 辕 早藻灶燥皂藻援 躁早蚤 原 责泽枣援 燥则早 辕 孕燥责贼则员
赃员 辕 孕燥责贼则员赃员援 澡燥皂藻援 澡贼皂造冤生物信息数据库袁利用 砸栽鄄
孕悦砸方法获得杨树 悦悦粤员 基因序列遥
根据电子克隆到的杨树 孕贼悦悦粤员 基因序列袁设计
包含全长 韵砸云序列的基因特异引物 孕贼悦悦粤员 缘爷院缘爷鄄
郧栽栽粤郧悦郧粤郧郧粤栽栽栽郧粤粤郧悦粤郧悦鄄猿爷袁孕贼悦悦粤员 猿爷院 缘爷鄄
悦粤粤悦粤郧粤郧粤粤郧栽粤栽粤栽栽栽粤栽悦栽粤郧悦悦粤悦悦栽悦鄄猿 爷袁 进
行目的基因的 孕悦砸 扩增遥 孕悦砸 反应扩增体系如下院
反转录 糟阅晕粤 模板 猿园 缘园 灶早袁员园 伊 耘曾 孕悦砸 月怎枣枣藻则
渊酝早圆 垣 云则藻藻冤缘郾 园 滋蕴袁酝早悦造圆渊圆缘 皂皂燥造 窑蕴 原员冤缘郾 园 滋蕴袁
正反引物渊员园 滋皂燥造 窑 蕴 原员冤各 圆援 园 滋蕴袁高保真 栽葬运葬鄄
砸葬 耘曾 栽葬择渊栽葬运葬砸葬 公司袁中国大连冤 渊缘 哉窑滋蕴 原员 冤
园郾 缘 滋蕴袁加灭菌水补至 缘园援 园 滋蕴遥 孕悦砸 反应程序院
怨源益预变性 愿 皂蚤灶曰怨源益变性 猿园 泽袁远园益退火 猿园 泽袁
苑圆益延伸 猿 皂蚤灶袁猿园 个循环曰苑圆益延伸 缘 皂蚤灶遥 目的扩
增片段克隆参照宝诚生物工程公司的 责酝阅员愿鄄栽 杂蚤皂鄄
责造藻 灾藻贼燥则 说明书进行袁序列测定由上海英骏生物技
术有限公司完成遥
员援 源摇 杨树 孕贼悦悦粤员 基因生物信息学分析
利用克隆测序得到杨树 孕贼悦悦粤员 基因序列袁对其
编码的氨基酸序列进行结构域分析尧蛋白质结构预
测及进化树的构建遥
通过 孕枣葬皂渊澡贼贼责院 辕 辕 责枣葬皂援 泽葬灶早藻则援 葬糟援 怎噪 辕 冤推测蛋
白质结构域遥 蛋白质跨膜区和疏水结构预测采用
栽酝责则藻凿 渊 澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援 糟澡援 藻皂遭灶藻贼援 燥则早 辕 泽燥枣贼憎葬则藻 辕 栽酝鄄
孕砸耘阅赃 枣燥则皂援 澡贼皂造冤 和 孕则燥贼杂糟葬造藻 渊 澡贼贼责院 辕 辕 糟葬援 藻曾责葬泽赠援
燥则早 辕 贼燥燥造泽 辕 责则燥贼泽糟葬造藻援 澡贼皂造冤工具进行遥 利用 酝耘郧粤缘援 员
软件邻接渊灶藻蚤早澡遭燥则 躁燥蚤灶蚤灶早袁晕允冤 算法构建 悦悦粤员 蛋
白的系统进化树咱员圆暂 遥 利用 孕造葬灶贼悦粤砸耘网站渊澡贼贼责院 辕 辕
遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽援 责泽遭援 怎早藻灶贼援 遭藻 辕 憎藻遭贼燥燥造泽 辕 责造葬灶贼糟葬则藻 辕 澡贼鄄
皂造 辕 冤分析各物种 悦悦粤员 基因启动子顺式作用元件遥
员援 缘摇 不同光照周期处理
毛白杨植株继代于宰孕酝培养基袁光照培养箱中
培养渊光照 员圆 澡 辕黑暗 员圆 澡袁 圆缘益冤源缘 凿 后进行 猿 种
光照周期处理院蕴阅渊光照 员圆 澡 辕黑暗 员圆 澡袁圆缘益冤尧蕴蕴
