全 文 ：园 艺 学 报 ， （ ）： – 2010 37 5 741 748
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期：2009–11–16；修回日期：2010–03–16
基金项目：国家‘973’项目（2009CB119004-05）；国家自然科学基金项目（30771252）；黑龙江省教育厅项目（1153018）；黑龙江科
技创新团队项目（2008）
词：黄瓜；盐胁迫；根际土壤；细菌群落结构；多样性
号：0513-353X（2010）05-0741-08

Eff mmunity Structure
u-qin
versity，Harbin 150030，China）
Abstract：In order to study effects of salt stress on changes of soil microbial quantities and the
dive
rhizospheric soil；bacterial community structure；diversity

盐胁迫对黄瓜根际土壤细菌群落结构和生长发
育的影响
吴凤芝*，包 静，刘淑芹
（东北农业大学园艺学院，哈尔滨 150030）
摘 要：以耐盐性不同的两个黄瓜品种‘津春 5 号’(耐盐)和‘津优 1 号’(盐敏感)为研究对象，
设置 4 个NaCl浓度处理(0、100、200、300 mmol · L-1)，采用PCR-DGGE技术研究整个生长时期根际土壤
细菌群落结构的变化。结果表明：盐胁迫能显著降低根际土壤细菌群落的丰富度(P＜0.05)，低盐处理下，
盐敏感品种根际细菌的丰富度较高；高盐胁迫下，耐盐品种根际细菌群落的丰富度较高。高盐胁迫对盐
敏感品种根际细菌群落结构组成影响较大。各时期DGGE图谱差异条带的序列片段经测序比对，推测为 4
大细菌类群：Firmicutes、Proteobacteria、Gemmatimonadetes和Bacteroidetes，且大多属于Proteobacteria(变
形菌门)的α–变形菌纲和γ–变形菌纲。随着盐浓度的增加黄瓜的株高和单株产量依次降低。
关键
中图分类号：S 642.2 文献标识码：A 文章编

ects of Salt Stress on Rhizospheric Soil Bacterial Co
and Cucumber Yield
WU Feng-zhi*，BAO Jing，and LIU Sh
（College of Horticulture，Northeast Agricultural Uni
rsity of soil microbial community by the technology of PCR-DGGE, two kinds of cucumbers with
different saline tolerance were selected，Jinchun 5（salt-tolerant）and Jinyou 1（salt-sensitive），and four
concentrations of NaCl were designed（0，100，200 and 300 mmol · L-1）. The results showed that salt stress
could reduce the richness of soil bacterial community significantly（P<0.05）. The richness of salt-sensitive
cultivar was high under low salt treatment, while the richness of salt-tolerant cultivar was high under
high salt treatment. High salt stress had more effects on the rhizosphere bacterial community structure
of salt-tolerant cultivar. Sequences of different bands of four stages belonged to four bacterial
groups，Firmicutes，Proteobacteria，Gemmatimonadetes and Bacteroidetes. Most of them belonged to
Alphaproteobacteria and Gammaproteobacteria. With the increasing of salt concentration，the plant heights
of cucumber and yield per plant reduced.
