全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 1 期 2016 年 1 月

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一测多评法测定淫羊藿中淫羊藿苷和朝藿定 A、B、C
徐文芬 1，杨 雯 1，何顺志 1*，王悦云 1，杨相波 2，贺 勇 2
1. 贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002
2. 贵州同济堂制药有限公司，贵州 贵阳 550002
摘 要：目的 建立一测多评（QAMS）法测定淫羊藿中的黄酮类成分，以提高淫羊藿药材的质量控制水平。方法 采用 HPLC
法，检测波长为 270 nm，在一定的线性范围内，测定淫羊藿苷与朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 的相对校正因子，并考察不同色
谱柱、不同仪器测定各成分相对校正因子的重现性，以淫羊藿苷为对照品，用所建立的相对校正因子计算淫羊藿药材中朝藿定 A、
朝藿定 B、朝藿定 C 的量；同时采用外标法测定 100 批淫羊藿药材中 4 种成分的量，以验证 QAMS 法的准确性和科学性。结果 所
建立各成分的相对校正因子重现性良好，分别为 1.352、1.384、1.340，其 RSD 值均小于 5%，采用该校正因子计算的朝藿定 A、
朝藿定 B、朝藿定 C 的量与外标法实测值之间没有显著性差异。结论 该方法准确可靠，简便可行，且节约对照品及检测成本，
该方法可以作为淫羊藿药材多指标成分测定质量控制方法。
关键词：淫羊藿；一测多评法；相对校正因子；外标法；质量控制方法；淫羊藿苷；朝藿定 A；朝藿定 B；朝藿定 C
中图分类号：R286.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)01 - 0130 - 08
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.01.020
Determination of icariin, epimendin A, epimendin B, and epimendin C in
Epimedii Herba by QAMS
XU Wen-fen1, YANG Wen1, HE Shun-zhi1, WANG Yue-yun1, YANG Xiang-bo2, HE Yong2
1. Guiyang College of Traditional Chinese Medicine, Guiyang 550002, China
2. Guizhou Tongjitang Pharmaceutical Co., Ltd., Guiyang 550002, China
Abstract: Objective To establish a method of quantitative analysis of multi-components by single marker (QAMS) for determining
the flavonoids in Epimedii Herba and improve the level of quality control of Epimedii Herba by applying multi-index components
control. Methods To detect a relative correction factor (RCF) of epimendin A, epimendin B, epimendin C, and icariin at detection
wavelength of 270 nm by HPLC in the range of a linear, to investigate the reproducibility of RCF in different chromatographic columns
and different instruments as well, to consider icariin as an internal standard, to calculate the contents of epimendin A, epimendin B, and
epimendin C in Epimedii Herba by using RCF; Meanwhile, to analyze the content of the four components in 100 Epimedii Herba by
external standard method (ESM) and verify the accuracy and scientificalness of QAMS. Results The RCF had a good reproducibility,
which were 1.352, 1.384, and 1.340. The values of RSD were less than 5%; No significant differences were found in the quantitative
results of epimendin A, epimendin B, and epimendin C determined by using RCF and ESM. Conclusion This method could be
