全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 18期 2015年 9月

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• 药剂与工艺 •
丁酰半乳糖酯修饰的薏苡仁组分微乳的制备及其体外抗肿瘤活性研究
刘明健 1, 2，瞿 鼎 2，陈 彦 2*，孙文杰 2，袁成甜 1, 2，王理想 2
1. 江苏大学药学院，江苏 镇江 212013
2. 江苏省中医药研究院 中药组分与微生态研究中心，江苏 南京 210028
摘 要：目的 合成丁酰半乳糖酯（butyryl galactose ester，But-Gal）并制备丁酰半乳糖酯修饰的薏苡仁组分微乳（butyryl
galactose ester modified coix component microemulsions，But-Gal-CMEs），对其进行理化性质评价和体外抗肿瘤活性测定。方
法 采用酶催化法合成 But-Gal，并通过 1H-NMR 与 FT-IR 对其结构进行表征。以薏苡仁油为油相，聚氧乙烯氢化蓖麻油
（Cremophor® RH40）为乳化剂，PEG400为助乳化剂，But-Gal为肝肿瘤细胞靶配体，薏苡仁多糖水溶液为水相，水滴定法
制备微乳，测定其粒径、电位和形态。通过 MTT 法考察薏苡仁组分微乳（CMEs）与 But-Gal-CMEs 对肿瘤细胞 HepG2 细
胞毒作用；以异硫氰酸荧光素（FITC）为荧光探针，借助荧光倒置显微镜观察 HepG2 细胞对微乳的摄取行为。结果 经
1H-NMR与 FT-IR表征确认丁酰半乳糖酯结构与设计一致。制备所得 But-Gal-CMEs外观形态圆整，平均粒径为（57.68±6.65）
nm，多分散指数（PDI）为 0.070±0.006，Zeta电位为（−2.95±0.23）mV。MTT实验表明，But-Gal-CMEs与 CMEs对 HepG2
细胞增殖的半数抑制浓度（IC50）分别为 62.55、71.23 μg/mL。HepG2细胞摄取结果显示 But-Gal-CMEs组的荧光强度强于
CMEs组。结论 所制备的 But-Gal-CMEs粒径小，外观圆整，稳定性好，But-Gal能增加 HepG2对 CMEs的细胞摄取，并
增强其对 HepG2细胞毒作用。
关键词：薏苡仁；丁酰半乳糖酯；微乳；细胞毒性；细胞摄取；抗肿瘤活性；酶催化法；水滴定法；异硫氰酸荧光素
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2015)18 - 2696 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.18.006
Study on preparation of butyryl galactose ester-modified coix component
microemulsions and their anticancer activity in vitro
LIU Ming-jian1, 2, QU Ding2, CHEN Yan2, SUN Wen-jie2, YUAN Cheng-tian1, 2, WANG Li-xiang2
1. College of Pharmacy, Jiangsu University, Zhenjiang 212013, China
2. Multi-component of Traditional Chinese Medicine and Microecology Research Center, Jiangsu Provincial Academy of Chinese
Medicine, Nanjing 210028, China
Abstract: Objective To synthesize butyryl galactose ester (But-Gal) and prepare butyryl galactose ester-modified coix component
microemulsions (But-Gal-CMEs) and to evaluate its physicochemical properties and anticancer activity in vitro. Methods But-Gal
was synthesized by enzyme-catalyzed reaction and the structure of the product was confirmed by 1H-NMR and FT-IR. The CMEs and
But-Gal-CMEs were prepared by aqueous titration method using coix seed oil, Cremophor RH40, PEG400, But-Gal, and coixan
solution as oil phase, surfactant, cosurfactant, target ligand, and aqueous phase, respectively. The average particle size, polydispersity
index (PDI), and Zeta potential were detected by dynamic light scattering (DLS). The cytotoxicity of CMEs and But-Gal-CMEs aganist
HepG2 cells was determined by MTT assay. The cellular uptake of CMEs and But-Gal-CMEs was detected by fluorescence
microscopy. Results The structure of But-Gal was confirmed by 1H-NMR and FT-IR. The But-Gal-CMEs displayed the spherical
surface with mean droplet size of (57.68 ± 6.65) nm, PDI of 0.070 ± 0.006, and Zeta potential of (−2.95 ± 0.23) mV, respectively. MTT
experiments showed that the half of HepG2 cell proliferation inhibition concentration (IC50) of But-Gal-CMEs and CMEs was 62.55

