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Determination of naringin and neohesperidin in Aurantii Fructus from different habitats

不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的测定



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 7 期 2012 年 7 月

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不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的测定
郭增喜 1,李文庭 1,李兆奎 2
1. 浙江省食品药品检验所,浙江 杭州 310004
2. 台州市食品药品检验所,浙江 台州 318000
摘 要:目的 测定不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的量,研究不同产地枳壳的质量差异。方法 采用高效液相色谱法测
定,色谱条件为 Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(20∶80)(用磷酸调节 pH 值为 3);体
积流量 1.0 mL/min;柱温 30 ℃;检测波长 283 nm。结果 朱栾枳壳未检出柚皮苷和新橙皮苷成分;江枳壳、川枳壳、湘枳
壳和常山胡柚均检出柚皮苷和新橙皮苷成分;陕西枳壳未检出新橙皮苷。江枳壳含 7.5%柚皮苷、5.6%新橙皮皮苷,量均为
最高。结论 朱栾枳壳与其他产地枳壳的成分有差异,不含有《中国药典》2010 年版规定的柚皮苷和新橙皮苷成分。
关键词:枳壳;朱栾枳壳;柚皮苷;新橙皮苷;HPLC
中图分类号:R286.022 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2012)07 - 1347 - 02
Determination of naringin and neohesperidin in Aurantii Fructus
from different habitats
GUO Zeng-xi1, LI Wen-ting1, LI Zhao-kui2
1. Zhejiang Institute for Food and Drug Control, Hangzhou 310004, China
2. Taizhou Institute for Food and Drug Control, Taizhou 318000, China
Key words: Aurantii Fructus; Citrus aurantium L. var. decumana Bonar. (Zhuluan); naringin; neohesperidin; HPLC

枳壳来源于芸香科植物酸橙 Citrus aurantium L.
及其栽培变种的干燥未成熟果实,是一种常用中
药[1-3]。栽培变种包括黄皮酸橙 C. aurantium L. CV.
Huangpi-Suanchen、代代花 C. aurantium L. var. amara
Engl.、朱栾 C. aurantium L. var. decumana Bonar. 及
塘橙 C. aurantium L. CV. Tangcheng。枳壳主产于江
西、四川和湖南,分别称为江枳壳、川枳壳和湘枳
壳,为枳壳的主流品种。浙江是传统的枳壳产地之
一,有金华产的代代花枳壳和温州产的朱栾枳壳。
本实验收集 6 个不同产地的枳壳样品,参照《中国
药典》2010 年版方法,测定不同产地的枳壳中柚皮
苷和新橙皮苷的量,为枳壳的质量控制提供依据。
1 材料
Agilent 1100 系列高效液相色谱仪(G1322A 脱
气机、G1313A 自动进样仪、G1316A 柱温箱、
G1314B 紫外检测器)和 Agilent Chemstation 工作
站;Metiler AE240 型电子天平。
柚皮苷(批号 0722-200108)、新橙皮苷(批号
111857-201001)对照品由中国药品生物制品检定所
提供。乙腈为色谱纯,水为重蒸水,甲醇、磷酸为
分析纯。枳壳 Aurantii Fructus 样品由郭增喜副主任
中药师鉴定,见表 1。
2 方法与结果
2.1 色谱条件[1]
Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),
流动相为乙腈-水(20∶80)(用磷酸调节pH值为3);
体积流量 1.0 mL/min;柱温 30 ℃;检测波长 283
nm。色谱图见图 1。
表 1 样品信息
Table 1 Information of Aurantii Fructus
编号 样 品 拉丁名 产 地 收集时间
1 朱栾
枳壳
Citrus aurantium var.
decumana
浙江省洞
头县
2011-08
2 江枳壳 C. aurantium 江西 2011-01
3 川枳壳 C. aurantium 四川 2011-01
4 湘枳壳 C. aurantium 湖南 2011-01
5 常山胡柚 C. changshan-huyou 浙江衢州 2011-01
6 陕西枳壳 C. wilsonii 陕西 2011-01

收稿日期:2012-03-21
作者简介:郭增喜,副主任中药师,从事中药材真伪鉴定及质量检验研究。Tel: (0571)864594258 E-mail: guozengxi@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 7 期 2012 年 7 月