accurate and reliable, simple and feasible, which could save the reference and costs of testing. It further validates that this approach can
be used as a quality control method for the determination of multi-component index in Epimedii Herba.
Key words: Epimedii Herba; quantitative analysis of multi-components by single marker; relative correction factor; external standard
method; quality control method; icariin; pimendin A; epimendin B; epimendin C

淫羊藿 Epimedii Herba 为用药悠久的传统中药
之一，也是贵州常用的重要苗药，来源于小檗科
（Berberidaceae）淫羊藿属 Epimedium L. 植物，具
有补肾阳、强筋骨、助阳益精等功效，主治阳痿遗
精、筋骨痿软、风湿痹痛、麻木拘挛等症。现代临
床上还常用于治疗骨质疏松、更年期综合症、乳房

收稿日期：2015-04-15
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81160506）；贵阳市科技局科技特派员项目（筑科合[2011207]21 号）；贵州省科技厅和贵阳中医学院
联合资金资助项目 [黔科合中药字（2010）LKZ7026 号]
作者简介：徐文芬（1964—），女，教授，主要从事中药、民族药质量控制研究。Tel: 13885036055 E-mail: wenfenxu@126.com
*通信作者 何顺志（1954—），男，教授，主要从事中药资源及质量控制研究。Tel: (0851)5924317 13985142971 E-mail: hesz8899@126.com
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肿块、高血压、冠心病等疾病，另外尚具有免疫增
强、抗衰老、抗肿瘤、抗艾滋病等作用，受到国内
外广泛关注。淫羊藿药材为多来源品种，《中国药典》
2010 年版收载 5 种，即淫羊藿 Epimedium brevicornu
Maxim.、箭叶淫羊藿 Epimedium sagittatum (Sieb.et
Zucc.) Maxim.、柔毛淫羊藿 Epimedium pubescens
Maxim.、朝鲜淫羊藿 Epimedium koreanum Nakai、巫
山淫羊藿 Epimedium wushanense T. S. Ying[1]。《贵州
省中药材、民族药材质量标准》2003 年版收载 4 种，
分别为粗毛淫羊藿 Epimedium acuminatum Franch.、
天平山淫羊藿 Epimedium myrianthum Stearn、毡毛淫
羊藿 Epimedium coactum H. R. Liang et W. M. Yah、黔
岭淫羊藿 Epimedium leptorrhizum Stearn[2]。
近年来，已有采用外标法（ESM）同时测定淫
羊藿中朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 和淫羊藿苷
4 个指标成分的报道[3-5]，这些方法由于朝藿定 A、
B、C 对照品的价格昂贵且不容易获得，难以在实
际工作中广泛应用，限制了该药材多指标成分质量
控制模式的实现。针对这一问题，王智民等[6]进行
了“一测多评”（QAMS）的研究，即利用有效化学
成分间内在的函数关系和比例关系，只测定 1 个成
分（对照品可得到、廉价者），来实现对多个成分（对
照品没有或难以得到者）的同步监控，该研究思
路已经在众多药材或复方制剂中得到验证和广泛
应用[7-10]，于霄等[11]虽然建立 QAMS 法测定了巫山
淫羊藿、柔毛淫羊藿及朝鲜淫羊藿共计 12 批药材含
量，但根据 QAMS 法建立的技术指南，测定样品数
据要求应≥30 批验证 QAMS 法的可行性，方法可
行性和可重复性的再验证样品应≥10 批[12]。所以对
于该方法是否可作为淫羊藿药材多指标成分质控方
法，有必要以更多样品测定进一步验证方法的可靠
性。笔者自 20 世纪 90 年代以来对中国淫羊藿属药
用植物的种类、地理分布、质量控制及民间用药情
况等进行了研究，相继发现一些新种，目前中国淫
羊藿属药用植物的种类近 50 种，除上述标准中收载
的种类以外，其余大部分种类在贵州民间特别是苗
族聚居地区长期作淫羊藿入药[13-16]，本实验收集了
包括标准收载种类共计 39 种 100 批淫羊藿药材，采
用 HPLC 法，以淫羊藿苷（易得、廉价、有效）为
内参物，进行 QAMS 法方法学考察试验研究，同时
采用ESM同步测定，以大量样本进一步验证QAMS
法测定淫羊藿药材中多个黄酮类成分的方法可行性
及适用性，为实现淫羊藿药材多成分的同步测定提供
可靠的相对校正因子，计算朝藿定 A、朝藿定 B、朝
藿定 C 量及对其色谱峰保留值定位，克服多指标成分
同时测定质量控制模式存在的对照品短缺、操作繁琐
及检测成本高等缺点，为提高淫羊藿药材质量水平及
相关产业生产提供理论依据，同时也为淫羊藿优良种
质资源的内在品质评价奠定基础。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100 和1260 型高效液相色谱仪（美国安捷
伦公司），安捷伦液相色谱系统化学工作站，DAD 检测
