全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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• 药剂与工艺 •
基于层次分析法及多指标正交试验优选酒炖女贞子炮制工艺
李 慧，刘其南，张 丽*，姚卫峰*，丁安伟
南京中医药大学 江苏省中药资源产业化过程协同创新中心，江苏省方剂高技术研究重点实验室，中药资源产业化与方剂
创新药物国家地方联合工程研究中心，江苏 南京 210023
摘 要：目的 优选酒炖女贞子的炮制工艺。方法 采用 HPLC 法同时测定红景天苷、特女贞苷、齐墩果酸，以层次分析
法（AHP）、多指标综合评分法结合正交试验考察黄酒用量、闷润时间、炖制时间对酒炖女贞子炮制品质量的影响，优选女
贞子酒炖工艺的技术参数。结果 黄酒用量及炖制时间对酒女贞子成品质量具有显著影响，闷润时间对结果无显著影响。酒
炖女贞子的最佳炮制工艺为每 100克女贞子加黄酒 30 g，闷润 30 min，炖制 8 h。结论 优选的炮制工艺合理可靠，为规范
女贞子饮片的炮制加工提供了参考，建立的同时测定女贞子中 3种成分的定量方法简便快速、重复性好，可用于女贞子饮片
的质量控制。
关键词：女贞子；炮制工艺；红景天苷；特女贞苷；齐墩果酸；正交试验；层次分析法
中图分类号：R283.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)16 - 2832 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.16.009
Optimization of processing technology of Ligustri Lucidi Fructus stewed with
wine based on analytic hierarchy process and multi-index orthogonal test
LI Hui, LIU Qi-nan, ZHANG Li, YAO Wei-feng, DING An-wei
Jiangsu Collaborative Innovation Center of Chinese Medicinal Resources Industrialization, Jiangsu Key Laboratory for High
Technology Research of TCM Formulae, and National and Local Collaborative Engineering Center of Chinese Medicinal Resources
Industrialization and Formulae Innovative Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210023, China
Abstract: Objective To optimize the processing technology of Ligustri Lucidi Fructus (LLF) stewed with wine. Methods The
contents of salidroside, specnuezhenide, and oleanolic acid were simultaneously determined using HPLC. The weight coefficient of
each component was evaluated by the analytic hierarchy process. With composite score as index, an orthogonal test was adopted to
investigate the effects of wine amount, soaking time, and steaming time on the quality of the processed products and to optimize the
technical parameters for the processing of LLF stewed with wine. Results Wine amount and steaming time had significant influence
on the quality of products, but soaking time had no significant effect. Optimal processing parameters were as follows: 30 g of wine was
added to 100 g of herbs, soaking time was 0.5 h, and steaming time was 8 h. Conclusion The optimized processing technology is
reasonable and reliable, and it can provide a reference for the processing of LLF. The method established to simultaneously determine
the contents of three components in LLF is simple, rapid, and reproducible for controlling the quality of LLF.
Key words: Ligustri Lucidi Fructus; processing technology; salidroside; specnuezhenide; oleanolic acid; orthogonal test; analytic
hierarchy process

女贞子为木犀科女贞属植物女贞 Ligustrum
lucidum Ait. 的干燥成熟果实，具有滋补肝肾、明目
乌发的功效，为传统的扶正固本药。女贞子生品在
补肝肾的同时偏于清肝明目、滋阴润燥，经过炮制

