---

作 者 ：吴俊辉 舒煦 李朝銮

期 刊 ：云南植物研究 1994年 16卷 02期 页码：1-3

关键词：葡萄属；cpDNA纯化；偏重亚硫酸钠；热处理；分子量；

Keywords:Vitis,

摘 要 ：分离出纯化的叶绿体DNA（cpDNA），基因组的文库便能建成，特定基因便能分离，其顺序便可进一步测定。然而，我们的研究经验表明，最常用制备纯化cpDNA的方法很难应用于葡萄属的种类。本文提出了一个分离和提纯葡萄属cpDNA的方法，这个方法不同于其它方法主要在于：1．偏重亚硫酸钠与巯基乙醇和维生素C一起加在缓冲液中，使与溶液中的氧结合，以防止游离氧氧化单宁和其它次生物质呈显色反应；2.在高盐溶液中使用加热处理，达至85℃为止，灭活氧化酶类，消除氧化条件。用其它科属的种类，菠菜和油菜作对比，提取和纯化了葡萄属不同类型种的cpDNA，均取得了较好的结果。将提纯的中国葡萄各种的cpDNA，用菠菜和油菜作比较，以λDNA作对照，经限制性酶BamHI，Sa1I＋XhoI和 PstI＋KpnI酶解，电泳分离，扫描定量，采用描图法测定了cpDNA各片段的分子量，总和约130kb同时测定了菠菜和油菜的cpDNA分子量。

Abstract:With the isolated and purified cpDNA, a library of cloned genomic fragments can be generated and the isolation and the nucleotide sequence of a given gene can further be conducted. However, the most generally applicable procedures for preparing purified cpDNA are very diffi-cult in Vitis species through the experience of our research work. In this paper we have developed a procedure which has been proved to be succesful in isolating and purifying the cpDNA of Vitis species, bearing comparing some species of other family.

---