器；Waters2487 型高效液相色谱仪（美国Waters 公司）；
岛津 LC-20AT 型高效液相色谱仪（日本岛津公司）。
AG135 型电子分析天平（Mettler Toledo）。色谱柱Agilent
Zorbax SB-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），Agilent Zorbax
XDB-C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），Agilent Zorbax
Extend-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），Diamonsil（钻
石）-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），Phenomenex（250
mm×4.6 mm，5 μm）；依利特 Hypersil-ODS2（250
mm×4.6 mm，5 μm），Agilent Zorbax SB-C18（150
mm×4.6 mm, 5 μm，USCM030053）等。
1.2 试药
朝藿定 A 对照品（批号 MUST-13040209，质量
分 数 ≥ 98% ）， 朝 藿 定 B 对 照 品 （ 批 号
MUST-13062312，质量分数≥98%），均购于北京神
州科创生物科技有限公司；淫羊藿苷对照品（批号
110737-200312 ）、 朝 藿 定 C 对 照 品 （ 批 号
110756-200110），均购于中国食品药品检定研究院；
甲醇、乙腈（色谱纯），实验用水为重蒸馏水，其
余试剂均为分析纯。所有供试淫羊藿药材的叶，
均于 2013 年 4～5 月在淫羊藿主产地贵州、四川、
陕西、湖南、湖北、重庆、吉林等采集，并经贵
阳中医学院何顺志教授鉴定，晒干，粉碎过三号
筛，置于硅胶干燥器中备用，供试淫羊藿药材采
集信息详见表 1。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Agilent Zorbax SB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5
μm）；流动相为乙腈-水（23∶77）；体积流量 1.0
mL/min；检测波长 270 nm；柱温 30 ℃；进样量 10 μL。
2.2 混合对照品溶液制备
分别精密称取朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、
淫羊藿苷对照品适量，加甲醇溶解并分别制成质量浓
度分别为 0.225 6 mg/mL 的朝藿定 A 溶液，0.221 2
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表 1 样本信息
Table 1 Information of samples
序号 种类 拉丁学名 产地 序号 种类 拉丁学名 产地
1 柔毛淫羊藿 E. pubescens 四川 51 拟巫山淫羊藿 贵州
2 柔毛淫羊藿 陕西南镇 52 拟巫山淫羊藿 贵州雷山连城河口
3 箭叶淫羊藿 E. sagittatum 广东 53 拟巫山淫羊藿 贵州雷山黄泥
4 箭叶淫羊藿 湖南 54 拟巫山淫羊藿 贵州龙里湾寨
5 箭叶淫羊藿 安徽黄山 55 拟巫山淫羊藿 贵州雷山西江
6 箭叶淫羊藿 不详 56 拟巫山淫羊藿 贵州雷山桃子寨
7 箭叶淫羊藿 安徽金寨 57 拟巫山淫羊藿 贵州龙里猴子沟
8 朝鲜淫羊藿 E. koreanum 吉林 58 直距淫羊藿 E. mikinorii 湖北恩施
9 淫羊藿 E. brevicornu 甘肃榆中 59 直距淫羊藿 湖北咸丰
10 巫山淫羊藿 E. wushanense 不详 60 直距淫羊藿 不详
11 巫山淫羊藿 四川巴中 61 直距淫羊藿 不详
12 巫山淫羊藿 不详 62 直距淫羊藿 不详
13 巫山淫羊藿 湖北巴东 63 绿药淫羊藿 E. chlorandrum 不详
14 巫山淫羊藿 不详 64 绿药淫羊藿 不详
15 粗毛淫羊藿 E. acuminatum 不详 65 湖南淫羊藿 E. hunanense 湖南新宁
16 粗毛淫羊藿 重庆武隆 66 湖南淫羊藿 广西资源
17 粗毛淫羊藿 不详 67 湖南淫羊藿 湖北鹤峰
18 粗毛淫羊藿 贵州 68 德务淫羊藿 E. dewuense 贵州德江
19 粗毛淫羊藿 贵州 69 竹山淫羊藿 E. zhushanense 湖北竹山
20 粗毛淫羊藿 贵州龙里草原 70 保靖淫羊藿 E. baojingense 湖南吉首
21 粗毛淫羊藿 贵州贵阳二戈寨 71 保靖淫羊藿 湖南永顺
22 粗毛淫羊藿 贵州贵定 72 保靖淫羊藿 湖南城步
23 粗毛淫羊藿 贵州龙里湾寨 73 偏斜淫羊藿 E. truncatum 湖南张家界
24 粗毛淫羊藿 贵州桐梓 74 无距淫羊藿 E. ecalcaratum 四川宝兴
25 粗毛淫羊藿 贵州贵阳永乐 75 川鄂淫羊藿 E. fargesii 重庆巫溪
26 粗毛淫羊藿 贵州开阳 76 恩施淫羊藿 E. enshiense 湖北恩施
27 粗毛淫羊藿 贵州龙里大草原 77 长蕊淫羊藿 E. dolichostemon 湖北利川
28 粗毛淫羊藿 贵州务川 78 长蕊淫羊藿 贵州务川
29 粗毛淫羊藿 贵州贵阳乌当水田 79 单叶淫羊藿 E. simplicifolium 贵州绥阳
30 粗毛淫羊藿 贵州贵阳乌当百宜 80 黔北淫羊藿 E. boreali-guizhouense 贵州沿河
