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Storage Conditions of Oncidium Plantlets in vitro in Low Temperature

文心兰试管苗低温贮藏条件


The goal of this study was to evaluate the effect of storage containers and manners, pretreatment time in low temperature on Oncidium variety ‘Aloha Iwanaga’ plantlets in vitro. Results showed that the polymer film culture bag (CB) was an effective container for Oncidium plantlets in vitro, and the CB with liquid medium (CB·L) was also a more economical and effective one for plantlets in vitro among the methods of CB·L, the flask with liquid medium (FL·L) and the flask with solid medium (FL·S) during low temperature storage. The comprehensive index, including survival rate after storage and rate of normal plantlet and axillary plantlet formation after further culture, of plantlets in vitro with the treatments of pretreatment time of 5 days or 7 days in the CB·L method was higher than other methods among the five pretreatment times of 0 day (the plantlet was stored immediately after inoculation), 3 days, 5 days, 7days and 9 days. The physiological indexes, as plantlet height, leaf number, number and length of root and dry mass rate, of plantlets in vitro in the CB·L method were a little higher than others and however no significantly different except the fresh/dry mass. In conclusion, the suitable pretreatment time for Oncidium plantlets in vitro was 5 to 7 days.


全 文 :第 !" 卷 第 #$ 期
% $ # $ 年 #$ 月
林 业 科 学
&’()*+(, &(-.,) &(*(’,)
./01!"!*/1#$
2345!% $ # $
文心兰试管苗低温贮藏条件!
王6政6何松林
"河南农业大学林学院6郑州 !A$$$%#
关键词%6文心兰& 试管苗& 树脂膜培养容器& 低温贮藏
中图分类号! &?%85#’ &"@%18#666文献标识码!,666文章编号!#$$# =?!@@"%$#$##$ =$#?8 =$A
收稿日期% %$#$ =$8 =8$& 修回日期% %$#$ =$@ =$A$
基金项目% 农业部.7!@/项目"%$$7 =l%@# $
!何松林为通讯作者$
)’#5&9(I#/3-’-#/$#4K9%-’-)+!*&/’*(’$-9F-7($ -/8#>B(6%(5&’+5(
i9N"/-%"#*%01-6"5"! V")$) 25%+&,6*,%$6I)+G"%#+*06[’")57’-, !A$$$%#
;,$’5&<’%6+LM4LHPP4JUVZ9P4/M[90J94M4LMM>M34/>P4/S94M;RMS94JSM/N ;)&+?+,9[9SHM4V.,0/L9(Z9N9<9/ R09N40M4P+) G+*%-5IMPJ04PPL/ZMU 4L944LMR/0V;MS>H0;3J04JSMT9<
"’F# Z9P9N M>M34H[M3/N49HNMS>/S;)&+?+,9R09N40M4P+) G+*%-! 9NU 4LM’FZH4L 0H]JHU ;MUHJ;"’F’-# Z9P90P/9;/SM
