全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 18 期 2014 年 9 月 ·2636·
HPLC 法评估 25 种国产干红葡萄酒质量研究
李 巍，张晓书，辛立波，赵余庆*
沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳 110016
摘 要：目的 对 25 种不同品牌、产地和年份的国产干红葡萄酒中 7 种活性成分（没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、表儿茶
素、原花青素 B2、白藜芦醇和鞣花酸）进行 HPLC 法同步检测，为其质量评价提供科学依据。方法 采用 HPLC 法测定中
国干红葡萄酒中没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、原花青素 B2、白藜芦醇和鞣花酸的量。色谱条件为 Kromasil C18
（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱：0～21 min，19%乙腈；21～24 min，19%～
25%乙腈；24～32 min，25%～30%乙腈；32～39 min，30%～40%乙腈；39～44 min，40%～50%乙腈；44～55 min，50%～
60%乙腈；55～60 min，60%～80%乙腈；60～65 min，80%～100%乙腈；65～70 min，100%乙腈；体积流量为 1 mL/min；
柱温 25 ℃；检测波长为 280 nm；每次进样 10 μL。结果 实验所测中国干红葡萄酒中都含有没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、
表儿茶素、原花青素 B2、白藜芦醇和鞣花酸 7 种活性成分，定量范围依次为 31.6～111.9、3.7～11.9、30.7～71.9、30.3～135.7、
29.8～82.5、0.9～12.3、1.9～23.2 mg/L。结论 没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、原花青素 B2、白藜芦醇和鞣花
酸 7 种活性成分可作为国产干红葡萄酒质量评价的指标，它们的存在是干红葡萄酒品质的保障和保健作用的物质基础。
关键词：干红葡萄酒；活性成分；HPLC；质量评价；没食子酸；原儿茶酸；儿茶素；表儿茶素；原花青素 B2；白藜芦醇；
鞣花酸
中图分类号：R286.02 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)18 - 2636 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.18.012
Quality assessment of 25 Chinese dry red wines by HPLC
LI Wei, ZHANG Xiao-shu, XIN Li-bo, ZHAO Yu-qing
College of Traditional Chinese Medicine, Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110016, China
Abstract: Objective Using HPLC to simultaneously detect the phenolic compounds in active ingredients, such as gallic acid,
protocatechuic acid, catechin, epicatechin, proanthocyanidin B2, resveratrol, and ellagic acid, in 25 kinds of Chinese dry red wines with
different brands, from different places, and in different years , and to provide the foundation for the quality assessment. Methods
HPLC was applied to determinating the content of each phenonic ingredient. The HPLC conditions were as follows: chromatographic
column used as Kromasil C18 (150 mm × 4.6 mm, 5 μm), mobile phase was methol (A)-H2O-0.1% phosphoric acid (B). The gradient
program was 0－21 min, 19% A; 24 min, 25% A; 32 min, 30% A; 39 min, 40% A; 44 min, 50% A; 55 min, 60% A; 60 min, 80% A;
65－70 min, 100% A. Mobile flow rate with 1 mL/min and the detective wavelength was 280 nm. Results The contents of gallic acid,
protocatechuic acid, catechin, epicatechin, proanthocyanidin B2, resveratrol, and ellagic acid in these wines were in the ranged of
31.6－111.9, 3.7－11.9, 30.7－71.9, 30.3－135.7, 29.8－82.5, 0.9－12.3, and 1.9－23.2 mg/L, respectively. Conclusion The seven
phenolic compounds could be selected as the index ingredients to evaluate the quality of dry red wine from the different sources and the
existence of them are guarantee of quality of dry red wine and the material basis of healthcare functions.
