全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 14 期 2014 年 7 月

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大黄酚前体脂质体的制备及其质量评价
王立华 1，毛微曦 1，黄慧婷 2，赵子兵 3，武亮飞 1，王永利 1，张丹参 4*
1. 河北北方学院应用化学研究所，河北 张家口 075000
2. 中国科学院生态环境研究中心 环境化学与生态毒理国家重点实验室，北京 100085
3. 太原理工大学化学化工学院，山西 太原 030024
4. 河北科技大学，河北 石家庄 050018
摘 要：目的 研制大黄酚前体脂质体并对其质量考察。方法 采用载体沉积法制备大黄酚前体脂质体，以包封率为评价指
标，通过单因素考察和正交试验法优化该处方，并观察其稳定性、形态及粒径。结果 大黄酚前体脂质体的最佳处方：温度
为 40 ℃，载脂比为 40∶1，胆固醇卵磷脂比为 1∶5，药脂比 1∶12；按该处方制备的大黄酚前体脂质体稳定性好，包封率
达（84.69±2.29）%，平均粒径为（593.4±14.2）nm，Zeta 电位为（−54.35±0.88）mV。结论 采用载体沉积法，以山梨
醇为载体，按最优处方和最佳制备条件可制得包封率较高、稳定性好、粒径均匀的大黄酚前体脂质体。
关键词：大黄酚；前体脂质体；载体沉积法；制备；质量评价；包封率
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)14 - 2014 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.14.010
Preparation and quality evaluation of chrysophanol proliposomes
WANG Li-hua1, MAO Wei-xi1, HUANG Hui-ting2, ZHAO Zi-bing3, WU Liang-fei1, WANG Yong-li1, ZHANG
Dan-shen4
1. Institute of Applied Chemistry, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China
2. State Key Laboratory of Environmental Chemistry and Ecotoxicology, Research Center for Eco-Environmental Sciences,
Chinese Academy of Sciences, Beijing 100085, China
3. Chemistry and Chemical Engineering of Taiyuan University of Technology, Taiyuan 030024, China
4. Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang 050018, China
Abstract: Objective To study and evaluate the quality of chrysophanol proliposomes. Methods Chrysophanol proliposomes were
prepared by carrier aggradation method. A single-factor investigation and orthogonal design were used to optimize the formulation by
entrapment efficiency (EE). And the stability, shape, and size were observed. Results The optimum prescription of chrysophanol
proliposomes as follows: the temperature was 40 , the ratio of carrier℃ -phospholipid was 40∶1, the ratio of cholesterol-phospholipid
was 1∶5, and the ratio of phospholipid-drug was 1∶12. Chrysophanol proliposomes prepared by the result of the orthogonal design
showed the uniform particle and good stability with the EE up to (84.69 ± 2.29)%, the particle size was (593.4 ± 14.2) nm, and the Zeta
potential was (−54.35 ± 0.88) mV. Conclusion The proliposomes prepared by the carrier aggradation method are used by sorbitol to
get high EE, stability and uniform particle size to optimize the prescription and preparation conditions.
