全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 16 期 2013 年 8 月
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虎眼万年青提取物抗肿瘤和镇痛抗炎作用研究
于艳辉 1,高 陆 1,石 菊 1,王莲萍 2,孙佳明 3,许艳茹 1,白 冰 1*
1. 吉林修正药业新药开发有限公司,吉林 长春 130012
2. 吉林省现代中药工程研究中心有限公司,吉林 长春 130012
3. 长春中医药大学中医药与生物工程研发中心,吉林 长春 130117
摘 要:目的 观察虎眼万年青提取物抗肿瘤和镇痛、抗炎等作用。方法 制备肿瘤细胞 MFC、HepG-2、S180 荷瘤小鼠模
型,观察虎眼万年青提取物的抑瘤率;采用小鼠醋酸扭体实验观察虎眼万年青提取物的镇痛作用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿
胀实验观察虎眼万年青提取物的抗炎作用。结果 虎眼万年青提取物剂量分别为 5.0、2.5 g/kg 能有效抑制小鼠实体瘤的生长,
且有一定的剂量相关性(P<0.05、0.001);显著抑制醋酸致小鼠扭体反应,与模型组相比有显著差异(P<0.05、0.001);
对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有抑制作用,与模型组相比也有显著差异(P<0.05、0.01)。结论 虎眼万年青提取物具有一定的
抗肿瘤、镇痛、抗炎作用,具有良好的开发前景。
关键词:虎眼万年青提取物;抗肿瘤;抗炎;镇痛;扭体反应
中图分类号:R282.710.5 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2013)16 - 2282 - 03
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.16.017
Antitumor, analgesic, and anti-inflammatory effects of Ornithogalum caudatum
extracts
YU Yan-hui1, GAO Lu1, SHI Ju1, WANG Lian-pin2, SUN Jia-ming3, XU Yan-ru1, BAI Bing1
1. Jilin Xiuzheng Pharmaceutical Group New Drug Development Co., Ltd., Changchun 130012, China
2. Jilin Province Modern Chinese Medicine Engineering Research Center Co., Ltd., Changchun 130012, China
3. Development Center of Traditional Chinese Medicine and Bioengineering, Changchun University of Traditional Chinese
Medicine, Changchun 130117, China
Abstract: Objective To investigate the antitumor, analgesic, and anti-inflammatory effects of Ornithogalum caudatum extract
(OCE). Methods The MFC, HepG-2, and S180 tumor-bearing mice models were established, and the tumor inhibitory rate of OCE
was calculated; The analgesic effect of OCE was observed by acetic acid writhing test of mice; The anti-inflammatory effect of OCE
was observed in xylene-induced ear edema model of mice. Results OCE (5.0 and 2.5 g/kg) could effectively inhibit the growth of
solid tumors in tumor-bearing mice in a dose-dependent manner (P < 0.05, 0.001); Compared with the model group, OCE (5.0 and
2.5 g/kg) could significantly inhibit the writhing response (P < 0.05, 0.001) and xylene-induced ear edama (P < 0.05, 0.01).
Conclusion OCE has certain antitumor, analgesic, and anti-inflammatory effects, suggesting they may be worth further investigation.
