全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 5 期 2015 年 3 月
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• 药材与资源 •
基于 DNA 条形码的玉叶金花属植物鉴定研究
龚 维 1,陈 湜 2,刘婉桢 1,邓小芳 3,涂铁要 4*
1. 华南农业大学生命科学学院,广东 广州 510642
2. 福建农林大学益虫研究所,福建 福州 350002
3. 国家林业局管理干部学院,北京 102600
4. 中国科学院华南植物园 中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室,广东 广州 510650
摘 要:目的 利用 DNA 条形码进行玉叶金花属植物的分子鉴定。方法 对玉叶金花属 20 种、89 份个体进行叶绿体片段
rbcL、matK 和 trnH-psbA 以及核基因片段 ITS 的 PCR 扩增和测序,计算种内和种间 Kimura 2-parameter(K2-P)遗传距离,
利用序列相似性法和邻接法进行单一片段、核心片段、组合片段以及 ITS2 片段的分析。结果 单一片段分析结果表明玉叶
金花属种间遗传距离(0.002~0.012)明显大于种内遗传距离(0.000 3~0.000 7)。trnH-psbA 扩增率最低,ITS2 片段的分辨
率最高,其次是 matK 和 ITS 片段,rbcL 片段的分辨率最低。片段组合后的分辨率明显提高,基于序列相似性法和邻接法,
matK+rbcL+ITS 和 matK+rbcL+trnH-psbA+ITS 的分辨率相当,且比其他片段组的分辨率更高,分别为 77%和 75%,成
功鉴定了 15 个近缘类群,包括 2 个药用种类广西玉叶金花和黐花。结论 鉴于 trnH-psbA 扩增率较低,建议 matK+rbcL+
ITS 作为玉叶金花属物种鉴定的 DNA 条形码,并作为其药用种类的分子鉴定工具。
关键词:玉叶金花属;DNA 条形码;物种鉴定;matK; trnH-psbA;rbcL;ITS;ITS2
中图分类号:R282.5 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)05 - 0727 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.05.019
Identification of plants in Mussaenda L. based on DNA barcoding
GONG-Wei1, CHEN-Shi2, LIU Wan-zhen1, DENG Xiao-fang3, TU Tie-yao4
1. College of Life Sciences, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China
2. Institute of Beneficial Insects, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, China
3. Institute of Cadre, State Academy of Forestry Administration, Beijing 102600, China
4. Key Laboratory of Plant Resources Conservation and Sustainable Utilization, South China Botanical Garden, Chinese Academy
of Sciences, Guangzhou 510650, China
Abstract: Objective This study aims at developing fast and accurate species identification methods for the plants of Mussaenda L.
Methods In the present study, DNA barcoding analysis was carried out on 89 individuals representing 20 species of Mussaenda in
order to evaluate the performance of the four candidate barcoding loci (matK, rbcL, trnH-psbA, and ITS) and ITS2 region. Based on
sequence similarity and Neighbor-joining (NJ) tree reconstruction, we detected inter- and intra-specific genetic distances using
Kimura 2-parameter (K2P). Results Inter-specific genetic distance of species in Mussaenda was significantly higher than
intra-specific genetic distance. The region of ITS2 showed the highest discrimination power among the independent sequences.
Comparably high species discrimination power was also revealed by the matK and ITS data set. The candidate barcode of rbcL
displayed the lowest identification rate among the others. However, each individual candidate barcode demonstrated significantly
lower discrimination power than the barcode of combined data set. Comparable discrimination power was revealed between the two
barcodes of combined sequences matK + rbcL + ITS and matK + rbcL + trnH-psbA + ITS, which showed the values around 77% and
75% based on sequence similarity and NJ tree method. Totally 15 species were identified based on NJ analysis of matK + rbcL + ITS.
Conclusion Consequently, the combined sequence of matK + rbcL + ITS provides an effective and fast tool for the identification and
authentication of medicinal plant species in the genus Mussaenda L.
