全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 4 期 2012 年 4 月

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HPLC 法测定畲药地稔药材中没食子酸和槲皮素
刘 敏 1，李水福 1*，程科军 2
1. 丽水市食品药品检验所，浙江 丽水 323000
2. 同济大学丽水中药研究院，浙江 丽水 323000
摘 要：目的 建立畲药地稔药材中没食子酸和槲皮素的测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定，色谱柱为 Agilent-SB
C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇（A）-0.4%磷酸水溶液（B），梯度洗脱 0～7 min，5% A；7～9 min，5%～35%
A；9～11 min，35%～55% A；体积流量 1.0 mL/min，柱温 30 ℃；检测波长 254 nm。结果 没食子酸和槲皮素的线性范围
分别为 0.081 4～0.326 0 μg（r＝0.999 8），0.027 1～0.136 0 μg（r＝0.999 6）；平均加样回收率分别为 97.72%（RSD＝0.90%），
99.75%（RSD＝1.39%）。结论 该方法简便易行、准确、重现性好，可用于畲药地稔药材的质量控制。
关键词：地稔；没食子酸；槲皮素；HPLC；质量控制
中图分类号：R286.022 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)04 - 0721 - 03
Dtermination of gallic acid and quercetin in traditional She Medicine－Melastoma
dodecandrum by HPLC
LIU Min1, LI Shui-fu1, CHENG Ke-jun2
1. Lishui Institute for Food and Drug Control, Lishui 323000, China
2. Tongji University-Lishui Institute of Traditional Chinese Medicine, Lishui 323000, China
Key words: Melastoma dodecandrum Lour.; gallic acid; quercetin; HPLC; quality control

畲药地稔为野牡丹科植物地稔 Melastoma
dodecandrum Lour. 的全草，畲族称为嘎狗噜或粪
桶板，又名山地稔、地葡萄、金头石榴、铺地锦、
落地稔、地茄等，分布于长江以南的江西、福建、
浙江、广西、广东、贵州、云南等省区，瑶族、畲
族等少数民族民间使用较广泛[1-2]。现有《广东药
材标准》和《浙江省中药炮制规范》2005 年版正
式收载该药，特别是《浙江省中药炮制规范》以畲
药的名义收载，而且据本课题组开发的畲医药数据
库统计，有 20 多个地稔处方是极具开发前景的天
然药物。临床用于治疗高热、肿痛、咽喉肿痛、牙
痛、赤白血痢疾、黄疸、水肿、痛经、崩漏、带下、
疔疮、毒蛇咬伤等病症[3]。现有研究表明，地稔含
有多糖、黄酮类、氨基酸、酚类、常量和微量元素、
色素等多种化学成分，具有止血、抗氧化、抑制糖
基化终末产物（AGE）的生成、镇痛抗炎、降糖等
作用[4-6]。没食子酸具有抗菌、抗病毒等作用，槲
皮素具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘
作用，此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、
减少毛细血管脆性、调血脂、扩张冠状动脉、增
加冠脉血流量等作用。因此，以此两种成分同时
控制其药材、饮片、提取物及其制剂的质量有较
大的意义。
本实验采用HPLC法测定地稔中没食子酸和槲皮
素，研究表明该方法简便易行、准确、重复性好，可
用于畲药地稔药材的质量控制。
1 仪器与试药
Agilent 1200 高效液相色谱仪（美国安捷伦公
司）；电子天平（XS104，上海恒刚衡器天平有限公
司）。地稔药材采自丽水市莲都区，经丽水市食品药
品检验所中药师李水福主任鉴定为野牡丹科植物地
稔 Melastoma dodeccandrum Lour.（根据采集时间确
定批号分别为 20100501、20100613、20100822、
20110726、20110802、20110811）；没食子酸对照品
（批号 110831-200803）、槲皮素对照品（批号
100081-200907，质量分数为 96.5%）均购自中国药
品生物制品检定所。甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯，
水为娃哈哈纯净水。

收稿日期：2011-12-15
基金项目：浙江丽水市重点课题（20100410）
作者简介：刘 敏，女，硕士，主要研究方向为中药质量控制及分析等。Tel: (0578)2138744 E-mail: 2001lm2005@163.com
*通讯作者 李水福 Tel: (0578)2155989 E-mail: lsf6789@126.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 4 期 2012 年 4 月

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2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 Agilent-SB C18（150 mm×4.6 mm，5
μm），流动相为甲醇（A）-0.4%磷酸溶液（B），梯
度洗脱：0～7 min，5% A；7～9 min，5%～35% A；
9～11 min，35%～55% A；体积流量为 1.0 mL/min，
柱温 30 ℃，检测波长为 254 nm。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取没食子酸和槲皮素对照品适量，置同
一 50 mL 量瓶中，加 80%甲醇溶解并稀释至刻度，
摇匀，制成含没食子酸 271.4 μg/mL、槲皮素 271
μg/mL 的混合对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
精密称取经粉碎，过 3 号筛的地稔药材（批号
20110802）粉末 4.0 g（同时另取本品测定水分）置
锥形瓶中，精密加入 50 mL 甲醇-15%盐酸（4∶1），
密塞，称定质量，加热回流提取 3 h，放冷至室温，
再称定质量，用提取溶剂补足减失的质量，摇匀，
滤过，精密量取 5 mL 滤液置 10 mL 量瓶中，用提
取溶剂稀释至刻度，摇匀，用 0.45 μm 的微孔滤膜
滤过，滤液即为供试品溶液。
2.4 系统适应性试验
分别精密吸取对照品和供试品项下溶液，按
“2.1”项下色谱条件进样，记录色谱图，见图 1。在