Key words: chrysophanol; proliposome; carrier aggradation method; preparation; quality evaluation; entrapment efficiency

大黄酚具有止咳、抗衰老、抗癌、降血糖等多
种功效[1]，但是由于大黄酚溶解度低、易氧化、对
胃肠道刺激大，不能长时间保存，使其临床应用受
到限制[2]。近年来，为了提高大黄酚生物利用度研
究开发了很多新制剂，如大黄酚环糊精包合物[3]、
大黄酚纳米囊[4]、大黄酚脂质体[5-6]、大黄酚冻干脂
质体[7]等。研究结果表明，脂质体是大黄酚较理想
的药物载体[8-9]，但是普通的脂质体多数以混悬液

收稿日期：2014-02-17
基金项目：河北省科学技术研究与发展计划项目（12276104D-94）；河北北方学院应用化学创新团队资助项目（CXTD1306）
作者简介：王立华（1980—）女，硕士，讲师，主要从事应用化学教学、科研方面的工作。Tel: 18931316766 E-mail: fangyuanguiju@163.com
*通信作者 张丹参，女，博士生导师。Tel: (0311)81668016 E-mail: zhangds2011@126.com
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形式存在，长时间放置容易分层和凝聚沉降，还会
发生磷脂的氧化分解、药物渗漏等问题[10]。将大黄
酚制成固体粉末状的前体脂质体，使用前水合为脂
质体混悬液，不仅易于保存，还可以有效提高制剂
的稳定性，避免上述问题。本实验采用载体沉积法，
通过筛选合适的载体，制备出稳定性好的大黄酚前
体脂质体，并对其进行质量评价，为进一步推动大
黄酚临床应用提供研究基础。
1 仪器与材料
TU—1810 紫外可见分光光度计，北京普析通
用仪器有限责任公司；RE52—99 型旋转蒸发仪，
上海亚荣生化仪器厂；SU—05 低速离心机，安徽
中科中佳科学仪器有限公司；H—7650 型透射电子
显微镜，日立 HITACHI 公司；CX—250 超声波清
洗器，北京医疗设备工厂；ALC—210.4 电子天平，
赛多利斯科学仪器（北京）有限公司；Delsa Nano
型 Zeta 电位及粒度分析仪，美国 Beckman Coulter
公司。
大黄酚对照品，中国食品药品检定研究院，批
号 110796-200716，质量分数≥98%；大黄酚样品（质
量分数为 98%），西安小草植物科技有限公司，批
号 XC20130903；卵磷脂（PC），北京华清美恒天然
产物技术开发有限公司，批号 20130308；胆固醇
（CH，批号 76C10150）、PEG 2000、维生素 E，北
京鼎国生物技术有限责任公司；甘露醇，天津市风
船化学试剂科技有限公司；山梨醇，天津市大茂化
学试剂厂；氯化钠，天津市北方天医化学试剂厂；
乳糖，天津市标准科技有限公司；色谱纯甲醇，天
津市永大化学试剂开发中心；无水乙醇等均为国产
分析纯。
2 方法与结果
2.1 大黄酚前体脂质体的制备工艺[6,11]
称取处方量的卵磷脂、胆固醇、大黄酚、维生
素 E 以及 PEG 2000，溶于无水乙醇中，形成澄清溶
液。另称取适量过 80 目筛的载体，置于 500 mL 茄
形瓶中，预热 5 min，然后分批次加入适量的类脂
质溶液，在一定温度下恒温水浴减压蒸发至干。将
制得品置于真空干燥器中干燥 12 h，过 40 目筛，密
闭于西林瓶中，冰箱 4 ℃保存。临用前，取大黄酚
前体脂质体粉末加入注射用水水合，振摇 15 min 溶
解，即得前体脂质体混悬液。
2.2 前体脂质体包封率的测定
按本课题组前期研究建立的低速离心法[12]进
行测定。测定过程简述如下：取待测的大黄酚前体
脂质体样品，加注射用水水化，振摇至全部溶解，
转移至 25 mL 量瓶中，定容，混合均匀。精密量取
2.0 mL 溶液置于离心管中，在 1 000 r/min、20 s/次