Key words: dry red wines; active ingredients; HPLC; quality assessment; gallic acid; protocatechuic acid; catechin; epicatechin;
proanthocyanidin B2; resveratrol; ellagic acid
葡萄酒的酿造已有几千年的历史，葡萄酒是仅
次于啤酒的第二大酒精性饮料。有研究学者报道，
长期饮用葡萄酒能够预防老年痴呆、有助于预防龋
齿[1-3]。葡萄中含有丰富的多酚类化学成分，这些成
分在酿酒过程中大都溶入酒液中并发生纷繁复杂的
变化，这些变化不仅影响葡萄酒的外观色泽、口感
收稿日期：2014-03-17
基金项目：沈阳市科技计划项目（F11-153-9-00）；辽宁省博士启动基金资助项目（20111135）
作者简介：李 巍（1981—），女，讲师，沈阳药科大学，主要从事天然产物研究。Tel: (024)23986522 E-mail: wei_li1981@163.com
*通信作者 赵余庆 Tel: (024)23986521 E-mail: zyq4885@126.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 18 期 2014 年 9 月 ·2637·
风味，而且影响其营养保健功能。干红葡萄酒是葡
萄酒酿造后，酿酒原料（葡萄汁）中的糖分完全转
化成酒精，残糖量≤4.0 g/L 的红葡萄酒。目前对干
红葡萄酒品质评价的方法多数还局限于感官分析和
单一成分的化学鉴定[4]。对国产干红葡萄酒多种活
性成分的检测和科学的质量评价研究鲜见报道。
本课题组前期已对部分市售干红葡萄酒活性成
分白藜芦醇、儿茶素、表儿茶素的量进行了比较分
析，发现作为干红葡萄酒中活性成分的白藜芦醇，
在中国干红葡萄酒中普遍存在，且其量较高，充分
说明了中国干红葡萄酒的品质[5]。基于此，本课题
组为了接续研究，收集了 25 种市售的国产干红葡
萄酒，并对其进行 7 种活性成分（没食子酸、原儿
茶酸、原花青素 B2、鞣花酸、白藜芦醇、儿茶素和
表儿茶素）的 HPLC 同步测定，为国产干红葡萄酒
活性成分的发现和质量评价提供科学依据和可行的
方法。
1 仪器与试剂
高效液相色谱仪、UV L—2400 紫外可见分光
光度计，日本 Hitachi 集团；Sartorius 电子天平，北
京赛多利斯天平有限公司。
没食子酸（批号 5995-86-8）、原儿茶酸（批号
99-50-3）、原花青素 B2（批号 26106-49-8）、鞣花酸
（批号 476-66-4）和白藜芦醇（批号 501-36-0）对照
品，质量分数＞98%，由天津市科曼思特医药科技
发展有限公司提供；儿茶素（批号 878-200102，质
量分数＞99%）、表儿茶素对照品（批号 877-200001，
质量分数＞99%）由中国食品药品检定研究院提供。
乙腈为色谱纯、蒸馏水采用三重蒸馏水。各种干红
葡萄酒由研究室收集，具体信息见表 1。
表 1 25 种红酒样品基本信息
Table 1 Basic information on samples of 25 kinds of red wines
编号 红酒样品 生产厂家 生产年份
1 张裕干红葡萄酒 1892（优选级） 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2000
2 张裕干红葡萄酒（双星） 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2011
3 张裕干红葡萄酒（5 星） 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2011
4 张裕干红葡萄酒解百纳（优选级） 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2011
5 张裕干红葡萄酒特制百年 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2011
6 张裕干红葡萄酒解百纳（特选级） 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2011
7 张裕干红葡萄酒（优选级） 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2010
8 张裕干红葡萄酒美乐（优选级） 烟台张裕葡萄酿酒股份有限公司 2010
9 长城干红葡萄酒赤霞珠（3 星） 中粮沙城产区怀涿盆地 2011
10 长城干红葡萄酒赤霞珠（特酿 8 年） 中粮沙城产区怀涿盆地 2011
11 长城干红葡萄酒红标 中国粮油食品有限公司 2011
12 长城海岸葡萄酒红色庄园干红（精选级） 中国粮油食品有限公司 2010
13 华夏长城干红葡萄酒赤霞珠 中国粮油食品有限公司 2010
14 长城葡萄酒精品至醇干红 中国粮油食品有限公司 2010
15 长城海岸葡萄酒解百纳干红 中国粮油食品有限公司 2008
16 长城天赋葡园赤霞珠干红 中国粮油食品有限公司 2011
17 长城干红葡萄酒长城赤霞珠 中国粮油食品有限公司 2011
18 长城干红葡萄酒赤霞珠特制 中国粮油食品有限公司 2009
19 长城干红葡萄酒解百纳（特制 5 年） 中国粮油食品有限公司沙城产区 2011
20 长城干红葡萄酒解百纳（3 年） 中国粮油食品有限公司沙城产区 2011