Key words：cucumber；salt stress；


﹡E-mail：fzwu2006@yahoo.com.cn
742 园 艺 学 报 37 卷
随着种植年限的增加，设施内黄瓜的连作障碍日趋明显。连作障碍原因很多，其中土壤次生盐
渍化、土壤微生物多样性降低（特别是病原微生物引起的土传病害）和连作引起的自毒作用等是主
要原因（吴凤芝 等，2000；喻景权和杜尧舜，2000；Yao & Wu，2006）。设施土壤次生盐渍化不仅
会影响作物生长，还会直接影响土壤微生物活性，通过改变土壤的部分理化性质来间接地影响土壤
微生物的生态环境（章家恩 等，2002）。植物相对于土壤微生物群落，对盐分的忍耐性更弱，因此
土壤受损引起的植物死亡将先于土壤微生物群落的衰落（Vanessa et al.，2006）。这也是人们常常
重视盐分对地上胁迫的研究而忽略了对地下胁迫的研究的主要原因。
土壤微生物群落结构组成及其变化在一定程度上反映了土壤的质量及其健全性（Visser &
Parkinson，1992），同时也是克服连作障碍及其他土壤障碍因子的关键所在（吴凤芝 等，2008）。
研究表明，盐分胁迫使微生物数量显著降低，耐盐较强的微生物将成为优势种群（林学政 等，2006）。
近年来有关金属胁迫、不同栽培方式及自毒物质对作物土壤微生物多样性影响的研究报道较多（胡
元森 等，2007；王光华 等，2008；王明道 等，2008；吴凤芝 等，2008；Wang et al.，2009），但
有关盐胁迫对根际土壤微生物群落影响的研究还鲜有报道。
作者以盐胁迫条件下黄瓜各生长时期的根际土壤细菌为研究对象，采用 PCR-DGGE 技术研究盐
胁迫对根际土壤细菌群落结构多样性的影响，旨在为进一步明确设施蔬菜连作障碍中盐分胁迫与土
壤微生物的关系奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料及其处理
试验于 2008 年 3 月至 2009 年 3 月在东北农业大学园艺试验站日光节能温室和园艺学院蔬菜生
理生态研究室进行。黄瓜（Cucumis sativus L.）耐盐品种‘津春 5 号’和盐敏感品种‘津优 1 号’
由天津蔬菜研究所提供。试验土壤为黑土，按照鲍士旦(2005)方法测定：土壤电导率 0.53 mS · cm-1，
pH 7.16，有机质 49.7 g · kg-1，碱解氮 306.83 mg · kg-1，有效磷 281.12 mg · kg-1，速效钾 393.79 mg · kg-1。
设置 4 个NaCl浓度处理：0（对照）、100、200 和 300 mmol · L-1。每个处理 3 次重复。在黄瓜
定植前分别把不同浓度的 78 L NaCl盐溶液随机均匀浇入特制栽培槽（4.08 m × 0.48 m）内，并保证
盐水浸透土壤而不渗出。选取籽粒饱满、大小均匀的黄瓜种子浸种催芽后播种于装沙育苗盘中育苗
（2008 年 3 月 17 日）。待子叶展平后（3 月 28 日）分苗至 8 cm × 8 cm营养钵，幼苗四叶一心时（4
月 27 日）定植在栽培槽内，常规管理。分别于定植前、定植后 30 d（根瓜期）、50 d（盛瓜期）、70
d（拉秧期），采用抖根法（Riley et al.，1969；van Elsas et al.，1986）随机收集每个处理黄瓜根际土
壤，过 80 目筛（吴凤芝和周新刚，2009），置于-80 ℃冰箱，用于土壤微生物群落结构的分析。
1.2 根际土壤细菌分析方法
1.2.1 根际土壤微生物 DNA 的提取 采用天泽基因工程有限公司生产的天净沙系列试剂盒 Soil
DNA out 提取土壤微生物 DNA，1%琼脂糖凝胶电泳检测。
1.2.2 根际土壤细菌 16S rDNA的扩增 将提取的DNA原液用ddH2O稀释 30 倍,采用对大多数细
菌的 16S rDNA V3 区通用的引物对 F338-GC（5′-CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGC
ACGGGGGGACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3′）和 R518（5′-ATTACCGCGGCTGCTGG-3′）（Muyzer
et al.,1993）进行PCR。50 μL PCR反应体系：DNA模板 1 L、Buffer + Mg2+ 5 L、dNTP 1 L、引