收稿日期：2015-05-14
基金项目：国家自然基金资助项目（81373979）；江苏省自然科学基金资助项目（BK20141508）
作者简介：刘明健（1989—），男，硕士在读，研究方向为中药新型给药系统。Tel/Fax: (025)85608672 E-mail: 15850594690@163.com
*通信作者 陈 彦 Tel/Fax: (025)85608672 E-mail: ychen202@hotmail.com
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and 71.23 μg/mL. The HepG2 cell uptake results suggested that the fluorescence intensity of But-Gal-CMEs group was higher than that
of CMEs group. Conclusion The But-Gal-CMEs presents small particle size, good roundness, and good stability. In addition, But-Gal
could increase the uptake rate of CMEs in HepG2 cells and enhance the inhibition of HepG2 cell proliferation.
Key words: Coicis Semen; butyryl galactose ester; microemusion; cytotoxicity; cell uptake; antitumor activity; enzymatic method;
aqueous titration method; fluorescein isothiocyanate

薏苡仁 Coicis Semen为禾本科（Gramineae）薏
苡属 Coix Linn. 植物薏苡 Coix lachryma-jobi L. var.
ma-yuen (Roman) Stapf. 的干燥成熟种仁[1]。研究表
明，薏苡仁中含有酯类、不饱和脂肪酸类、糖类及
内酰胺类等活性成分，具有抗肿瘤、提高免疫力、
降血糖等作用[2-3]。作为薏苡仁主要药效成分的薏苡
仁油具有较强的抗肝癌作用[4-5]，多糖成分具有调节
免疫功能的作用，但二者口服生物利用度较低，影
响了其作为口服制剂在临床上的疗效发挥。
微乳作为纳米载体之一，是一种由油相、水相、
表面活性剂和助表面活性剂按适当比例制得的一种
透明、黏度低、且热力学稳定的溶液体系[6]，其粒
径小、稳定性好，能够促进难溶性药物的口服吸收。
本课题组前期研究中以薏苡仁油为微乳油相，荷载
灵芝三萜，制备了薏苡仁油-灵芝三萜组分微乳，有
效地增加了薏苡仁油及灵芝三萜的体内吸收[7]。本
实验利用薏苡仁中薏苡仁油及多糖 2种抗肿瘤活性
组分，制备了薏苡仁组分微乳（CMEs），为了进一
步提高薏苡仁组分微乳的抗肝癌作用，本实验合成
了能够被肝细胞膜上去唾液酸糖蛋白受体
（ASGPR）[8-10]特异性识别的一种具有半乳糖残基的
丁酰半乳糖酯（butyryl galactose ester，But-Gal），
并将其修饰 CMEs，对修饰后的 CMEs的理化性质
及体外抗肿瘤活性进行了考察[11]，为进一步提高中
药多组分抗肿瘤制剂的组织靶向性及抗肿瘤效果提
供实验依据。
1 仪器与材料
FA2104型万分之一天平，上海良平仪器仪表有
限公司；Nano-ZS 型马尔文粒径测定仪，英国马尔
文公司；Nicolet IS-10 型傅里叶变换红外光谱
（FT-IR）仪，美国赛默菲世尔科技公司；JEM-2100
型透射电子显微镜，日本 JEOL 公司；Bruker 500
MHz核磁共振仪，瑞士布鲁克公司；ZEISS倒置显
微镜，南京微弗德科学仪器有限公司；HERA Cell
150 CO2 培养箱，美国热电集团；酶标仪，美国热
电集团；Cytation5细胞成像微孔板检测系统，美国
伯腾仪器有限公司。
Novozym 435固定化脂肪酶，南京诚纳化工有
限公司；丁酸乙烯酯，南京森贝伽生物科技有限公
司；D-(+)-半乳糖，国药集团化学试剂有限公司；
OP-10乳化剂，上海久亿化学试剂有限公司；聚氧
乙烯氢化蓖麻油（Cremophor® RH40），德国BASF
公司；聚乙二醇400（PEG400），国药集团化学试剂
有限公司；聚山梨酯80、20，成都市科龙化工试剂
厂；薏苡仁油，自制，超临界萃取制得，以总甘油
三酯计质量分数为86.67%；薏苡仁多糖，自制，由
超临界萃取药渣水提醇沉制得，以葡萄糖计质量浓
度为76.63%；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料
有限公司；RPMI-1640培养基、胰蛋白酶溶液，
GIBCO公司；二甲基亚砜，南京化学试剂有限公司；
四甲基偶氮唑盐（MTT），SunShine公司；异硫氰酸
荧光素（FITC），天津百萤科技有限公司。
人肝癌细胞 HepG2细胞株，购自于中国科学院
上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所。
2 方法与结果
2.1 But-Gal的合成与表征[12-13]
称取 2.0 g Novozym 435固定化脂肪酶，研细，
与 1.5 g D-(+)-半乳糖和 3.0 mL丁酸乙烯酯，共置
于 100 mL圆底烧瓶中，加入纯化后的丙酮 50 mL，
与分子筛适量，60 ℃油浴，回流 15 h。将所得粗产
物进行 TLC 分析，并以硅胶柱色谱，以石油醚-醋
酸乙酯（12∶1）为洗脱剂洗脱，纯化产物。But-Gal
合成路线见图 1，通过 FT-IR及 1H-NMR对其结构
进行验证。FT-IR、1H-NMR结果见图 2与图 3。
FT-IR：在 3 428.11 cm−1处是羟基的伸缩振动吸
收峰，在 2 917.61、2 849.96 cm−1处有甲基和亚甲
基的吸收峰，1 736.70 cm−1处是羰基的特征峰，而
在 1 600 cm−1处不存在丁酸乙烯酯烯键的特征峰，