Key words: Mussaenda L.; DNA barcoding; species identification; matK; trnH-psbA; rbcL; ITS; ITS2
收稿日期:2014-09-19
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31300174);教育部博士点基金项目(20124404120014)
作者简介:龚 维(1979—),女,副研究员,研究方向为植物学。E-mail: wgong@scau.edu.cn
*通信作者 涂铁要(1979—),男,副研究员,研究方向为植物学。E-mail: tutieyao@scbg.ac.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 5 期 2015 年 3 月
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玉叶金花属 Mussaenda L. 隶属于茜草科
(Rubiaceae),本属植物为攀援灌木或藤本。玉叶金花
属,全世界约 120 种,分布于热带亚洲、非洲及太平
洋诸岛,我国产 28 种,1 变种[1]。该属植物地理分布
范围广,形态变异大,部分类群地理分布区重叠,近
缘类群难以区别。因此,利用形态学的方法进行物种
鉴别存在一定困难。该属植物具有较高的药用价值。
据《中华本草》和《中药大辞典》记载以及相关研究
报道,玉叶金花 Mussaenda pubescens W. T. Aiton、广
西玉叶金花 M. kwangsiensis H. L. Li 和黐花 M.
shikokiana H. Lévl 等含有萜类、三萜皂苷类等成分,
其干燥茎、根具有清热解暑、凉血、解毒的功效,
可用于治疗感冒、中暑和呼吸道疾病[2-5]。然而,由
于该属形态鉴定困难,野生资源受到威胁,一些非药
用种类常被作为替代品,降低了其药用价值[6]。前人
已对该属植物进行了分类学研究,但是关于该属植物
的分子鉴定研究目前尚未见报道。
随着分子生物技术的发展,DNA 条形码(DNA
barcoding)为植物准确、有效地鉴定提供了更为方便
快捷的方法。该技术运用一个或多个 DNA 片段进行
物种鉴定[7],结果准确率高、重复率高,不受环境、
物种等因素限制,方法通用性强。CBOL Plant Working
Group[8]建议叶绿体片段 rbcL 和 matK 组合作为陆生
植物的核心 DNA 条形码,并提出将 trnH-psbA 和核
基因 ITS 作为 DNA 条形码候选片段[9-10]。以上条形码
片段在种间及种下具有较快进化速率,变异程度较
高,适用于近缘种及种下物种鉴定[11]。在药用植物条
形码研究中,大量研究表明 ITS2 片段在中药材鉴定
中具有重要价值,是药用植物鉴定的有效工具[12-15]。
同时,以上各片段均已成功应用于茜草科植物的DNA
条形码研究[13,16-17]。基于此,本研究将核心条形码片
段 rbcL 和 matK、候选条形码片段 trnH-psbA 和 ITS
以及 ITS2 片段相结合,对玉叶金花属植物进行 DNA
条形码物种鉴定研究,并为该属药用植物种类的鉴定
提供初步的分子证据和鉴定工具。
1 材料与方法
1.1 材料
本研究一共包括玉叶金花属 20 个种、89 份个体,
每个种至少包括 2 个个体。由中国科学院华南植物园
标本馆张奠湘研究员鉴定为贡山玉叶金花 Mussaenda
treutleri Stapf、展枝玉叶金花 Mussaenda divaricate
Hutchins. 、 疏 花 玉 叶 金 花 Mussaenda laxiflora
Hutchins.、短裂玉叶金花 Mussaenda breviloba S.
Moore、大叶玉叶金花 Mussaenda macrophylla Wall.、
狭瓣玉叶金花 Mussaenda lancipetala X. F. Deng & D.
X. Zhang、红毛玉叶金花 Mussaenda hossei Craib、多
脉玉叶金花 Mussaenda multinervis C. Y. Wu ex Hsue
et H. Wu、洋玉叶金花 Mussaenda frondosa Linn.、粗
毛玉叶金花 Mussaenda hirsutula Miq.、海南玉叶金花
Mussaenda hainanensis Merr. 、 广 东 玉 叶 金 花
Mussaenda kwangtungensis Li、玉叶金花玉叶金花原变
型 Mussaenda pubescens W. T. Ait. f. pubesscens、白花
玉叶金花 Mussaenda pubescens W. T. Ait. f. var. alba
X. F. Deng et D. X. Zhang、仁昌玉叶金花 Mussaenda
chingii Y. C. Wu ex Hsue et H. Wu、黐花 M. shikokiana
H. Lévl、壮丽玉叶金花 Mussaenda antiloga Chun et
Ko、长瓣玉叶金花 Mussaenda longipetala H. L. Li、单
裂玉叶金花 Mussaenda simpliciloba Hand. -Mazz.、广
西玉叶金花 Mussaenda kwangsiensis Li、粉纸扇
Mussaenda philippica A. Rich. cv. Queen Sirkit、裂果金
花 Schizomussaenda henryi (Hutch.) X. F. Deng & D. X.
