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翁沥通胶囊中铜绿的拆方研究



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翁沥通胶囊中铜绿的拆方研究
任雷鸣*  ,赵  丁, 王  雪,吴志刚,赵  艳
(河北医科大学药学院 药理学研究室,河北 石家庄  050017)
摘  要:目的  研究铜绿在翁沥通胶囊镇痛、抗炎及治疗前列腺增生功效中的作用。方法  采用醋酸扭体模型比
较不含铜绿的翁沥通胶囊 ( A 药) 和含铜绿的翁沥通胶囊 ( B 药 ) 的镇痛作用; 采用小鼠二甲苯炎症模型比较 A
药和 B 药的抗炎作用; 采用小鼠 sc 丙酸睾酮诱导前列腺增生模型,比较 A 药和 B 药的抗前列腺增生作用。结果
连续 ig 7 d 翁沥通 A 药和 B 药 0 6、1 2、2 4、4 8 g / kg (按生药量计算) , 小鼠 15 min 内的扭体次数均显著少于对
照组 (P < 0 05、0 01)。翁沥通 B 药 1 2、2 4、4 8 g / kg 及翁沥通 A 药 2 4 g/ kg 连续 ig 7 d,明显减轻小鼠耳片肿
胀度 (P< 0 05、0 01) ; 翁沥通 A 药的其他 4 个剂量组的小鼠耳片肿胀度与对照组相比均无明显差异。翁沥通 B
药 0 3、1 2 g/ kg 连续 ig 14 d,明显减轻前列腺增生模型小鼠的前列腺湿质量及湿质量系数、前列腺干质量及干质
量系数 ( P< 0 05、0 01) ;翁沥通 A 药仅有 1 2 g/ kg 明显减轻模型小鼠的前列腺湿质量、湿质量系数及前列腺干
质量 (P< 0 05、0 01) , 对前列腺干质量系数无明显影响 (P > 0 05)。结论  铜绿在翁沥通胶囊的组方中,对于该
方剂的抗炎和抗前列腺增生功效发挥重要作用。
关键词:翁沥通胶囊; 铜绿; 镇痛; 抗炎; 前列腺增生
中图分类号: R285 5    文献标识码: A    文章编号: 02532670( 2010) 11186204
  良性前列腺增生 ( BPH ) 是以排尿困难进行性
加重,如尿频、尿等待、尿线无力、尿间断或尿滴沥等
为临床症状的一类前列腺疾病, 是中老年人群的常
见病和多发病。对于轻度和中度 BPH 患者, 临床
上常采用药物治疗。1976年, Caine 等 [ 1]就使用非
选择性 受体阻断药酚苄明治疗 BPH 患者。但
是,非选择性的 受体阻断药不良反应较大, 约有
10% 患者不能耐受而停药。天然药物因其作用全
面而温和,不良反应较小, 适合长期服用等特点, 在
治疗良性前列腺增生方面越来越受到重视。前列腺
炎也是泌尿科临床上最常见的炎症性疾病之一, 高
达 25%~ 50% 的男性曾经或正在受到前列腺炎的
1862 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月
收稿日期: 20100312                     基金项目:河北省自然基金 ( C2006000802)
* 通讯作者  任雷鸣( 1956 ! ) ,男,教授,主要从事神经和心血管药理学研究。T el: ( 0311) 86266405  Email: renleiming@ 263. net
困扰[ 3] 。20世纪 90 年代中期, 欧洲临床上广泛地
应用植物药治疗慢性前列腺炎所致的男性下尿路综
合征,其中德国更有 90% 患者临床采用植物药治
疗[ 4]。翁沥通胶囊具有清热祛湿通利、活血通瘀散
结的功效,是我国研制的复方纯中药制剂,临床用于
治疗湿热蕴结、痰瘀交阻所致的前列腺增生症,并被
列为国家中药保护品种。近年, 国内临床研究报道
翁沥通胶囊治疗慢性前列腺炎 [ 56]、慢性非细菌性前
列腺炎[ 7]和慢性骨盆疼痛综合征[ 8]获得良好效果。
翁沥通胶囊的主要成分为薏苡仁、浙贝母、川木
通、铜绿等。研究显示翁沥通胶囊体内具有降低前
列腺质量指数、减轻炎症细胞浸润和纤维母细胞增
生、改善局部血液循环的作用[ 9] ;大鼠血清药理学实
验研究还发现, 翁沥通胶囊能阻断 1受体[ 10]。这些
实验结果为翁沥通胶囊临床应用奠定了基础。由于
