全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 2 期 2011 年 2 月 • 234 •
枸骨根的化学成分研究
范琳琳 1, 2，陈 重 1，冯育林 2，李笑然 1，许琼明 1*，杨世林 1, 2
1. 苏州大学药学院，江苏 苏州 215123
2. 江西中医学院，江西 南昌 330004
摘 要：目的 研究冬青科冬青属植物枸骨 Ilex cornuta 根中的化学成分。方法 运用硅胶、Sephadex LH-20 柱色谱对枸骨
根中的化学成分进行分离，通过理化常数、质谱和核磁技术鉴定化合物。结果 从枸骨根中分离并鉴定了 11 个化合物，分
别为 β-谷甾醇（1）、羽扇豆醇（2）、白桦酸（3）、常春藤皂苷元（4）、3β-乙酰基-28-羟基-乌苏醇（5）、乌苏酸（6）、19α-
羟基乌苏酸（7）、3β-乙酰基-乌苏酸（8）、23-羟基-乌苏甲酯（9）、庚酸（10）、β-胡萝卜苷（11）。结论 化合物 4、5、8、
9 为首次从该属植物中分离得到。化合物 3 为首次从该植物中分离得到。
关键词：枸骨；三萜；白桦酸；常春藤皂苷元；3β-乙酰基-28-羟基-乌苏醇
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)02 - 0234 - 03
Chemical constituents in roots of Ilex cornuta
FAN Lin-lin1, 2, CHEN Zhong1, FENG Yu-lin2, LI Xiao-ran1, XU Qiong-ming1, YANG Shi-lin1, 2
1. School of Pharmacy, Medical College of Soochow University, Suzhou 215123, China
2. Jiangxi College of Traditonal Chinese Medicine, Nanchang 330004, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents of the roots of Ilex cornuta. Methods The compounds were isolated and
purified by silica gel, Sephadex LH-20, medium pressure column chromatography, and semi-preparative liquid chromatography, and
their structures were elucidated by chemical properties and spectroscop analyses. Results Eight compounds were isolated and their
structures were identified to be β-sitosterol (1), lupeol (2), betulonic acid (3), hede-ragenin (4), 3β-acetoxy-28-hydroxyurs-12-ene (5),
ursolic acid (6), 19α-hydroxy ursolic acid (7), 3β-acetoxy-ursolic acid (8), 23-hydroxyl-methyl ursolate (9), heptanoic acid (10),
β-daucosterol (11). Conclusion Compounds 4, 5, 8, and 9 are obtained from this genus for the first time, and compound 3 is obtained
from this plant for the first time.
Key words: Ilex cornuta Lindley; triterpenoid; betulonic acid; hede-ragenin; 3β-acetoxy-28-hydroxyurs-12-ene

枸骨 Ilex cornuta Lindley 为冬青科冬青属植物，
常绿灌木或乔木，主要分布于我国长江中下游地区，
其根、枝、叶和果均可入药，其叶既为常用中药，
也为苦丁茶的主要来源之一[1]。根味苦，性凉，无
毒，功能补肝肾、健腰膝、除风湿、凉血清热；主
治肝肾不足、腰膝腿软、关节疼痛、头风、牙痛[1]。
该植物主要含有三萜、黄酮及其苷类化合物，具有
抗生育、免疫抑制、心血管系统保护的作用。对其