的条件下离心 6 次，弃去上层清液。精密移取 5.0 mL
甲醇溶解沉淀，以甲醇做参比测定吸光度，计算游
离大黄酚的量，计算包封率。每个样品平行测定 3
次，取其平均值。
包封率＝1－W 游离 / W 总
W 游离为游离大黄酚的质量，W 总为总大黄酚的质量
2.3 影响前体脂质体制备因素的考察
预试验发现载体种类、载脂比、药脂比和胆固
醇用量是影响大黄酚前脂质体包封率的主要因素。
制备工艺中各因素对产品质量均有重要影响，故首
先通过单因素确定主要影响因素，然后采用正交试
验设计优化处方，以期确定大黄酚前体脂质体的最
佳制备条件。
2.3.1 不同载体对包封率的影响 固定处方及工艺
中的其他因素，分别选用山梨醇、甘露醇、氯化钠、
乳糖为载体，制备大黄酚前体脂质体，测定包封率，
结果分别为 79.46%、71.35%、51.21%、57.43%。
结果显示载体为山梨醇时，制备的脂质体包封率高、
稳定性好。
2.3.2 水浴温度对包封率的影响 固定其他因素，
考察水浴温度分别为 30、35、40、45、50 ℃，制
备大黄酚前体脂质体，测定包封率，结果分别为
68.60%、71.47%、74.38%、69.42%、65.53%。结果
表明水浴温度为 40 ℃时，可以制得包封率较高的
脂质体。
2.3.3 载脂比对包封率的影响 固定其他因素，使
处方中载体-卵磷脂的比例分别为 20∶1、25∶1、
30∶1、35∶1、40∶1，制备大黄酚前体脂质体，测
定包封率，结果分别为 72.16%、73.90%、79.45%、
78.90%、77.33%。结果表明载脂比为 30∶1 时，可
以制得包封率高、稳定性好的脂质体。
2.3.4 药脂比对包封率的影响 固定其他因素，使
处方中药物-卵磷脂的比例分别为 1∶8、1∶10、1∶
12、1∶14、1∶16，制备大黄酚前体脂质体，测定
包封率，结果分别为 52.23%、79.44%、82.53%、
74.63%、65.56%。结果表明药脂比为 1∶12 时，脂
质体包封率最高。
2.3.5 胆固醇用量对包封率的影响 固定其他因
素，使处方中胆固醇-卵磷脂的比例分别为 1∶2、1∶
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3、1∶4、1∶5、1∶6，制备大黄酚前体脂质体，测
定包封率，结果分别为 76.92%、81.19%、78.62%、
79.41%、72.48%。结果表明，胆固醇与卵磷脂的最
佳质量比为 1∶3 时，制备的大黄酚前体脂质体包封
率最高。
2.4 正交试验优化
在单因素考察试验基础上，以包封率为指标，
对处方中水浴温度（A）、载脂比（B）、胆固醇-卵
磷脂比（C）、药脂比（D）4 个因素进行优选，以
期得到稳定性好、包封率较高的前体脂质体处方和
制备条件。选用 L9(34) 正交表安排试验，制备前体
脂质体，测定包封率。试验设计及结果见表 1，方
差分析见表 2。

表 1 L9(34) 正交试验设计及结果
Table 1 Design and results of L9(34) orthogonal test
编号 A / ℃ B C D 包封率 / %
1 35 (1) 30∶1 (1) 1∶3 (1) 1∶10 (1) 68.07
2 35 (1) 35∶1 (2) 1∶4 (2) 1∶12 (2) 73.92
3 35 (1) 40∶1 (3) 1∶5 (3) 1∶14 (3) 77.55
4 40 (2) 30∶1 (1) 1∶4 (2) 1∶14 (3) 67.74
5 40 (2) 35∶1 (2) 1∶5 (3) 1∶10 (1) 77.67
6 40 (2) 40∶1 (3) 1∶3 (1) 1∶12 (2) 83.48
7 45 (3) 30∶1 (1) 1∶5 (3) 1∶12 (2) 76.85
8 45 (3) 35∶1 (2) 1∶3 (1) 1∶14 (3) 65.34
9 45 (3) 40∶1 (3) 1∶4 (2) 1∶10 (1) 76.12
K1 219.54 212.66 216.89 221.86