物各 1 L、pfu酶 1 L、无菌去离子水 40 L。PCR反应程序：94 ℃预变性 5 min；94 ℃变性 45 s，
69 ℃退火 45 s，72 ℃延伸 1 min，共 35 个循环；72 ℃延伸 5 min；4 ℃保存。扩增片段长度约 230 bp，
5 期 吴凤芝等：盐胁迫对黄瓜根际土壤细菌群落结构和生长发育的影响 743
1%琼脂糖凝胶电泳检测。将上述扩增产物继续稀释 40 倍，用Taq酶再次扩增。50 μL PCR反应体
系:DNA模板 8 L、Buffer 5 L、Mg2+ 4 L、dNTP 4 L、引物各 1.5 L、Taq酶 0.4 L、无菌去离
子水 25.6 L。PCR反应程序: 94 ℃预变性 7 min；94 ℃变性 45 s，52 ℃退火 45 s，72 ℃延伸 45 s，
共 35 个循环；72 ℃延伸 10 min；4 ℃保存。PCR产物长 230 bp左右，1%琼脂糖凝胶电泳检测。
1.2.3 变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析 使用 DGGE 梯度胶制备装置,参照 Bassam 等（1991）的
方法, 在凝胶成像系统下拍照。
1.2.4 细菌 16S rDNA片段的克隆和测序 切下差异条带，用聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒进行
胶回收，以不含GC夹子的引物对F338（5′-CCTACGGGAGGCAGCAG-3′）和R518 再次进行PCR扩
增。50 μL PCR反应体系: DNA模板 2 L、Buffer 5 L、Mg2+ 3 L、dNTP 1 L、引物各 1 L、Taq
酶 1 L、无菌去离子水 36 L。PCR反应程序: 94 ℃预变性 5 min；94 ℃变性 30 s，60 ℃退火 45 s，
72 ℃延伸 1 min，共 30 个循环；72 ℃延伸 10 min；4 ℃保存。扩增产物在 1%琼脂糖凝胶中检测，
由哈尔滨鑫丰生物材料有限公司进行克隆和测序。
1.3 数据分析
原始数据整理采用 Excel 2003 完成；数据处理使用 SAS 9.0 软件，方差分析采用 GLM 过程。
DGGE 图像用 Quantity One V4.6.2（Bio-Rad）软件进行分析，得到各列的条带位置、数字化结
果及条带数量信息图，DGGE 条带数量可以代表土壤细菌群落的丰富度(刘恩科 等, 2007)。
测序所得序列采用 NCBI 的 Blast 程序 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) 进行序列同源性分析，采
用 Sequence match 程序（http://rdp.cme.msu.edu/ Ribosomal Database ProjectⅡ-Release 9 website）进
行细菌分类分析。序列全部上传至 NCBI 的 GenBank 数据库。
2 结果与分析
2.1 盐胁迫对黄瓜根际土壤电导率的影响
从表 1 可以看出，两个品种的无盐对照在 4 个取样时期 EC 值相近且变化不大。定植前对土壤
进行盐处理，随着盐处理浓度的增加土壤 EC 值增加，均超过本底值造成不同程度的盐害。定植后
对黄瓜幼苗实行常规管理，因为不再进行盐处理，随着滴灌浇水次数的增多和植物根系对离子的吸
收利用，土壤 EC 值逐渐下降。其中根瓜期各处理间差异不显著；盛瓜期 Y2 显著高于 C0、Y0、Y1
和 C3；拉秧期 C2、Y2 显著高于 Y0；盛瓜期与拉秧期的 NaCl 浓度相同处理 C1、Y1，C2、Y2 和
C3、Y3 间 EC 值也有差异，但差异不显著。
表 1 盐胁迫对黄瓜土壤电导率（EC）的影响
Table 1 Effects of salt stress on the soil electrical conductivity
代号
Code
NaCl/
(mmol · L-1)
品种
Cultivar
定植前
Preplanting
根瓜期
Early fruit stage
盛瓜期
Fruit stage
拉秧期
Uprooting stage
C0 0 津春 5 号 Jinchun 5 0.69 ± 0.03 a 0.83 ± 0.27 a 0.72 ± 0.07 b 0.79 ± 0.14 abc