根部化学成分的研究为进一步阐明该植物的活性成
分奠定了基础，并为建立其药材质量标准提供参考。
本实验从枸骨根的乙醇提取物中分得 11 个化合物，
分别鉴定为 β-谷甾醇（1）、羽扇豆醇（2）、白桦酸
（3）、常春藤皂苷元（4）、3β-乙酰基-28-羟基-乌苏醇
（5）、乌苏酸（6）、19α-羟基乌苏酸（7）、3β-乙酰基-
乌苏酸（8）、23-羟基-乌苏甲酯（9）、庚酸（10）、
胡萝卜苷（11）。化合物 4、5、8、9 为首次从该属
植物中分得，化合物 3 为首次从该植物中分得。
1 仪器和材料
旋转蒸发仪（东京理化器械独资工厂）；半制备
高效液相色谱仪（LC—20AT，SPD—20A，日本岛
津公司）；C18半制备色谱柱（10 mm×250 mm，5
μm，美国 Kromsil 公司）；中压液相色谱仪（Buchi
公司）；Sephadex LH-20 凝胶（美国GE 公司）；XT—5
显微熔点测定仪（北京科仪电光仪器厂）；AutopolIV
型旋光仪（美国鲁道夫公司）；UNITY INOVA 500
核磁共振仪（美国瓦里安公司，TMS 内标）；TOF-MS
（英国 Micromass 公司）；化学试剂（分析纯，国药
集团化学试剂有限公司）；氘代试剂（德国 Merck

收稿日期：2010-05-16
基金项目：苏州大学青年基金项目（2008）；苏州大学大学生创新试验计划项目资助（2009DC03092）
作者简介：范琳琳，女，在读硕士研究生，河南平顶山人。
*通讯作者 许琼明 Tel: (0512)65882080 E-mail: xuqiongming@suda.edu.cn
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公司）；薄层色谱硅胶板（HSGF254，烟台市芝罘黄
务硅胶开发试验厂出品）；各种柱色谱用硅胶均为青
岛海洋化工厂出品。枸骨根药材于 2007 年 12 月采
自湖北省蕲春县，经苏州大学药学院生药教研室李
笑然教授鉴定为冬青科冬青属植物枸骨 Ilex cornuta
Lindley 的干燥根。
2 提取与分离
干燥的枸骨根 17 kg，经 8 倍量 90％乙醇冷浸
过夜后，加热回流 2 h，滤过；药渣经 8 倍量 90%
乙醇提取 2 h；合并两次提取液，纱布滤过，所得滤
液经减压浓缩，回收乙醇得流浸膏 2.0 L。将流浸膏
用水分散，分别用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁
醇多次萃取，各部分萃取液经减压浓缩，得石油醚
提取物 212.7 g、氯仿提取物 50.7 g、醋酸乙酯提取
物 68.1 g、正丁醇提取物 623.9 g。石油醚及氯仿提
取物分别反复经硅胶柱色谱，用石油醚-醋酸乙酯梯
度洗脱，并结合 Sephadex LH-20 柱色谱，以氯仿-
甲醇（1︰1）洗脱，半制备高效液相色谱制备，从
石油醚提取物中分离得到化合物 1～3，从氯仿提取
物中分离得到化合物 4～8，从醋酸乙酯提取物中分
离得到化合物 9～11。
3 结构鉴定
化合物 1：无色针晶（氯仿），mp 145～147 ℃。
Liebermann-Burchard 反应阳性，Molish 反应阴性。
与 β-谷甾醇对照品进行薄层色谱对比，10%硫酸-
乙醇显示紫红色，Rf 值与显色行为与对照品一致，
且混合后熔点不下降，鉴定化合物 1 为 β-谷甾醇。
化合物 2：无色粉末结晶（氯仿），mp 210 ℃。
Liebermann-Burchard 反应阳性，Molish 反应阴性。
EI-MS m/z: 426 [M]＋, 316, 315, 218, 207, 204, 203,
189, 135, 109。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 0.97
(3H, s, H-23), 0.76 (3H, s, H-24), 0.83 (3H, s, H-25),
1.04 (3H, s, H-26), 0.95 (3H, s, H-27), 0.79 (3H, s,
H-28), 1.58 (3H, s, H-30), 3.18 (1H, dd, J = 11.4, 4.9
Hz, H-3), 4.57 (1H, s, H-29α), 4.69 (1H, s, H-29β)。
13C-NMR 数据见表 1。以上数据与文献报道的羽扇
豆醇基本一致[2]。
化合物 3：白色粉末（氯仿），mp 286～288 ℃。
Liebermann-Burchard 反应阳性。EI-MS m/z: 456 [M]＋,
438, 248, 220, 207, 189, 175。1H-NMR (500 MHz,
