全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •538•
阿魏酸钠与苦参素的协同抗炎作用研究
孙 妍 1，刘汉清 1，陈方芳 1，高 艳 1，许明波 2，刘志峰 1*
1. 烟台大学药学院，山东 烟台 264005
2. 北京双鹭药业股份有限公司，北京 100041
摘 要：目的 探讨阿魏酸钠（sodium ferulate，SF）与苦参素（kushenin）即氧化苦参碱（oxymatrine，OMT）联合用药的
协同抗炎作用。方法 采用小鼠耳肿胀、大鼠足肿胀、大鼠棉球肉芽肿模型观察 SF 与 OMT 联合用药的抗炎作用。体外采
用 RAW264.7 细胞观察联合用药对脂多糖（LPS）诱导的 NO 合成的影响，用 Griess 法测定 NO 生成量。结果 SF 与 OMT
联合应用时，可明显降低二甲苯所致的小鼠耳肿胀和角叉菜胶所致的大鼠足肿胀，大剂量可减轻大鼠棉球肉芽肿的质量，但
单独给予 SF 或 OMT 对上述 3 种炎症模型均无显著作用。体外实验结果显示，SF 与 OMT 联合应用可明显降低 LPS 诱导的
RAW264.7 细胞 NO 的产生，且二者之间存在协同作用。结论 SF 与 OMT 联合应用具有明显的协同抗炎作用，降低 LPS
诱导的炎性因子 NO 的产生，可能是其减轻炎症反应的机制之一。
关键词：阿魏酸钠（SF）；苦参素；氧化苦参碱（OMT）；抗炎；协同作用；一氧化氮（NO）
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)03 - 0538 - 04
Observation of synergistic anti-inflammatory effect of combination of sodium
ferulate and oxymatrine
SUN Yan1, LIU Han-qing1, CHEN Fang-fang1, GAO Yan1, XU Ming-bo2, LIU Zhi-feng1
1. School of Pharmacy, Yantai University, Yantai 264005, China
2. Beijing SL Pharmaceutical Co., Ltd., Beijing 100041, China
Abstract: Objective To assess the synergistic anti-inflammatory effect of sodium ferulate (SF) and kushenin, i.e. oxymatrine (OMT).
Methods The anti-inflammatory effect of the combination of SF and OMT was evaluated on xylene-induced murine ear edema
model, carrageenin-induced rat paw edema model, and rat tampon-induced granuloma model in vivo. In vitro, the effect of SF and OMT
on the nitric oxide (NO) production induced by LPS was observed on RAW264.7 cells. The content of NO in the supernatant was
detected with Griess reagent. Results When SF was used in combination with OMT, the edema induced by xylene and carrageenin
was markedly inhibited, the weight of granuloma caused by tampon was also reduced in the high dose group, and the inhibition rate was
more considerable by combined treatment than those by SF or OMT alone. In vitro, the NO production induced by LPS was depressed
by combined treatment, and a synergistic anti-inflammatory effect was observed. Conclusion The present study demonstrats that the
combination of SF and OMT could exert conspicuous synergistic anti-inflammatory effect, and the mechanism may be related to the
inhibited effect of NO production in inflammatory factors induced by LPS.
Key words: sodium ferulate (SF); kushenin; oxymatrine (OMT); anti-inflammation; synergistic effect; nitric oxide (NO)

当归 Angelica sinensis (Oliv.) Diels 和苦参
Sophora flavescens Ait. 是我国传统医学中的常用
药材，且二者经常配伍使用，用于治疗痤疮、前列
腺炎等疾病。阿魏酸是当归的主要有效成分之一，
阿魏酸钠（sodium ferulate，SF）是阿魏酸的钠盐；
苦参素（kushenin）又名氧化苦参碱（oxymatrine，
OMT）是从苦参中提取的生物碱。近年研究表明
SF 和 OMT 均具有抗心律失常、抗炎及改善微循环
等多方面作用[1-2]。但有关 SF 与 OMT 联合用药的
相关研究未见报道。本实验初步探讨 SF 与 OMT 联
合用药对不同炎症模型的协同抗炎作用及其机制。
1 材料与仪器
1.1 动物
健康雄性昆明小鼠，体质量 18～22 g；健康雄