Y0 津优 1 号 Jinyou 1 0.71 ± 0.09 a 0.66 ± 0.17 a 0.73 ± 0.38 b 0.40 ± 0.04 d
C1 100 津春 5 号 Jinchun 5 1.84 ± 0.40 a 1.05 ± 0.43 a 1.13 ± 0.09 ab 0.42 ± 0.15 cd
Y1 津优 1 号 Jinyou 1 1.12 ± 0.37 a 0.65 ± 0.11 a 0.78 ± 0.03 b 0.43 ± 0.30 bcd
C2 200 津春 5 号 Jinchun 5 2.72 ± 2.14 a 1.38 ± 0.96 a 1.23 ± 0.41 ab 0.89 ± 0.13 a
Y2 津优 1 号 Jinyou 1 2.44 ± 1.42 a 0.85 ± 0.39 a 2.14 ± 1.15 a 0.75 ± 0.11 abc
C3 300 津春 5 号 Jinchun 5 2.80 ± 1.55 a 1.56 ± 1.39 a 0.63 ± 0.07 b 1.04 ± 0.27 a
Y3 津优 1 号 Jinyou 1 3.42 ± 3.35 a 1.67 ± 1.24 a 1.06 ± 0.83 ab 0.80 ± 0.12 ab

744 园 艺 学 报 37 卷
2.2 盐胁迫对黄瓜根际土壤细菌群落结构的影响
2.2.1 根际土壤细菌DGGE图谱分析 比较 4 个取样时期土壤细菌 16S rDNA V3 区片段PCR产物的
DGGE图谱（图 1）发现，许多条带为共有条带，但也有一些差异条带，如在定植前的土壤中，条
带a、c只在耐盐品种‘津春 5 号’300 mmol · L-1高盐处理（C3）出现，条带b在盐敏感品种‘津优 1
号’200 和 300 mmol · L-1高盐处理（Y2 和Y3）中出现；在根瓜期的根际土中，条带d出现在处理Y1
和Y2，对照和低盐处理无条带e；盛瓜期条带f在处理C3 和Y0、Y2、Y3 中出现，条带g只在对照Y0
中出现。拉秧期差异条带明显增多，处理C3 特有条带h，低盐处理Y1 无条带i和n，盐敏感品种的对
照Y0 特有条带h、j、m，低盐处理Y1 特有条带j、k，高盐处理特有条带l。
对箭头所指向的条带进行回收、扩增、克隆与测序，将测序结果与 NCBI GenBank 中已提交的
核酸序列进行比对分析并推测种群。由表 2 可以看出，所测序列与不可培养的土壤细菌克隆同源性
较高，在 90%以上。测序得出的序列片段经比对推测为 4 大细菌类群: Firmicutes（硬壁菌门）、
Proteobacteria（变形菌门）、Gemmatimonadetes（芽单孢菌门）和 Bacteroidetes（黄杆菌门）。条带 i
和 j 属于尚未分类的细菌。
9 条差异条带的序列属于 Proteobacteria（变形菌门）的 α-变形菌纲（条带 b、c、g、h、m、n）
和 γ–变形菌纲（条带 e、k、l）；条带 a 属于硬壁菌门消化球菌科；条带 d 属于芽单孢菌门芽单孢
菌属；条带 f 属于黄杆菌门黄杆菌科。
2.2.2 盐胁迫对黄瓜根际土壤细菌 DGGE 条带数的影响 DGGE 条带数量可以代表土壤细菌群落
的丰富度（Hu et al.,2004）。如表 3 所示，两品种的对照 C0 和 Y0 在各个时期丰富度变化不大且
差异不显著（P > 0.05）。定植前土壤细菌群落丰富度高，相同处理之间差异不显著。随着盐胁
迫时间的延长，盐处理土壤的细菌丰富度下降。在黄瓜的不同生长时期，耐盐品种的对照 C0 丰
富度高于 Y0。根瓜期和盛瓜期，处理 C1 的细菌丰富度低于 Y1 但差异不显著，处理 C2 的细菌丰
富度显著低于 Y2，处理 C3 则显著高于 Y3。拉秧期处理 C1 的细菌丰富度显著低于 Y1，处理 C2
显著高于 Y2，处理 C3 高于 Y3 但差异不显著。由此可见，盐胁迫能显著降低根际土壤细菌群落
的丰富度。低盐处理下，盐敏感品种根际细菌的丰富度较高；高盐胁迫下，耐盐品种根际细菌的
丰富度较高。
图 1 16S rDNA V3 片段 PCR 产物的 DGGE 图谱
Fig. 1 DGGE electrophoretograms of amplified 16S rDNA fragments from soil samples

