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Mericlone Production Technical of Phalaenopsis

蝴蝶兰组培工厂化生产技术



全 文 :园 艺 学 报 2004,31(3):413—414
Acta Horticulturae Sinica
蝴蝶兰组培工厂化生产技术
李 军 柴向华 曾宝 张秀珊 王细燕 詹海洋 朱饱卿
(汕头市农业科学研究所,汕头515021)
摘 要:介绍了蝴蝶兰组培快繁技术及其工厂化生产技术。
关键词:蝴蝶兰;组织培养
中图分类号:S 68 文献标识码:A 文章编号:0513—353X(2004)0343413-02
Mericlone Production Technical of Phalaenopsis
Li Jun,Chai Xianghua,Zeng Baodang,Zhang Xiushan,Wang Xiyan,Zhan Haiyang,and Zhu Baoqing
(Shantou Agricultural Science Research 疵u ,Shantou 515021,China)
Abstract:This paper dealt with rapid propagation and factorial production of Phalaenopsis.
Key words:Phalaenopsis;Tissue culture
蝴蝶兰 (Phalaenopsis)为单茎性气生兰,植株极少发育侧枝,较难进行常规无性繁殖。自Rotor
G.1949年利用蝴蝶兰花梗腋芽培养出试管苗以来,蝴蝶兰组培种苗的工厂化生产发展迅猛,技术日
趋成熟 。近十年来,我们建立了一整套蝴蝶兰组培快繁与工厂化生产技术流程,并在蝴蝶兰优良
小花品种 ‘满天红’和本所选育的新品种组培生产中取得了成功,逐渐形成年产各类规格种苗几十
万株、开花株近十万株 (其中大部分为自育品系)的规模。
1 生产技术流程
2 诱导
花梗诱导 — 二次诱导 — 分化丛生芽 — 增殖 — 壮苗与生根 — 炼苗 — 出瓶种植
L 叶 诱导 片 —
2.1 外植体及其处理
选用已开花花梗的下端休眠芽和分化苗的叶片作为外植体。将剪去上端花序的花梗剪切成 10~
15 cm,用自来水冲洗 1~2 h,然后在超净工作台上先用 75%酒精浸泡 30 S,无菌水冲洗后放人
0.1% HgC1 溶液中浸泡10 min左右,无菌水冲洗2~3次,在无菌接种盘上剥去休眠芽的苞片,再放
人0.05%HgC1,溶液中浸泡7~8 min,无菌水冲洗5~8次。
2.2 花梗诱导
处理后的花梗切成2~3 cm长的切段,每段一个侧芽,基部向下插入诱导培养基1/3 MS+6-BA
10 mg·L +NAA 1 mg·L +椰汁 10%+蔗糖2%+琼脂0.7% (pH 5.6左右)。先放置于黑暗培
养7~10 d,然后光照培养,光照强度 1000~2000 lx,光照时间10 h/d,培养温度 (26±2)℃。5~
10 d后开始萌动,诱导率可达90%以上。在花梗休眠芽的诱导过程中,我们发现有80%左右的休眠
芽萌发后,长成类似花梗侧枝的细嫩梗茎,约20 d后,待其长至3~5 cm,有2~3个芽点时将其切
离花梗,并将其重新切段,基部向下重新放人诱导培养基中,约l0~20 d,下端切口、侧芽、上端切
收稿日期:2003—12—03;修回日期:2004一O2—23
感谢许大熊研究员对本研究的悉心指导。
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口等部位均出芽,其中以侧芽出芽率最高,较快地分化出丛生芽,下端切口的出芽率次之,分化频率
不高,但启动后出芽较多。
2.3 叶片诱导
将分化苗的叶片切割成 1~2 cm ,叶面向上水平放入诱导培养基中进行诱导,光照强度 1000~
2000 lx,光照时间10 h/d,培养温度 (26 4-2)℃。约3O~45 d,部分叶片开始分化,且不经过原球
茎阶段,直接分化出芽,尤其是叶片的基部诱导出芽率较高,分化也较早。利用这一方法,可以周年
进行诱导,极大改善生产上原材料少的限制,加快组培材料的积累。
3 继代增殖
花梗和叶片诱导出丛生芽后,接种于继代培养基 1/3 Ms+NAA 0.5 mg·L +蔗糖 2% +琼脂
0.7%+6.BA 1~10 mg·L (pH 5.6左右),培养温度 (26±2)℃,光照强度2000 lx,光照时间1O
h/d。每4O~50 d继代 1次,增殖倍数2~3倍。继代增殖的初期宜用5—10 mg·L 浓度的6-BA较
快地积累材料,随着继代次数的增加,特别是 1O代以后或变异株开始出现以后,只能用 1~5 mg。
L 浓度6-BA促进丛生芽的生长,并在生产中及时汰除变异株 。
我们发现:丛生芽的增殖生长表现出一定的群体效应,即当丛生芽切割成只有 1~2个芽时,丛
生芽的增殖大大减少,大多数 1个继代周期后几乎没有增殖,但丛生芽有一定的长大。当有3~5个
芽或更多时,丛生芽的增殖则较为正常。切割丛生芽时,只能将丛生芽轻轻分开,不可对丛生芽的四
周进行切割,否则会因切割伤口太多而导致培养基褐化较快,不利于丛生芽的生长与分化,甚至会造
成丛生芽的死亡。对一些较大的芽 (芽高1.5 cm以上,单轴茎直径0.5 cm以上)进行横切可以提高
增殖率,横切后会在切口的下部长出一轮丛生芽,增殖率可提高3~5倍。因蝴蝶兰单轴茎较短小,
在切割时对切割部位的掌握要准,否则会将芽切死或因没有切去顶芽而达不到应有的增殖率。
4 生根与炼苗
当芽长至1.5~3 cm高,2~3片叶时,即可转入生根培养基花宝1号2.5 g·L +10%香蕉泥+
IBA 1 mg·L一 +NAA 0.5 mg·L +蔗糖2%+琼脂0.7% +活性炭0.1%(pH 5.6左右),光照强度
2000~3000 lx,光照时间12 h/d,培养温度22~28~C,20 d左右开始生根。生根后将苗置于光照强
度8000~10000 lx、光照时间8~12 h/d的环境条件下 15~20 d,可以明显提高瓶苗的质量和种植成
活率。当苗高3~5 cm,叶片数3~5片时,即可出瓶种植。
参考文献:
1 谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术.北京:中国林业出版社,1991.247—257
2 王怀字.蝴蝶兰的快速无性繁殖.园艺学报,1998,16(1):73~77
3 刘荣维,梅庆超,崔元芳,等.丛生芽——蝴蝶兰无性快速繁殖的新途径.热带作物学报,1993,14(2):105~107
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