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a-柚皮苷 b-新橙皮苷
a-naringin b-neohesperidin
图1 混合对照品 (R) 和不同产地枳壳样品 (1~6) 的HPLC图
Fig. 1 HPLC chromatograms of mixed reference substances (R)
and other Aurantii Fructus (1-6) from different habitats
2.2 对照品溶液的制备
分别精密称取柚皮苷和新橙皮苷对照品适
量,加甲醇制成含柚皮苷 80.32 μg/mL 和新橙皮苷
86.04 μg/mL 的混合对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取各样品粗粉约 0.2 g,置具塞锥形瓶
中,精密加入甲醇 50 mL,称定质量,加热回流 1.5
h,放冷,用甲醇补足减失的质量,摇匀,滤过。精
密量取续滤液 10 mL,置 25 mL 量瓶,加甲醇至刻
度,摇匀,即得。
2.4 线性关系考察
精密吸取混合对照品溶液 0.5、1、3、5、10、
15 µL 注入液相色谱仪,色谱峰峰面积为纵坐标(Y),
进样量为横坐标(X)绘制标准曲线,柚皮苷与新橙
皮苷线性回归方程分别为:柚皮苷 Y=1.481 4 X-
1.663 7(r=0.999 9),新橙皮苷 Y=1.541 X+25.472
(r=0.999 8),结果表明柚皮苷进样量在 40.16~
1204.8 ng,新橙皮苷在 43.02~1 290.6 ng 与峰面积
呈良好线性关系。
2.5 精密度试验
精密吸取混合对照品溶液 10 μL,按“2.1”项
下色谱条件连续进样 6 次,测定其柚皮苷和新橙皮
苷峰面积的 RSD 分别为 0.28%和 0.45%。
2.6 稳定性试验
取川枳壳供试品溶液按“2.1”项下色谱条件分别
在 0、2、4、8、12、18、24 h 进样,测定柚皮苷和新
橙皮苷峰面积,峰面积 RSD 分别为 0.45%和 1.06%。
2.7 重复性试验
精密称取川枳壳样品 6 份,依“2.3”项下方法
分别制备供试品溶液,测得柚皮苷和新橙皮苷成分
的质量分数的 RSD 分别为 0.58%和 0.68%。
2.8 加样回收率试验
精密称取已测定的川枳壳样品 0.1g,共 6 份,
分别加入含柚皮苷 0.201 mg/mL、新橙皮苷 0.196
mg/mL 对照品溶液 25 mL,再加入甲醇 25 mL。按
“2.3”项下方法制备供试品溶液,依法测定柚皮苷
和新橙皮苷峰面积,并计算回收率,柚皮苷和新橙
皮苷的回收率分别为 99.83%和 99.92%,RSD 分别
为 1.61%和 1.00%。
2.9 样品测定
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10
μL,注入液相色谱仪,样品测定结果见表 2。
表 2 不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的量
Table 2 Determination of naringin and neohesperidin
in Aurantii Fructus from different habitats
样品 柚皮苷 / % 新橙皮苷 / %
1 - -
2 7.5 5.6
3 4.9 4.8
4 4.3 2.2
5 2.6 1.5
6 5.2 -
“-”-未检出
“-”- undetected
上述样品中,朱栾枳壳未检出柚皮苷和新橙皮
苷成分;江枳壳、川枳壳和湘枳壳均检出《中国药
典》2010 版规定的柚皮苷和新橙皮苷成分;陕西枳
壳未检出新橙皮苷;常山胡柚也能检出柚皮苷和新
橙皮苷成分。朱栾枳壳与其他来源枳壳成分有差异。
3 讨论
中药材所含成分受到品种、产地、采收时间和
加工方法等的影响,在多来源的药材中品种的变化
直接影响成分的不同;根据本实验结果,江枳壳含
柚皮苷 7.5%,新陈皮苷 5.6%,量均为最高。朱栾
枳壳中未能检出规定的柚皮苷成分。这说明在枳壳
等药材的检验中,必须做好品种鉴定,保证来源符
合规定。执行标准时应该注意指标成分的检验,只
有来源和指标成分均符合检测规定才是合格药材。
参考文献
[1] 中国药典 [S]. 一部. 2010.
[2] 董 玄, 高文远, 李凤阁, 等. RP-HPLC 法测定枳壳药
材中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷 [J]. 中草药, 2009,
40(增刊): 283-284.
[3] 中国药品生物制品检定所 . 现代实用本草 [M]. 北
京: 人民卫生出版社, 2001.
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