5 期 吴凤芝等：盐胁迫对黄瓜根际土壤细菌群落结构和生长发育的影响 745
表 2 部分差异条带 16S rDNA 基因片段测序结果
Table 2 Sequencing results of 16S rDNA fragments of selected bands
同源性比对 BLAST match 测序
条带
Band
片段长
/bp
Fragment
length
登录号
Accession
number
相似序列
Similar sequences
相似性/%
Identity
登录号
Accession
推测种群
Putative population
a 173 GQ169288 Uncultured bacterium clone Toolik_
Jun2005_shrubmin_131
90(157/173) DQ509814 消化球菌科 Peptococcaceae
b 169 GQ169289 Uncultured bacterium clone F12-G01 100(169/169) FJ615977 鞘氨醇单孢菌属
Sphingomonas
c 169 GQ169290 Uncultured bacterium clone D48 48 95(161/169) EU580512 紫杆箘属 Porphyrobacter
d 171 GQ169291 Uncultured bacterium clone 2G1-58 94(165/174) EU160218 芽单孢菌属 Gemmatimonas
e 194 GQ169292 Uncultured bacterium clone CCSD_
DF1080_B17
100(194/194) AY820698 硫发菌目 Thiotrichales
f 189 GQ169293 Uncultured soil bacterium clone F6-68 97(186/190) EF688374 黄杆菌目 Flavobacteriaceae
g 169 GQ169294 Uncultured Kaistobacter sp. clone
Plot03-B03
99(168/169) EU276569 鞘氨醇单孢菌属
Sphingomonas
h 169 GQ169295 Uncultured Kaistobacter sp.
clone Plot17-2D04
96(163/169) EU440706 鞘氨醇单孢菌属
Sphingomonas
i 173 GQ169296 Uncultured bacterium clone GASP-
WC2S1_ F12
93(163/174) EF074958 Uncultured candidate division
OD1 bacterium
j 173 GQ169297 Uncultured soil bacterium clone S03 93(163/174) AF507684 Uncultured candidate division
OD1 bacterium
k 194 GQ169298 Uncultured Coxiellaceae bacterium
clone Plot03-B05
96(188/194) EU276556 柯克斯体科 Coxiellaceae
l 194 GQ169299 Uncultured gamma proteo bacterium
clone 153 NPW1
97(190/194) EU447449 肠杆菌科 Enterobacteriaceae
m 169 GQ169300 Agrobacterium sp. IMER-B4-18 98(167/169) FJ796437 根瘤菌属 Rhizobium
n 169 GQ169301 Uncultured bacterium clone F12-G12 97(165/169) FJ615987 鞘氨醇单孢菌属
Sphingomonas

表 3 盐胁迫对黄瓜根际土壤细菌 DGGE 条带数的影响
Table 3 Effects of salt stress on the DGGE band number of soil bacterial
代号
Code
NaCl/
(mmol · L-1)
品种
Cultivar
定植前
Preplanting
根瓜期
Early fruit stage
盛瓜期
Fruit stage