Key words: Ornithogalum caudatum extracts; antitumor; anti-inflammation; analgesia; writhing response
虎眼万年青 Ornithogalum caudatum Ait 又名珍
珠草、胡连万年青,为百合科多年生草本植物,民
间全草入药,用于抗炎、抗肿瘤等[1]。研究表明虎
眼万年青皂苷(OSW-l)具有靶向抗癌作用,可直
接杀灭癌细胞,在对多种肿瘤细胞产生强细胞毒活
性的同时,对人正常细胞的毒性很小(IC50 为 1.51
μg/mL)[2]。虎眼万年青球茎中含大量的生物碱及其
他化学成分,已检测出的化学成分有 27 种[3]。许多
学者致力于研究其化学成分,希望发现比 OSW-1 活
性更强、毒性更低的成分。本实验通过观察虎眼万
年青提取物(Ornithogalum caudatum extracts,OCE)
的抗肿瘤、抗炎、镇痛作用,为其有效物质基础的
收稿日期:2013-04-25
基金项目:吉林省中医药局项目(pt091)
作者简介:于艳辉(1979—),女,学士,研究方向为药理学。Tel: (0431)85161453
*通信作者 白 冰 Tel: (0431)85161453 E-mail: 33063825@qq.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 16 期 2013 年 8 月
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进一步研究、开发和应用提供实验依据。
1 材料
1.1 药品与试剂
虎眼万年青乙醇提取物(深棕色),吉林修正药
业新药开发有限公司提供,每克浸膏含生药 4.6 g,
含总黄酮 21%(以芦丁计),批号 20090101;环磷
酰胺,上海华联制药有限公司,批号 09102921;阿
司匹林,河北天成药业有限公司,批号 08100501。
冰醋酸、二甲苯,北京化工厂。
1.2 动物及肿瘤细胞株
清洁级 ICR 小鼠,5~8 周龄,体质量(20±2)
g,吉林大学基础医学院动物实验中心提供,合格证
号:SCXK(吉)2007-0003。小鼠胃癌细胞株(MFC)、
小鼠肝癌细胞株(HepG-2)、小鼠肉瘤细胞株(S180),
由吉林大学基础医学院药理教研室常规传代培养。
1.3 仪器
LCZ5—2 型离心机,北京医用离心机厂;CDS—1
型倒置显微镜,重庆光学仪器厂; SW—CJ—IF 型
超净工作台,苏净集团苏州安泰空气技术有限公司。
2 方法
2.1 抗肿瘤作用实验
将 MFC、HepG-2、S180 细胞株用生理盐水洗涤,
台盼蓝计数后稀释成 2×106/mL,接种于 ICR 小鼠
腹腔内,每只 0.2 mL。于接种第 7 天,无菌条件下
取小鼠腹水,再次洗涤、计数,稀释至 5×106/mL,
取 0.2 mL,于 50 只小鼠(雌雄各半)右前肢腋下
接种制备实体瘤模型。接种次日将小鼠随机分为 5
组:模型组,环磷酰胺(30 mg/kg)阳性对照组,
虎眼万年青提取物高、中、低剂量(5.0、2.5、0.5 g/kg)
组。环磷酰胺组隔日 ip 给药 1 次,模型组每天 ig
蒸馏水 0.1 mL/10 g,虎眼万年青提取物各组每天 ig
相应剂量药物 1 次,连续给药 10 d。给药前、给药
后 5、10 d 分别称体质量。小鼠停药次日处死,剖
取皮下瘤块称质量,计算抑瘤率。
抑瘤率= (对照组平均瘤质量-给药组平均瘤质量) /
对照组平均瘤质量
2.2 镇痛作用实验[4]
50 只雄性 ICR 小鼠按体质量随机分为 5 组:模
型组,虎眼万年青提取物高、中、低剂量(5.0、2.5、
0.5 g/kg)组,阿司匹林(0.2 g/kg)阳性对照组。
各给药组每天 ig 给予相应药物 1 次,给药体积 0.2
mL/10 g,连续给药 5 d,模型组 ig 同体积蒸馏水。
末次给药后 1 h,各组小鼠 ip 0.6%冰醋酸 0.1 mL/10
g,观察 15 min 内小鼠扭体次数,计算扭体抑制率。
抑制率=(模型组小鼠平均扭体次数-给药组小鼠平均
扭体次数) / 模型组小鼠平均扭体次数
2.3 抗炎作用实验[5]
分组与给药同“2.2”项。末次给药后 1 h,各
组小鼠右耳两面均匀涂抹二甲苯 0.05 mL 致炎,左
耳涂抹生理盐水作为对照。致炎 2 h 后,小鼠脱臼
处死,用直径 6 mm 的打孔器在小鼠两耳相同部位
打孔,分别称耳片质量,计算肿胀度和抑制率。
肿胀度=右耳片质量-左耳片质量
抑制率=(模型组平均肿胀度-给药组平均肿胀度) /
模型组平均肿胀度
2.4 统计学处理
用 SPSS 19.0 统计学软件对实验数据进行方差
分析,组间比较采用 t 检验,数据用 ±x s 表示。
3 结果
3.1 对肿瘤生长的影响
与模型组相比,虎眼万年青提取物 5.0、2.5 g/kg
组及环磷酰胺组对接种 MFC、HepG-2、S180 肿瘤细