收稿日期：2010-05-20
作者简介：孙 妍（1984—），女，辽宁省辽阳市人，硕士。Tel: (0535)6706030-8021 E-mail: ronnie.8023@163.com
*通讯作者 刘志峰 Tel: (0535)2102150 E-mail: lzhf@luye.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •539•
性 SD 大鼠，体质量 220～250 g，由山东绿叶制药
股份有限公司提供，动物合格证号：SCXK(鲁)
20090009。
1.2 药品与试剂
SF（质量分数＞99%，批号 080303）购于丽珠集
团利民制药厂。OMT（质量分数＞98%，批号
20081204）由江苏天晟制药股份有限公司提供。地
塞米松（Dexamethasone，DEX）磷酸钠注射液为济
南利民制药有限责任公司产品，规格 5 mg/mL。角
叉菜胶、LPS 购于 Sigma 公司。二甲苯为莱阳市康
德化工有限公司产品。磷酸为天津市化学试剂厂产
品。磺胺、盐酸萘乙二胺为国药集团化学试剂有限
公司产品。
1.3 主要仪器
YLS—7B 足趾容积测量仪（济南益延科技发展
有限公司），SPX—150B—Z 生化培养箱（上海博迅
实业有限公司医疗设备厂），酶标仪（Bio. TEK
Synergy HT，美国），TGL—16G 型台式高速离心机
（上海医用分析仪器厂），BCN—1360 型超净工作台
（哈尔滨市东联电子技术开发有限公司），Nikon TE—
2000 倒置显微镜。
2 方法与结果
2.1 统计学处理
数据均以 sx ± 表示，各组间采用两样本均数 t
检验，用 Microsoft Excel 2003 完成，IC50 的计算应
用 SPSS17.0 软件完成。
2.2 SF 与 OMT 联合用药对二甲苯致小鼠耳肿胀的
影响[3-4]
将70只小鼠按体质量随机分为7组，即对照组、
DEX（1 mg/kg）组、SF（20 mg/kg）组、OMT（40 mg/kg）
组、SF＋OMT 低、中、高剂量［（10＋20）、（20＋
40）、（40＋80） mg/kg］组，每组 10 只。各组小鼠
分别 iv 相应药物，30 min 后每只小鼠均在右耳前后
两面涂布二甲苯（20 μL/只）致炎，左耳不做任何
处理。致炎 30 min 后脱臼处死动物，剪下双耳，用
8 mm 直径打孔器分别在两耳同一部位打下耳片，
用电子天平称质量。以每鼠右耳片质量减去左耳片
质量为肿胀度，结果见图 1。单独给予 SF（20 mg/kg）
或 OMT（40 mg/kg）未见明显抗炎作用（P＞0.05），
但当二者联合用药时，对二甲苯所致的小鼠耳肿胀
具有明显的抑制作用（P＜0.001）。SF＋OMT 低、
中、高剂量组小鼠的耳肿胀程度与对照组比较均有
显著差异（P＜0.01、0.001），且呈明显剂量关系。

与对照组比较：**P＜0.01 ***P＜0.001
**P<0.01 ***P<0.001 vs control group
图 1 SF 与 OMT 联合用药对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
( 01=± n , sx )
Fig. 1 Effect of SF combined with OMT on xylene-induced
ear edema in mice ( 01=± n , sx )
2.3 SF 与 OMT 联合用药对角叉菜胶致大鼠足跖
肿胀的影响[3,5]
将 70 只大鼠按体质量随机分为 7 组，分组及给
药剂量同“2.2”项。应用足趾容积测量仪测定各鼠
右后足容积作为给药前正常值。各组大鼠均右后足
跖 sc 1%角叉菜胶溶液 0.1 mL/只，2 h 后 iv 相应药
物，观察记录致炎 4 h 大鼠足跖容积数值的变化，
以致炎后右后足容积减去致炎前右后足容积为肿胀
度，结果见图 2。对照组大鼠足爪肿胀明显，SF 与
OMT联合用药组在致炎后 4 h大鼠的足爪肿胀度较
对照组显著降低（P＜0.05、0.01），而 SF 和 OMT
单独用药组对大鼠的足爪肿胀度未见明显影响。

与对照组比较：*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001
*P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001 vs control group
图 2 SF 与 OMT 联合用药对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的
影响 ( 01=± n , sx )
Fig. 2 Effects of SF combined with OMT on carrageenin-
induced hind paw edema in rats ( 01=± n , sx )
2.4 SF 与 OMT 联合用药对大鼠棉球肉芽肿形成的
影响[3,6]
将 70 只大鼠按体质量随机分为 7 组，分组及给
药剂量同“2.2”项。各组大鼠均以 10%水合氯醛
14
12
10
8
6
4
2
0
对照 DEX SF OMT 10+20 20+40 40+80
SF+OMT / (mg·kg−1)
肿
胀
度
/m
g
*** ***
*****
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
对照 DEX SF OMT 10+20 20+40 40+80
SF+OMT / (mg·kg−1)
肿
胀
度
/m
L
* *
**
***
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •540•
ip 麻醉，剪去腹部被毛，无菌条件下剪开两侧腹股
沟处皮肤，植入（50±1）mg 无菌干燥棉球（实验
前以电子天平精确称量，常规高压灭菌后备用），缝
合切口。术后尾 iv 受试药物，每天 1 次，连续给药
7 d。末次给药 2 h 后将大鼠处死，剥离并取出棉球
肉芽组织，置于 60 ℃烘箱中干燥 24 h，称质量，
减去棉球质量即为肉芽肿质量，结果见图 3。对照
组大鼠肉芽肿组织增生明显，单独给予 SF（20
mg/kg）或 OMT（40 mg/kg）均未见明显的抑制肉
芽肿生成的作用（P＞0.05），SF 与 OMT 联合用药
在中、低剂量时抗炎作用也不明显（P＞0.05），而
SF＋OMT 高剂量组和阳性药 DEX 组对棉球诱导的
大鼠肉芽组织增生有显著的抑制作用（P＜0.01、
0.001）。
2.5 SF与OMT联合用药对LPS诱导的RAW264.7
细胞 NO 生成的影响[7]