M3/N/;H3909NU M>M34H[M/NM>/SR09N40M4P+) G+*%-9;/N<4LM;M4L/UP/>’F’-! 4LM>09P^ ZH4L 0H]JHU ;MUHJ;"a-’-# 9NU
4LM>09P^ ZH4L P/0HU ;MUHJ; "a-’&# UJSHN<0/Z4M;RMS94JSMP4/S99>4MSP4/S9N/S;90R09N40M49NU 9QH09SVR09N40M4>/S;94H/N 9>4MS>JS4LMS3J04JSM! />R09N40M4P+) G+*%-ZH4L 4LM
4SM94;MN4P/>RSM4SM94;MN44H;M/>A U9VP/S? U9VPHN 4LM’F’-;M4L/U Z9PLHH[M
RSM4SM94;MN44H;MP/>$ U9V"4LMR09N40M4Z9PP4/SMU H;;MUH94M0V9>4MSHN/3J094H/N#! 8 U9VP! A U9VP! ?U9VP9NU 7 U9VP5
+LMRLVPH/0/NJ;TMS! NJ;TMS9NU 0MN<4L />S//49NU USV;9PPS94M! />R09N40M4P+)
G+*%-HN 4LM’F’-;M4L/U ZMSM90H40MLHH39N40VUH>MSMN4MQ3MR44LM>SMPLhUSV;9PP5
(N 3/N30JPH/N! 4LMPJH49T0MRSM4SM94;MN44H;M>/S;)&+?+,9 R09N40M4P+) G+*%-Z9PA 4/? U9VP5
=(0 >#53$%6;)&+?+,9& R09N40M4+) G+*%-& R/0V;MS>H0;3J04JSMT9<"’F#& 0/Z4M;RMS94JSMP4/S966在文心兰";)&+?+,9PR5#试管苗商业化生产过
程中!试管苗的销售多被限定在某一特定季节和时
期"如夏季开花型栽培时!生产者多集中在 % 月份
购入试管苗#$ 这就要求种苗生产企业必须在这一
限定期间内大量生产出规格一致的试管苗来满足市
场需求$ 该情况下!若能将其他时间快繁的试管苗
利用生长抑制的方法进行短期保存!就能做到试管
苗的计划性生产!并在需求集中期大批量供应生长
均一的试管苗$ 因此!种苗生产过程中大批量试管
苗的短期贮藏技术被认为是试管苗商业化生产中亟
待研究和开发的新技术之一 "田中道男等!#77A#$
目前!国内外试管苗贮藏研究主要集中在种质资源
保存方面 "*M<9PL "*$6M!%$$#& 艾鹏飞等!%$$!& 刘
月学等!%$$!& 宋希强等!%$$A& 吴金寿等!%$$A& 牛
爱国等! %$$A& W/NKx0MK"*$6M! %$$"& 赵密珍等!
%$$"& 陈辉等! %$$"& 王越等! %$$"& 刘剑锋等!
%$$?& 王艳芳等!%$$?& 翟晓巧等!%$$7& E/[903LJ^
"*$6M!%$$7& :93LM3/"*$6M!%$$7#!在规模化生产中的
应用研究甚少& 且传统贮藏容器如三角瓶(罐状瓶
等具有体积大(空间利用率低等缺点!而有关其他容
器在试管苗短期贮藏方面的应用研究尚未见报道$
树脂膜培养容器以其高透气性(低透湿性等特点成
为替代植物试管苗培养用传统培养容器"三角瓶和
罐状瓶#的新型容器!其中利用树脂膜制作的箱型
培养容器 "3J04JSMR93^& 简称 ’:# 已在文心兰
"何松林等!%$$89& %$$8T& %$$83& %$$8U#和大花蕙
兰"1098+?+,9’08%+?#"何松林等!%$$?& %$$@#试管
苗培养及环境调控中得到应用!而树脂膜容器在试
管苗贮藏中尚未进行研究及应用$ 因此!本研究拟
利用树脂膜制作封筒型树脂膜培养容器 " R/0V;MS
>H0;3J04JSMT9贮藏性研究!探讨 ’F在文心兰试管苗低温贮藏中
的有效性!并在利用 ’F条件下研究试管苗不同预
处理对文心兰试管苗低温贮藏性的影响!以确定低
林 业 科 学 !" 卷6
温贮藏前文心兰试管苗最佳的预处理时间!为商业
化生产中文心兰试管苗的贮藏和运输提供技术
参考$
?A材料与方法
#1#6封筒型树脂膜培养容器!’F"的制作及接种方
法6采用 A$ 5;厚的 *M/>0/N7四氟乙烯与全氟烷
基乙烯基醚共聚物 ":a,#!制作 #! 3;p7 3;的
’F!制作及接种步骤如图 # 所示$ 首先!将塑膜裁
成长方形"#A 3;p%$ 3;#!并纵向对折& 其次用塑
膜封口机"志贺包装机制!EY%A$)i#沿斜线部分热
封!再将封口线外的剩余部分剪除"图 #,#$ 接种
时先将 ’F置于高压灭菌锅内灭菌"#%# d!#1% ^<’
3;=%!8A ;HN#!在超净工作台中将已灭菌的液体培
养基注入 ’F& 被贮藏试管苗放入到 ’F内后 "图
#F#!用塑料夹具在 ’F开口部下方密封!最后用塑
料封口机将开口部热封后除去塑料夹具"图 #’#$
#1%6试验材料 6试材为薄叶系文心兰品种.,0/L9
(Z9N9<9/$ 将由茎尖诱导并增殖形成的原球茎
":-F#接种于 X& C蛋白胨":MR4/NM#% <’-=# C植物
结冷胶"WM09N 基上"R\A18#$ 在常规培养条件,温度"%A g##d!