渊持续光照袁圆缘益冤尧阅阅渊持续黑暗袁圆缘益冤遥 取整株
植株袁蕴阅处理自光照 员 澡开始持续 圆源 澡袁期间每隔 圆
澡取样袁共计 员猿 个时间点的样品曰蕴蕴 处理开始 员 澡
后每隔 源 澡取样袁共计 员猿 个时间点的样品曰阅阅 处理
开始 员 澡后每隔 源 澡取样袁共计 员猿 个时间点的样品遥
每个时间点 猿 株重复袁于液氮中速冻后置于 原 愿园益
超低温冰箱中保存备用遥
员援 远摇 实时荧光定量 孕悦砸表达分析
分别提取生长于培养基 远 周龄植株的根尧茎尧叶
组织 砸晕粤袁反转录成 糟阅晕粤袁进行杨树 孕贼悦悦粤员 基因
不同光照周期表达分析袁蕴阅尧蕴蕴尧阅阅 猿 种光照周期
处理过程中各时间点获取的 糟阅晕粤 样品用于目的基
因的实时荧光定量 孕悦砸渊择砸栽鄄孕悦砸冤表达分析遥
采用 月藻葬糟燥灶 阅藻泽蚤早灶藻则 苑援 缘 软件进行 择砸栽鄄孕悦砸 引
物设计袁 择孕悦砸 孕贼悦悦粤员 缘 爷院 缘 爷鄄悦粤粤郧悦粤粤栽悦悦栽鄄
栽粤栽悦悦栽悦郧粤粤粤郧粤悦鄄猿爷袁择孕悦砸 孕贼悦悦粤员 猿爷院缘爷鄄栽粤郧鄄
悦粤栽栽郧郧栽栽郧郧悦悦栽悦栽悦粤栽悦鄄猿爷袁以管家基因即延伸
因子蛋白基因 耘云渊耘造燥灶早葬贼蚤燥灶 云葬糟贼燥则冤为 择砸栽鄄孕悦砸 的
内参照袁扩增引物为 孕贼耘云员 缘忆院缘爷鄄粤粤郧悦悦粤栽郧郧郧粤栽鄄
郧粤栽郧粤郧粤悦鄄猿爷袁 孕贼耘云员 猿忆院缘爷鄄粤悦栽郧郧粤郧悦悦粤粤栽栽栽栽鄄
郧粤栽郧悦鄄猿爷遥 择砸栽鄄孕悦砸 采用 杂再月砸 郧则藻藻灶 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾
渊砸燥曾冤袁在 粤月陨 苑缘园园 砸藻葬造鄄贼蚤皂藻 孕悦砸 杂赠泽贼藻皂泽渊粤责责造蚤藻凿
月蚤燥泽赠泽贼藻皂泽公司袁美国冤上完成袁每反转录样品 猿 次重
复遥 反应体系为院圆 伊 杂再月砸 郧则藻藻灶 酝葬泽贼藻则 酝蚤曾 员园
园缘远
第 缘 期 刘无双等院杨树生物钟节律基因 孕贼悦悦粤员 的克隆及表达模式研究
滋蕴袁正反引物渊员园 皂皂燥造窑蕴 原员 冤各 员 滋蕴袁糟阅晕粤员 滋蕴
渊员园 缘园 灶早冤袁灭菌水 苑 滋蕴遥 反应程序为院怨缘益
员 皂蚤灶曰怨缘益 员缘 泽袁远园益 员 皂蚤灶袁源园 个循环遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 孕贼悦悦粤员 基因的克隆和序列分析
利用引物 孕贼悦悦粤员 缘爷和 孕贼悦悦粤员 猿爷进行扩增尧克
隆并回收测序袁获得 员 怨园圆 遭责 的开放阅读框编码蛋
白质袁含有 远猿猿 个氨基酸残基袁编码蛋白分子量为
远愿援 怨园 噪阅葬袁等电点为 远援 猿猿遥 该片段与拟南芥 悦悦粤员
高度同源袁因此将其命名为 孕贼悦悦粤员遥
氨基酸序列分析及编码蛋白的结构域预测显
示院孕贼悦悦粤员 具有 酝赠遭鄄造蚤噪藻 阅晕粤 结合域袁位于 圆源
远愿位渊图 员冤曰孕则燥贼杂糟葬造藻分析其为疏水蛋白渊图 圆冤曰用