31 粗毛淫羊藿 贵州金沙 81 普定淫羊藿 E. pudingense 贵州普定
32 天平山淫羊藿 E. myrianthum 贵州天柱 1 82 时珍淫羊藿 E. lishihchenii 江西
33 天平山淫羊藿 贵州 83 时珍淫羊藿 贵州万山
34 天平山淫羊藿 湖南 84 木鱼坪淫羊藿 E. franchetii 不详
35 天平山淫羊藿 贵州江口 85 木鱼坪淫羊藿 湖北建始
36 天平山淫羊藿 不详 86 茂汶淫羊藿 E. platypetalum 四川泸定
37 天平山淫羊藿 湖南芷江 87 星花淫羊藿 E. stellulatum 不详
38 天平山淫羊藿 广东革乐 88 腺毛淫羊藿 E. glandulosopilosum 不详
39 天平山淫羊藿 贵州天柱 2 89 天全淫羊藿 E. flavum 不详
40 天平山淫羊藿 贵州剑河 90 膜质淫羊藿 E. membranaceum 贵州赫章
41 天平山淫羊藿 贵州 91 膜质淫羊藿 不详
42 天平山淫羊藿 湖南桑植 92 膜质淫羊藿 不详
43 天平山淫羊藿 令同 93 少花淫羊藿 E. pauciflorum 四川汶川
44 黔岭淫羊藿 E. leptorrhizum 不详 94 四川淫羊藿 E. sutchuenense 贵州务川
45 黔岭淫羊藿 贵州 95 宝兴淫羊藿 E. davidii 四川宝兴
46 黔岭淫羊藿 贵州龙里猴子沟 96 方氏淫羊藿 E. fangii 四川
47 黔岭淫羊藿 贵州余庆兴关 97 川西淫羊藿 E. elongatum 四川
48 毡毛淫羊藿 E. coactum 贵州剑河南脚 98 贵州淫羊藿 E. sagittatum var. guizhouense 贵州开阳
49 毡毛淫羊藿 贵州剑河岩寨 99 万山淫羊藿（待定） E. wanshanense 贵州万山
50 拟巫山淫羊藿 E. pseudowushanense 贵州 100 荔波淫羊藿（待定） E. liboense 贵州荔波
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mg/mL 的朝藿定 B 溶液，1.310 mg/mL 的朝藿定
C 溶液，0.450 0 mg/mL 的淫羊藿苷单一对照品储
备液。
2.3 供试品溶液的制备
取淫羊藿药材粉末约 0.2 g，精密称定，置于 50
mL 具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇 20 mL，称定
质量，超声提取（功率为 100 W）1 h，取出放冷，
再称定质量，加稀乙醇补足减失质量，滤过，取续
滤液，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，即得。
2.4 专属性考察试验
精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液各 10
μL，注入高效液相色谱仪，测定，记录色谱图，结
果表明，供试品图谱中 1、2、3、4 号色谱峰的保留
时间和与 4 个对照品一致，且其纯度因子依次为
979.820、981.999、987.338、975.646，峰纯度良好，
表明该方法具有专属性，结果见图 1。
2.5 标准曲线的绘制
分别精密吸取不同体积“2.2”项下制备的单一
对照品储备液，混合稀释制成 6 个系列质量浓度混
合对照品溶液（朝藿定 A：4.230、14.10、28.20、56.40、
112.8、225.6 μg/mL；朝藿定 B：4.148、13.82、27.63、




1-朝藿定 A 2-朝藿定 B 3-朝藿定 C 4-淫羊藿苷
1-epimendin A 2-epimendin B 3-epimendin C 4-icariin
图 1 混合对照品 (A) 和淫羊藿样品 (B) 的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC of mixed reference substances (A) and sample (B)
55.30、110.6、221.2 μg/mL；朝藿定 C：13.41、33.54、
83.84、209.6、524.0、1 310 μg/mL；淫羊藿苷：2.304、
11.52、28.80、72.00、180.0、450.0 μg/mL），分别精
密吸取系列质量浓度混合对照品溶液 10 μL，注入高
效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定其峰面积，
每个质量浓度重复进样 3 次，取平均值，以对照品
进样量为横坐标（X），峰面积平均值为纵坐标（Y），
进行回归计算，得朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、
淫羊藿苷的回归方程及相关系数，结果见表 2。
表 2 淫羊藿药材中 4 个黄酮成分回归方程和线性范围
Table 2 Standard curves of four flavonoids in Epimedii Herba
成分 回归方程 r 线性范围/μg
朝藿定 A Y＝1 604.758 45 X＋3.667 073 9 0.999 99 0.042 30～2.256
朝藿定 B Y＝1 560.200 06 X＋8.349 361 1 0.999 99 0.041 48～2.212
朝藿定 C Y＝1 606.268 97 X＋48.535 437 0.999 97 0.134 10～13.100
淫羊藿苷 Y＝2 178.084 11 X＋2.801 849 7 1.000 00 0.023 04～4.500