光强 8$1" 5;/0’;=%P=#(光照时间 #" L’U =# -下诱
导 :-F分化(形成幼苗!然后选择生长状况一致(株
高 %1A 3;(展叶 ! 片的去根试管苗作为供试贮藏
材料$
图 #6封筒型树脂膜培养容器"’F#的制作及接种方法
aH<5#6+LM;9NJ>934JSM9NU HN/3J094HN<;M4L/UP/>
R/0V;MS>H0;3J04JSMT9<"’F#
#186方法6##贮藏容器类型及方式6试验以 ’F
和 #$$ ;-三角瓶作为培养容器!采用 ’F容器 C液
体培养基方式"’F’-#(三角瓶 C液体培养基方式
"a-’-#(三角瓶 C固体培养基方式"a-’ 种贮藏
方式进行低温贮藏试验$ 每种贮藏方式均接种 8 容
器!每个容器培养基用量 8$ ;-!试管苗 #" 株$ 对
照为未贮藏的供试试管苗直接接种至再培养培养基
中培养$
%#贮藏条件及再培养处理6将供试试管苗转
入’F’-!a-’-和a-’& 8种贮藏方式后!在常规培养
室内预培养 ? 天 "据实验室经验设定时间!培养条
件同 #1%#!然后分别移入低温贮藏箱"\O’Y"@,!海
尔#贮藏$ 贮藏温度 @ d!贮藏期 ! 周$ 贮藏结束后
试管苗在常规培养室内放置 #% L!使其适应培养室
内的环境条件!然后接种于 A$$ ;-的柱状培养瓶内
再培养!7$ 天后测定试管苗的相关生理指标$
贮藏用培养基% #h% X& C:MR4/NM% <’-=# C
蔗糖 8$ <’-=#!其中固体培养基添加 WM09N % <’-=#! R\A18& 再培养培养基% X& C:MR4/NM
% <’-=# CWM09N 8#不同预处理6采用 ’F’-方式将供试试管苗
接种后!在常规培养室内进行预处理!即分别培养 $
"接种后立即贮藏#!8!A!?!7 天后再移入低温贮藏
箱内$ 贮藏温度 @ d!贮藏期 ! 周$ 然后各处理按
前述方法进行再培养!并测定各项生长指标$
!#生长指标测定6再培养结束后!分别调查各
贮藏方式下试管苗的存活率(正常苗率(腋生苗形成
率!以及恢复培养后试管苗的株高(叶数(叶长 "最
大叶长平均值#(根数(根长"最大根长平均值#!整
株(地上部及根部鲜质量!整株(地上部及根部干质
量!干质量比率等指标$ 测定干质量时!用剪刀将试
管苗的根全部剪下后!分地上部和根部分别进行烘
干和称量$ 烘干时首先将植物材料在#$A d条件下
干燥 8$ ;HN!之后移入恒温干燥箱!在"$ d条件下
继续加热干燥 !@ L 后测定$ 正常苗率 f恢复培养
后主茎正常生长的试管苗数h总贮藏试管苗数 p
#$$_& 腋生苗形成率 f试管苗中萌发腋生苗 "株
高## 3;以上#的株数h正常苗总数 p#$$_!其中
腋生苗是指主茎正常的试管苗叶腋间的腋生芽萌发
后形成的新植株$
所有试验数据均采用邓肯氏新复极差测验法
"&&I法#进行比较!显著水平 Jq$1$A$ 数据统计
采用软件 D:& 81$# 版$
DA结果与分析
%1#6不同贮藏容器类型及方式对文心兰试管苗低
温贮藏性的影响6##不同贮藏容器类型及方式对
文心兰试管苗生长的影响6在 8 种贮藏方式下!贮
藏 ! 周的文心兰试管苗经 7$ 天再培养后的生长情
