全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •526•
注射用苦参素纳米球与普通粉针剂在大鼠体内药动学比较
陈 纭，金 涌*
安徽医科大学药学院 药物分析教研室，安徽 合肥 230032
摘 要：目的 比较注射用苦参素纳米球（KU-PLGA-NS）与注射用苦参素普通粉针剂（KUI）在大鼠体内的药动学特性。
方法 建立 HPLC 法检测大鼠血浆中苦参素，采用 ANOVA 法选择房室模型，将所测得的血药浓度-时间数据，采用 DAS 程
序进行分析，根据 F 值与 AIC 选择房室模型求算药动学参数。结果 等剂量 KU-PLGA-NS 和 KUI 的 AUC0-t分别为（785.57±
170.92）、（342.43±54.49）mg·L−1·min，Cmax为（18.51±2.47）、（28.48±5.40）mg/L，t1/2Ke为（91.69±1.94）、（11.51±2.47）
min。结论 KU-PLGA-NS 在大鼠体内的药动学特性与 KUI 比较 AUC 和 Cmax 增加，t1/2延长。
关键词：苦参素；纳米球；药动学；血药浓度；房室模型
中图分类号：R285.51 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)03 - 0526 - 04
Pharmacokinetic comparison between Kushenin Injection Nanoparticles and common
injection in rats

CHEN Yun, JIN Yong
Department of Pharmaceutical Analysis, School of Pharmacy, Anhui Medical University, Hefei 230032, China

Abstract: Objective To compare the in vivo pharmacokinetic properties of Kushenin Injection Nanoparticles (KU-PLGA-NS) with
the ordinary Kushenin Injection (KUI) of rats. Methods A method has been developed and validated for the quantification of
kushenin in rat plasma. Using ANOVA method to choose the compartment model, The plasma concentration-time data were measured
and then analyzed by DAS program on the computer. According to F values, the AIC choice compartment model pharmacokinetic
parameters were calculated. Results The main pharmacokinetic parameters of KU-PLGA-NS and KUI were as follows: AUC0-t
were (785.57 ± 170.92) and (342.43 ± 54.49) mg·L−1·min, respeticevly; Cmax were (18.51 ± 2.47) and (28.48 ± 5.40) mg/L,
respeticevly; t1/2Ke were (91.69 ± 1.94) and (11.51 ± 2.47) min, respeticevly. Conclusion Comparison of in vivo pharmacokinetic
characteristics of rats between KU-PLGA-NS and KUI has a significant change with AUC and Cmax increase and t1/2 extension.
Key words: kushenin; nanoparticles; pharmacokinetics; blood drug concentration; compartment model

苦 参 素 （ kushenin ） 又 名 氧 化 苦 参 碱
（ oxymatrine ），是从豆科植物苦豆子 Sophora
alopecuroides L. 的种子或苦参 Sophora flavescens
Ait.的根中提取的一种生物碱。苦参素具有抗炎、
抗病毒、增强免疫功能和抗肿瘤等作用[1]，近年来
发现其对病毒性肝炎亦有明显治疗作用。苦参素是
我国自主开发完成，享有完全知识产权的纯天然生
物碱类药物，现有多种该药的制剂研究报道，包括
胶囊、片剂、注射液等[2-3]。该药物已广泛地应用于
临床，主要在治疗乙型肝炎、白细胞减少症、心律
失常、湿疹等方面有较好疗效[4-5]。但目前临床上使
用的苦参素半衰期较短，大多为 2.6 h 左右，且不良
反应较多，并在肝中浓度小。而纳米给药系统在实
现靶向和缓释给药，以及提高难溶性药物的生物利
用度，降低药物不良反应等方面具有良好应用前景[6-7]。
本研究通过比较注射用苦参素纳米球（ KU-
PLGA-NS）与苦参素普通粉针剂（KUI）ip 给药后
大鼠血浆药物浓度变化规律和药动学参数，考察苦
参素纳米球的药动学特性，评价其临床应用前景。
1 材料与方法