2.6 校正因子的计算
分别精密吸取“2.5”项下制备的系列质量浓度
混合对照品溶液 10 μL，在上述色谱条件下，进样测
定，以淫羊藿苷为内参物，按公式 fsi＝fs/fi＝(As×
Ci)/(Ai×Cs)（As、Cs 分别为内参物对照品的峰面积
和浓度，Ai、Ci 分别为待测成分对照品的峰面积和
浓度）计算淫羊藿苷（简称 S）对朝藿定 A（简称
A）、朝藿定 B（简称 B）、朝藿定 C（简称 C）的相
对校正因子 fS/A、fS/B、fS/C，结果见表 3。
2.7 精密度试验
精密吸取上述混合对照品溶液 10 μL，在上述
色谱条件下，重复进样 7 次，测得峰面积，计算峰
面积的 RSD，朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、淫
羊藿苷的 RSD 分别为 0.74%、0.96%、0.51%、0.33%，
均小于 2.0%，表明仪器精密度良好。
表 3 淫羊藿药材中 4 个黄酮成分的相对校正因子
Table 3 RCFS of four flavonoids in Epimedii Herba
实验编号 fS/A fS/B fS/C
1 1.334 1.376 1.331
2 1.365 1.390 1.368
3 1.341 1.380 1.322
4 1.352 1.377 1.332
5 1.366 1.384 1.331
6 1.354 1.395 1.356
平均值 1.352 1.384 1.340
RSD/% 0.940 0.55 1.300
2.8 稳定性试验
精密吸取同一供试品溶液（15 号样品）10 μL，
分别于 0、3、6、9、12、24 h，注入液相色谱仪进
行分析，计算各组分峰面积的 RSD，朝藿定 A、朝
0 5 10 15 20 25 30 35
t/min
1 2
3
4
1 2
3
4
A
B
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藿定 B、朝藿定 C、淫羊藿苷的 RSD 分别为 0.42%、
0.35%、0.32%、1.0%，表明供试品溶液在 24 h 内
稳定。
2.9 重复性试验
取同一淫羊藿样品（15 号样品）6 份，每份约
0.2 g，精密称定，按“2.3”项方法制备供试液，在
上述色谱条件下进行测定，计算朝藿定 A、朝藿定
B、朝藿定 C、淫羊藿苷的平均质量分数分别为
0.28%、0.36%、1.71%、0.21%，其 RSD 分别为 2.2%、
2.1%、2.0%、2.2%，结果表明用本法测定时重复性
良好。
2.10 加样回收率试验
取已测定的淫羊藿样品（15 号样品）9 份，
每份约 0.1 g，精密称定，分别精密加入朝藿定
A、朝藿定 B、朝藿定 C、淫羊藿苷对照品溶液
适量，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，在
上述色谱条件下分别测定，分别计算朝藿定 A、
朝藿定 B、朝藿定 C、淫羊藿苷的平均回收率依
次为 102.21%、100.56%、104.15%、100.44%，
RSD 值依次为 2.5%、2.3%、0.63%、1.2%，表
明本方法测定准确度高。
2.11 不同仪器及色谱柱对相对校正因子的影响
本实验考察了 4 个实验室的“1.1”项下的 4 种
高效液相色谱系统和 8 只不同型号色谱柱。分别精
密吸取“2.5”项下制备的系列质量浓度混合对照品
溶液 10 μL，在上述色谱条件下，进样测定，计算
朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 对淫羊藿苷的相对
校正因子，依次在 1.274～1.361、1.330～1.494、
1.242～1.340，不同仪器不同色谱柱所得相对校正因
子的 RSD 值在 0.74%～3.7%，不同仪器同一色谱柱
所得相对校正因子的 RSD 值在 0.28%～4.8%，表
明不同仪器和色谱柱对各成分的相对校正因子无显
著影响，结果见表 4。
2.12 待测组分色谱峰的定位参数考察
建立 QAMS 法的目的是只使用一种对照品即
淫羊藿苷，利用待测成分朝藿定 A、朝藿定 B、
朝藿定 C 对于淫羊藿苷的保留时间差或相对保留
时间作为定位标准，本实验考察了这 2 个参数在
不同仪器和不同规格色谱柱中的重复性。结果表
明：不同仪器不同色谱柱各成分的保留时间差波
动较大，RSD 值为 40.6%～49.2%。而在同样条件
下，不同仪器不同色谱柱各成分的相对保留时间
波动较小，朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 相对
保留时间的 RSD 值分别为 0.65%～ 0.74%、
0.75%～0.84%、0.86%～0.95%，不同仪器、不同
色谱柱各成分的相对保留时间 RSD 值为 2.8%～
3.5%，不同仪器、同一色谱柱各成分相对保留时
间的 RSD 值为 0.57%～1.8%。因此认为选用相对
保留时间这一参数作为淫羊藿药材中待测成分色
谱峰的定位指标是比较合理的，结果见表 4。
表 4 相对校正因子、保留时间差及相对保留时间考察结果 (n = 3)
Table 4 Investigation on RCF, retention time difference, and relative retention time (n = 3)
相对校正因子 保留时间差/min 相对保留时间
仪器型号 色谱柱
fS/A fS/B fS/C ΔtA ΔtB ΔtC tRA tRB tRC