况见表 #$ 8 种贮藏方式中!’F’-和 a-’& 贮藏方
式下试管苗存活率均达#$$_!且与 a-’-方式差异
显著& a-’-方式下存活率最低!仅为 @#18_$ 从再
!?#
6第 #$ 期 王6政等% 文心兰试管苗低温贮藏条件
培养后试管苗形态来看!正常苗率以 ’F’-方式最
高!其次为 a-’& 和 a-’-$其中 a-’-方式显著低
于对照的7?17_$ 但在再培养后试管苗腋生苗形
成率方面!% 种液体贮藏方式"’F’-和 a-’-#均显
著高于固体贮藏方式的 a-’&$表 # 和图 % 表明!8
种贮藏方式中 a-’& 贮藏方式下株高值最大!其次
为 ’F’-(对照和 a-’-!但处理间差异不显著$ 试
管苗贮藏后叶数均有所增加!且与对照相比差异
显著!但不同贮藏方式间差异并不明显$ 叶长方
面!对照略高于 a-’& 和 ’F’-贮藏方式!并与
a-’-方式间存在显著差异$与叶长的情况类似!对
照(a-’& 和 ’F’-的根数均多于 a-’-贮藏方式!
且与 a-’-间差异显著$根长方面!8 种贮藏方式和
对照间差异不大$
表 ?A不同贮藏容器类型及方式对文心兰试管苗再培养后生长的影响!
B&,C?AQ44(<’#4$’#5&9(<#/’&-/(5$&/36(’"#3$#/’"(95#>’"#4K9%-’-)+%*&/’*(’$-9F-7($ &4’(54+5’"(5<+*’+5(
贮藏方式
&4/S9;M4L/UP
供试株数
*J;TMS/>
4MP4MU
;94MSH90P
生存株数
*J;TMS/>
PJS[H[90
R09N40M4P
存活率
&JS[H[90
S94Mh_
再培养后试管苗形态
X/SRL/0/R09N40M49>4MS>JS4LMS3J04JSM
正常苗率
I94M/>N/S;90
R09N40M4h_
腋生苗形成率
I94M/>9QH09SV
R09N40M4>/S;94H/Nh_
株高
:09N40M4
LMH叶数
*J;TMS/>
0M9[MP
叶长
-M9>
0MN<4Lh3;
根数
*J;TMS/>
S//4P
根长
I//4
0MN<4Lh3;
’F’- !@ !@ #$$ 9 7A1@ 9 "A1% 9 @17 9 ##18 9 "17 9T ?1" 9 A1$ 9
a-’- !@ 87 @#18 T ""1? 3 "#1A T @1" 9 #$17 9 "1" T "1A T A1$ 9
a-’& !@ !@ #$$ 9 7#1? T !#17 3 71$ 9 #$17 9 ?1% 9 @1$ 9 !1@ 9
对照2’E !@ !@ #$$ 9 7?17 9 8#17 U @1@ 9 #$1% T ?1A 9 @1# 9 !1? 9
66!同列数据后字母相同者表示无显著差异"Jk$1$A# !下同$ +LM[90JMPZH4L 4LMP9;M0M4MSPHN 4LMP9;M3/0J;N L9[MN/4PHH39N4UH>MSMN3M
"Jk$1$A# 5+LMP9;MTM0/Z52对照为未贮藏的供试试管苗直接接种至再培养培养基中培养!下同$ +LMJNP4/SMU 4MP4YR09N40M4PZMSMUHSM340V
HN/3J094MU HN4/;MUHJ;>/S>JS4LMS3J04JSM9P4LM3/N4S/03LM3^"’E#5+LMP9;MTM0/Z5