K2 228.89 216.93 217.78 234.25
K3 218.31 237.15 232.07 210.63
R 10.58 24.49 15.18 23.62
表 2 方差分析
Table 2 Analysis of varianc
因素 偏差平方和 自由度 F 值 显著性
B 114.093 2 5.11 无
C 48.381 2 2.17 无
D 93.059 2 4.17 无
A (误差) 22.319 2
F0.05(2, 2)＝19.00
从直观分析和方差分析可知各因素均无显著性
差异，各因素的影响大小为 B＞D＞C＞A。载药量
为 2.0 mg 时，最佳处方为 A2B3C3D2，即温度为 40
℃，载脂比为 40∶1，胆固醇-卵磷脂比为 1∶5，药
脂比为 1∶12。
2.5 验证试验
按上述最优处方制备 3 批大黄酚前体脂质体，
测定其包封率分别为 82.41%、86.45%、85.22%。由
测定结果可知该处方和制备条件稳定可行。
2.6 大黄酚前体脂质体的质量评价
2.6.1 外观 最终制得的大黄酚前体脂质体为黄色
固体粉末，分散性好，长时间放置不团聚。
2.6.2 脂质体形态、粒径和 Zeta 电位的测定 取适
量的大黄酚前体脂质体加注射水水合，稀释一定倍
数，将稀释后的大黄酚前体脂质体重组液，点样于
铜网上，静置 70 s，吸干周边多余水分，用 1%的磷
钨酸负染，用滤纸吸干染液，然后用透射电子显微
镜（TEM）观察并拍照，脂质体轮廓清晰，呈圆形
或椭圆形，为单室或多室脂质体，见图 1。用 Delsa
Nano 型 Zeta 电位及粒度分析仪测定所制备的脂质
体粒径分布及 Zeta 电位，结果见图 2，平均粒径为
（593.4±14.2）nm，Zeta 电位为（−54.35±0.88）
mV，表明水合后的大黄酚脂质体溶液稳定。
2.6.3 脂质体稳定性考察 取验证试验制备的大黄
酚前体脂质体，4 ℃低温保存，每隔 5 天测定其渗
透率。脂质体溶液 15 d 渗漏率仅为 1.05%，所制备
的脂质体较为稳定，不易渗漏。


图 1 大黄酚前体脂质体 TEM 照片
Fig. 1 TEM photograph of chrysophanol proliposomes




图 2 大黄酚前体脂质体粒径分布图
Fig. 2 Particle size distribution of chrysophanol
proliposomes
13.2 174.6 2 307.4 27 500.0
粒径 / nm
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3 讨论
大黄酚为脂溶性、易氧化药物，普通方法制备
的前体脂质体包封率较低。故本实验采用载体沉积
法制备大黄酚前体脂质体，并在单因素试验的基础
上，采用正交试验设计对大黄酚前体脂质体的制备
处方进行了优化研究，得到了最优处方和制备条件。
实验结果表明，载体种类对前体脂质体的包封
率有很大影响，这主要是由于前体脂质体是将磷脂
吸附在水溶性载体如甘露醇、氯化钠、山梨醇等上
制成前体脂质体，磷脂遇水溶胀，载体溶解形成多
层脂质体，其中载体的颗粒大小直接影响脂质体的
大小和均匀性。山梨醇的表面为多孔径结构，比表
面积大，不易湿结成团，流动性好，负载磷脂能力
强，因而对药物的包封效果好；甘露醇也有多孔径
结构，但吸湿性强，使药物前体脂质体在制备过程
中部分湿结成团，流动性降低；氯化钠晶体表面无
孔径结构，负载磷脂能力差，其结果不理想。
载体沉积法制备的大黄酚前体脂质体为黄色的
干燥粉末或颗粒状固体，流动性良好，同时其制备
方法简单，包封率较高为（84.69±2.29）%，质量
可控易于生产。大黄酚前体脂质体可用来压片和装
胶囊，因此不仅增加了药物的稳定性，而且便于贮
存和运输，较好地解决了大黄酚临床应用中的一些
问题，具体药效学方面有待于进一步研究。
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