图 1 But-Gal的合成路线
Fig. 1 Synthesis route of But-Gal
酶
D-(+)-半乳糖
产物
丁酸乙烯酯
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图 2 But-Gal 的 FT-IR 图
Fig. 2 FT-IR of But-Gal



图 3 But-Gal 的 1H-NMR 图
Fig. 3 1H-NMR of But-Gal

提示反应生成了 But-Gal。
1H-NMR (500 Mz, CDCl3) 中，δ 0.89 (3H, t, J =
6.0 Hz, 1-CH3), 1.62 (2H, m, 2-CH2), 2.01 (4H, s, 1′,
2′, 3′, 4′-OH), 2.32 (2H, t, J = 3.5 Hz, 3-CH2), 3.5～
4.5 归属为 D-半乳糖单元 C-2′, 3′, 4′, 5′, 6′位质子，
5.31 (s) 归属为 D-半乳糖单元 C-1′位质子。产物在
δ 0.89～2.32 处有丁酸乙烯酯结构中的-CH2、-CH3
质子信号峰，在 δ 3.54～4.51 处有与 D-半乳糖相似
的峰，提示成功合成了 But-Gal。
通过 FT-IR 及 1H-NMR 分析，经过酶促反应，
在半乳糖 C-6′位羟基发生了酯化反应，所得产物为
But-Gal。
2.2 CMEs 处方的设计与筛选
2.2.1 伪三元相图的绘制 按乳化剂与助乳化剂的
质量比（Km值）称取混合乳化剂（Smix），磁力搅拌
混匀，固定薏苡仁油与混合乳化剂的质量比为 1∶
9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2
及 9∶1，加入薏苡仁油，于磁力搅拌下混匀后，在
室温下以 240 mg 薏苡仁多糖溶于不同体积的蒸馏
水中作为水相，磁力搅拌下滴加此薏苡仁多糖水溶
液，直到形成澄清透明的微乳，分别以混合乳化剂、
薏苡仁油、薏苡仁多糖水溶液作为伪三元相图的 3
个顶点，每一条边表示相应 2 组分的质量比，微乳
制备过程中记录进入凝胶区、退出凝胶区以及微乳
形成时各相所占比例，应用 Origin 7.5 软件绘制伪三
元相图，确定凝胶区及微乳区。
2.2.2 乳化剂的选择 以薏苡仁油、PEG400 为微
乳油相、助乳化剂，分别选取聚山梨酯 80、RH40、
OP-10 以及聚山梨酯 20 作为乳化剂，混合均匀后，
滴加薏苡仁多糖水溶液，观察体系的变化，绘制伪
三元相图。结果显示，以 RH40 作为乳化剂所得微
乳区面积最大，其次为聚山梨酯 80，OP-10 与聚山
梨酯 20 的微乳区面积均较小，表明 RH40 更有利于
微乳形成，因此确定最佳乳化剂为 RH40。
2.2.3 助乳化剂的选择 以薏苡仁油、RH40 为微
乳油相、乳化剂，分别选取乙醇、PEG400 以及丙
二醇作为助乳化剂，混合均匀后，滴加薏苡仁多糖
水溶液，观察体系的变化，绘制伪三元相图。结果
显示，以 PEG400 作为助乳化剂所得微乳区面积最
