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Tissue Culture and Rapid Propagation of Veronicastrum sibricum Pennel

草本威灵仙的组织培养与快速繁殖



全 文 :园 艺 学 报 2004,31(3):400~402
Acta Horticulturae Sinica
草本威灵仙的组织培养与快速繁殖
姜洪波 贾桂霞 丁 琼
(北京林业大学园林学院,北京 100083)
摘 要:用种子切段作外植体,建立了草本威灵仙的组织培养和再生体系。试验结果表明:草本威灵
仙种子切段诱导愈伤组织的最佳培养基为Ms+6一BA 3 mg·L +NAA 0.3 mg·L~,诱导率达86.7%;附
加6一BA 2 mg·L。+NAA 0.2 mg·L 的Ms培养基有利于芽的分化和增殖,培养60 d左右,每个外植体
分化形成的再生小植株数达到12~18个;在1/2 Ms+IBA 0.5 mg·L 的培养基中生根效果最好。移植时
喷施营养液可以提高幼苗的成活率。
关键词:草本威灵仙;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S 68 文献标识码:A 文章编号:0513—353X(2004)03-0400-03
Tissue Culture and Rapid Propagation
Pennell
Jiang Hongbo,Jia Guixia ,and Ding Qiong
(Colege ofLandscape Architecture,Beifng Forestry University,Beifng 100083,China)
Abstract:The explants from seed segments of Veronicastrum sibiricum (L.)Pennel were used to eS—
tablish culture in vitro and regeneration system.The experiments showed that the best medium for callus in—
duction from seed segm ents was MS with 3 mg·L 6一BA and 0.3 mg·L~ NAA.Th e medium supplemen—
ted with 2 mg·L~6一BA and 0.2 mg·L~ NAA was favorable to the diferentiation and proliferation of buds.
and each explant regenerated 12—1 8 plantlets about 60 days.Th e growth of roots was best on 1/2 MS medi—
um with supplement of IBA 0.5 mg·L~.
Key words:Veronicastrum sibiricum (L.)Pennel;Tisue culture;Rapid propagation
1 目的、材料与方法
草本威灵仙 ¨[Veronicastrum sibiricum (L.)Pennel1],又名轮叶婆婆纳,玄参科婆婆纳属多年
生草本花卉,主要分布在我国东北、华北及西北地区,朝鲜、日本、俄罗斯也有分布。多生于林边草
甸、山坡草地及灌木丛中,耐寒、喜光,也耐半荫。株高1 m左右,由多数小花集成的长尾状穗状花
序顶生,可达30 am;花冠淡紫蓝色、红紫色等,是较好的切花材料和花境用花。其自然状况下以
种子繁殖为主,在引种栽培试验中,由于种子细小,人工播种成活率极低,从播种发芽到正常成
苗有长达三四个月的生长停滞期,导致育苗困难。采用组织培养繁殖可以加快繁殖速度,提高繁
殖系数。
草本威灵仙的种子、茎、叶采自河北省围场县坝下。用自来水将种子、茎、叶冲洗干净,无菌条
件下用75%酒精消毒30 S,0.1%升汞消毒 (种子8 rain,茎、叶4~6 min),再用无菌水冲洗4~5
次。将消毒好的无菌种子切成两段 (胚轴及子叶充满整个种子,因此两段均带种胚),茎切成5 mil
大小,叶切成0.5 am 小块 (带中脉),于固体培养基中培养。MS为基本培养基,附加不同种类和浓
收稿日期:2003—07—09;修回日期:2004—01一l6
}通讯作者 Corresponding author
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3期 姜洪波等:草本威灵仙的组织培养与快速繁殖
度的植物生长调节剂,蔗糖 3%,琼脂0.6%,pH 5.8~6.0。培养温度 (22±3)℃。光照 1 000~
2 000 lx,14 h/d。
2 结果与分析
2.1 愈伤组织的诱导及芽的分化
用茎、叶作为外植体形成的愈伤组织都极少,
褐化死亡。
种子切段 (表 1)接种 10 d左右在 MS+
6一BA 3 mg·L (单位下同) +NAA 0.3培养基
上形成质地疏松的淡黄色愈伤组织,在含有6-BA
1+NAA 0.1的MS培养基上几乎不能诱导出愈伤
组织,在6-BA 2+NAA 0.2的培养基上诱导率较
低。继续增加植物生长调节剂的浓度,形成的愈
伤组织增多,当采用 MS+6.BA 3+NAA 0.3时,
形成大量丰富透明的瘤状愈伤组织 (图版,1),
诱导率达86.7%。继续加大浓度为6一BA 5+NAA
0.5时,形成的愈伤组织逐渐褐化,最终失去分
化能力。结果表明,添加不同浓度的2,4-D对草
本威灵仙种子切段形成愈伤组织的作用不如6一BA
明显。
当愈伤组织长至大约1 cm时转入到不同的分
化培养基上。从表2可见,提高6-BA浓度可以增
加不定芽的分化数,但形成玻璃化苗的几率也升
高,但浓度增加到2 mg·L 时,每个外植体能
分化出l2~l8个小芽 (图版,2),继续加大6一
BA浓度,外植体出芽数继续增多,但最终长出的
小植株多细弱,且极易形成玻璃化苗。KT对芽的
分化效果也不如6一BA明显。
2.2 继代培养
大部分不分化;茎 lO~14 d后褐化,叶片20 d后
表1 培养基对诱导愈伤组织的影响
Tahie 1 E廿bct of the media On calus induction
表2 草本威灵仙愈伤组织在不同培养基的出芽率
Table 2 Efect ofgrowth regulators On callus of
Veronicastrum sibirieum (L.J Pennel
培养 植物生长调节剂
基 Growth
Med· regulators
ium (mg·L )
平均每个外
植体出芽数
Average no.
of shoots
per explant
MS 6.BA 1+NAAn 1 30
MS 6.BA 2+NAAn 2 30
MS 6.BA 3+NAAQ 3 30
MS 6.BA 5+NAAQ 5 30
MS KT 3+NAA 0.3 30
14 74 5.3
30 336 16
30 520 17.3
30 540 18
16 144 9
将培养中带愈伤组织的丛芽分割接种到MS+6-BA 2+NAA 0.2上,芽开始增殖,每60~70 d继
代1次,增殖4~6倍。分生的芽逐渐形成独立小植株 (图版,3),部分长出幼根,但极细弱。
2.3 生根培养及移栽
继代培养得到大量的增殖苗,将一部分转入IBA分别为0.1、0.5和1.0 mg·L 的1/2 MS生根
培养基中。在1/2 MS+IBA 0.5的培养基中20 d左右 100%生根,50 d后转入MS培养基中壮苗,3O
d后幼苗根系发达,植株健壮 (图版,4)。
出瓶前先打开瓶盖,在实验室散射光下炼苗2~3 d。移栽前,先将幼苗根部的琼脂用清水洗净,
然后移入盆中,上部用塑料薄膜遮荫保湿,5 d后除掉薄膜,每周两次用营养液喷施小苗,15 d后成
活率达95%。
参考文献:
1 贺士元,邢其华,尹祖棠,等.北京植物志下册.北京:北京出版社.1993.906 907
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