全 文 ：园 　艺 　学 　报 　2001 , 28 (6) : 570～571
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2001 - 05 - 28 ; 修回日期 : 2001 - 07 - 13
正交设计在黄金鱼花组织培养中的应用
李　艳　王　青　李英慧　王火旭
(辽宁师范大学生物系 , 大连 116029)
摘 　要 : 用正交设计法研究了 4 种激素对黄金鱼花叶片诱导愈伤组织的影响。结果显示 ,
诱导黄金鱼花愈伤组织产生的最佳激素配比为 : MS + 2 ,4 2D 1 mg/ L + 62BA 1 mg/ L + NAA 1 mg/
L , 有 2 ,42D 的培养基中愈伤组织诱导率明显高于没有 2 ,42D 的培养基 , IBA 对愈伤组织的诱
导有抑制作用。
关键词 : 黄金鱼花 ; 组织培养 ; 正交设计
中图分类号 : S 68 ; 　文献标识码 : A 　文章编号 : 05132353X (2001) 0620570202
1 　目的、材料与方法
黄金鱼花 ( Nematanthus glabra) 为苦苣苔科丝花苣苔属植物 , 原产南美洲 , 叶椭圆
形 , 蜡质 ; 花囊状 , 橘黄色 , 似金鱼。采用正交试验设计法〔1 ,2〕研究了激素对诱导黄金鱼
花愈伤组织产生的影响 , 找出诱导愈伤组织的最佳培养基。黄金鱼花叶片外植体采自大连
园林花木公司。幼叶 (叶龄为 20 d) 先用洗涤剂冲洗干净 , 然后用 75 %酒精消毒 30 s ,
0. 1 %升汞消毒 10min , 无菌水冲洗 5 次 , 每次 1min , 之后将幼叶切成 6 mm ×6 mm 的小块
接种到培养基上。以 MS 培养基为基本培养基 , pH 5. 8 , 蔗糖浓度 30 g/ L。培养室温度 20
～28 ℃, 每天用荧光灯照明 10 h , 光照强度为 2 000 lx , 14 h 黑暗。
培养基中添加激素采用 L9 (34) 正交设计 : 2 ,4 2D、62BA、NAA、IBA 4 种激素各设 3
个水平 (表 1) , 3 次重复 , 考察上述 4 种激素对黄金鱼花愈伤组织诱导的影响。
2 　结果与分析
黄金鱼花外植体接种两周后叶表面切口处变白 , 至 3 周时切口处产生淡黄色愈伤组
织 , 质地疏松。正交试验结果 (表 1) 表明 : (1) 在叶片诱导愈伤组织的 9 种组合中 , 以
第 5 组合的愈伤组织诱导率为最高 , 达到 87 % , 以第 1、第 2 组合最低 , 为 0 ; (2) 诱导叶
片愈伤组织的最佳激素组合为 MS + 2 ,4 2D 1 mg/ L + 62BA 1 mg/ L + NAA 1 mg/ L , 诱导叶片
愈伤组织的频率最高 , 达 87 % ; (3) 在有2 ,4 2D 的培养基中愈伤组织诱导率明显高于没有
2 , 42D 的培养基 ; (4) IBA 对愈伤组织的诱导有抑制作用。
植物细胞的分化是一个复杂的生理生化过程 , 植物激素和植物生长调节物质的种类、
浓度以及它们之间的组合直接影响着愈伤组织的诱导。在植物组织培养过程中 , 选择合适
的培养基 , 确定适宜的激素种类及其浓度是极其重要的。
本文结果表明 , 用正交设计法安排多因素多水平的试验只需通过较少的试验次数就能
有效地选择合适的培养基 , 其优越性在于能大量减少试验次数 , 提高工作效率及试验结果
的正确性和可靠性。
表 1 　黄金鱼花组织培养 MS 添加激素正交试验结果
Table 1 　Result of orthogonal design in tissue culture of Nematanthus glabra
编号
Serial
Number
处理　Treatment (mg/ L)
2 ,4 2D 62BA NAA IBA 愈伤组织诱导率Inducing callusrate ( %)
1 0 0. 5 0 0 0
2 0 1 0. 5 0. 5 0
3 0 1. 5 1 1 9
4 1 0. 5 0. 5 1 43
5 1 1 1 0 87
6 1 1. 5 0 0. 5 60
7 2 0. 5 1 0. 5 40
8 2 1 0 1 7
9 2 1. 5 0. 5 0 7
R 130/ 3 27/ 3 86/ 3 41/ 3
参考文献 :
1 　栾　军. 现代实验设计优化方法. 上海 : 上海交通大学出版社 , 1995. 54
2 　孙清荣 , 孙洪雁 , 赵红军. 中国樱桃抗病毒选系试管苗生根的研究. 园艺学报 , 2000 , 27 (1) : 57～58
Application of Orthogonal Design in Tissue Culture of Nematanthus glabra
Li Yan , Wang Qing , Li Yinghui , and Wang Huoxu
( Department of Biology , Liaoning Normal University , Dalian 116029)
Abstract : Effects of 2 ,4 2D , 62BA , NAA and IBA on callus induction of Nematanthus glabra was studied by L9
(34) orthogonal design. The experimental results showed that the best medium for callus induction was MS with 2 ,4 2D
1 mg/ L , 62BA 1 mg/ L , NAA 1 mg/ L. Callus induction rate was higher in the medium with 2 ,4 2D than without it , cal2
lus induction was inhibited with IBA.
Key words : Nematanthus glabra ; Tissue culture ; Orthogonal design
中国园艺学会南瓜研究会成立暨第一届学术交流会在京召开
会议于 2001 年 10 月 23～24 日在北京中国农科院蔬菜花卉所召开。来自全国 13 个省市的 50 余位代
表参加了会议。中国园艺学会理事长朱德蔚、副理事长李树德、中国农科院蔬菜花卉所所长屈冬玉 , 以
及中国农科院科技局、中国包装和食品机械公司领导出席了会议。中国园艺学会南瓜研究会筹备委员会
主任、中国农科院蔬菜花卉所研究员刘宜生做了“关于中国园艺学会南瓜研究会成立的工作报告”。中
国农业大学食品学院教授蔡同一、四川省农科院教授林德佩分别做了学术报告。
在本次会议召开之际 , 由南瓜研究会主持编印了《中国园艺学会南瓜研究会成立暨第一届学术交流
会论文集》, 其中除刊有领导同志的贺词外 , 还收录 38 篇论文等 , 李树德副理事长作序 , 高度评价了论
文集的学术成绩 , 并指出“本论文集的出版 , 全方位地反映了我国南瓜产业发展的概况 , 这也是我国第
一本以南瓜为专题的论文集 , 它将对进一步推动南瓜产业化的发展 , 起着积极的作用。”
会议期间 , 与会代表进行了学术交流活动 , 并对研究会的组织结构、工作任务、工作方向、活动形
式等问题进行了讨论 , 最后会长刘宜生先生做了大会总结发言。
(中国园艺学会南瓜研究会秘书处)
1756 期 　　　　　　　　　李 　艳等 : 正交设计在黄金鱼花组织培养中的应用