大，其次为乙醇，丙二醇的微乳区面积最小，表明
PEG400 更有利于微乳形成，因此确定最佳助乳化
剂为 PEG400。
2.2.4 Km值筛选 根据以上筛选的处方，以薏苡仁
油为油相、RH40 为乳化剂、PEG400 为助乳化剂、
薏苡仁多糖水溶液为水相，分别选择 Km值 1∶1、
2∶1、3∶1，水滴定法制备微乳并绘制伪三元相图。
结果显示，当 Km值为 3∶1 时所得微乳区面积最大，
2∶1 时略小于 3∶1，1∶1 时微乳区面积最小，表
明乳化剂与助乳化剂的最佳比例为 3∶1，因此确定
最佳 Km值为 3∶1，见图 4。
根据上述研究结果，确定 CMEs 处方为薏苡仁
油 200 mg、RH40 150 mg、PEG400 50 mg、薏苡仁
多糖 240 mg 溶于水相，所制备的微乳有淡蓝色乳
光，澄清透明。
2.3 CMEs 及 But-Gal-CMEs 制备
2.3.1 CMEs 制备[14] 取 150 mg RH40、50 mg PEG
400置于西林瓶中，磁力搅拌 2.5 h，混匀后加 200 mg
薏苡仁油，再磁力搅拌 2.5 h 混匀，以 2 mL 薏苡仁
多糖水溶液（120 mg/mL）为水相，水滴定法制备
CMEs。
2.3.2 But-Gal-CMEs 制备 取 150 mg RH40、50
mg PEG400 与 32 mg But-Gal 置于西林瓶中，磁力
搅拌 2.5 h，混匀后加 200 mg 薏苡仁油，再磁力搅
拌 2.5 h 混匀，以 2 mL 薏苡仁多糖水溶液（120
4 000 3 000 2 000 1 000
ν/cm−1
7 6 5 4 3 2 1 0
δ
3 2
1
1′ 2′～6′
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M-微乳区 G-凝胶区
M-microemulsion area G-gel area

图 4 不同 Km值的 But-Gal-CMEs伪三元相图
Fig. 4 Pesudo-ternary phase diagram of But-Gal-CMEs at different Km values
mg/mL）为水相，水滴定法制备 But-Gal-CMEs。
2.4 微乳表征
采用马尔文激光散射粒度测定仪，在室温下测
定 CMEs 与 But-Gal-CMEs 的平均粒径、多分散指
数（PDI）和 Zeta 电位，结果见表 1。同时将载有
Formvar 支持膜的铜网放于蜡板上，在膜上滴加微
乳液 1滴，红外灯下照射 5 min，再滴加 1%的磷钨
酸 1滴，室温风干 10 min，置于 JEM-2100型透射
电镜下观察微乳的外观形态。结果显示所制备的
CMEs与But-Gal-CMEs外观圆整，分散均匀（图 5）。
2.5 But-Gal-CMEs的稳定性考察
2.5.1 稀释对稳定性的影响 取微乳 1.0 mL，分别
用蒸馏水及生理盐水将其稀释 10、20、50、100倍，
测定其粒径和 PDI。结果见表 2，稀释对微乳粒径
无显著性影响。