21 长城干红葡萄酒蛇龙珠 中国粮油食品有限公司沙城产区 2010
22 长城干红葡萄酒蛇龙珠（3 年） 中国粮油食品有限公司沙城产区 2011
23 长城干红葡萄酒解百纳（特酿 3 年） 中国粮油食品有限公司沙城产区 2011
24 长城干红葡萄酒解百纳（5 年盛藏） 中国粮油食品有限公司沙城产区 2009
25 卡斯特金牌窖藏干红葡萄酒 烟台市埃维堡酒业公司 2011
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2 方法与结果
2.1 色谱条件
Kromasil C18 色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；
流动相采用乙腈-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脱：0～
21 min，19%乙腈；21～24 min，19%～25%乙腈；
24～32 min，25%～30%乙腈；32～39 min，30%～
40%乙腈；39～44 min，40%～50%乙腈；44～55
min，50%～60%乙腈；55～60 min，60%～80%乙
腈；60～65 min，80%～100%乙腈；65～70 min，
100%乙腈；体积流量为 1 mL/min；柱温 25 ℃；检
测波长为 280 nm；每次进样 10 μL。色谱图见图 1。
1-没食子酸 2-原儿茶酸 3-儿茶素 4-原花青素 B2 5-表儿茶素
6-白藜芦醇 7-鞣花酸
1-gallic acid 2-protocatechuic acid 3-catchin 4-proanthocyanidin B2
5-epicatchin 6-resveratrol 7-ellagic acid
图 1 混合对照品 (A) 和华夏长城干红葡萄酒赤霞珠样品
(B) 的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC of mixed reference substances (A) and Huaxia
Great Wall red wine Cabernet Sauvignon (B)
2.2 标准曲线的制备
分别精确称取白藜芦醇、儿茶素、表儿茶素、
原花青素 B2、原儿茶酸、没食子酸、鞣花酸对照品
各 2 mg，置于 10 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，
即得。精密吸取适量混合对照品溶液，进样测定峰
面积值。以进样量为横坐标（X），峰面积为纵坐标
（Y），绘制标准曲线，进行线性回归。没食子酸标
准曲线 Y＝2 350 743 X－273 975，R2＝0.996 5，结果
表明，没食子酸在 0.2～2.8 μg 线性关系良好；原儿
茶酸标准曲线 Y＝788 910 X－111 788，R2＝0.999 8，
结果表明，原儿茶酸在 0.2～2.8 μg 线性关系良好；
儿茶素标准曲线 Y＝540 822 X－73 815，R2＝0.999 7，
结果表明，儿茶素在 0.2～2.8 μg 线性关系良好；表
儿茶素标准曲线 Y＝602 376 X－99 405，R2＝0.999 4，
结果表明，表儿茶素在 0.2～2.8 μg 线性关系良好；
原花青素 B2 标准曲线 Y＝85 567 X－57 927，R2＝
0.999 1，结果表明，原花青素 B2 在 0.2～2.8 μg
线性关系良好；鞣花酸标准曲线 Y＝994 654 X－
213 775，R2＝0.999 7，结果表明，鞣花酸在 0.2～
2.8 μg 线性关系良好；白藜芦醇标准曲线 Y＝
285 053 X－36 380，R2＝0.999 1，结果表明，白藜
芦醇在 0.2～2.8 μg 线性关系良好。
2.3 精密度试验
精密称取长城干红葡萄酒赤霞珠酒样 10 μL，
过 0.22 μm 微孔滤膜，共 6 份，连续进样 6 次，测
定色谱峰面积。结果显示没食子酸、原儿茶酸、儿
茶素、表儿茶素、原花青素 B2、白藜芦醇和鞣花酸
峰面积的 RSD 分别为 1.92%、1.13%、0.98%、1.02%、
0.99%、1.23%和 0.91%，表明本实验测定方法的精
密度良好。
2.4 重复性试验
精密称取长城干红葡萄酒赤霞珠酒样 10 μL，
过 0.22 μm 微孔滤膜，共 6 份，进样，测定色谱峰
面积，计算各成分的质量浓度。结果显示没食子酸、
原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、原花青素 B2、白藜
芦醇和鞣花酸质量浓度的 RSD 分别为 1.01%、
1.11%、1.23%、0.82%、0.93%、1.71%和 0.94%，
表明本实验测定方法的重复性良好。
2.5 稳定性试验
分别在 0、4、8、12、24 h 精密吸取长城干红
葡萄酒赤霞珠酒样 10 μL，过 0.22 μm 微孔滤膜，进
样，测定色谱峰面积。结果显示没食子酸、原儿茶
酸、儿茶素、表儿茶素、原花青素 B2、白藜芦醇和
鞣花酸峰面积的 RSD 分别为 1.12%、1.00%、1.14%、
1.42%、0.97%、1.36%和 1.02%，表明在 24 h 内供
试品溶液性质稳定。
2.6 加样回收率试验
精密称取长城干红葡萄酒赤霞珠酒样，共 6 份，
分别加一定量的没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、表