收稿日期：2016-03-31
基金项目：国家自然科学基金项目资助（81001599，81573554）
作者简介：李 慧，硕士研究生，主要从事中药炮制学及中药复方机制研究。Tel: 15895973661 E-mail: missyhui2012@163.com
*通信作者 张 丽，教授，博士生导师，主要从事中药炮制学及中药复方机制研究。Tel: (025)85811509 E-mail: zhangli@njucm.edu.cn
姚卫峰，副教授，硕士生导师，主要从事中药质量控制及代谢研究。Tel: (025)85811836 E-mail: yaowf@njucm.edu.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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后补肝肾作用增强，且能减缓寒滑之性，故临床多
以炮制品入药。女贞子历代的炮制方法有很多，主
要有蒸制、酒制、盐制、药汁制等，现代的炮制方
法主要以酒炖和酒蒸为主。《中国药典》2015 年版
酒女贞子的炮制主要依照通则（0213）中酒炖法或
酒蒸法炖至酒吸尽或蒸透[1]，只对黄酒用量做了一
定规定，而对于闷润及炖制时间都没有明确规定，
各地区在炮制女贞子时，采取的工艺参数也各不相
同，女贞子的炮制工艺目前仍不统一。
以往关于酒女贞子炮制工艺的研究多以齐墩果
酸和熊果酸的质量分数为评价指标。齐墩果酸和熊
果酸为五环三萜类化合物，被认为是女贞子的保肝
活性成分[2]，齐墩果酸为《中国药典》2005年版女
贞子的定量测定指标，但因其为脂溶性成分且在多
种中药材中普遍存在，《中国药典》2010及 2015年
版均将女贞子中量较高且专属性更强的水溶性环烯
醚萜苷类成分特女贞苷作为女贞子药材的定量测定
指标。
为了全面客观地反映炮制工艺对酒炖女贞子质
量的影响，本实验以红景天苷、特女贞苷及齐墩果
酸的量为评价指标，以黄酒用量、闷润时间及炖制
时间为考察因素，采用正交试验优选酒炖女贞子炮
制工艺，为女贞子炮制工艺的规范化及合理控制饮
片质量提供参考。
1 仪器与材料
Agilent 1290 系列高效液相色谱系统，美国
Agilent公司；New Classic MS型分析天平，d＝0.01
mg，Mettler Toledo；FA1104N型分析天平，d＝0.1
mg，HANGPING；KH-500B 型超声清洗器，额定
功率 600 W，额定频率 40 kHz，昆山市超声仪器有
限公司；电磁炉，额定功率 2 100 W，额定频率 50
Hz，美的电器公司。
女贞子饮片，批号 150201，铜陵禾田中药饮片
股份有限公司，经南京中医药大学吴启南教授鉴定
为木犀科女贞属植物女贞 Ligustrum lucidum Ait. 的
干燥成熟果实；东风花雕酒，3年陈黄酒，清爽型，
会稽山绍兴酒股份有限公司。对照品红景天苷（批
号 PS10062401）、特女贞苷（批号 PS0331-0020）、
齐墩果酸（批号 PS0230-0025）均由成都普思生物
科技股份有限公司提供，质量分数＞98%；乙腈，
色谱级，美国 Tedia公司；超纯水由Milli-Q系统制
得，美国Millipore公司；甲醇为色谱纯，其他试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 多成分定量测定方法
2.1.1 色谱条件 色谱柱为 Ultimate XB-C30 柱
（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-纯水，
梯度洗脱：0～5 min，5%～11%乙腈；5～12 min，
11%～14%乙腈；12～13 min，14%～22%乙腈；13～
24 min，22%乙腈；24～25 min，22%～93%乙腈；
25～37 min，93%乙腈；体积流量 1.0 mL/min；柱
温 30 ℃；检测波长 215 nm；进样量 10 μL。在该
色谱条件下，对照品及样品色谱图见图 1。





图 1 混合对照品 (A)、女贞子饮片 (B) 及酒女贞子炮制品
(最佳工艺验证 1, C) 的 HPLC图
Fig. 1 HPLC of mixed reference substances (A), LLF pieces
(B), and LLF processed with wine (C)