与对照组比较：**P＜0.01 ***P＜0.001
**P<0.01 ***P<0.001 vs control group
图 3 SF 与 OMT 联合用药对大鼠棉球肉芽肿的影响
( 01=± n , sx )
Fig. 3 Effect of SF combined with OMT on cotton ball
granuloma model in rats ( 01=± n , sx )
RAW264.7 细胞（购于中国科学院细胞库）用
RPMI 1640 完全培养基传代培养，实验时用 0.25%
胰酶消化后收集细胞，调节细胞密度为 1×106/mL，
加入到 96 孔培养板，每孔 100 μL，于 5% CO2、37
℃条件下培养 2 h，加入 LPS 2 μL/孔（控制其终质
量浓度为 1 μg/mL），各孔加入相应质量浓度的药
物，培养 24 h。吸取培养上清液 100 μL 加入 96 孔
板，加入等体积 Griess 试剂（5%磷酸配制 1%磺胺，
蒸馏水配制 0.1%盐酸萘乙二胺，临用前等体积混
合）与之混匀，室温避光静置 10 min，用酶标仪于
540 nm 处测定吸光度值。用亚硝酸钠绘制标准曲
线，计算样品中 NO 的量。由图 4-A 可见，单独给
予 SF≥100 mg/L 时，对 NO 合成具有明显的抑制作
用（P＜0.05、0.01）。单独给予 OMT，只有 400 mg/L
组显示出明显抑制作用（P＜0.01）。当 SF 与 OMT
以摩尔浓度比 1︰2 联合应用时，能显著抑制 LPS 诱
导的 NO 产生（P＜0.001），且其抑制率明显高于同
剂量下单独用药组。依据等效线图解法[8]做 SF 与
OMT 联合用药的等效线图，见图 4-B。SF、OMT
及联合用药组的半数抑制浓度（IC50）对数值分别
为 3.447、4.009、2.670。SF 与 OMT 联合用药组的
IC50 对数值在等效线以下，说明两者之间存在协同
作用。
3 讨论
炎症是机体对于刺激的一种防御反应，表现为
红、肿、热、痛和功能障碍。在炎症早期一般以变
质和血管反应为主，以发红、肿胀、疼痛等为主要
征候。后期则以增生为主，增生具有限制、清除病
原和病理产物的作用，有利于炎灶部位损伤的修复。

与对照组比较：*P＜0.05 **P＜0.01 ***P＜0.001
*P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001 vs control group
图 4 SF 与 OMT 联合用药对 LPS 诱导 RAW264.7 细胞合成 NO 的影响（n＝3）
Fig. 4 Effect of OMT combined with SF on LPS-induced NO production in RAW264.7 cells (n＝3)
50
40
30
20
10
0
6.25 12.5 25 50 100 200 400
N
O
抑
制
率
/%

ρ / (mg·L−1)
0 1 2 3 4 5
O
M
T
(lg
IC
50
)
6
5
4
3
2
1
0
SF (lg IC50)
SF
OMT
SF＋OMT
B
*
**
**
**
***
***
***
SF+OMT (lg IC50)
A
100
80
60
40
20
0
对照 DEX SF OMT 10+20 20+40 40+80
SF+OMT / (mg·kg−1)
肉
芽
肿
质
量
/m
g
***
**
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 3 期 2011 年 3 月 •541•
但增生也可造成局部组织结构改变，引起组织器官
不同程度的功能障碍。
近年来，中药的抗炎作用已得到广泛关注。临
床及实验研究证实，许多中药材或其有效成分具有
良好的抗炎作用，且不良反应少。可通过影响下丘
脑-垂体-肾上腺皮质轴的功能，影响花生四烯酸代
谢、免疫调节等发挥抗炎作用。当归和苦参是我国
传统医学中的常用药材，且二者经常配伍使用用于
治疗痤疮、前列腺炎等疾病。SF 和 OMT 是其中的
主要有效成分，研究表明，二者均具有抗炎活性[9-10]。
本实验结果表明，SF 与 OMT 联合应用可明显
减轻二甲苯、角叉菜胶和棉球异物所致的急、慢性
炎症反应，且其抗炎效果优于单独用药。SF 与 OMT
联合应用对 LPS 诱导的巨噬细胞 NO 生成有明显的
抑制作用，随着给药剂量增高，抑制作用增强，表
明抑制 NO 的产生可能是 SF 与 OMT 联合用药发挥
抗炎作用的机制之一。在等效线图上可见，SF 与
OMT 联合用药组的 IC50 在等效线以下，说明两者
之间存在协同作用。两者联合用药对其他炎症因子
生成的影响是否也具有协同作用，以及二者联合用
药抗炎的具体机制有待于进一步研究。
参考文献
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