表 1 微乳的平均粒径、PDI与 Zeta电位
Table 1 Average particle size, PDI, and Zeta potential of
microemusions
组别 平均粒径/nm PDI Zeta电位/mV
CMEs 63.04±6.83 0.106±0.008 -0.168±0.340
But-Gal-CMEs 59.68±6.65 0.070±0.006 -2.950±0.230

图 5 CMEs (A) 与 But-Gal-CMEs (B) 的透射电镜图
Fig. 5 TEM photos of CMEs (A) and But-Gal-CMEs (B)
表 2 不同稀释介质对微乳粒径的影响
Table 2 Effect of different dilution media on mean droplet
size of But-Gal-CMEs
稀释介质 粒径/nm PDI
原液 59.68±4.34 0.129±0.011
生理盐水稀释 10倍 57.06±3.35 0.125±0.009
生理盐水稀释 20倍 56.63±3.97 0.106±0.008
生理盐水稀释 50倍 56.02±3.55 0.131±0.007
生理盐水稀释 100倍 54.64±3.26 0.098±0.007
蒸馏水稀释 10倍 56.54±3.27 0.135±0.008
蒸馏水稀释 20倍 55.96±3.62 0.127±0.010
蒸馏水稀释 50倍 55.45±3.17 0.110±0.008
蒸馏水稀释 100倍 55.37±3.24 0.095±0.006

2.5.2 高速离心对稳定性的影响 取微乳 1.0 mL
于离心管中，以 13 000 r/min的速度离心 30 min，
观察微乳外观。结果显示所制备微乳无明显絮凝和
分层现象。
2.5.3 放置时间对稳定性的影响 微乳在 4 ℃和
25 ℃的条件下保存 1个月，观察微乳外观。结果显
示所制备微乳无明显絮凝和分层现象。
2.5.4 pH对稳定性的影响 取微乳样品溶液 7份，
加磷酸缓冲液调节 pH值分别为 2.5、3.0、4.5、5.0、
6.5和 7.4，观察其外观形态的变化并测定平均粒径。
结果见图 6及表 3，在考察范围内 pH对微乳的粒径
无显著性影响。
2.6 体外抗肿瘤活性考察
2.6.1 细胞培养 从液氮罐中取出 HepG2 细胞冻
存管，迅速置于 37 ℃恒温水浴中解冻，离心去除
冻存液，加入已配制的含 10% FBS 的 RPMI 1640
培养液，吹打均匀并移至细胞培养瓶中，于 37 ℃、
0.25
0.25 0.75
0.75
0.75
0.25
0.25
0.25 0.75
0.25
0.75
0.75
0.25
0.75
0.75
0.25 0.75
0.25
水相
M M M
G G
G
水相 水相 Smix
薏苡仁油
Smix Smix
薏苡仁油 薏苡仁油
Km＝1∶1 Km＝3∶1 Km＝2∶1
A B
100 nm 100 nm
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图 6 不同 pH值下 But-Gal-CMEs的透射电镜图
Fig. 6 TEM photos of But-Gal-CMEs at different pH values

表 3 不同 pH值下微乳的粒径与 PDI
Table 3 Particle size and PDI at different pH values
pH值 粒径/nm PDI
2.5 62.58±3.24 0.120±0.011
3.0 64.70±3.64 0.135±0.012
4.5 65.20±2.86 0.140±0.009
5.0 64.85±3.18 0.118±0.011
6.5 63.75±3.09 0.125±0.010
7.4 63.45±2.78 0.128±0.012