图 %6不同贮藏方式下文心兰试管苗再培养后生长状况
aH<5%6+LM;)&+?+,9 R09N40M4P+) G+*%-9>4MS>JS4LMS
3J04JSMZH4L UH>MSMN4P4/S966%#不同贮藏容器类型及方式对文心兰试管苗
鲜(干质量及干质量比率的影响6从表 % 看出!8 种
不同贮藏方式中!试管苗整株鲜质量大小依次为 a-
’&!a-’-和 ’F’-!且 8 种贮藏方式与对照间差异均
不显著& 地上部鲜质量的变化基本上与整株鲜质量
相似$ 根部鲜质量方面!对照与 8 种低温贮藏方式
间无显著差异$ 低温贮藏的试管苗在干质量方面与
对照处理间差异均不显著!除 ’F’-方式下的根部
干质量外!整株与地上部干质量均以对照较好!但 8
种低温贮藏方式相比较!’F’-方式下试管苗的干
质量最大$表 % 表明!’F’-方式下的试管苗在整株(
地上部和根部干质量比率方面均高于 a-’-!a-’&
和对照!特别是根部干质量比率高达 ?1"_!而
a-’-!a-’& 和对照之间差别并不明显$
表 DA不同贮藏容器类型及方式对再培养后文心兰试管苗鲜%干质量及干质量比率的影响
B&,CDAQ44(<’#4$’#5&9(<#/’&-/(5$&/36(’"#3$#/’"(45($"_350 6&$$&/3350 6&$$5&’(#4K9%-’-)+%*&/’*(’$
-9F-7($ &4’(54+5’"(5<+*’+5(
贮藏方式
&4/S9;M4L/UP
鲜质量 aSMPL ;9PPh;< 干质量 DSV;9PPh;< 干质量比率 DSV;9PPS94Mh_
整株
+/490
地上部
,T/[M根部
I//4
整株
+/490
地上部
,T/[M根部
I//4
整株
+/490
地上部
,T/[M根部
I//4
’F’- # %8A1% 9 # $8?1A 9 #7?1? 9 @A1A 9 ?$1! 9 #A1# 9 "17 9 "1@ 9 ?1" 9
a-’- # %!!1! 9 # $8A1% 9 %$71% 9 @$1! 9 ""1! 9 #!1$ 9 "1A 9 "1! 9 "1? T
a-’& # %?!1! 9 # $"71A 9 %$!17 9 ?71@ 9 "A1? 9 #!1# 9 "18 9 "1% 9 "17 9T
对照 ’E # 8@?1@ 9 # #??1@ 9 %#$1$ 9 7$1A 9 ?A1" 9 #!17 9 "1A 9 "1! 9 ?1$ 9T
668 种贮藏方式中!’F’-方式下的文心兰试管苗
存活率(正常苗率等指标显著高于其他 % 种贮藏处
理$ 再培养后!’F’-方式下的文心兰试管苗在株
高(叶数(叶长(根数(根长及鲜(干质量等指标方面
与其他处理差异不显著$ 因此!’F是文心兰试管苗
低温贮藏的有效容器!’F’-方式是其经济有效的
A?#
林 业 科 学 !" 卷6
低温贮藏方式$
%1%6不同预处理对文心兰试管苗低温贮藏性的影
响6##不同预处理时间对文心兰试管苗生长状况
的影响6试管苗经过不同预处理后进行低温贮藏!
再培养后的生长状况如表 8 所示$ 试管苗再培养后
的存活率以预处理时间为 A 天和 ? 天的处理最高!