拉秧期
Uprooting stage
C0 0 津春 5 号 Jinchun 5 22.5 ± 0.7 d 20.0 ± 0.8 bc 20.0 ± 0.8 bc 17.5 ± 0.7 bcd
Y0 津优 1 号 Jinyou 1 25.0 ± 1.4 cd 19.3 ± 0.5 bc 19.3 ± 0.5 bc 17.5 ± 0.7 bcd
C1 100 津春 5 号 Jinchun 5 29.0 ± 2.8 ab 20.0 ± 0.8 bc 20.0 ± 0.8 bc 14.5 ± 2.1 d
Y1 津优 1 号 Jinyou 1 31.5 ± 2.1 a 21.8 ± 0.9 ab 21.8 ± 1.0 ab 21.0 ± 1.4 b
C2 200 津春 5 号 Jinchun 5 30.0 ± 0.0 a 20.0 ± 0.8 bc 20.0 ± 0.8 bc 26.0 ± 2.8 a
Y2 津优 1 号 Jinyou 1 28.5 ± 0.7 ab 23.3 ± 1.9 a 23.3 ± 1.9 a 16.5 ± 0.7 cd
C3 300 津春 5 号 Jinchun 5 29.0 ± 0.0 ab 23.8 ± 3.0 a 23.8 ± 3.0 a 19.5 ± 0.7 bc
Y3 津优 1 号 Jinyou 1 26.0 ± 0.0 bc 17.5 ± 1.9 c 17.5 ± 1.9 c 17.0 ± 1.4 cd
2.3 盐胁迫对黄瓜生长发育的影响
2.3.1 盐胁迫对黄瓜株高的影响 从定植后第 2 周起，每周测量统计黄瓜植株的株高至盛瓜期，如
表 4 所示。定植后 2 ~ 3 周，处理 C2、Y2、C3 和 Y3 与对照差异显著（P<0.05），随着黄瓜生长时
期的延长，各处理株高间的差异降低，从定植后第 7 周开始各处理间株高无显著差异。不同品种相
同处理间差异不显著。两个黄瓜品种植株的株高整体呈现随盐胁迫的增加而降低的趋势。

746 园 艺 学 报 37 卷
表 4 盐胁迫对黄瓜株高的影响
Table 4 Effects of salt stress on plant heights of cucumber /（cm）
定植后周数 Weeks after field planting 代号
Code 2 3 4 5 6 7 8
C0 20.79 ± 4.33 a 40.10 ± 10.12 a 74.09 ± 12.72 a 105.91 ± 13.98 a 151.57 ± 17.98 a 180.72 ± 21.81 a 211.86 ± 37.32 a
Y0 16.41 ± 2.35 b 31.93 ± 4.70 ab 61.07 ± 10.16 ab 87.62 ± 14.00 ab 139.44 ± 16.94 ab 175.33 ± 17.71 a 206.22 ± 49.65 a
C1 14.08 ± 6.03 bc 23.51 ± 11.47 bc 53.86 ± 23.60 bc 78.80 ± 32.84 bc 133.43 ± 40.85 abc 171.15 ± 59.59 a 204.56±30.90 a
Y1 12.87 ± 4.88 bc 21.99 ± 10.08 c 50.80 ± 21.58 bc 74.08 ± 29.97 bc 122.11 ± 39.04 abcd 160.40 ± 42.92 a 203.17±45.24 a
C2 10.79 ± 5.03 c 19.73 ± 12.09 c 44.31 ± 10.36 bc 70.66 ± 13.40 bc 125.90 ± 19.74 abcd 156.43 ± 10.93 a 189.88 ± 60.44 a
Y2 10.62 ± 3.87 c 19.71 ± 7.31 c 43.25 ± 23.07 bc 63.59 ± 26.91 bc 110.83 ± 47.46 bcd 145.37 ± 48.82 a 189.50 ± 65.08 a
C3 10.62 ± 3.29 c 18.28 ± 6.52 c 38.98 ± 15.75 c 63.63 ± 31.84 bc 96.40 ± 45.60 cd 139.35 ± 52.85 a 187.78 ± 63.01 a