Zhang、假玉叶金花 Pseudomussaenda flava Verdc.。其
中药用种类为玉叶金花、白花玉叶金花、广西玉叶金
花和黐花,其他种类的药用价值目前尚不明确,以假
玉叶金花和裂果金花作为外类群。在有多个居群材料
的情况下,尽可能选取来自不同居群的样品,以涵盖
物种内部的遗传变异。居群样品采自广东、广西、云
南、四川、海南等地,全部凭证标本均保存在华南植
物园标本馆(IBSC)。采集植物新鲜叶片,经硅胶快
速干燥后保存。样品信息见表 1。
1.2 方法
1.2.1 DNA 提取、片段扩增和测序 硅胶干燥叶片采
用改良 CTAB 法提取总 DNA。选用 4 个片段(rbcL、
matK、trnH-psbA 和 ITS)的引物[18-25]进行 PCR 扩增。
各片段引物信息见表 2。PCR 反应用 50 μL 体系,其
中基因组 DNA 50 ng,10×PCR 缓冲液,2 mmol/L
MgCl2,0.2 μmol/L dNTPs,引物各 0.2 μmol/L,以及
Takara(大连宝生物工程有限公司)的 PrimeStar Taq
酶。PCR 反应程序为 94 ℃预变性 4 min,接着是 30
个循环反应,包括 94 ℃预变性 1 min,54 ℃退火 1
min,72 ℃延伸 90 s,循环反应完成后,72 ℃延伸 8
min,最后 10 ℃保存。PCR 反应结束后,用 1.5%的
琼脂糖凝胶电泳进行分离、检测,同时电泳 3 μL 的
Maker。条带清晰、单一的扩增产物直接送上海英潍
捷基生物工程技术服务公司进行 PCR 产物直接测序。
为保证序列的可靠性,所有片段都进行双向测序。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 5 期 2015 年 3 月
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表 1 样品信息
Table 1 Sample information
编号 样本 标本号 采集地 编号 样本 标本号 采集地
1 贡山玉叶金花 Deng X.F.340 云南省福贡 47 玉叶金花原变型 Duan T.T.631 广东省茂名市电白县麻岗镇热水乡
2 Deng X.F.347 云南省福贡 48 Gong W.47 广东省象头山
3 展枝玉叶金花 Duan T.T.417 四川省宜宾 49 Gong W.76 广东省广州市龙洞宵箕窝
4 Duan T.T.418 四川省宜宾 50 Gong W.51 广东省东莞市观音山
5 Duan T.T.419 四川省宜宾 51 Gong W.77 江西省大余
6 疏花玉叶金花 Deng X.F.361 云南省金平 52 Gong W.78 江西省会昌
7 Duan T.T.436 云南省屏边 53 Gong W.83 香港大学
8 Duan T.T.432 云南省屏边 54 白花玉叶金花 Gong W.81 福建省上杭
9 Duan T.T.433 云南省屏边 55 Gong W.49 广东省东莞市观音山
10 短裂玉叶金花 Duan T.T.579 云南省勐海 56 Gong W.82 广东省深圳市梧桐山
11 Duan T.T.580 云南省勐海 57 Gong W.79 江西省大余
12 Duan T.T.581 云南省勐海 58 Gong W.80 江西省吉安
13 Duan T.T.582 云南省勐海 59 Deng X.F.184 广东省广州市
14 Deng X.F.423 云南省勐海 60 仁昌玉叶金花 Deng X.F.236 广西壮族自治区罗城
15 Deng X.F.387 云南省思茅 61 Duan T.T.673-1 广西壮族自治区罗城
16 大叶玉叶金花 Deng X.F.408 云南省勐仑 62 Duan T.T.673-2 广西壮族自治区罗城
17 Deng X.F.401 云南省版纳 63 Duan T.T.673-3 广西壮族自治区罗城
18 Duan T.T.471 云南省绿春 64 Duan T.T.673-5 广西壮族自治区罗城
19 狭瓣玉叶金花 Duan T.T.515 云南省绿春 65 Duan T.T.673-4 广西壮族自治区罗城
20 Duan T.T.516 云南省绿春 66 黐花 Deng X.F.215 广西壮族自治区金秀
21 Duan T.T.517 云南省绿春 67 Chen S.52 江西省井冈山
22 Duan T.T.518 云南省绿春 68 Chen S.78-1 广西壮族自治区七分山
23 Deng X.F.410 云南省勐腊 69 Chen S.78-2 广西壮族自治区七分山