5% CO2的饱和湿度孵箱中静置培养。次日换液，2～
3 d传代，取对数生长期细胞用于实验。
2.6.2 MTT 实验[15-16] 收集对数生长期 HepG2 人
肝癌细胞，用含 10% FBS的 RPMI 1640培养基调
整细胞悬液浓度至1×105个/mL，接种于96孔板中，
每孔加入 200 μL细胞悬液，置于 5% CO2、37 ℃培
养箱中培养 24 h使其贴壁，对照组正常培养，对照
组给予 RPMI 1640 不完全培养基，给药组给予
CMEs与 But-Gal-CMEs（以薏苡仁油质量浓度计分
别为 7.81、15.63、31.25、62.50、125.00、250.00
μg/mL），每个质量浓度均设 3个复孔，药物与细胞
作用 48 h，终止培养前 4 h加入MTT（5 mg/mL），
10 μL/孔，培养结束后弃去上层液体，每个复孔加
入 100 μL DMSO溶液，摇床低速振摇 10 min后，
采用酶标仪检测 492 nm处各孔吸光度（A）值。并
利用公式计算药物对细胞的增殖抑制率。
细胞增殖抑制率＝1－A 给药组/A 对照组
根据细胞增殖抑制率（表 4）求得 CMEs、
But-Gal-CMEs 抑制 HepG2 细胞增殖的半数抑制浓
度（IC50）分别为 71.23、62.55 μg/mL。在薏苡仁油
质量浓度为 7.81、15.63 μg/mL 时，But-Gal-CMEs
与 CMEs相比，But-Gal-CMEs对 HepG2细胞增殖
表 4 CMEs和 But-Gal-CMEs作用 HepG2细胞 48 h的抑
制效应 ( x±s, n = 3)
Table 4 Inhibitory effect of CMEs and But-Gal-CMEs on
HepG2 cells at 48 h ( x±s, n = 3)
质量浓度/(μg∙mL−1) 抑制率/%
CMEs But-Gal-CMEs
7.81 2.49±0.67 8.94±0.73**
15.63 9.95±1.02 16.00±1.24**
31.25 14.43±1.42 16.41±2.36
62.50 51.24±1.52 55.88±2.54
125.00 66.14±2.67 68.06±2.55
250.00 90.05±1.32 88.71±1.97
与 CMEs组比较：**P＜0.01
**P < 0.01 vs CMEs group
的抑制作用显著强于 CMEs。
2.7 HepG2细胞摄取实验[17-18]
2.7.1 试药配制 游离 FITC（free FITC）溶液的制
备：称取 FITC 0.975 mg，用去离子水溶解定容至 5
mL，得 500 μmol/L Free FITC 溶液，避光保存于
4 ℃。
薏苡仁组分物理混合（mixture）溶液的制备：
精密称取薏苡仁油 200 mg、薏苡仁多糖 240 mg、
FITC 0.975 mg，磁力搅拌混合均匀后溶于 5 mL
DMSO中，得 500 μmol/L溶液，避光保存于 4 ℃。
载 FITC的 CMEs（FITC-loaded CMEs）的制备：
称取 FITC 0.975 mg、RH40 150 mg、PEG400 50 mg，
避光条件下，磁力搅拌 2 h，加入 200 mg薏苡仁油，
磁力搅拌 2 h混匀，以 2 mL薏苡仁多糖水溶液（120
mg/mL）为水相，水滴定法制备微乳，用去离子水
定容至 5 mL，得 500 μmol/L FITC-loaded CMEs微
乳，避光保存于 4 ℃。
载 FITC 的 But-Gal-CMEs（FITC-loaded But-
Gal-CMEs）的制备：称取 FITC 0.975 mg、RH40 150
mg、PEG400 50 mg、But-Gal 32 mg，避光条件下，
磁力搅拌 2 h，加入 200 mg薏苡仁油，磁力搅拌 2 h
混匀，以 2 mL薏苡仁多糖水溶液（120 mg/mL）为
水相，水滴定法制备微乳，用去离子水定容至 5 mL，
得 500 μmol/L FITC-loaded But-Gal-CMEs微乳，避
光保存于 4 ℃。
2.7.2 细胞摄取实验 取对数生长期细胞，用胰蛋
白酶消化使其脱壁，用含 10% FBS 的 RPMI 1640
培养液重悬成单细胞悬液，并进行细胞计数，用含
10% FBS的 RPMI 1640培养液稀释至细胞浓度 1×
105/mL，吹打均匀，接种于 24孔细胞培养板，每孔
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培养液 400 μL，在 37 ℃、5% CO2培养箱中孵育
24 h。移去孔内原培养液，将上述 500 μmol/L free
FITC、mixture、FITC-loaded CMEs、FITC-loaded But-
Gal-CMEs用不完全培养基稀释至 20 μmol/L，给药
于 HepG2 细胞，每孔 400 μL。然后移入细胞培养
箱继续培养 2 h。孵育结束后，快速弃去培养基，加
入冷的 PBS终止细胞摄取，并冲洗细胞 3遍。于荧
光倒置显微镜下观察并比较各孔的细胞形态及细胞
荧光强度，结果见图 7。
由图 7可知，FITC-loaded CMEs及 FITC-loaded
But-Gal-CMEs 组荧光强度显著强于 free FITC、
mixture组，提示薏苡仁油形成微乳后增强了细胞摄
取作用；由 FITC-loaded CMEs 及 FITC-loaded
But-Gal-CMEs 组对比可知，But-Gal-CMEs 荧光强
度强于 CMEs，提示 CMEs 经 But-Gal 表面修饰后
进一步增强了细胞摄取作用。