1-没食子酸 2-槲皮素
1-gallic acid 2-quercetin
图 1 混合对照品 (A) 和地稔供试品 (B) 溶液的 HPLC 图谱
Fig. 1 HPLC chromatograms of mixed reference
substances (A) and sample (B)
该色谱条件下，没食子酸、槲皮素与其他成分可达
到基线分离，分离度均大于 1.5。对照品色谱峰与供
试品色谱峰中相对应色谱峰的紫外光谱吸收均一
致。结果表明在上述色谱条件下没食子酸和槲皮素
具有良好的分离效果。
2.5 线性关系考察
精密吸取混合对照品溶液适量，分别制成没食
子酸质量浓度为 16.284、27.140、37.996、48.852、
65.136 μg/mL，槲皮素质量浓度为 5.42、10.84、
16.26、21.68、27.10 μg/mL 的对照品溶液，准确吸
取 5 μL，按上述确定的色谱条件进行测定，分别以
对照品的（X）为横坐标，峰面积积分值（Y）为纵
坐标，得没食子酸回归方程为 Y＝2×106 X＋2.302 6，
r＝0.999 8，槲皮素回归方程为 Y＝6×104 X＋5.152 1，
r＝0.999 6。结果表明,没食子酸和槲皮素分别在
0.081 4～0.326 0、0.027 1～0.136 0 μg 内与峰面积
呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
精密吸取对照品溶液 5 μL，连续进样 5 次，测
得其峰面积，计算没食子酸峰面积的RSD为 0.46%，
槲皮素峰面积的 RSD 为 0.41%。
2.7 稳定性试验
精密吸取“2.3”项下制备的供试品溶液各 5 μL，
分别在 0、4、8、12、24 h 依次进样，测得其峰面
积，计算没食子酸峰面积的 RSD 为 0.83%，槲皮素
峰面积的 RSD 为 0.43%。
2.8 重复性试验
精密称取同一地稔药材（批号 20110802）粉末
5 份，照“2.3”项下制备，进样 5 μL，按干燥品计
算，没食子酸和槲皮素质量分数分别为 1.00、0.31
mg/g，RSD 分别为 0.86%、1.42%。
2.9 加样回收率试验
取已测定的地稔药材（批号 20110802）6 份，
各约 2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密
加入没食子酸、槲皮素对照品溶液 1 mL（质量浓度
分别为 1.76、0.590 mg/mL），按“2.3”项下方法，
制备供试品液，进样 5 μL，测定没食子酸和槲皮素
量，计算得没食子酸和槲皮素回收率分别为
97.72%、99.75%，RSD 分别为 0.90%、1.39%。
2.10 样品测定
取不同批号的样品粉末（过 3 号筛）约 4.0 g，
各 2 份，精密称定，按“2.3”项下方法制备供试品
溶液，分别测定并计算质量分数。结果见表 1。

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
A
B
1 2
1 2
t / min
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 4 期 2012 年 4 月

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表 1 地稔药材中没食子酸和槲皮素的测定结果 (n＝3)
Table 1 Determination of gallic acid and quercetin
in M. dodecandrum ( ＝n 3)
批号 没食子酸 / (mg·g−1) 槲皮素 / (mg·g−1)
20100501 0.99 0.28
20100613 0.85 0.29
20100822 1.02 0.26
20110726 0.96 0.33
20110802 1.00 0.31
20110811 1.92 0.24

3 讨论
经紫外扫描发现，没食子酸在 273、223 nm 波
长处有最大吸收，槲皮素在 254、359 nm 波长处有
最大吸收。经过比较发现在 254 nm 时，2 个对照品
吸收峰的峰形良好，吸收较强，所以选择 254 nm
为检测波长。
因没食子酸、槲皮素的极性差异较大，曾尝试
采用乙腈-0.2%磷酸溶液、甲醇-0.2%磷酸溶液、甲
醇-0.4%磷酸溶液为流动相，进行梯度洗脱。结果发
现，以甲醇-0.4%磷酸溶液进行梯度洗脱的分析效果
较优，分析时间短，分离度较高。
本实验发现采用甲醇-盐酸混合溶液提取的样
品能同时检测出 2 种成分，且盐酸酸度对提取影响
较大，通过比较发现以甲醇-15%盐酸（4∶1）作为
提取溶剂能将药材中的两种成分提取完全。
没食子酸和槲皮素为畲药地稔药材中的药理活
性成分，目前，尚无同时测定两种成分的研究报道。
本实验采用 HPLC 法同时测定畲药地稔药材中没食
子酸和槲皮素的量，研究表明该方法简便易行、准
确、重复性好，可用于畲药地稔药材的质量控制。
致谢：丽水市食品药品检验所中药师李建良副
主任组织的采药小组以及中药室全体同志对本课题
的大力支持与帮助。
参考文献
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[6] 李 丽, 周 芳, 黄琼珍. 地菍的化学成分和药理作用
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