收稿日期：2010-05-06
基金项目：安徽省自然科学基金项目（070413117）；安徽医科大学校级研究项目（2008kj12）；国家中医药管理局中医药科研三级实验室“中
药药理实验室”项目（TCM-2009-197）
作者简介：陈 纭（1981—），男，汉族，安徽池州人，讲师，硕士，主要从事药物分析研究工作。
Tel: 13856020743 E-mail: chenyun3503@sina.com
*通讯作者 金 涌 Tel: (0551)5518877 E-mail: jyayd@sina.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •527•
1.1 药品与试剂
苦参素对照品（中国药品生物制品检定所，质
量分数 99.5%），KUI（批号 20090821，质量分数
96.9%）由陕西龙孚生物化工有限责任公司提供；
KU-PLGA-NS（批号 20090821，质量分数 97.6%）
自制[8]，其平均包封率为 79.5%，平均载药量为
1.75%，平均粒径为 190.5 nm。甲醇为色谱纯（天
津市运盛化学试剂科技有限公司），磷酸和其他试剂
均为分析纯（天津化学试剂三厂）。
1.2 仪器与设备
岛津高效液相色谱仪（包括色谱数据 LC-
sloution System、CTO—20AS 系统控制器、LC—
20AT 输液泵和 SPD—20A 紫外检测器），色谱柱为
Kromasil-C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm，天津市
色谱科技有限公司）；全自动高速冷冻离心机
GL20A（湖南仪器仪表总厂离心机厂）；XW—80A
旋涡振荡器（上海精科实业有限公司）。
1.3 生物样品来源
健康 SD 大鼠 40 只，雌雄各半，体质量 180～
220 g，由安徽医科大学实验动物中心提供，普通级。
动物随机分成 4 组，每组 10 只。
1.4 色谱条件
色谱柱为 Kromasil-C18柱（150 mm×4.6 mm，
5 μm），流动相为 0.01 mol/L 磷酸盐缓冲液-甲醇
（35∶65）；检测波长 229 nm；灵敏度 0.001 AUFS；
柱温 30 ℃；体积流量 1.0 mL/min；进样量 20 μL。
1.5 给药方案
大鼠 ip 给药，其中 3 组分别 ip KU-PLGA-NS
（3、6、12 mg/kg），另 1 组 ip KUI（6 mg/kg）。
1.6 血浆样本的采集
大鼠给药前禁食 12 h，整个实验期间自由饮水。
于给药前 0 h 和给药后按时间点（2、5、10、20、
45、60、90、120、240 min）从大鼠眼底静脉丛取
血 0.5 mL 于肝素化试管中，静置，4 000 r/min 离心
10 min，取血浆 0.2 mL，冰箱保存待测。
1.7 血浆样品处理
取血浆 200 μL，分别加入甲醇 100 μL，生理盐
水 200 μL，涡旋震荡混匀，再加醋酸乙酯 2 mL，
涡旋震荡约 45 s，3 000 r/min 离心 10 min，取有机
层，重复一次，合并有机相，40 ℃氮气吹干，流动
相重溶，转移至 EP 管中，4 000 r/min 离心 10 min，
20 μL 进样。
1.8 数据处理
数据以 sx ± 表示，采用 ANOVA 法选择房室模
型。将所测得的血药浓度-时间数据，采用 DAS 程
序在计算机上进行分析，根据 F 值与 AIC 选择房室
模型，并求算药动学参数。组间比较采用 Student’s t
检验。
2 实验结果
2.1 方法专属性
取大鼠空白血浆，除不加对照品溶液外，其余
按“1.7”项下方法处理并分析，获得空白血浆的色
谱图；将一定浓度苦参素对照品溶液加入空白血浆
中，同法操作，获得相应的色谱图。血浆色谱图中
苦参素的保留时间为 5.5 min 左右，药物峰附近未
见杂质峰干扰，生物样品中内源性物质均不干扰体
内苦参素的测定，见图 1。

图 1 空白血浆（A）、空白血浆＋苦参素（B）和血浆样品
（C）的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of blank plasma (A),
blank + kushenin (B), and plasma sample (C)
2.2 标准曲线
取大鼠空白血浆 300 μL，加苦参素对照品系列
溶液 200 μL，配制成苦参素 1.25、2.5、5.0、10.0、
20.0、40.0、80.0 μg/mL 的血浆样品，在 1.25～80
μg/mL 苦参素血浆浓度与色谱峰面积比线性关系良
好，线性回归方程为 y＝193 889 x＋1 950.2（r＝
0.999 7，P＜0.05，n＝7），最低检测度 0.05 μg/mL。
2.3 方法回收率
选择大鼠血浆样品进行回收率考察，配制低、