Y3 9.98 ± 2.20 c 16.29 ± 8.76 c 34.02 ± 21.62 c 53.14 ± 32.70 c 92.70 ± 38.03 d 135.91 ± 52.11 a 182.33 ± 82.37 a

2.3.2 盐胁迫对黄瓜产量的影响 如图 2 所示，随着盐浓度的增加黄瓜单株产量依次降低，黄瓜产
量受到不同程度的盐害。耐盐品种‘津春 5 号’的单株产量为 1.78 kg · 株-1，100、200、300 mmol · L-1
NaCl处理的黄瓜单株产量依次减产 2.66%、18.72%、39.10%，且 300 mmol · L-1 NaCl高盐处理显著
低于对照(P<0.05)。盐敏感品种‘津优 1 号’对照的单株产量为 1.54 kg · 株-1，100、200、300 mmol · L-1
NaCl处理的黄瓜单株产量依次减产 14.54%、25.77%、32.97%。
图 2 盐胁迫对黄瓜单株产量的影响
Fig. 2 Effects of salt stress on the cucumber yield per plant
3 讨论
根际土壤中存在大量微生物，这些微生物群落结构的改变与作物种类、土壤类型、根际养分和
作物生长发育时期等密切相关（Bowen & Rovira，1999；Garbeva et al.，2004；刘俊杰 等，2008）。
DGGE 根据 DNA 解链行为的不同，可以分离具有相同长度但是碱基对序列不同的 DNA。从
DGGE 图谱可以看到，在黄瓜生长的不同时期存在许多共有条带，表明具有这些条带基因的土壤细
菌不受黄瓜品种、采样时期和盐处理的影响，在土壤中比较稳定，这与陈雪丽等（2008)研究结果一
致。定植前土壤、根瓜期和盛瓜期的根际土差异条带较少，拉秧期根际土壤差异条带较多，说明拉
秧期特有细菌种类变化多, 这与根系分泌物和土壤理化性质等微生态环境的改变密切相关。差异条
带在盐敏感品种的各个处理中都有出现，而耐盐品种只在不同时期的高盐处理 C3 中出现差异条带，
说明盐胁迫对盐敏感品种根际细菌群落结构多样性的影响较大。
测序得到的序列片段大多属于 Proteobacteria (变形菌门)。盐胁迫能降低根际土壤细菌群落的
丰富度。低盐处理下，盐敏感品种根际细菌的丰富度较高；高盐胁迫下，耐盐品种根际细菌群落的
丰富度较高。试验所用土壤中的大部分差异细菌属于 Proteobacteria（变形菌门）的 α–变形菌纲、γ
–变形菌纲；条带 a 属于硬壁菌门消化球菌科；条带 d 属于芽单孢菌门芽单孢菌属，这类细菌多生
5 期 吴凤芝等：盐胁迫对黄瓜根际土壤细菌群落结构和生长发育的影响 747
存在环境较差的条件下，说明盐胁迫可使土壤环境恶化；条带 f 属于黄杆菌门黄杆菌科，条带 l 属
于肠杆菌科，它们可能具有除草潜能（王茹华 等，2007），黄杆菌还是可以拮抗黄瓜细菌性角斑病
的有益菌；条带 m 与根瘤菌属相似性高，此类细菌绝大多数为有益细菌，具有固氮功能。条带 b、
g、h、n 属于鞘氨醇单胞菌属，是土壤中的降解细菌（项丽和唐建设，2007）。
对于细菌群落结构多样性的分析基于一个假设，即 DGGE 图谱中的每一个条带代表一个单独的
菌种。由于 DNA 的提取和 PCR 在扩增某些未知种群方面的限制（Farrelly et al.，1995，Polz &
Cavanaugh，1998），以及不同序列 DNA 存在共迁移的可能性，使得这种假设存在一定的局限性,并
不完全正确。另外，在图像处理过程中，对于在 DGGE 图谱上肉眼可见、但被软件忽略掉的一些小
条带进行了手动处理，所以本试验的分析方法并不能完全揭示土壤细菌的实际生态特征。但 DGGE
条带的位置和多少在一定程度上的确能反映细菌的群落结构多样性，DGGE 图谱也提供了一个在分
子水平度量微生物群落遗传多样性变化的方法（Stamper et al.，2003），因此 DGGE 可以补充传统微
生物培养方法的不足，对进一步了解和研究微生物生态系统有着重要意义。
此外，不同浓度处理下两品种产量之间产生了差异，耐盐品种的产量高于盐敏感品种，但没有
达到差异显著，这可能是因为定植前进行盐处理，之后正常管理，随着黄瓜的生长和灌水次数的增
加，盐胁迫程度降低，到中后期（盛瓜期以后）不同盐浓度处理的 EC 值差异不显著，因而没有对
产量产生显著性差异，关于这一点还有待于进一步研究。

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