图 7 荧光倒置显微镜观察各组 HepG2细胞 2 h的摄取作用
Fig. 7 Fluorescent staining of cellular uptake in each group after incubation with HepG2 cell for 2 h

3 讨论
本研究以酶催化法成功合成了 But-Gal，并用水
滴定法制备了 CMEs及经 But-Gal对 CMEs表面修
饰形成的 But-Gal-CMEs。所制备的微乳均具有粒径
小、圆整度好、稳定性好的特点。体外 MTT 实验
考察了 CMEs 与 But-Gal-CMEs 对抑制肝癌细胞
HepG2 增殖的作用，实验发现，CMEs、But-Gal-
CMEs抑制 HepG2细胞增殖的 IC50值分别 71.23、
62.55 μg/mL，CMEs经 But-Gal修饰后促进了其对
HepG2细胞增殖的抑制作用。细胞摄取结果也进一
步证明了 But-Gal-CMEs增强了 HepG2细胞对药物
的摄取。CMEs及 But-Gal-CMEs体内靶向性如何，
值得进一步建立荷载 HepG2裸鼠异位瘤模型，采用
近红外成像技术观察 CMEs 及 But-Gal-CMEs 口服
后体内分布情况，以及 2种制剂体内药效如何，也
会对其进一步验证。
以薏苡仁油作为 CMEs的油相，不仅可以作为
药效成分，又可以降低辅料用量，CMEs 中的薏苡
仁多糖成分，能够起到协同抗肿瘤作用。
在肝细胞膜表面具有丰富的 ASGPR，能特异性
识别结构中具有半乳糖残基的半乳糖配体，结合形
成的配体受体复合物，定向转运到肝细胞内。而且
But-Gal 是一种带有半乳糖残基的化合物，能被
ASGPR 特异性识别，将其对 CMEs 表面修饰形成
But-Gal-CMEs，增强肿瘤靶向效果。此外，本研究
合成 But-Gal 所采用的酶催化法具有反应温和、效
率高、选择性强、副产物少等优势。
本研究合成But-Gal过程中遇到了产率低问题，
期望得到较高产率仍需对反应条件进行优化。本研
究只合成了一种半乳糖酯修饰中药组分微乳，关于
其对不同分子构象的半乳糖酯修饰中药组分微乳能
否达到较好的肿瘤靶向效果，可以对其进一步研究。
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