0 1 2 3 4 5 6
t / min
A
B
C
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •528•
中、高 3 种不同质量浓度的苦参素标准生物体液样
品，按上述样品预处理步骤操作，生物样品中苦参
素色谱峰面积代入相应的标准曲线，通过测得量与
加入量比值求得苦参素 40、10、2.5 μg/mL 相对回
收率分别为（98±3）%、（100±2）%、（107±5）%
（n＝5），结果符合临床前药动学的研究要求。
2.4 方法精密度
选择大鼠血浆样品进行精密度考察，按生物样
品标准曲线测定方法配制低、中、高 3 种不同浓度
的苦参素标准生物体液样品，按上述生物样品预处
理步骤同法操作，测定日间和日内相对标准差，其
中日内测定 5 次，日间测定 5 d，每天 1 次，40、10、
2.5 μg/mL 苦参素的日内 RSD 分别为 3.2%、0.5%、
0.8%，日间 RSD 分别为 2.1%、1.3%、0.8%，均小
于 6.5%。
2.5 生物样品稳定性
2.5.1 室温稳定性 将高、中、低（40、10、2.5
μg/mL）3 种质量浓度血浆样品，按血浆样品提取与
处理项下操作，于室温（18～22 ℃）放置 24 h 后，
测定其浓度，观察其稳定性。结果 1 h 的 RSD 分别
为 4.3%、2.7%、1.7%，24 h 后的 RSD 为 3.3%、1.5%、
1.3%（n＝5），高、中、低 3 种生物样品 RSD 均小
于 6.5%。
2.5.2 冻融稳定性 将高、中、低 3 种浓度血浆样
品，按血浆样品提取与处理项下操作，放入−20 ℃
冰箱保存 24 h，反复冻融 3 次后，测定其浓度，观
察其稳定性。结果冻融前的RSD分别为3.2%、3.8%、
1.3%，冻融后的 RSD 为 3.5%、2.3%、1.7%（n＝5），
高、中、低 3 种生物样品 RSD 均小于 6.5%。
2.5.3 长期稳定性 将高、中、低 3 种浓度血浆样
品，按血浆样品提取与处理项下操作，放入−20 ℃
冰箱保存，放置 15 d 后，测定其浓度，观察其稳定
性。结果 1 d 的 RSD 分别为 4.3%、2.8%、1.2%，
15 d 后 RSD 为 3.7%、2.5%、2.8%（n＝5），高、中、
低 3 种生物样品 RSD 均小于 6.5%。
2.6 药动学结果
2.6.1 药时曲线 结果见图 2。

图 2 大鼠 ip KU-PLGA-NS 和 KUI 血药浓度-时间曲线
( 01=± n , sx )
Fig. 2 Concentration-time couve of KU-PLGA-NS
and KUI in plasma ( 01=± n , sx )
2.6.2 KU-PLGA-NS 药动学参数估算 根据血药
浓度时间数据拟和符合一级吸收的一房室模型，按
权重系数 1/C2 进行计算，其药动学参数见表 1。其
中 3 个剂量 KU-PLGA-NS 的 t1/2Ke、tmax 无显著性差
异，而 AUC0-t 和 Cmax 呈剂量依赖性增加。
3 讨论
本研究表明 KU-PLGA-NS（3、6、12 mg/kg）
的血药经时过程均符合一级吸收的一房室模型，其
主要药动学参数 AUC、Cmax 在 3～12 mg/kg 呈剂量
依赖性增加，提示 KU-PLGA-NS 在这个范围内药物
剂量与血药浓度呈线性关系。tmax 和 t1/2Ke都显著延
表 1 大鼠 ip KU-PLGA-NS 和 KUI 的药动学参数 ( 01=± n , sx )
Table 1 Pharmacokinetic parameters of KU-PLGA-NS and KUI by ip injection in rats ( 01=± n , sx )
KU-PLGA-NS
参数 单位
3 mg·kg−1 6 mg·kg−1 12 mg·kg−1
KUI 6 mg·kg−1
t1/2Ka min 3.71±2.34 3.69±1.94* 3.45±2.49 2.63±3.39
t1/2Ke min 90.71±2.34 91.69±1.94** 92.45±2.49 11.51±2.47
AUC0-t mg·L−1·min 271.36±78.87 785.17±170.21** 996.24±165.43 342.43±54.49
tmax min 10.00±0.82 10.10±0.74* 10.20±1.21 5.09±0.97
Cmax mg·L−1 11.82±2.29 28.48±5.40** 40.21±5.13 35.05±2.84
CL L·min−1·kg−1 0.01±0.00 0.01±0.00 0.01±0.00 0.01±0.00
与 KUI 组比较：*P＜0.05 **P＜0.01
*P<0.05 **P<0.01 vs KUI group
50
40
30
20
10
0
2 5 10 20 45 60 90 120 240
t / min
KU-PLGA-NS 3 mg·kg−1
KU-PLGA-NS 6 mg·kg−1
KU-PLGA-NS 12 mg·kg−1
KUI 6 mg·kg−1
血
药
浓
度
/(μ
g·
m
L−
1 )