2.1.2 混合对照品溶液的制备 精密称取对照品红
景天苷 1.92 mg、特女贞苷 17.00 mg、齐墩果酸 7.25
mg，置同一 25 mL量瓶中，80%甲醇溶解并定容至
刻度，制成红景天苷、特女贞苷、齐墩果酸质量浓
度分别为 76.8、680、290 μg/mL的混合对照品溶液。
2.1.3 供试品溶液的制备 取炮制品粉末（过 3号
筛），精密称定 0.4 g，置具塞锥形瓶中，精密加入
80%甲醇 25 mL，称定质量，超声提取 1 h，放冷，
80%甲醇补足减失的质量，取适量经 15 000 r/min
离心 10 min，取上清液即得。
2.1.4 线性关系考察 精密量取混合对照品储备液
5 mL，置 10 mL量瓶中，用 80%甲醇稀释至刻度，
摇匀。按等倍法依次逐级稀释，制得一系列质量浓
红景天苷
特女贞苷
齐墩果酸
红景天苷
红景天苷
特女贞苷
特女贞苷
齐墩果酸
齐墩果酸
0 5 10 15 20 25 30 35
t/min
A
B
C
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度梯度的混合对照品溶液，依法注入液相色谱仪测
定，记录峰面积。以各对照品质量浓度为横坐标
（X），峰面积为纵坐标（Y）绘制标准曲线，进行线
性回归，结果红景天苷 Y＝11.930 4 X＋1.479 9，r＝
1.000 0，线性范围 1.20～76.80 μg/mL，检测限
（LOD）0.21 μg/mL，定量限（LOQ）0.42 μg/mL；
特女贞苷 Y＝7.901 7 X＋9.391 4，r＝1.000 0，线性
范围 10.63～680.00 μg/mL，LOD 0.26 μg/mL，LOQ
0.53 μg/mL；齐墩果酸 Y＝3.300 5 X＋1.081 3，r＝
1.000 0，线性范围 15.50～965.20 μg/mL，LOD 1.02
μg/mL，LOQ 2.04 μg/mL。
2.1.5 精密度试验 取预试验所制炮制品粉末依法
制备一份供试品溶液，在“2.1.1”项色谱条件下连
续进样 6次，计算红景天苷、特女贞苷、齐墩果酸
色谱峰面积的 RSD值分别为 2.97%、0.50%、1.31%。
2.1.6 稳定性试验 取预试验所制炮制品粉末依法
制备一份供试品溶液，室温下放置，分别于 0、2、
4、8、10、12 h进样测定，测得红景天苷、特女贞
苷、齐墩果酸色谱峰面积的 RSD值分别为 1.60%、
0.60%、1.03%，表明供试品溶液在制备后 12 h内稳
定性良好。
2.1.7 重复性试验 取预试验所制炮制品粉末，依
法制备供试品溶液 6份，测得红景天苷、特女贞苷、
齐墩果酸的平均质量分数分别为 1.41、25.86、11.41
mg/g，RSD值分别为 0.73%、1.60%、1.27%。
2.1.8 加样回收率试验 取已测定的炮制品粉末共
6份，每份 0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分
别加入对应量的特女贞苷、齐墩果酸、红景天苷对
照品，依“2.1.3”项方法制备供试品溶液。在“2.1.1”
项色谱条件下进样测定，计算得到红景天苷、特女
贞苷、齐墩果酸的平均加样回收率分别为 94.78%、
101.09%、93.15%，RSD值分别为 1.87%、1.95%、
2.92%。
2.1.9 样品定量测定 取各炮制品粉末，依法制备
供试品溶液，重复 2次，在上述色谱条件下进样测
定，记录各色谱峰面积，以干燥品计算各成分的质
量分数。
2.2 正交试验设计及样品制备
以《中国药典》2015年版“0213炮制通则”中
酒炖法为参照，选取酒炖过程中的关键参数黄酒用
量（A）、闷润时间（B）、炖制时间（C）为考察因
素，在预试验的基础上各设计 3个水平，因素水平
见表 1。按 L9(34) 正交表安排试验制备样品。取已
净选的女贞子 100 g，放入不锈钢饭盒中，加入规定
量黄酒拌匀，密闭，闷润至规定的时间，置锅屉上，
电磁炉武火（2 100 W，240 ℃）加热至圆汽后改用
小火（800 W，130 ℃）并开始计时，炖至规定的
时间，取出放凉，晾至半干，烘箱中 50 ℃烘干，
自封袋密封后至阴凉干燥处，即得。9 份炮制品均
达到《中国药典》2015年版规定的外观性状要求，
表面呈黑褐色，微有酒香气，且炖制时间长的炮制
品颜色更深。

表 1 L9(34) 正交试验安排及直观分析结果
Table 1 Design and results of L9(34) orthogonal test
试验号 A/g B/min C/h D (空白) 红景天苷/% 特女贞苷/% 齐墩果酸/% 综合评分（Y）
1 10 (1) 30 (1) 6 (1) (1) 0.154 2.575 0.875 78.53
2 10 (1) 60 (2) 8 (2) (2) 0.181 2.663 0.908 86.30
3 10 (1) 90 (3) 10 (3) (3) 0.201 2.157 0.853 84.53
4 20 (2) 30 (1) 8 (2) (3) 0.204 2.556 0.939 91.04
5 20 (2) 60 (2) 10 (3) (1) 0.217 2.017 0.868 86.76
6 20 (2) 90 (3) 6 (1) (2) 0.156 2.685 0.921 80.74
7 30 (3) 30 (1) 10 (3) (2) 0.234 2.145 0.876 92.50
8 30 (3) 60 (2) 6 (1) (3) 0.172 2.549 0.866 82.30
9 30 (3) 90 (3) 8 (2) (1) 0.226 2.272 0.955 93.13
K1 83.12 87.36 80.52 86.14
K2 86.18 85.12 90.16 86.51
K3 89.31 86.13 87.93 85.96
R 6.19 2.24 9.63 0.56
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2.3 层次分析法（AHP）确定各指标权重
AHP是美国著名运筹学家Saaty教授于 20世纪
70年代初提出的一种权重决策分析方法[3]。首先，
采用1～9标度法对3项指标进行两两比较评判重要
性[4]，见表 2，各指标的判断优先矩阵见表 3。按照
几何平均法[5]计算各指标的权重系数[3-4]，得到红景
天苷、特女贞苷、齐墩果酸的权重系数分别为 0.570、
0.333、0.097。对求得的各个权重系数进行一致性检
验[3-4,6]，得一致性指标（CI）＝0.01≠0，接着计算
随机一致性比率（CR）＝0.02＜0.1，说明指标层的
判断矩阵和单排序结果的一致性可以接受，求得的
权重系数合理有效，无逻辑混乱。