胞小鼠的肿瘤生长均有一定的抑制作用(P<
0.05、0.01、0.001),且有一定的剂量相关性。结果
见表 1。
3.2 虎眼万年青提取物的镇痛作用
与模型组相比,虎眼万年青提取物 5.0、2.5 g/kg
组及阿司匹林组对醋酸致小鼠扭体反应均有显著的
抑制作用(P<0.05、0.001),且有一定剂量相关性。
结果见表 2。
3.3 虎眼万年青提取物的抗炎作用
与模型组相比,虎眼万年青提取物 5.0、2.5 g/kg
及阿司匹林组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀均具有抑制
作用(P<0.05、0.01),且有一定剂量相关性。结
果见表 3。
4 讨论
近年来,虎眼万年青的药理作用受到广泛关注并
得到广泛研究,尤以对其抗肿瘤作用的研究最多[7]。
从该植物中分离出的皂苷 OSW-1 对肺癌、乳腺癌有
明显的抗癌活性;体外抗 P338 淋巴细胞白血病细
胞活性实验结果表明,OSW-1 的抗癌活性是抗癌药
物喜树碱、阿霉素、紫杉醇的 10~100 倍[6],并已
由 Deng 等[8]合成,用于临床。虎眼万年青多糖可以
促进 T 细胞的增殖反应和 IL-2 的分泌,有利于增强
细胞毒 T 细胞和天然杀伤细胞(NK 细胞)的杀瘤
作用,并具有增强机体多种免疫功能的作用[9-10]。
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表 1 虎眼万年青提取物对小鼠肿瘤生长的影响 ( ± = 10x s , n )
Table 1 Inhibitory effect of OCE on tumor growth in mice ( ± = 10x s , n )
MFC HepG-2 S180 组 别 剂量 / (g·kg−1)
瘤质量 / g 抑瘤率 / % 瘤质量 / g 抑瘤率 / % 瘤质量 / g 抑瘤率 / %
模型 - 2.78±0.94 - 2.52±0.60 - 1.18±0.34 -
虎眼万年青提取物 5.0 1.30±0.54*** 53.08 1.83±0.57* 27.49 0.68±0.41* 42.85
2.5 1.70±0.40* 38.91 1.92±0.56* 23.90 0.69±0.29* 41.86
0.5 1.98±0.71 28.55 1.92±0.91 23.82 0.85±0.39 27.92
环磷酰胺 0.03 0.76±0.19*** 72.62 1.42±0.82** 43.80 0.55±0.17*** 53.60
与模型组比较:*P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001,下表同
*P < 0.05 **P < 0.01 ***P < 0.001 vs model group, same as below
表 2 虎眼万年青提取物对醋酸致小鼠扭体反应的影响
( ± = 10x s , n )
Table 2 Effect of OCE on acetic acid-induced writhing
reaction of mice ( ± = 10x s , n )
组 别 剂量 / (g·kg−1) 扭体次数 抑制率 / %
模型 — 40.2±10.5 —
虎眼万年青提取物 5.0 21.9± 7.3*** 45.5
2.5 31.4± 7.8* 21.9
0.5 37.9± 4.4 5.7
阿司匹林 0.2 3.9± 2.4*** 90.3
表 3 虎眼万年青提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
( ± = 10x s , n )
Table 3 Effect of OCE on ear swelling of mice
induced by xylene ( ± = 10x s , n )
组 别 剂量 / (g·kg−1) 肿胀度 / mg 抑制率 / %
模型 — 9.5±4.6 81.5
虎眼万年青提取物 5.0 3.8±3.7** 31.9
2.5 5.6±3.0* 45.1
0.5 5.9±3.1 47.1
阿司匹林 0.2 3.6±2.4** 28.6
本实验结果显示,虎眼万年青提取物具有镇痛作
用,能减少醋酸所致的小鼠扭体反应次数;对二甲苯
所致小鼠耳廓肿胀也具有显著抑制作用,表明该药能
抑制以毛细血管扩张、通透性增加、渗出性水肿为主
的炎症早期反应。同时观察到,MFC、HepG-2、S180
荷瘤小鼠 ig 虎眼万年青提取物后,可明显抑制肿瘤
的生长,且有一定的剂量相关性,其抗肿瘤作用可能
主要通过细胞毒活性、阻滞细胞周期、抑制肿瘤细胞
生长及诱导肿瘤细胞凋亡等途径实现的。今后将进一
步深入研究虎眼万年青提取物的有效物质基础,为其
药用价值的开发应用提供依据。
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