分别为 #$$_和 7?17_!且与其他处理差异显著&
接种后立即进行贮藏时 "预处理 $ 天#!存活率最
低!仅为 @818_$ 从再培养后试管苗的形态来看!
试管苗的正常苗率以预处理 A 天和 ? 天的较高!其
次是预处理 7 天!且与其他处理差异显著& 而再培
养后试管苗的腋生苗形成率以 ? 天最低!其次分别
为预处理 A 天(7 天和 8 天!预处理 $ 天的试管苗腋
生苗形成率最高! 且处理间差异显著$ A 种预处理
中!以预处理 ? 天的试管苗株高值最大!其次为预处
理 A 天和 8 天& 且 8 种处理均显著高于预处理 $ 天
的处理"表 8#$ 在叶数和叶长方面!预处理 A 天和 ?
天的试管苗在叶数上显著高于其他 8 种处理& 预处
理 ? 天条件下的试管苗叶长最大!且与预处理 A 天
和 8 天之间差异显著$ 根数和最大根长方面!A 种
处理间的试管苗根数差异不大& 而预处理 ? 天的试
管苗根长最大!其次是 A 天和 8 天处理!8 者差异不
显著& 预处理 $ 天和 7 天试管苗根长显著低于上述
8 种处理$
表 EA不同预处理对文心兰试管苗再培养后生长状况的影响
B&,CEAQ44(<’#43-44(5(/’%5(’5(&’6(/’$#/’"(95#>’"$’&’+$#4K9%-’-)+%*&/’*(’$-9F-7($ &4’(54+5’"(5<+*’+5(
预处理时间
:SM4SM94;MN4
4H;MhU
供试株数
*J;TMS/>
4MP4MU
;94MSH90P
生存数
*J;TMS/>
PJS[H[90
R09N40M4P
存活率
&JS[H[90
S94Mh_
再培养后试管苗形态
X/SRL/0/R09N40M4P9>4MS>JS4LMS3J04JSM
正常苗率
I94M/>N/S;90
R09N40M4Ph_
腋生苗形成率
I94M/>9QH09SV
R09N40M4>/S;94H/Nh_
株高
:09N40M4
LMH3;
叶数
*J;TMS/>
0M9[MP
叶长
-M9>
0MN<4Lh
3;
根数
*J;TMS/>
S//4P
根长
I//4
0MN<4Lh
3;
$ !@ !$ @818 U @$1$ U ?"18 9 71? 3 "1! 9T ?18 9 !17 9 ?1@ 3
8 !@ !8 @71A 3 @81? 3 ?%1A T #$1! T A1% 3 ?1% 9 !1@ 9 @1! 9T
A !@ !? 7?17 9 781" 9 ""1? 3U ##18 9 "1% T ?1A 9 A1# 9 @1A 9T
? !@ !@ #$$ 9 7A1@ 9 "A1% U ##18 9 "17 9 ?1" 9 A1$ 9 @17 9
7 !@ !A 781@ T @@17 T "71@ T3 #$1# T3 "1! 9T ?1% 9 A1# 9 @1% T
66%#不同预处理对文心兰试管苗鲜(干质量及干
质量比率的影响6如表 ! 所示!A 种处理的试管苗
在整株(地上部及根部鲜质量方面的变化较为一致!
