全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月
·2017·
首乌藤中大黄素的提取工艺研究
杨金华 1，王登斌 2，陈小明 2*
1. 河南中医学院第一附属医院，河南 郑州 450000
2. 桂林三金药业股份有限公司，广西 桂林 541004
摘 要：目的 研究不同提取工艺对首乌藤中大黄素提取效果的影响，并优化其提取工艺。方法 以首乌藤为原料，大黄素
转移率为指标，采用单因素试验和正交设计对提取工艺进行研究。结果 最佳提取工艺为以 6 倍量 90%乙醇回流提取 3 次，
每次 0.5 h。结论 优化后的提取工艺稳定，大黄素的转移率达 90%以上，适用于首乌藤中大黄素的提取。
关键词：首乌藤；大黄素；提取工艺；转移率；正交试验
中图分类号：R283.6 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)10 - 2017 - 03
Extracting technology of emodin from cane of Polygonum multiflorum
YANG Jin-hua1, WANG Deng-bin2, CHEN Xiao-ming2
1. The First Affiliated Hospital of Henan University of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450000, China
2. Guilin Sanjin Pharmaceutical Co., Ltd., Guilin 541004, China
Key words: Polygonum multiflorum Thunb.; emodin; extracting technology; transfer rate; orthogonal test
首乌藤，别名为夜交藤，为蓼科植物何首乌
Polygonum multiflonum Thunb.的干燥藤茎，具有养
血安神、祛风通络的功效[1]。其所含化学成分有大
黄素、大黄酚、大黄酸、大黄素甲醚、大黄素 8-O-β-D-
单葡萄糖苷等羟基蒽醌类衍生物及其他成分[2-4]，生
理活性物质大黄素具有抗炎、抗病毒、抑菌、免疫
调节、保护肝肾、利胆、促进胃肠蠕动、抗氧化、
清除自由基、改善微循环等药理作用[5]。有关何首
乌中大黄素提取工艺的文献报道较多[6-8]，但对首乌
藤中大黄素的提取工艺报道较少。因此，现以大黄
素为指标，对首乌藤的提取工艺进行考察，为进一
步制备现代制剂提供原料。
1 仪器与材料
Agilent 1200 高效液相色谱系统（美国 Agilent
公司）；Agilent Zorbax SB-C18 柱（250 mm×4.6 mm，
5 µm）；RE—111 旋转蒸发仪（瑞士 Buchi 公司）；
CQ—25 超声波清洗仪（中船重工集团公司第七二
六研究所）。大黄素对照品（批号 110756-200110，
中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯；水为纯
净水；其他试剂均为分析纯。首乌藤药材产地四川，
购于成都市西南药都，经桂林三金药业药物研究所
中药资源研究室钟小清高级工程师鉴定为蓼科多年
生缠绕草本植物何首乌 Polygonum multiflonum
Thunb.的干燥藤茎。
2 方法与结果
2.1 大黄素的测定
2.1.1 色谱条件[1] 色谱柱为 Agilent Zorbax SB-
C18 柱（250 mm×4.6 mm，5 µm），流动相为甲醇-
0.1%磷酸（85∶15），体积流量 1 mL/min，检测波
长 254 nm，柱温 25 ℃，进样量 10 µL。
2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取适量大黄素对
照品，加甲醇配制成 84.00 µg/mL 对照品溶液。
2.1.3 供试品溶液的制备 称取约 0.5 g 首乌藤药
材粉末（过 3 号筛），精密称定，加入甲醇 25 mL，
加热回流 30 min，放冷，用甲醇补足减失的质量，
滤过，取续滤液 5 mL，蒸干，残渣加 8%盐酸溶液
10 mL，超声处理 2 min，再加氯仿 10 mL，加热回
流 1 h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤
收稿日期：2011-03-21
作者简介：杨金华（1966—），男，河南淅川人，主管药师，学士，研究方向为中药制剂。
Tel: 15838097918 E-mail: yangjinhua1010@163.com
*通讯作者 陈小明 Tel: (0773)5809052 E-mail: chenxiaoming3012@163.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月
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容器，并入分液漏斗中，分取氯仿层，酸液再用氯
仿提取 3 次，每次 10 mL，合并氯仿液，减压回收
氯仿，残渣用甲醇溶解并转移至 10 mL量瓶中定容。
摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.1.4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液，依次
配成 1.68、3.36、8.40、16.80、33.60、84.00 µg/mL
系列对照品溶液。分别吸取 10 µL，按“2.1.1”项
色谱条件进行测定。以峰面积积分值为纵坐标、进
样量为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程 Y＝
3 964.9 X＋6.031 8（r＝0.999 9），表明大黄素在
16.8～840.0 µg 与峰面积呈良好的线性关系。
2.1.5 精密度试验 精密吸取 5 µL 对照品溶液，按
“2.1.1”项色谱条件连续进样 6 次，测定得大黄素峰
面积积分值的 RSD 为 0.52%。
