全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 2 期 2011 年 2 月 • 291 •
HPLC 法测定小儿咳喘颗粒中黄芩苷
潘桂玲
徐州医学院附属医院，江苏 徐州 221002
摘 要：目的 建立 HPLC 法测定小儿咳喘颗粒中黄芩苷的方法，控制产品的质量。方法 采用高效液相色谱法对小儿咳
喘颗粒中的黄芩苷进行测定。色谱柱：Hypersil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2），
体积流量 1 mL/min，检测波长 280 nm；柱温室温。结果 黄芩苷的线性范围分别为 0.049 5～1.485 0 μg，平均回收率为 99.99%，
RSD 为 0.52%。结论 方法可行、重现性好，能有效地控制小儿咳喘颗粒的质量。
关键词：小儿咳喘颗粒；黄芩苷；外标法；质量控制；高效液相色谱
中图分类号：R286.02 文献标志码：B 文章编号：0253 - 2670(2011)02 - 0291 - 02
Determination of baicaline in Children’s Kechuan Granula by HPLC
PAN Gui-ling
Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002, China
Key words: Children’s Kechuan Granula; baicaline; external standard method; quality control; HPLC

小儿咳喘颗粒为《中华人民共和国卫生部药品
标准》中药成方制剂第十册收载品种，由麻黄、川
贝母、苦杏仁（炒）、黄芩、天竺黄等 15 味中药组
成，清热宣肺，化痰止咳，降逆平喘，用于小儿发
热，咳嗽，气喘。原标准中只有 4 味药材的定性鉴
别，且均为理化鉴别。为了有效控制其质量，本实
验采用高效液相色谱法对其所含黄芩苷进行了测
定。结果表明，方法简便可行，重现性好，能有效
地控制小儿咳喘颗粒的质量并确保产品临床用药的
安全有效。
1 仪器与材料
LC—2010A 系列全自动高效液相色谱仪，色谱
柱（大连依力特有限公司提供）；PC—2501 UV 紫
外分析仪；BP211D 分析天平。
黄芩苷对照品（批号 110715-200212）由中国
药品生物制品检定所提供。小儿咳喘颗粒由西安碑
林药业股份有限公司提供，每袋装 6 g（相当于原生
药 12.63 g）。
甲醇为色谱纯（天津市科密欧化学试剂开发中
心）；其余试剂为分析纯；水为重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件[1]
色谱柱为 Hypersil C18（250 mm×4.6 mm，5
μm），流动相为甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2），体积
流量 1 mL/min，检测波长 280 nm；柱温室温。在此
色谱条件下，小儿咳喘颗粒中黄芩苷分离良好，见
图 1。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取黄芩苷对照品 9.9 mg，置 100 mL 量
瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对

1

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图 1 黄芩对照品（A）、供试品（B）和阴性对照（C）的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC chromatograms of baicaline refernce substance (A), Children’s Kechuan Granula (B), and negative sample (C)