Agilent Zorbax SB-C18（USCM014766） 1.274 1.332 1.301 8.96 6.21 3.12 0.67 0.77 0.88
Agilent Zorbax SB-C18（USCM030053） 1.282 1.346 1.311 8.98 6.18 2.86 0.68 0.78 0.90
Agilent Zorbax XDB-C18 1.309 1.354 1.309 8.15 5.65 2.73 0.67 0.77 0.89
Agilent Zorbax Extend-C18 1.301 1.365 1.340 8.76 6.26 3.14 0.68 0.77 0.88
Phenomenex synergi 4u Hydro-RP 80A 1.332 1.349 1.309 17.46 11.40 4.06 0.71 0.81 0.93
依利特 Hypersil-ODS2 1.343 1.379 1.333 11.32 7.09 2.25 0.74 0.84 0.95
Welchrom-C18 1.337 1.364 1.300 18.35 12.41 4.89 0.70 0.80 0.92
Diamonsil（钻石）-C18 1.354 1.494 1.242 24.34 15.83 6.90 0.70 0.80 0.92
Agilent 1100 型
RSD/% 2.200 3.700 2.300 45.30 43.00 40.60 3.40 3.10 2.80
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 1 期 2016 年 1 月

• 135 •
续表 4
相对校正因子 保留时间差/min 相对保留时间
仪器型号 色谱柱
fS/A fS/B fS/C ΔtA ΔtB ΔtC tRA tRB tRC
Agilent 1260 型 Agilent Zorbax SB-C18（USCM014766） 1.306 1.366 1.332 7.00 4.93 2.70 0.66 0.76 0.87
Agilent Zorbax SB-C18（USCM030053） 1.297 1.362 1.338 7.01 4.92 2.50 0.67 0.77 0.88
Agilent Zorbax XDB-C18 1.300 1.352 1.337 6.31 4.47 2.35 0.66 0.76 0.87
Agilent Zorbax Extend-C18 1.304 1.357 1.332 7.51 5.44 2.92 0.67 0.76 0.87
Phenomenex synergi 4u Hydro-RP 80A 1.293 1.330 1.310 15.46 10.29 4.15 0.70 0.80 0.92
依利特 Hypersil-ODS2 1.318 1.355 1.338 9.69 6.23 2.31 0.73 0.83 0.94
Welchrom- C18 1.285 1.346 1.334 15.40 10.67 4.79 0.69 0.78 0.90
Diamonsil（钻石）-C18 1.314 1.350 1.321 20.54 13.69 6.66 0.68 0.79 0.90

RSD/% 0.830 0.820 0.740 47.80 45.80 43.60 3.50 3.20 2.90
Agilent Zorbax SB-C18（USCM014766） 1.291 1.345 1.308 8.15 5.83 3.38 0.65 0.75 0.86
Agilent Zorbax SB-C18（USCM030053） 1.299 1.342 1.318 8.25 5.86 3.16 0.66 0.76 0.87
Agilent Zorbax XDB-C18 1.300 1.346 1.326 7.27 5.22 2.91 0.66 0.75 0.86
Agilent Zorbax Extend-C18 1.295 1.352 1.331 8.79 6.41 3.56 0.67 0.76 0.87
Phenomenex synergi 4u Hydro-RP 80A 1.308 1.355 1.293 18.51 12.50 5.37 0.70 0.80 0.91
依利特 Hypersil-ODS2 1.330 1.366 1.329 11.55 7.48 2.97 0.72 0.82 0.93
Welchrom- C18 1.302 1.358 1.317 17.77 12.49 5.92 0.68 0.78 0.89
Diamonsil（钻石）-C18 1.361 1.440 1.320 24.86 16.77 8.69 0.67 0.78 0.89
日本岛津 LC-20AT 型
RSD/% 1.800 2.4000 0.940 49.20 47.10 45.40 3.40 3.20 2.80
Agilent Zorbax SB-C18（USCM014766） 1.299 1.358 1.328 8.51 6.01 3.33 0.65 0.75 0.86
Agilent Zorbax SB-C18（USCM030053） 1.304 1.363 1.333 8.47 5.77 3.00 0.67 0.77 0.88
Agilent Zorbax XDB-C18 1.304 1.341 1.319 7.40 5.27 2.81 0.67 0.76 0.87
Agilent Zorbax Extend-C18 1.298 1.348 1.325 9.42 6.77 3.63 0.66 0.76 0.87