儿茶素、原花青素 B2、白藜芦醇和鞣花酸对照品，
分别精密吸取 10 μL 进样，测定，平均回收率分别
为 99.34%、99.51%、99.79%、99.31%、99.83%、
1
2
3
4 5
6 7
A
B 1
2 3 4 5
6 7
0 20 40 60 80
t / min
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100.12%和 99.63%，RSD 分别为 0.94%、0.99%、
0.98%、1.32%、1.61%、0.84%和 0.97%。
2.7 样品测定
按“2.1”项色谱条件，依次取 25 种不同品牌、
生产厂家和年份的干红葡萄酒样品，过 0.22 μm 滤
膜超滤后进行 7 种成分的 HPLC 测定，结果见表 2。
3 讨论
本实验采用HPLC/UV法首次对 25种国产干红
表 2 25 种干红葡萄酒中 7 种活性成分的定量测定结果
Table 2 Quantitative determination of index components in 25 kinds of dry red wines
编号
质量浓度 / (mg·L−1)
没食子酸 原儿茶酸 儿茶素 原花青素 B2 表儿茶素 白藜芦醇 鞣花酸
1 65.13 3.54 27.71 25.51 29.14 0.19 1.22
2 105.49 10.35 28.82 56.67 1.41 0.10 0.64
3 75.57 5.99 10.66 47.33 2.89 0.17 0.61
4 73.40 6.17 11.93 66.58 5.86 0.16 0.49
5 46.83 5.66 14.54 16.89 4.02 0.6 0.36
6 58.72 2.78 16.33 40.27 0.85 0.19 0.43
7 34.58 4.74 11.44 6.90 5.72 0.11 0.52
8 50.42 5.27 12.09 17.72 1.27 0.15 0.36
9 42.26 5.42 20.92 22.35 8.71 0.11 0.42
10 68.93 3.96 23.07 23.27 7.85 0.07 0.36
11 50.15 2.78 8.68 7.51 6.44 0.03 0.35
12 37.45 4.30 6.12 24.30 7.65 0.12 0.41
13 28.20 3.24 7.45 11.47 3.48 0.08 0.87
14 50.68 4.07 18.08 26.32 4.06 0.11 0.46
15 47.30 4.95 13.43 16.26 2.52 0.15 0.54
16 55.48 6.97 19.88 2.53 3.89 0.11 0.51
17 74.97 3.21 26.13 23.72 7.39 0.19 0.48
18 56.94 7.22 14.38 30.31 4.88 0.19 0.56
19 172.89 29.59 127.34 123.48 1.88 0.54 0.71
20 37.73 5.20 26.37 26.10 2.62 0.02 0.39
21 48.60 6.11 21.81 16.43 1.11 0.06 0.22
22 52.94 6.33 21.94 31.31 1.58 0.12 0.58
23 50.24 5.24 51.41 41.98 3.26 0.03 0.45
24 48.94 5.88 16.68 12.43 1.64 0.34 0.55
25 60.68 3.19 13.64 18.73 11.07 0.03 0.33
葡萄酒中 7 种活性成分（没食子酸、原儿茶酸、儿
茶素、表儿茶素、原花青素 B2、白藜芦醇和鞣花酸）
进行同步测定，该方法简单、准确、有效，各活性
成分均得到较好的分离。测定结果显示，25 种酒样
均检测到 7 种活性成分，各酒样间 7 种活性成分的
量差异不大，仅酒样 19［长城干红葡萄酒解百纳（特
制五年）］各活性成分的量均较其他酒样高，排除同
一产地葡萄酒生产工艺影响，推测其与所使用的葡
萄原料的品种及质量有关。
大量研究表明，没食子酸衍生物具有抗胃溃疡、
抗病毒、预防冠心病等作用[6]，儿茶素、表儿茶素
类化合物具有明显的抗氧化、抗衰老及改善肝功能
等生物活性[7]，鞣花酸具有抗癌、抗突变、抗氧化
和降压等作用[8-9]，原儿茶酸及衍生物具有抗氧化、
降低心肌耗氧量、减慢心率等作用[10]，白藜芦醇具
有调血脂、抑制血小板、改善非酒精性脂肪肝及抑
制脂肪氧化酶活性的作用，并可通过保护细胞线粒
体中DNA免遭化学损害而发挥延缓衰老功效[11-13]，
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原花青素更早已被证实具有抗氧化、抗突变、抗癌、
预防和治疗心血管疾病等作用[14-16]。同时，由测定
结果可知，25 种干红葡萄酒中都含有没食子酸、原
儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、原花青素 B2、鞣花酸、
白藜芦醇 7 种酚类物质，各酒样之间仅存在量高低
的差异，说明这 7 种活性成分可以作为葡萄酒质量
评价的测定指标和其发挥保健作用的物质基础，也
为长期适量的饮用红葡萄酒可以调节人体的各项生
理功能提供了科学依据。
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