翁沥通胶囊需要长期服用, 临床医师对铜绿的应用
持谨慎态度,甚至提出取消应用铜绿的建议。处方
中的铜绿在方剂的组成中发挥何种作用, 铜绿在翁
沥通胶囊治疗 BPH 和慢性前列腺炎中的地位如何
仍不清楚。铜绿的主要成分为含水碱式碳酸铜或醋
酸铜,是中医临床常用的∀以毒攻毒#类药物, 用于治
疗外科疮伤及恶性肿瘤[ 11]。本实验采用不添加和
添加铜绿的两种翁沥通胶囊, 研究铜绿在该复方制
剂中对镇痛、抗炎和抗前列腺增生药理活性的影响。
1  材料与方法
1 1  药品: 翁沥通胶囊 A (不添加铜绿, 批号
20040820A) , 翁沥通胶囊 B ( 添加铜绿, 批号
20040820B) 和铜绿均由华北制药集团制剂有限公
司提供,临用时加水研磨制成混悬液备用;本实验所
用翁沥通胶囊的剂量均按生药量计算。阿司匹林由
石家庄市协和制药厂提供, 批号 990801。冰醋酸由
河北省石家庄市红旗化学试剂厂提供,批号 85908。
己烯雌酚片剂, 天津市力生制药股份有限公司,批号
0308008, 临用时加水研磨制成混悬液备用。丙酸睾
酮注射 液, 天津金耀氨基酸有限公 司, 批号
0401131, 临用时以灭菌橄榄油稀释至所需浓度。
1 2  动物昆明种小鼠, 雄性, 体质量 18~ 24 g , 由
河北省实验动物中心提供, 许可证号: SCXK ( J)
20031003。实验期间饲以该中心提供的固体饲
料,自由饮水。
1 3  翁沥通胶囊 A 和 B 对小鼠醋酸扭体模型的影
响[ 12] : 取小鼠 132 只, 体质量 18~ 22 g, 雄性, 随机
分为 12组,每组 11只。翁沥通胶囊 A 及翁沥通胶
囊 B 各自分为 5 个剂量组: 0 3、0 6、1 2、2 4 和
4 8 g/ kg ;阳性对照组给予阿司匹林 0 2 g/ kg, 对照
组给予水。以上各组均 ig 给药,容积 0 2 mL/ 10 g
体质量, 每日 1 次, 连续 7 d。于末次给药后 30
m in, ip 0 6% 冰醋酸 0 2 mL/只,观察 15 min 内小
鼠因冰醋酸刺激腹膜所引起的扭体反应次数。
1 4  翁沥通胶囊 A 和 B 对小鼠耳片肿胀的影
响[ 1 2] :取小鼠 132 只,雄性, 体质量 18~ 22 g。随机
分为 12 组,每组 11只。翁沥通胶囊 A 及翁沥通胶
囊 B 各自分为 5 个剂量组: 0 3、0 6、1 2、2 4、48
g / kg;阳性对照组给予阿司匹林 0 2 g / kg, 对照组
给予水。以上各组均 ig 给药,容积 0 2 mL/ 10 g 体
质量,每日 1次,连续 7 d。于末次给药后 30 min,
取二甲苯 0 1 mL 滴于小鼠右耳廓并用玻棒涂匀,
左耳作为对照涂以 0 1 mL 生理盐水。给予二甲苯
2 h 后将小鼠脱臼致死,沿耳廓基线剪下两耳,用直
径 9 mm 的打孔器分别在左、右两耳相同部位打下
圆形耳片, 称质量。以左、右耳片质量之差表示肿
胀度。
1 5  翁沥通胶囊 A 和 B对小鼠前列腺增生模型的
作用[ 13] : 取体质量 20~ 24 g 雄性小鼠 110 只, 随机
留取 10 只作为空白对照,其余 100 只每日 sc 丙酸
睾酮 5 mg/ kg, 空白对照组 sc 等容积橄榄油,连续
2 周。2 周后, 由 100 只模型动物中随机取出 10
只,连同空白对照组 10 只小鼠一并称体质量后,脱
臼处死,仔细剖取前列腺各叶,立即称湿质量。计算
前列腺湿质量系数, 空白对照组为 ( 2 296 ∃ 0 412)
mg/ g ,丙酸睾酮组为 ( 3 557 ∃ 0 75) mg/ g; 经 t 检
验分析, 两组的前列腺湿质量系数差异显著 ( P<
0 01) , 表明已造成前列腺增生模型, 停止注射丙酸
睾酮。
将已形成前列腺增生的 90 只小鼠随机分为 9
组,每组 10只。翁沥通胶囊 A 及翁沥通胶囊 B 各
分为 3 个剂量组: 0 3、1 2、4 8 g/ kg ;阳性对照药组
给予己烯雌酚 12 mg/ kg ;铜绿组给予铜绿 120 mg /
kg; 模型给予水。以上各组均 ig 给药, 容积 0 2
mL/ 10 g 体质量,每日 1 次, 连续 2 周。于末次给