24 Deng X.F.457 云南省勐腊 70 Chen S.78-3 广西壮族自治区七分山
25 红毛玉叶金花 Duan T.T.546 云南勐腊磨憨苗寨 71 Chen S.78-4 广西壮族自治区七分山
26 Deng X.F.416 云南省勐腊至勐仑途中 72 Chen S.78-5 广西壮族自治区七分山
27 Duan T.T.547 云南勐腊磨憨苗寨 73 壮丽玉叶金花 Duan T.T.75 海南省乐东县尖峰岭
28 Duan T.T.548 云南勐腊磨憨苗寨 74 Duan T.T.78 海南省乐东县尖峰岭
29 多脉玉叶金花 Duan T.T.464 云南省绿春 75 长瓣玉叶金花 Duan T.T.180 广西壮族自治区那坡县
30 Duan T.T.466 云南省绿春 76 Duan T.T.181 广西壮族自治区那坡县
31 Duan T.T.467 云南省绿春 77 Duan T.T.182 广西壮族自治区那坡县
32 Duan T.T.468 云南省绿春 78 单裂玉叶金花 Duan T.T.421 四川省凉山德昌县蒲坝
33 Deng X.F.418 云南省勐腊 79 Duan T.T.422 四川省凉山德昌县蒲坝
34 Deng X.F.444 云南省勐腊 80 Duan T.T.423 四川省凉山德昌县蒲坝
35 洋玉叶金花 Deng X.F.397 云南省勐腊 81 Duan T.T.424 四川省凉山德昌县蒲坝
36 Deng X.F.402 云南省版纳 82 Duan T.T.425 四川省凉山德昌县蒲坝
37 粗毛玉叶金花 Duan T.T.66 海南省乐东县尖峰岭 83 广西玉叶金花 Duan T.T.197 广西壮族自治区凌云县玉洪乡
38 Duan T.T.67 海南省乐东县尖峰岭 84 Duan T.T.198 广西壮族自治区凌云县玉洪乡
39 Duan T.T.68 海南省乐东县尖峰岭 85 Duan T.T.199 广西壮族自治区凌云县玉洪乡
40 Duan T.T.69 海南省乐东县尖峰岭 86 Duan T.T.200 广西壮族自治区凌云县玉洪乡
41 海南玉叶金花 Duan T.T.70 海南省霸王岭 87 Duan T.T.220 广西壮族自治区凌云县玉洪乡
42 Duan T.T.72 海南省霸王岭 88 粉纸扇 Deng X.F.463 云南省版纳植物园
43 Duan T.T.73 海南省霸王岭 89 Deng X.F.248 海南省万宁市兴隆热带花园
44 广东玉叶金花 Duan T.T.660 广东省台山市北峰山林场 90 裂果金花 Deng X.F.409 云南省勐腊
45 Gong W.50 广东省东莞市观音山 91 假玉叶金花 YS 438 广东省广州市华南植物园温室栽培
46 Zhang D.X.1053 广东省新会古兜山
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表 2 4 个条形码片段引物信息
Table 2 Primers information of four barcode fragment
条形码片段 引物名称 序列 (5’-3’)
rbcL rbcLa_f ATGTCACCACAAACAGAGACTAAAGC
724R TCGCATGTACCTGCAGTAGC
matK 3F_KIM CGTACAGTACTTTTGTGTTTACGAG
1R_KIM ACCCAGTCCATCTGGAAATCTTGGTTC
XF TAATTTACGATCAATTCATTC
trnH-psbA psbA 3 GTTATGCATGAACGTAATGCTC
trnH-05 CGCGCATGGTGGATTCACAATCC
ITS ITS 4 TCCTCCGCTTATTGATATGC
ITS 5HP GGAAGGAGAAGTCGTAACAAGG
ITS-NNc18s10 AGGAGAAGTCGTAACAAG
ITS-C26A GTTTCTTTTCCTCCGCT
1.2.2 数据处理和分析 利用 Sequencher 4.1.4
(Gene Code Cop.)软件对原始序列数据进行检查和
拼接,并使用 Se-AL 软件[26]进行人工校正。基于 4
个片段,计算物种间和物种内的 Kimura 2-parameter
(K2P)遗传距离。基于 K2P 模型,对单一片段和
片段组合条形码,使用 MEGA 6.0 软件,构建邻接
(neighbor-joining,NJ)树,并通过 1 000 次重复的
bootstrap 值来确定每个分支的支持率。利用