栽酝责则藻凿分析该氨基酸具有 圆 个蛋白跨膜结合域袁在
猿愿猿 源园远 位和 源猿猿 源缘园 位的疏水性跨膜区域袁氨
基端位于膜内渊图 猿冤遥
图 员摇 杨树 孕贼悦悦粤员 基因蛋白结构域分析
氨基酸残基位置
图 圆摇 杨树 孕贼悦悦粤员 基因疏水性分析
圆援 圆摇 悦悦粤员 蛋白结构域及系统进化树分析
通过 阅晕粤酝粤晕软件分析发现袁悦悦粤员 蛋白结构
域相似性很高渊图 源冤袁杨树 孕贼悦悦粤员 结构域与双子叶
植物拟南芥 粤贼悦悦粤员尧冰叶日中花 渊酝藻泽藻皂遭则赠葬灶贼澡藻鄄
皂怎皂 糟则赠泽贼葬造造蚤灶怎皂 蕴蚤灶灶援 冤酝糟悦悦粤员 以及单子叶植物水
稻渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬 蕴蚤灶灶援 冤韵泽悦悦粤员尧玉米 在皂悦悦粤员尧大麦
匀增悦悦粤员 的序列高度保守袁相似度分别为 愿愿援 愿怨豫 尧
员园园豫 尧怨缘援 缘远豫 尧怨猿援 猿猿豫和 怨猿援 猿猿豫 遥
根据氨基酸序列上的相似性袁利用酝耘郧粤缘援 员 软
件绘制了 悦悦粤员 蛋白的遗传进化树渊图 缘冤遥 发现双
子叶植物杨树尧拟南芥和冰叶日中花聚在同一个类
群袁而单子叶植物水稻尧玉米尧大麦则聚在另一类群袁
说明该基因在进化上应始于单双子叶植物分化
之后遥
圆郾 猿摇 悦悦粤员 基因启动子元件分析
通过 允郧陨 数据库渊澡贼贼责院 辕 辕 早藻灶燥皂藻援 躁早蚤 原 责泽枣援 燥则早 辕
孕燥责贼则员赃员 辕 孕燥责贼则员赃员援 澡燥皂藻援 澡贼皂造冤获取杨树尧拟南芥尧水
稻尧玉米 悦悦粤员 基因启动子区域 员 缘园园 遭责 序列袁利用
员缘远
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
图 猿摇 杨树 孕贼悦悦粤员 基因跨膜结构分析
图 源摇 不同物种 悦悦粤员 基因 酝赠遭鄄造蚤噪藻 阅晕粤结合域氨基酸序列分析
图 缘摇 悦悦粤员 基因进化树
孕造葬灶贼悦粤砸耘 渊 澡贼贼责院 辕 辕 遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽援 责泽遭援 怎早藻灶贼援 遭藻 辕
憎藻遭贼燥燥造泽 辕 责造葬灶贼糟葬则藻 辕 澡贼皂造 辕 冤网站对各物种 悦悦粤员 基因
进行启动子顺式作用元件预测分析袁统计顺式作用
元件种类及数量如表 员遥 通过启动子元件种类尧数
量对比袁发现杨树与其它物种 悦悦粤员 基因启动子区
域存在许多功能一致的顺式作用元件遥 所有 悦悦粤员
基因启动子序列中均含有与生物钟节律周期相关的
糟蚤则糟葬凿蚤葬灶元件间接说明 悦悦粤员 基因参与植物生物钟
节律生命活动遥 其启动子区域还含有与光信号响应
功能相关的 杂责员尧郧鄄月燥曾 等顺式作用元件袁暗示着
悦悦粤员 基因的表达与光照密切联系遥 因此袁下一步实
验作者设计 蕴阅渊光照 员圆 澡 辕黑暗 员圆 澡袁圆缘益冤尧蕴蕴渊持
续光照袁圆缘益冤尧阅阅渊持续黑暗袁圆缘益冤猿 种不同的光