收稿日期：2010-08-17
A B C
0 10 20 30 0 10 20 30 0 10 20 30
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 2 期 2011 年 2 月 • 292 •
照品储备液。精密量取该溶液 1 mL，置 10 mL 量
瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取装量差异下的本品，研细，取约 5 g，精密称
定，置具塞锥形瓶中，精密加入 70%乙醇 100 mL，
密塞，称定质量，加热回流 3 h，放冷，再称定质量，
用 70%乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量
取续滤液 1 mL，置 10 mL 量瓶中，加甲醇至刻度，
摇匀，即得。
2.4 阴性对照溶液的制备
按处方比例准确称取处方中除黄芩以外的其他
各味药材，模拟本品的制备工艺和供试品溶液的制
备方法，制成缺黄芩的空白溶液。
2.5 线性关系考察
称取黄芩苷对照品 9.9 mg，置 100 mL 量瓶中，
加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀；精密量取 0.5、
1、5、10、15 μL，分别注入液相色谱仪，测定峰面
积。以峰面积对进样质量进行线性回归，得回归方
程 Y＝3×106 X＋28 850，r＝0.999 8。结果表明，
在此色谱条件下，黄芩苷在进样量为 0.049 5～1.485 0
μg 与峰面积呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
精密吸取 9.9 μg/mL 黄芩苷对照品溶液 10 μL，分
别进样 5 次，记录黄芩苷峰面积，结果 RSD 为 0.65%。
2.7 重现性试验
取批号 080901 的样品，分别称取 6 份，制备供
试品溶液，进样测定，计算得黄芩苷平均质量分数
为 3.46 mg/g，RSD 为 0.34%。
2.8 稳定性试验
取批号 080901 的样品，制备供试品溶液，分别
放置 0、1、2、4、6、8 h 后进样测定，记录色谱图，
结果黄芩苷峰面积的 RSD 为 0.27%。
2.9 加样回收率试验
取批号 080901 的样品（含黄芩苷 3.68 mg/g）6
份，每份约 3.00 g，精密称定，分别准确加入 0.550
8 mg/mL 黄芩苷对照品溶液 20.0 mL，制备供试品
溶液，进样测定，计算回收率，结果平均加样回收
率为 99.99%，RSD 为 0.52%。
2.10 样品测定
取小儿咳喘颗粒 10 批，分别制备供试品溶液，
依法操作，每批平行测定两份，结果见表 1。可见
黄芩苷的质量分数为 3.30～3.70 mg/g，考虑到黄芩
药材的质量差异，故规定黄芩苷不得少于 3.30 mg/g。
表 1 小儿咳喘颗粒中黄芩苷的测定结果
Table 1 Determination of baicaline in Children’s
Kechuan Granula
批号 黄芩苷/(mg·g−1) 批号 黄芩苷/(mg·g−1)
080615 3.59 080807 3.44
080621 3.55 080813 3.42
080627 3.60 080826 3.65
080705 3.52 080901 3.68
080801 3.71 080915 3.62

3 讨论
本实验对黄芩苷的甲醇溶液进行紫外区扫描，
结果黄芩苷在（278±2）nm 有最大吸收峰。参考
《中国药典》2010 年版一部黄芩药材项下黄芩苷测
定检测波长，并经实验比较，在 280 nm 处测定基
线波动小，峰形理想，样品中其他组分干扰小，故
检测波长选用 280 nm。
参考《中国药典》2010 年版一部黄芩药材项下
黄芩苷测定方法，以甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）
为流动相，检测波长为 280 nm。理论板数按黄芩苷
峰计算应不低于 2 500。在上述色谱条件下，吸取供
试品溶液 10 μL，注入液相色谱仪，结果表明，用
此流动相测得的色谱图中主峰的分离度、保留时间
均合适，故选择甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）为本
品中黄芩苷测定的流动相。
有报道采用 HPLC 法测定小儿咳喘颗粒中麻黄
碱[2]，笔者在研究时发现其在 210 nm 处有最大吸
收，但此波长处接近末端吸收，干扰较大。本实验
定量黄芩苷的依据是通过方法学的系统考察，黄芩
苷的检测波长为 280 nm，用上述方法测得的色谱图
中主峰的分离度、保留时间均合适，该方法的重现
性、稳定性、精密度、回收率试验均符合有关规定，
且专属性好、简便可行，能有效地控制小儿咳喘颗
粒的质量，故选择黄芩苷作为含量测定的指标。
参考文献
[1] 冯 波, 施春玲, 郝乘仪, 等. RP-HPLC 法测定芎菊上
清丸中黄芩苷 [J].中草药, 2009, 40(5): 743-745.
[2] 张俊宏, 雒西萍, 付 彬. 小儿咳喘颗粒质量标准研究
[J]. 西北药学杂志, 2010(5): 355-356.