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •529•
长，提示药物吸收较快，消除较慢，在体内驻留时
间比市售普通粉针剂长，解决了普通粉针剂生物利
用度低的问题。该结果为进一步开发和临床合理应
用苦参素奠定了理论基础。
本实验采用了 KU-PLGA-NS 和 KUI 平行比较
的方法，考察纳米剂型的药动学特征，为临床用药
提供参考。从实验得到数据可以看出，中剂量
KU-PLGA-NS 大鼠注射后其 AUC 和 Cmax 高于苦参
素原料药，KU-PLGA-NS 的 AUC0-t 为（785.57±
170.92）mg·L−1·min，Cmax 为（28.48±5.40）mg/L，
而 KUI 的分别为（342.43±54.49）mg·L−1·min，
（18.51±2.47）mg/L，表明 KU-PLGA-NS 与 KUI
相比，具有吸收完全、生物利用度高的特点。中剂
量 KU-PLGA-NS 和 KUI 的 t1/2Ke 分别为（91.69±
1.94）min、（11.51±2.47）min，这些结果提示，
KU-PLGA-NS 比 KUI 更快、更多地分布到组织内，
在体内的存在时间更长，有利于药物活性的发挥。
KU-PLGA-NS 是否更易进入组织，是否对某些组织
具有靶向性，需要通过进一步开展药物组织分布研
究加以证明，这对进一步完善苦参素药动学研究有
着重要意义。
参考文献
[1] 朱晓伟, 宝金荣, 布 仁. 苦参碱和氧化苦参碱抗肿瘤
作用研究进展 [J]. 中草药, 2009, 40(增刊): 82-84.
[2] 徐 彬, 杨惠娣, 侯爱君. 苦参碱治疗慢性病毒性肝炎
的作用 [J]. 国外医药合成药生化药: 制剂分册, 2002,
23(6): 356-358.
[3] 肖贵南, 陆惠文, 宜 全. 注射用苦参素细菌内毒素检
查法的研究 [J]. 中草药, 2005, 36(9): 1332-1335.
[4] 李正蓉. 苦参碱的药理与临床研究进展 [J]. 华西药学
杂志, 2003, 18(6): 435-437.
[5] 贾建伟, 杨积明, 袁桂玉, 等. 苦参素治疗慢性乙型肝
炎的疗效及其影响因素探讨 [J]. 中草药, 2003, 34(11):
1030-1031.
[6] Zhang L, Liu W, Zhang R, et al. Pharmacokinetic study of
matrine, oxymatrine and oxysophocarpine in rat plasma
after oral administration of Sophora flavescens Ait extract
by liquid chromatography tandem mass spectrometry [J].
Pharm Biomed Anal, 2008, 47(4-5): 892-598.
[7] 兰雪莲, 贾晓斌, 陈 彦, 等. 几种纳米给药系统在改
善中药 ADME/Tox 性质方面的应用 [J]. 中草药, 2008,
39(11): 1746-1748.
[8] 陈 纭, 金 涌, 李 俊. 苦参碱靶向缓释纳米球的制
备及影响因素考察 [J]. 时珍国医国药, 2009, 20(5):
1203-1206.