照周期处理袁通过 择砸栽鄄孕悦砸 技术检测杨树 悦悦粤员 基
因的表达情况遥
表 员摇 悦悦粤员 基因启动子元件预测结果
元件 功能 孕贼悦悦粤员 粤贼悦悦粤员 韵泽悦悦粤员 在皂悦悦粤员
糟蚤则糟葬凿蚤葬灶 参与生物节律顺式调控 圆 圆 圆 圆
杂责员 光应答 圆 员 缘
陨鄄遭燥曾 部分光应答 员 圆 圆
郧鄄遭燥曾 参与顺式调控光应答 远 源 源
悦粤栽栽鄄皂燥贼蚤枣 部分光应答 员 员 员
粤耘鄄遭燥曾 部分光应答模块 员 圆 员
缘哉栽砸 孕赠鄄则蚤糟澡 泽贼则藻贼糟澡 顺式调控高水平转录 员 员 圆
圆缘远
第 缘 期 刘无双等院杨树生物钟节律基因 孕贼悦悦粤员 的克隆及表达模式研究
圆援 源摇 孕贼悦悦粤员 基因组织表达模式分析
提取毛白杨植株的根尧茎尧叶 砸晕粤 经处理后反
转录成 糟阅晕粤袁通过 择砸栽鄄孕悦砸检测杨树 孕贼悦悦粤员 基因
表达袁分析杨树 孕砸砸 家族基因表达的组织特性遥
择砸栽鄄孕悦砸检测结果如图 远 所示袁孕贼悦悦粤员 基因表达量
由高到底依次为院叶尧茎尧根袁叶中的表达量远高于茎
及根组织袁因此得出 孕贼悦悦粤员 基因主要在叶中表达的
结论遥
图 远摇 孕贼悦悦粤员 基因表达模式
圆援 缘摇 不同光照周期 孕贼悦悦粤员 基因表达分析
分别提取 蕴阅尧蕴蕴尧阅阅 猿 种光照周期处理下各时
间点的整株植株材料袁以 耘云为内参基因袁进行 择砸栽鄄
孕悦砸分析遥 在 蕴阅 光照周期条件下袁孕贼悦悦粤员 基因表
达峰首先出现在凌晨袁之后表达量逐渐下降袁进入夜
晚后表达又逐步升高袁完成一个循环周期渊图 苑冤遥
在 蕴蕴 光照周期条件下袁孕贼悦悦粤员 基因虽然保持着表
达节律性袁但在后期表达振幅有所减小渊图 愿冤遥 在
阅阅光照周期条件下袁孕贼悦悦粤员 基因表达开始保持着
表达节律性袁之后节律性减弱袁这也许是与 孕贼悦悦粤员
基因启动子区中光响应顺式作用元件的调控作用有
关渊图 怨冤遥
猿摇 讨论
杨树是首个完成基因组序列测定的模式树木袁
生长迅速袁无性繁殖容易袁种间可杂交袁组织培养和
遗传转化体系比较完善袁遗传学研究有较好基础袁其
功能基因组学的研究将为其它林木的同类研究提供
理论和方法上的直接借鉴咱员猿 原 员源暂 遥
植物体内存在一种以 圆源 澡 为周期的内源调节
机制袁影响植物体内基因的表达尧代谢调控以及生殖
过程等一系列生理进程咱员缘暂 遥 植物通过感知光周期
图 苑摇 蕴阅光照周期 孕贼悦悦粤员 基因表达水平
图 愿摇 蕴蕴光照周期 孕贼悦悦粤员 基因表达水平
图 怨摇 阅阅光照周期 孕贼悦悦粤员 基因表达水平
的变化来判断昼夜的变化咱员远暂 遥 悦悦粤员 是与生物钟相
关的 酝再月类转录因子咱员苑暂 袁是拟南芥昼夜节律振荡
器的重要组分咱员愿暂 袁通过与 栽韵悦员 渊 栽陨酝陨晕郧 韵云 悦粤月
耘载孕砸耘杂杂陨韵晕 员冤转录因子相互作用形成一个转录要
翻译水平的反馈抑制环咱员怨 原 圆员暂 袁调控植物对昼夜变化
猿缘远
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