CDCl3) δ: 1.71 (3H, s, H-30), 1.02 (3H, s, H-27), 0.98
(3H, s, H-26), 0.97 (3H, s, H-23), 0.82 (3H, s, H-25),
0.76 (3H, s, H-24), 3.19 (1H, dd, J = 11.3, 4.8 Hz,
H-3), 2.41 (1H, m, H-19), 4.58 (1H, s, H-29α), 4.68
(1H, s, H-29β)。13C-NMR 数据见表 1。以上数据与
文献报道的白桦酸基本一致[3]。
化合物 4：白色粉末（氯仿）。1H-NMR (500 MHz,
CDCl3) δ: 1.23 (3H, s, H-24), 1.02 (3H, s, H-30), 0.99
(3H, s, H-27), 0.79 (3H, s, H-29), 3.29 (3H, s, H-25),
0.76 (3H, s, H-26), 4.21 (1H, dd, J = 11.0 ,5.37 Hz,
H-3), 3.27 (1H, dd, J = 12.1, 4.2 Hz, H-18), 5.27 (1H,
br s, H-12), 4.18 (1H, d, J = 10.6 Hz, H-23α), 3.71
(1H, d, J = 10.6 Hz, H-23β)。13C-NMR 数据见表 1。
以上数据与文献报道的常春藤皂苷元基本一致[4]。
化合物 5：无色针晶（氯仿），mp 264～267 ℃。
EI-MS m/z: 484 [M]＋, 466, 453, 424, 406, 393, 286,
269, 255, 249, 234, 216。1H-NMR (500 MHz, CDCl3)
δ: 1.10 (3H, s, H-24), 1.01 (3H, s, H-30), 0.98 (3H, s,
H-23), 0.93 (3H, s, H-29), 0.88 (3H, s, H-25), 0.87
(3H, s, H-24), 0.81 (3H, s, H-26), 2.05 (3H, s, OCH3),
3.19 (1H, d, J = 11.0 Hz, H-28α), 3.50（1H, d, J = 11.0
Hz, H-28β ), 4.50 (1H, dd, J = 6.0, 10.0 Hz, H-3), 5.14
(1H, br s, H-12)。13C-NMR 数据见表 1。以上数据与文
献报道的 3β-乙酰基-28-羟基-乌苏醇基本一致[5-7]。
化合物 6：白色粉末（氯仿），mp 264～266 ℃。
EI-MS m/z: 456 [M]＋。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ:
1.22 (3H, s, H-24), 1.12 (3H, s, H-25), 1.08 (3H, s,
H-26), 0.95 (3H, s, H-27), 0.85 (3H, s, H-23), 0.93
(3H, s, H-29), 0.78 (3H, s, H-30), 2.03 (3H, s, OCH3),
3.20 (1H, m, H-3α), 5.25 (1H, br s, H-12)。13C-NMR 数
据见表 1。以上数据与文献报道的乌苏酸基本一致[8]。
化合物 7：白色粉末（氯仿），mp 298～300 ℃。
EI-MS m/z: 477 [M]＋。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ:
0.78 (3H, s, H-23), 1.21 (3H, s, H-24), 1.26 (3H, s,
H-25), 1.26 (3H, s, H-26), 1.63 (3H, s, H-27), 0.99
(3H, d, J = 6.4 Hz, H-29), 0.92 (3H, d, J = 6.4 Hz,
H-30), 3.44 (1H, dd, J = 11.0, 5.6 Hz, H-3), 3.06 (1H,
s, H-18), 5.64 (1H, d, J = 12.8 Hz, H-12)。13C-NMR
数据见表 1。以上数据与文献报道的 19α-羟基乌苏
酸基本一致[9]。
化合物 8：白色粉末（氯仿），mp 248～250 ℃。
EI-MS m/z: 501 [M]＋。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ:
0.78 (3H, s, H-23), 0.94 (3H, s, H-24), 0.96 (3H, s,