均以预处理 A 天和 ? 天处理最大!并与其他处理间
差异显著$ 与鲜质量相比!不同处理在干质量方面
略有不同!试管苗整株(地上部及根部干质量以预处
理 A 天(? 天 % 个处理的效果最好!且与预处理 $ 天
和 8 天差异显著!但在整株及根部干质量方面与预
处理 7 天差异不显著$ 在干质量比率方面!预处理
? 天的试管苗在整株(地上部和根部干质量比率方
面均高于其他处理!其次为预处理 7 天和 A 天& 预
处理 $ 天的根部干质量比率低于预处理 8 天的处
理!但其整株和地上部干质量比率与预处理 8 天的
处理差异不显著$
表 FA不同预处理对再培养后文心兰试管苗鲜%干质量及干质量比率的影响
B&,CFAQ44(<’#43-44(5(/’%5(’5(&’6(/’$#/’"(45($"_350 6&$$&/3350 6&$$5&’(#4K9%-’-)+%*&/’*(’$
-9F-7($ &4’(54+5’"(5<+*’+5(
预处理时间
:SM4SM94;MN4
4H;MhU
鲜质量 aSMPL ;9PPh;< 干质量 DSV;9PPh;< 干质量比率 DSV;9PPS94Mh_
整株
+/490
地上部
,T/[M根部
I//4
整株
+/490
地上部
,T/[M根部
I//4
整株
+/490
地上部
,T/[M根部
I//4
$ # $!@1@T @@"18T #"%1AT ""1%T A"1@T 7183 "18 9 "1! 9 A1? 3
8 # $@A1AT 7$%1%T #@818T "@1!T A"18T #%1%T "18 9 "1% 9 "1? T
A # %?"1%9 # $"#1@9 %#!1A9 @!1"9 "71%9 #A1!9 "1" 9 "1A 9 ?1% 9T
? # %8A1%9 # $8?1A9 #7?1?9 @A1"9 ?$1!9 #A1#9 "17 9 "1@ 9 ?1" 9
7 # $?718T 7$818T #?A17T ?81@9T "$1?T #81#9T "1@ 9 "1? 9 ?1! 9T
66A 种预处理中!预处理时间为 A 天(? 天下的文
心兰试管苗存活率及正常苗率等综合指标高于其他
预处理& 且再培养后 % 种处理下的文心兰试管苗在
株高(叶数(根数(根长及干质量比率等指标方面略
高于其他处理!但差异不显著& 而其鲜(干质量显著
高于其他处理$ 因此!A 种预处理中!文心兰试管苗
适宜的预处理时间为 A ‘? 天$
EA讨论
在植物组培苗低温保存研究中!多采用试管或
"?#
6第 #$ 期 王6政等% 文心兰试管苗低温贮藏条件
三角瓶等作为贮藏容器$ 玻璃容器用于种质资源保
存较为有效!但在组培苗规模化运输和贮藏中!上述
容器由于占用较大的贮藏空间!提高了试管苗的成
本!也极大地制约了低温贮藏技术在试管苗商业化
生产中的应用$ 本研究以 ’F作为文心兰试管苗低
温贮藏用容器!研究结果表明!与传统的三角瓶相
比!试管苗再培养后 % 种容器在存活率及生长状况
等方面无显著差异!与对照相比差异也不显著$ 但
由于 ’F是热压封口!试管苗在贮藏期间和运输过
程中污染和破损的机率较小& 且 ’F为袋形!体积相
对较小!贮藏时可将其并排放置!与其他贮藏用容器
"三角瓶(罐头瓶等#相比!贮藏空间的利用率大幅
度提高$ 因而!认为!在规模化文心兰试管苗低温贮
藏中!’F是文心兰试管苗低温贮藏的有效容器!