Phenomenex synergi 4u Hydro-RP 80A 1.293 1.336 1.307 18.99 12.79 5.16 0.71 0.80 0.92
依利特 Hypersil-ODS2 1.326 1.365 1.333 12.19 7.71 2.89 0.72 0.83 0.94
Welchrom-C18 1.301 1.361 1.327 18.66 12.94 5.84 0.68 0.78 0.90
Diamonsil（钻石）-C18 1.327 1.361 1.303 25.37 16.85 8.22 0.68 0.79 0.90
Waters 2487 型
RSD/% 0.98 0.82 0.86 48.30 46.70 44.00 3.50 3.40 3.10

2.13 样品测定
取淫羊藿药材样品，共计 100 批次，分别按
“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下
色谱条件，进样测定，记录朝藿定 A、朝藿定 B、
朝藿定 C、淫羊藿苷色谱峰峰面积，分别采用外
标一点法和 QAMS 法，分别计算干品药材中 4 个
成分的量，并对 2 种方法测定结果进行比较，结
果见表 5。
3 讨论
本实验无论是不同仪器、不同色谱柱还是不
同仪器、同一色谱柱，测定得到淫羊藿各成分相
对校正因子、相对保留时间的 RSD 均小于 5%，
符合 QAMS 法方法学研究的耐用性考察要求，所
测定的各成分相对校正因子重现性好，相对保留
时间定位准确。采用 ESM 测定淫羊藿各成分的含
量与通过 QAMS 法计算得到的量进行比较，t 检
验结果为 P＞0.05，表明两种方法测定所得的量没
有显著性的差异，结果准确可靠，方法可行且适
用性强，进一步验证了 QAMS 法可作为淫羊藿药
材多指标成分质控方法，各成分峰位以其相对保
留时间定位，应在规定值的 5%～−5%内，朝藿定
A、朝藿定 B、朝藿定 C 的相对保留时间/相对校
正因子规定值分别为 0.68/1.352、0.78/1.384、
0.90/1.340。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 1 期 2016 年 1 月

• 136 •
表 5 样品测定结果 (n = 3)
Table 5 Determination of samples (n = 3)
淫羊藿苷/% 朝藿定 A/% 朝藿定 B/% 朝藿定 C/% 淫羊藿苷/% 朝藿定 A/% 朝藿定 B/% 朝藿定 C/%
序号
ESM ESM QAMS ESM QAMS ESM QAMS
序号
ESM ESM QAMS ESM QAMS ESM QAMS
1 2.18 0.50 0.50 0.65 0.65 0.90 0.92 51 0.18 0.13 0.13 0.15 0.15 0.70 0.69
2 0.56 0.36 0.36 0.57 0.57 1.29 1.31 52 0.49 0.30 0.31 0.35 0.39 4.75 4.58
3 0.08 0.06 0.07 0.01 0.01 2.32 2.40 53 0.40 0.23 0.23 0.28 0.28 4.38 4.39
4 2.51 0.18 0.18 0.22 0.22 5.92 5.98 54 0.36 0.16 0.16 0.17 0.17 5.23 5.26
5 0.06 0.06 0.06 0.07 0.07 0.12 0.12 55 0.99 0.38 0.38 0.40 0.39 5.89 5.90
6 0.36 0.12 0.13 0.17 0.17 3.64 3.67 56 1.02 0.29 0.29 0.31 0.31 8.77 8.81
7 0.39 0.90 0.89 1.34 1.34 0.39 0.40 57 0.92 0.30 0.31 0.38 0.35 4.53 4.72
8 1.62 0.46 0.45 0.80 0.80 0.49 0.48 58 0.06 0.04 0.04 0.03 0.04 0.27 0.25
9 1.35 0.35 0.35 2.30 2.27 0.76 0.77 59 — — — — — — —
10 0.34 0.20 0.20 0.25 0.25 3.13 3.15 60 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.63 0.62
11 1.10 0.10 0.10 0.18 0.18 3.61 3.69 61 — — — — — — —
12 0.35 0.24 0.24 0.24 0.28 3.22 3.25 62 0.01 0.01 0.01 — — 0.09 0.04
13 0.26 0.26 0.26 0.27 0.27 2.15 2.16 63 0.01 — — — — 1.02 1.22
14 0.16 0.12 0.13 0.17 0.19 1.00 1.06 64 0.63 — — — — 0.01 0.01
15 0.24 0.32 0.22 0.32 0.32 1.79 1.81 65 0.48 0.54 0.54 0.77 0.72 1.02 1.03
16 0.41 0.32 0.33 0.44 0.44 1.11 1.12 66 0.21 0.13 0.13 0.19 0.18 0.49 0.49
17 0.16 0.16 0.15 0.22 0.22 0.94 0.93 67 0.12 0.17 0.17 0.22 0.22 0.56 0.56
18 0.30 0.22 0.23 0.37 0.37 1.79 1.80 68 0.32 0.30 0.30 0.27 0.33 2.67 2.70