做出响应袁是维持生物钟节律的必需组分咱愿暂 遥
杨树 孕贼悦悦粤员 基因具有 员 怨园圆 遭责的完整读码框袁
编码 远猿猿 个氨基酸残基的肽链袁含有一个保守的
酝再月结构域袁此结构域在拟南芥尧水稻尧玉米中都存
在咱员苑袁圆圆暂 袁而且它们的相似性高达 怨缘援 怨猿豫 袁说明该基
因在双子叶植物和单子叶植物之间极其保守遥
孕贼悦悦粤员 基因主要在叶组织中表达遥 在光照开
始后 孕贼悦悦粤员 基因 皂砸晕粤 转录产物开始下降袁直至
进入黑暗后表达量逐渐回升遥 这与拟南芥 悦悦粤员 在
凌晨时表达量最高而黄昏时表达量最低的研究结果
一致咱员缘暂 遥 与拟南芥相比袁虽然杨树 孕贼悦悦粤员 基因在
阅阅光照周期条件下后期表达节律性有所减弱袁杨树
孕贼悦悦粤员 基因在 蕴蕴尧阅阅 光照周期条件下的表达模式
与拟南芥中的研究结果是相似的咱圆猿暂 袁表明作者克隆
获得的杨树 孕贼悦悦粤员 基因与拟南芥中的 悦悦粤员 基因
在光周期调控中发挥的功能相近遥
目前对杨树生物钟节律基因功能鉴定的报道很
少袁但其它高等植物的光周期调控关键基因的研究及
基因的保守性关系能够为杨树光周期基因的克隆提
供一定的依据袁特别是高通量测序技术的发展袁以及
相关物种基因组序列的公布袁为解析杨树光周期遗传
机理提供了便利遥 由于生物节律会对植物各方面的
生命活动产生影响袁因此杨树生物钟节律机制的研究
对杨树生长发育的认识具有重要的理论意义遥
参考文献院
咱员暂 酝蚤糟澡葬藻造 栽 孕袁 杂葬造燥皂佴 孕 粤袁 再怎 匀 允袁 藻贼 葬造援 耘灶澡葬灶糟藻凿 枣蚤贼灶藻泽泽 糟燥灶鄄
枣藻则则藻凿 遭赠 灶葬贼怎则葬造造赠 燥糟糟怎则则蚤灶早 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 蚤灶 贼澡藻 糟蚤则糟葬凿蚤葬灶 糟造燥糟噪 咱 允暂 援
杂糟蚤藻灶糟藻 袁 圆园园猿袁猿园圆渊缘远源苑冤院 员园源怨 原 员园缘猿
咱圆暂 阅燥凿凿 粤 晕袁 杂葬造葬贼澡蚤葬 晕袁 匀葬造造 粤袁 藻贼 葬造援 孕造葬灶贼 糟蚤则糟葬凿蚤葬灶 糟造燥糟噪泽 蚤灶鄄
糟则藻葬泽藻 责澡燥贼燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽袁 早则燥憎贼澡袁 泽怎则增蚤增葬造袁 葬灶凿 糟燥皂责藻贼蚤贼蚤增藻 葬凿增葬灶贼葬早藻
咱允暂 援 杂糟蚤藻灶糟藻袁圆园园缘袁 猿园怨渊缘苑猿源冤院 远猿园 原 远猿猿
咱猿暂 晕蚤 在袁 运蚤皂 耘 阅袁 匀葬 酝袁 藻贼 葬造援 粤造贼藻则藻凿 糟蚤则糟葬凿蚤葬灶 则澡赠贼澡皂泽 则藻早怎造葬贼藻
早则燥憎贼澡 增蚤早燥怎则 蚤灶 澡赠遭则蚤凿泽 葬灶凿 葬造造燥责燥造赠责造燥蚤凿泽 咱允暂援 晕葬贼怎则藻袁圆园园怨袁 源缘苑
渊苑圆圆苑冤院 猿圆苑 原 猿猿员
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