’F’-贮藏方式是其贮藏的有效方式$
酒井昭"#7@%#在马铃薯" F-6$),9*,8"%-#,9#试
管苗低温贮藏研究中证明!培养体在低温贮藏前进
行预处理可以提高其低温贮藏性$ 本研究也表明文
心兰试管苗在低温贮藏前!进行适当时间的预处理
可以提高其低温贮藏性能!预处理时间以 A ‘? 天为
宜$ 同时还发现!在预处理为 $ ‘? 天内预培养时间
愈短!再培养后正常苗率愈低!而腋生苗形成率愈
高!这与 aJ^9H等 " #77$ # 在菊花 "@")?%$)*’"9$
5%$)?+.6-%,9#茎尖低温保存研究中的结论一致$ 前
人在对大田作物研究中发现!处于迅速生长期的植
物对低温的抵抗能力通常较差$ 本研究中!文心兰
试管苗在预处理 7 天时出现正常苗率大幅下降的现
象!其原因目前尚不清楚!是否与此时试管苗已处于
恢复生长期有关!尚需进一步探讨$ 今后!若能在文
心兰试管苗 ’F容器低温贮藏温度(贮藏时间等方
面进一步研究!将会完善其低温贮藏技术!为文心兰
试管苗的运输和贮藏提供技术支持$
参 考 文 献
艾鹏飞!罗正荣5%$$!1柿和君迁子试管苗缓慢生长法保存及其遗传
稳定性研究5园艺学报! 8#"!# % !!# =!!"1
陈6辉!陈晓玲!陈龙清! 等5%$$"1百合种质资源限制生长法保存
研究5园艺学报! 88"!# % ?@7 =?781
何松林! 王鹏飞!杨秋生!等5%$$895’2% 施肥时树脂膜培养容器在
文心兰试管苗培养中应用研究5北京林业大学学报! %A"8# % 88
=8"1
何松林! 刘6震!杨秋生!等5%$$8T5’2% 施肥时非无菌条件下容器
内文心兰试管苗接种技术研究5北京林业大学学报! %A"!# % !7
=A81
何松林! 孔德政!杨秋生!等5%$$835高分子树脂膜培养容器在文心
兰原球茎增殖中的应用5北京林业大学学报! %A"A# % AA =A@1
何松林! 杨秋生!孔德政!等5%$$8U5施 ’2% 时培养基糖浓度对文心
兰试管苗生长的影响5园艺学报! 8$""# % ?!A =?!?1
何松林!蒋要卫!孔德政!等5%$$?1不同培养方式对大花蕙兰试管苗
生长的影响5河南农业大学学报!!#""# % "#7 ="%%1
何松林!蒋要卫!孔德政!等5%$$@1’2% 施用对大花蕙兰试管苗生长
和叶片气孔特征的影响5河南农业大学学报! !% " % # % #"%
=#""1
刘剑 锋! 阎 秀 峰! 程 云 清! 等5%$$?1高 山 红 景 天 " !’-?+-6$
#$&’$6+)")#+##试管苗缓慢生长法保存及试管苗 D*,含量分析5
浙江大学学报% 农业与生命科学版!88"!# % 8?8 =8?@1
刘月学! 刘小军! 王家福!等5%$$!1低温等因素对枇杷种质离体保
存的影响5植物资源与环境学报! #8"## % %@ =8#1
牛爱国! 张开春! 张晓明! 等5%$$A1樱桃种质资源试管苗保存方
法5园艺学报! 8%"%# % %7@ =8$$1
宋希强! 罗毅波! 钟云芳! 等5%$$A1石斛属植物生物技术研究概
况5园艺学报!8%"!# % ?!# =?!?1
王艳芳! 房伟民! 陈发棣!等5%$$?1.神马/菊花的离体保存及遗传
稳定性5西北植物学报! %?"?# % #8!# =#8!@1
王6越! 刘6燕5%$$"1玻璃化法超低温保存石楠茎尖的初步研究5
林业科学! !%"#%# % #8! =#8"1
吴金寿! 胡又厘! 林顺权! 等5%$$A1芳樟离体快繁与离体保存试管
苗再生植株培养5福建农林大学学报% 自然科学版! 8!"## % !!
=A$1
赵密珍!王壮伟!钱亚明5%$$"1不同培养基对草莓种质离体保存的
影响5果树学报! %8"## % %? =8$1
翟晓巧!程6斐!朱延林5%$$71二乔刺槐愈伤组织超低温保存及适
宜降温方法5林业科学!!A"#$# % !7 =A!1
酒井 昭5#7@%1植物8耐冻性F寒冷反应5东京% 学会出版N:=
=5
田中道男! 新居 清! 高村武二郎5#77A1O:PQRSTUI@:
苗8计划生产8EV8苗条低(贮藏5园学杂! "! "# # % A%%
=A%81
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!责任编辑6徐6红"
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