19 0.25 0.07 0.07 0.10 0.11 2.26 2.29 69 — — — — — — —
20 0.73 0.31 0.31 0.36 0.36 2.71 2.72 70 — — — — — — —
21 0.99 0.39 0.39 0.43 0.43 3.45 3.47 71 — — — — — — —
22 1.80 0.83 0.84 0.97 0.97 8.65 8.71 72 — — — — — — —
23 0.53 0.34 0.34 0.39 0.39 2.28 2.29 73 0.01 0.29 — — — 6.07 7.21
24 0.19 0.06 0.07 0.11 0.11 0.58 0.59 74 0.83 0.42 0.42 0.50 0.50 0.83 0.83
25 0.81 0.24 0.24 0.27 0.27 2.84 2.85 75 0.28 0.21 0.22 0.26 0.26 1.51 1.56
26 0.43 0.23 0.23 0.26 0.26 1.53 1.55 76 — — — — — — —
27 0.70 0.29 0.29 0.34 0.34 2.38 2.39 77 0.37 0.15 0.16 0.19 0.19 0.95 0.96
28 0.97 0.41 0.41 0.46 0.46 3.15 3.17 78 0.19 0.08 0.08 0.10 0.10 0.49 0.48
29 0.43 0.16 0.17 0.18 0.18 1.56 1.58 79 0.53 0.53 0.52 0.69 0.69 3.27 3.29
30 0.44 0.26 0.27 0.31 0.31 1.42 1.44 80 1.07 0.41 0.41 0.00 0.00 3.19 3.20
31 0.35 0.14 0.14 0.19 0.20 1.08 1.10 81 0.81 0.46 0.46 0.53 0.53 2.59 2.61
32 0.28 0.05 0.05 0.18 0.18 6.76 6.91 82 — — — — — — —
33 0.64 0.46 0.46 0.53 0.53 0.93 0.94 83 — — — — — — —
34 0.58 0.62 0.62 0.72 0.72 4.29 4.31 84 — — — — — — —
35 4.60 0.65 0.65 0.63 0.63 4.31 4.35 85 0.13 0.08 0.08 0.12 0.12 0.20 0.22
36 0.50 0.40 0.40 0.38 0.38 0.89 0.90 86 0.60 0.24 0.25 0.28 0.28 0.79 0.80
37 0.36 0.33 0.34 0.37 0.37 3.76 3.80 87 — — — — — — —
38 0.07 — — — — 4.58 4.62 88 — — — — — — —
39 0.20 0.21 0.20 0.15 0.15 4.06 3.91 89 0.36 0.33 0.33 0.40 0.40 0.56 0.57
40 0.25 0.27 0.27 0.23 0.23 2.43 2.46 90 0.50 0.14 0.10 0.13 0.14 1.19 1.20
41 0.43 0.47 0.47 0.43 0.43 2.64 2.67 91 0.33 0.26 0.26 0.38 0.37 1.19 1.21
42 0.44 0.56 0.56 0.66 0.67 2.92 2.95 92 0.65 0.34 0.34 0.45 0.45 0.57 0.58
43 0.08 0.12 0.14 0.05 0.07 6.75 6.83 93 0.91 0.14 0.15 0.19 0.20 0.97 0.98
44 — — — — — — — 94 — — — — — — —
45 — — — — — — — 95 2.49 0.53 0.54 0.59 0.60 1.74 1.76
46 — — — — — — — 96 2.91 0.55 0.56 0.49 0.50 4.47 4.49
47 — — — — — — — 97 5.36 0.66 0.66 0.74 0.75 5.21 5.25
48 0.25 — — 0.04 0.04 12.93 12.75 98 0.07 0.00 — 0.20 0.22 3.92 4.65
49 0.07 — — — — 10.75 12.53 99 0.97 0.58 0.38 0.47 0.47 2.06 2.08
50 0.29 0.22 0.22 0.27 0.27 3.93 3.94 100 1.80 0.35 0.35 0.39 0.39 5.62 5.66

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47 卷 第 1 期 2016 年 1 月

• 137 •
由于样品中大部分产地的天平山淫羊藿
Epimedii Herba 药材中所含黄酮类成分种类较多，
且量也较高，本实验在文献报道[11]的基础上调整流
动相为乙腈-水（23∶77），才能使朝藿定 A、朝藿
定 B、朝藿定 C 及淫羊藿苷彼此完全分离。供试品
溶液的提取方法与文献方法[11]不同，仍然采用《中
国药典》收载淫羊藿测定项下方法[3]，以保证待测
成分采用外标法测定与通过 QAMS 法计算得到结
果的可靠性。
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