表 2 目标树各层次评分标准
Table 2 Evaluation standard of target tree at different levels
相对重要性 定义
1 同等重要
3 稍重要
5 明显重要
7 强烈重要
9 绝对重要
2、4、6、8 以上相邻标度重要性的中间值
倒数 若 i与 j的重要性之比为 aij，则
j与 i的重要性之比为 1/aij

表 3 指标成对比较的判断优先矩阵
Table 3 Decision matrix of paired comparison on indexes
指标 红景天苷 特女贞苷 齐墩果酸 wi′ wi λmax CI
红景天苷 1 (a11) 2 (a12) 5 (a13) 2.154 0.570 3.02 0.01
特女贞苷 1/2 (a21) 1 (a22) 4 (a23) 1.260 0.333
齐墩果酸 1/5 (a31) 1/4 (a32) 1 (a33) 0.368 0.097

初始权重系数（wi′）＝(ai1ai2…aim)1/m
归一化权重系数（wi）＝wi′/∑
=
m
i 1
wi′
CI＝(λmax－m)/(m－1)
最大特征根（λmax）＝[∑
=
m
i 1
∑
=
m
j 1
(aijwj/wi)]/m
CR＝CI/RI
i为判断优先矩阵中的列，j为判断优先矩阵中的行，m为指
标的个数，RI 为判断矩阵的平均随机一致性指标，查相关
表[5]可知 RI＝0.52
2.4 加权法综合评价女贞子酒炖工艺
采用加权综合评分法考察女贞子酒炖最佳工
艺，根据 AHP 法计算的结果，分别给予红景天苷
0.570、特女贞苷 0.333、齐墩果酸 0.097的加权系数，
求出综合评分（Y）。
Yi＝各样品中红景天苷质量分数/9个样品中红景天苷最
高质量分数×0.570×100＋各样品中特女贞苷质量分数/9个
样品中特女贞苷最高质量分数×0.333×100＋各样品中齐
墩果酸质量分数/9个样品中齐墩果酸最高质量分数×0.097×
100，i＝1，2，3，……，9
加权评分结果及方差分析分别见表 1、4。由直
观分析可知，各因素对炮制工艺的影响顺序为 C＞
A＞B，方差分析结果表明黄酒用量和蒸制时间因素
对结果有显著性影响（P＜0.01），闷润时间对结果
的影响不显著。综合分析，确定酒炖女贞子的最佳
工艺组合为A3B1C2，即女贞子每 100克加黄酒 30 g，
闷润 30 min，蒸制 8 h。

表 4 方差分析
Table 4 Analysis of variance
方差来源 离均差平方和 自由度 方差 F值 显著性
A 57.48 2 28.74 119.03 P＜0.01
B 7.53 2 3.76 15.59 P＞0.05
C 152.62 2 76.31 316.07 P＜0.01
误差 (D) 0.48 2 0.24
F0.05(2, 2) = 19.00 F0.01(2, 2) = 99.00

2.5 女贞子酒炖最佳工艺验证试验
按照优选出的酒炖女贞子最佳炮制工艺条件平
行制备 3批样品，分别测定各指标成分的质量分数，
计算 Y，并与女贞子生品进行比较，结果见表 5。
验证试验结果表明，优选出的工艺稳定可靠，重现
性好。由最优工艺得到的酒女贞子炮制品中红景天
苷质量分数约达到生品的 2倍，特女贞苷的质量分
数与生品相比降低 34%，而齐墩果酸的质量分数则
略有降低。
3 讨论
饮片入药是中医临床用药的特色，中药经炮制