H-25), 0.87 (3H, s, H-26), 1.08 (3H, s, H-27), 0.85
(3H, s, H-29), 0.92 (3H, s, H-30), 2.05 (3H, s,
OCH2CH3), 4.50 (1H, t, OCH2CH3), 5.25 (1H, d, J =
12.8 Hz, H-12)。13C-NMR 数据见表 1。以上数据与
文献报道的 3β-乙酰基-乌苏酸基本一致[10]。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 2 期 2011 年 2 月 • 236 •
表 1 化合物 2～9 的 13C-NMR 数据（125 MHz，CDCl3）
Table 1 13C-NMR Spectral data of compounds 2—9 (125 MHz, CDCl3)
位置 2 3 4 5 6 7 8 9
C-1 38.8 38.7 38.8 38.5 38.8 39.9 38.3 32.9
C-2 27.5 27.4 27.3 26.0 27.2 37.0 24.1 27.3
C-3 79.0 79.0 79.0 80.9 79.0 77.9 80.9 79.0
C-4 38.9 38.7 42.4 38.0 38.6 39.8 37.7 38.0
C-5 55.3 55.3 47.6 55.3 55.2 54.7 55.3 55.2
C-6 18.4 18.3 18.4 18.2 18.3 25.6 18.2 18.3
C-7 34.3 34.3 33.2 32.8 33.0 39.1 32.9 33.0
C-8 40.0 40.9 39.8 40.1 38.8 39.9 39.5 39.4
C-9 50.5 50.4 47.9 47.6 47.5 54.7 47.5 47.7
C-10 37.2 37.3 36.9 36.8 37.0 25.6 36.9 36.9
C-11 20.9 20.9 23.6 23.3 17.0 26.7 23.4 23.3
C-12 25.2 25.2 122.4 124.9 125.9 128.0 125.8 125.1
C-13 38.1 38.9 144.9 138.8 137.9 137.8 138.0 138.7
C-14 42.9 42.7 42.4 42.1 42.0 40.1 42.0 42.1
C-15 27.5 29.9 28.1 26.0 28.1 38.2 28.1 28.1
C-16 35.6 33.9 23.6 23.4 24.2 32.3 23.6 23.4

化合物 9：白色粉末（氯仿），mp 234～236 ℃。
FAB-MS m/z: 477 [M＋H]＋。1H-NMR (500 MHz,
CDCl3) δ: 1.16 (3H, s, H-24), 1.02 (3H, s, H-25), 1.01
(3H, s, H-26), 0.95 (3H, s, H-27), 0.98 (3H, d, J = 6.4
Hz, H-29), 0.92 (3H, d, J = 6.4 Hz, H-30), 2.03 (3H, s,
OCH3), 4.17 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-23α), 3.71 (1H, d,
J = 11.03 Hz, H-23β), 4.23 (1H, dd, J = 5.6, 12.5 Hz,
H-3), 5.12 (1H, br s, H-12)。13C-NMR 数据见表 1。以
上数据与文献报道的23-羟基-乌苏甲酯基本一致[5,11]。
化合物 10：白色粉末（氯仿），溴钾酚绿反应
显阳性，提示结构中含有羧基。1H-NMR (500 MHz,
CDCl3) δ: 0.88 (3H, t, J = 6.5 Hz, CH3), 1.27 (8H,
overlap, H-3, 4, 5, 6), 1.58 (2H, m, H-2)为直链烷烃
取代信号。EI-MS m/z: 130 [M]＋, 113, 85, 73, 60, 45。
综合以上数据推断化合物 10 为庚酸[12]。
化合物 11：白色粉末（甲醇），mp 287～289 ℃。
Liebermann-Burchard 反应阳性，Molish 反应阴性。
与 β-胡萝卜苷对照品进行薄层色谱对比，10%硫酸-
乙醇显色，Rf 值与显色行为与对照品一致，且二者混
合后熔点不下降。故鉴定化合物 11 为 β-胡萝卜苷。
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