TaxonDNA 软件,确定遗传距离 95%的阈值,并将
此阈值标定为种内变异的界限。通过“best match”
“best close match”“All species barcodes”功能,对
单一片段条形码和片段组合条形码进行序列相似性
匹配分析,将所有样品的序列均准确鉴定的物种计
入严格匹配的序列中[27]。
2 结果与分析
2.1 序列信息和种内/种间变异分析
玉叶金花属 4 个片段的扩增情况见表 3。除
trnH-psbA 的扩增成功率为 95.60%外,其他 3 个片
段的 PCR 成功率均为 100%。在 trnH-psbA 片段扩
增中,红毛玉叶金花和多脉玉叶金花各有 2 份个体
扩增失败。rbcL 和 matK 的测序结果较好,序列不
存在插入/缺失位点,序列比对最容易。ITS 存在 14
个位点的插入/缺失,序列长度为 750~755 bp,分
别为 ITS1、5.8 S rRNA 和 ITS2 区域。其中,ITS2
长度为 262~266 bp,存在 6 个位点的插入/缺失。
trnH-psbA 片段含有单拷贝碱基 A/T 重复,在测序
中表现为 poly后双峰,且包括 29个插入/缺失位点,
片段长度为 241~285 bp。该片段序列比对具有一定
困难,结果需进一步进行手工校对。ITS 片段变异
位点和信息位点数最多(47 个和 31 个),其中,ITS2
区域含有变异位点和信息位点数分别为35和20个。
rbcL 的变异位点和信息位点均最少(10 个和 5 个)。
基于各单一片段的分析结果,玉叶金花属 20 种植物
的种内遗传距离为 0.000 3~0.000 7,种间遗传距离
(0.002~0.012)大于种内遗传距离。
表 3 各片段的 PCR 扩增和测序成功率及各自的序列信息
Table 3 PCR Amplification, sequencing successful rates, and sequence characteristics of each fragment
片段
候选条形码片
段长度/bp
比对后长
度/bp
获得的样
品数
PCR 扩增及测序
成功率/%
核苷酸变异数/信
息位点数
种内遗传距
离均值
种间遗传
距离均值
rbcL 554 554 89 100.00 10/5 0.000 5 0.002
matK 794 794 89 100.00 23/21 0.000 6 0.004
trnH-psbA 241~285 325 85 95.51 12/12 0.000 3 0.012
ITS 750~755 765 89 100.00 47/31 0.000 7 0.007
ITS2 262~266 268 89 100.00 35/20 0.000 4 0.008
2.2 玉叶金花属近缘类群的鉴定
对单一片段和组合片段的条形码,利用序列相
似性法和 NJ 法对玉叶金花属植物进行物种鉴定。在
单一片段中,ITS2 的分辨率最高,matK 和 ITS 片段
的分辨率比 rbcL 和 trnH-psbA 高。在组合片段中,
matK+rbcL 的分辨率比单一叶绿体片段高,matK+
rbcL+trnH-psbA 的分辨率低于 matK+rbcL+ITS。
matK+rbcL+ITS 与 matK+rbcL+trnH-psbA+ITS
的分辨率相当,两者序列相似性法的分辨率为 77%,
NJ 树的分辨率均为 75%。ITS2 参与的组合片段
中,其分辨率均低于 ITS 参与的组合片段。此外,
基于 rbcL、ITS、matK+rbcL、matK+rbcL+ITS
和 matK+rbcL+trnH-psbA+ITS 的各条形码,序列
相似性法比 NJ 法具有更高的分辨率。
由于 trnH-psbA 有 2 份个体 PCR 扩增失败,本
研究进一步利用matK+rbcL+ITS进行玉叶金花属
植物条形码分析。基于该组合片段的 NJ 树共成功
鉴定了 15 个种,分辨率为 75%,其中包括 2 个药
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用种类广西玉叶金花和黐花(图 1)。未能成功鉴定
的共 5 个种,包括 2 个药用种类玉叶金花和白花玉
叶金花以及 3 个非药用种类广东玉叶金花、海南玉
叶金花和疏花玉叶金花。除广西玉叶金花的支持率
图 1 基于matK+rbcL+ITS 条形码数据的玉叶金花属NJ 树
Fig. 1 Neighbor-joining tree based on matK + rbcL + ITS
combined for species of Mussaenda L.