表 5 最佳酒炖工艺验证结果
Table 5 Verification results of best wine-stewing technology
样品 红景天苷/% 特女贞苷/% 齐墩果酸/% Y
验证 1 0.225 2.198 1.119 93.43
验证 2 0.225 2.598 1.091 98.16
验证 3 0.223 2.491 1.027 95.70
生品 0.121 3.678 1.256 87.98
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后药性及药效发生变化的同时势必伴随着化学成分
的改变。本研究以化学成分为导向，运用 AHP 确
定各成分权重系数，以综合评分为评价指标，正交
试验优选出酒炖女贞子最佳工艺为女贞子每 100克
加黄酒 30 g，闷润 30 min，炖制 8 h。优选出的女
贞子炮制工艺稳定可靠，为规范女贞子的炮制加工
提供了参考。
3.1 定量测定
本研究采用HPLC梯度洗脱方式同时测定女贞
子中的水溶性成分红景天苷、特女贞苷及脂溶性成
分齐墩果酸，所建立的方法快速灵敏、重现性好，
为全面控制女贞子饮片质量提供了新的方法。特女
贞苷的最佳检测波长为 224 nm，红景天苷在 222 nm
及 275 nm 均有较大吸收，齐墩果酸为末端吸收，
为使各成分均有较高的响应值，最终选择 215 nm
为检测波长。采用 HPLC测定齐墩果酸时，存在与
其同分异构体熊果酸分离困难的问题，曾尝试不同
厂家的 C18、RP18、ODS 等类型的色谱柱，通过降
低柱温或体积流量、更改流动相比例，均无法达到
好的分离效果，最后采用含碳量高的 Ultimate XB
C30色谱柱使齐墩果酸和熊果酸的分离度达到1.5以
上，确保了齐墩果酸定量的准确。
3.2 因素水平的设定
《中国药典》2015 年版四部中规定“蒸、煮、
炖时，除另有规定外，一般每 100 kg待炮炙品，用
水或规定的辅料 20～30 kg”[7]，部分地区在炮制女
贞子时黄酒用量为 10%。黄酒用量为 10%时，药材
表面即可被酒液均匀湿润，当黄酒用量超过 30%时
会有大量酒液在容器底部积聚。单因素试验结果表
明，黄酒用量在 10%～30%各成分综合评分较高，
因此选择 10%、20%、30%作为黄酒用量的考察水
平。对闷润时间进行单因素考察，结果显示闷润时
间在 30～90 min各成分综合评分达到 96分以上，
因此选择 30、60、90 min为闷润时间的考察水平。
对炖制时间进行单因素考察，发现女贞子经黄酒炖
制后特女贞苷质量分数明显降低，红景天苷质量分
数明显升高，且二者的质量分数与炖制时间密切相
关，当炖制时间低于 6 h时，所得炮制品无法达到
《中国药典》的“表面黑褐色或灰黑色”外观性状要
求，当炖制时间超过 10 h时特女贞苷的质量分数将
降至生品的 55%以下，而红景天苷的质量分数将升
高到生品的 2倍以上。考虑到《中国药典》目前仍
以特女贞苷作为女贞子药材及其饮片的质控标准，
且炖制时间在 6～10 h各成分的量有较高的综合评
分，因此选择 6、8、10 h进行炖制时间的优选。
3.3 权重系数的确定
AHP 是一种将定性与定量相结合的系统分析
方法，将其与多指标综合评分法结合应用于炮制工
艺的优选，能够更加全面、科学、客观地反映指标
层对实验结果的影响。AHP在进行赋权时，通过数
理运算将各指标的重要性转变为可量化的权重系
数，这一过程虽然也存在一定的主观性，但比起单
纯凭借经验赋值少了盲目性和随意性，因此 AHP
逐渐受到中药研究者的关注[8-9]。本研究在运用AHP
确定权重时，以有关文献报道[10-14]为基础，综合考
虑各成分的药理作用及其在炮制过程中的变化对各
指标进行重要性评判。
红景天苷对心脏、神经系统、肝、肾均有保护
作用，还具有抗癌、抗衰老、抗骨质疏松等多种药
理作用[10]，特女贞苷在大鼠胃与小肠内均可被代谢
为红景天苷，更利于胃肠吸收，且红景天苷为女贞
子炮制后的增量成分[11]，推测其可能为女贞子酒制
后补肝肾作用增强的效应成分，由此认为红景天苷
在炮制品的质量评价中有着比特女贞苷更重要的地
位[12]。齐墩果酸具有保肝作用，有研究认为，女贞
子经黄酒炮制后，齐墩果酸的量有所升高[13]，也有
文献认为炮制对齐墩果酸的量并无显著影响[14]，本
研究则发现女贞子经炮制后齐墩果酸的量反而有所
下降。考虑到齐墩果酸脂溶性极强，溶出度不理想，
且女贞子传统多以水煎剂入药，故在进行两两比较
时，将齐墩果酸的重要性置于红景天苷和特女贞苷
之后。
参考文献
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