2.1.6 稳定性试验 精密吸取按“2.1.3”项下处理
得到的供试品溶液 10 µL，按上述色谱条件，分别
在 0、2、4、6、8、12、24 h 进样测定，计算得大
黄素峰面积的 RSD 为 1.12%，表明供试品溶液在
24 h 内稳定。
2.1.7 重现性试验 分别称取首乌藤粉末 6 份，按
“2.1.3”项下操作制备供试品溶液，依法测定，计算
得大黄素质量分数的 RSD 为 2.01%。
2.1.8 加样回收率试验 精密称取样品 6 份，每份
0.25 g，精密称定，分别精密加入大黄素对照品适量，
制备供试品溶液，进样测定，计算回收率。结果大
黄素的平均回收率为 102.13%，RSD 为 1.14%。
2.1.9 样品测定 取不同工艺制备的样品，制备供
试品溶液，依法测定，计算大黄素的量。色谱图见
图 1。
*大黄素
*emodin
图 1 对照品（A）和样品（B）的 HPLC 色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of reference substance (A)
and sample (B)
2.2 单因素试验
2.2.1 提取溶媒的考察 称取 10 g 首乌藤细粉，共
2 份，分别用 10 倍量 95%乙醇和水超声提取（30
min×3），合并提取液，依法测定。计算得 95%乙
醇、水提取大黄素的提取率分别为 88.20%、9.15%，
表明 95%乙醇提取的效率明显优于水。
2.2.2 乙醇体积分数的考察 分别称取10 g首乌藤
细粉 6 份，分别用 10 倍量水及 20%、40%、60%、
80%、95%乙醇回流提取 3 次，每次 1 h，合并提取
液，依法测定。结果大黄素的提取率分别为 10.2%、
23.2%、45.0%、70.8%、91.2%、90.3%，表明大黄
素的提取效率随乙醇体积分数的增加而增加；当乙
醇体积分数达 80%以后，提取效率随乙醇体积分数
的增大变化不明显。
2.2.3 提取方式的考察 分别称取10 g首乌藤细粉
3 份，分别采用 80%乙醇的回流提取、超声提取和
冷浸法提取各 3 次，合并提取液，依法测定。结果
大黄素的提取率分别为 90.89%、86.34%、81.78%，
可见回流提取法优于超声提取和冷浸法。
2.2.4 溶媒用量的考察 分别称取10 g首乌藤细粉
5 份，分别用 4、6、8、10、12 倍量 80%乙醇回流
提取 3 次，合并提取液，依法测定。结果大黄素的
提取率分别为 79.0%、83.5%、88.7%、90.6%、91.0%，
表明大黄素的提取效率随溶媒量的增加而增加；当
溶媒剂量达 10 倍量时，溶媒用量增加，提取效率增
加不显著。
2.3 正交试验优选提取工艺
在单因素试验的基础上，选择乙醇体积分数
（A）、溶媒用量（B）、提取时间（C）、提取次数（D）
进行正交试验。以大黄素的转移率为评价指标，选
择 L9(34) 正交表安排试验。
取 10 g 首乌藤药材细粉，按正交表安排试验，
提取液用相应体积分数乙醇定容至 500 mL，取 100
mL，蒸干，按“2.1.3”项方法制备供试品溶液，测
定。试验设计及结果和方差分析见表 1 和 2。
转移率＝100 mL 提取液中大黄素的量×5/10 g 首乌藤
药材中大黄素的量
极差分析表明 4 种因素对大黄素转移率的影响
程度依次为 D＞A＞C＞B，其最优化组合为
A3B2C2D3；方差分析表明乙醇体积分数和提取次数
对转移率有显著影响（P＜0.05），提取时间和溶媒
用量对转移率的影响不明显。结合极差和方差分析
结果，及综合成本考虑，提取时间和溶媒用量选择
了因素水平组合 B1C1，而不是 B2C2。因此，最后选
择的优化条件为 A3B1C1D3，即 90%乙醇提取 3 次，
每次用 6 倍量溶剂，提取 0.5 h。
2.4 验证试验
采用优选工艺参数，重复 3 次验证试验。结果
A B
* *
0 5 10 0 5 10
t / min
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表 1 正交试验设计及结果
Table 1 Design and results of orthogonal test
因 素
试验号
A/% B/倍 C/h D/次
转移率/%
1 70（1） 6（1） 0.5（1） 1（1） 39.93
2 70（1） 8（2） 1（2） 2（2） 60.98
3 70（1） 10（3） 1.5（3） 3（3） 62.72
4 80（2） 6（1） 1（2） 3（3） 80.33
5 80（2） 8（2） 1.5（3） 1（1） 45.30
6 80（2） 10（3） 0.5（1） 2（2） 61.09
7 90（3） 6（1） 1.5（3） 2（2） 76.60
8 90（3） 8（2） 0.5（1） 3（3） 98.16
9 90（3） 10（3） 1（2） 1（1） 64.84
K1 163.65 196.87 199.18 150.08
K2 186.72 204.44 206.16 198.67
K3 239.60 188.66 184.63 241.22
R 25.32 5.26 7.18 30.38
表 2 方差分析
Table 2 Analysis of variance
方差来源 偏差平方和 自由度 均方 F 值 显著性
A 1 010.97 2 505.49 24.32 P＜0.05
B 41.57 2 20.79 1.00
C 80.40 2 40.20 1.93
D 1 386.57 2 693.29 33.35 P＜0.05
F0.05(2, 2)＝19.00 F0.01(2, 2)＝99.00
大黄素转移率分别为 90.82%、91.58%、90.96%，表
明所筛选的提取工艺条件稳定、方法可行，有效成
分提取转移率高。
3 讨论
以首乌藤中有效成分大黄素的转移率为考察指
标，通过单因素和正交试验，优选得到最佳提取工
艺条件为：90%乙醇回流提取、加醇量为 6 倍量、
提取 3 次、每次 0.5 h。优选的提取工艺稳定，大黄
素转移率达 90%，研究结果可为首乌藤产品的开发
利用提供依据。
参考文献
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