为 52%,其他鉴定成功种类的支持率均在 60%以上。
此外,狭域分布的种类大多被成功鉴定。例如,5 个
云南特有种贡山玉叶金花、狭瓣玉叶金花、红毛玉
叶金花、多脉玉叶金花和壮丽玉叶金花,1 个海南特
有种洋玉叶金花,以及 1 个广西特有种仁昌玉叶金
花均被成功鉴定。从 NJ 树上来看,广东玉叶金花、
海南玉叶金花、玉叶金花和白花玉叶金花聚在一支,
与壮丽玉叶金花和广西玉叶金花遗传距离较近。
3 讨论
DNA 条形码是用于区分植物近缘类群、鉴定药用
植物的有效手段。植物叶绿体量丰富,即使从植物标
本中提取DNA 也能成功用于叶绿体片段扩增。叶绿体
基因组单亲遗传,避免了基因重组,使其成为了植物
DNA 条形码的主要来源[9,28]。然而,仅仅依靠叶绿体
基因组的信息尚不足以解决物种鉴定问题,叶绿体基
因组与核基因组片段相组合的条形码更具有物种鉴别
能力[18,29-30]。本研究中,无论是利用序列相似性法还是
NJ 树法,单一片段条形码的分辨率均≤50%,而片段
组合的条形码分辨率明显提高(表 3)。基于本研究,
核心条形码 matK+rbcL 比单一叶绿体片段条形码具
有更高的分辨率,但仍不足以进行物种鉴定研究。在
核心条形码基础上,增加候选条形码 ITS 片段比
trnH-psbA 片段可获得更高的分辨率(表 3)。ITS2 被
证明为药用植物有效的DNA 条形码,本研究结果也表
明 ITS2 比 ITS 具有更高的分辨率。但是,ITS2 单一片
段条形码尚不足以解决玉叶金花属物种鉴定的问题
(表 3)。同时,在组合片段中,ITS2 参与组合的条形
码,其分辨率低于 ITS 参与组合的条形码。因此,
建议仍利用 ITS 作为候选条形码。基于序列相似性
法和 NJ 法,matK+rbcL+ITS 和 matK+rbcL+
trnH-psbA+ITS 2 种组合的结果相当,但是 trnH-psbA
的 PCR 扩增率较低。基于以上原因,建议 PCR 扩增容
易、成功率高、分辨率高的 matK+rbcL+ITS 片段组
合作为玉叶金花属近缘类群物种鉴定的DNA 条形码。
玉叶金花属植物具有较高的药用价值和经济价
值[4]。利用该属植物开发、生产的中药产品也已在
民间流传,如源吉林甘茶、玉叶清火片、玉叶解毒
颗粒、玉叶解毒糖浆、三金感冒片和千金茶等[6]。
根据分类学和生药学研究报道,该属植物长期以来存
在形态鉴定困难、药用种类难以鉴定等问题,对其药
用植物的利用和开发造成影响。本研究成功鉴定了 2
个常见药用种类广西玉叶金花和黐花,在NJ 树上明显
区别于其他近缘类群。然而,2 个常见药用种类玉叶金
45
57
48
49
50
58
52
54
51
41
42
43
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中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 5 期 2015 年 3 月
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花和白花玉叶金花的个体与广东玉叶金花和海南玉叶
金花聚在一起,无法成功鉴定。这 4 个种地理分布区
域广,分布区重叠,在形态学上难以区分,可能存在
种间杂交或基因渐渗,建议利用更多片段组合的条形
码对其进行更加深入的研究和分析。此外,DNA 条形
码在鉴定云南、海南和广西的玉叶金花属植物中具有
明显优势,共有 7 个地区性特有种被成功鉴定。这些
地区是黎药和瑶药的重要产出地,但这些地区的玉叶
金花属植物药用价值尚不明确,本研究结果将在其药
用植物的开发和利用中具备一定的应用价值。
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