药后次日,称体质量,脱臼处死小鼠, 剖腹,仔细分离
前列腺各叶,称前列腺湿质量后,置前列腺于 60 %
烤箱 24 h,称干质量。计算前列腺干质量系数 (干
质量/体质量)、湿质量系数 (湿质量/体质量)。
1 6  数据处理:所有数据以 x ∃ s 表示。采用单因
素方差分析对各实验组进行统计学检验, F 值小于
0 05 时进一步采用 Dunnet t 检验分析各给药组与
对照组间的显著性差异。
1863 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月
2  结果
2 1  翁沥通胶囊 A 和 B 对小鼠醋酸扭体模型的影
响:对照组小鼠 ip 0 6% 冰醋酸后, 15 m in 内的扭
体次数为 31 40 ∃ 5 19;连续 7 d ig 给予翁沥通 A
药和 B 药各剂量组小鼠 15 min 内的扭体次数均显
著少于对照组 ( P< 0 05、0 01) ; A 药和 B 药相比,
二者的作用无明显差异; 阿司匹林亦可显著减少小
鼠扭体次数 (表 1)。
表 1 翁沥通胶囊 A 和 B对小鼠醋酸扭体模型的影响
( x∃ s, n= 11)
Table 1  Effect of Wenglitong Capsula A and B on acetic
acid writhing model of mice (x ∃ s, n= 11)
组  别 剂量/ ( g kg- 1 ) 扭体次数/ (次 15 min - 1)
对照 - 31 40 ∃ 5 19
翁沥通 A 药 03 25 00 ∃ 11 9
06 23 60 ∃ 5 34* *
12 21 27 ∃ 4 34* *
24 18 36 ∃ 4 65* *
48 22 18 ∃ 5 34* *
翁沥通 B 药 03 28 36 ∃ 5 39
06 26 18 ∃ 4 05*
12 21 27 ∃ 5 18* *
24 21 20 ∃ 6 16* *
48 18 82 ∃ 5 44* *
阿司匹林 02 14 27 ∃ 3 64* *
  与对照组比较: * P< 005  * * P< 0 01,表 2同
  * P< 0 05  * * P < 0 01 v s cont rol group, Table 2 is same
2 2  翁沥通胶囊 A 和 B 对小鼠耳片肿胀的影响:
对照组小鼠的耳片肿胀度为 ( 9 72 ∃ 3 91) mg; 连
续给予翁沥通胶囊 7 d后,翁沥通 B药 3剂量及翁沥
通 A 药 24 g/ kg 明显减轻小鼠耳片肿胀度 ( P<
005、0 01) ;翁沥通 A药的其他4个剂量组的小鼠耳
片肿胀度与对照组相比,均无明显差异;阿司匹林明
显减轻小鼠耳片肿胀度 ( P< 0 01)。结果见表 2。
2 3  翁沥通胶囊 A 和 B 对小鼠前列腺增生模型的
表 2  翁沥通胶囊 A 和 B对二甲苯致小鼠耳片肿胀的影响
(x ∃ s, n= 11)
Table 2  Ef fect of Wenglitong Capsula A and B
on ear swlling of mice induced by xylene
(x ∃ s, n= 11)
组  别 剂量/ ( g kg- 1) 耳廓肿胀度/ mg
对照 - 9 72 ∃ 3 91
翁沥通 A 药 0 3 7 21 ∃ 3 72
0 6 7 55 ∃ 4 19
1 2 7 60 ∃ 4 28
2 4 5 25 ∃ 3 70*
4 8 7 23 ∃ 2 95
翁沥通 B药 0 3 7 85 ∃ 3 15
0 6 8 41 ∃ 3 32
1 2 5 11 ∃ 3 45* *
2 4 5 74 ∃ 3 27*
4 8 4 70 ∃ 3 55* *
阿司匹林 0 2 3 92 ∃ 3 14* *
作用:与模型组比较, 翁沥通胶囊 B 0 3、1 2 g/ kg
剂量显著降低模型小鼠的前列腺湿质量及湿质量系
数、前列腺干质量及干质量系数 ( P< 0 05、0 01) ;
翁沥通胶囊 A 仅有 1 2 g / kg 剂量明显减轻模型小
鼠的前列腺湿质量、湿质量系数及前列腺干质量
( P< 0 05、0 01) ,对前列腺干质量系数无明显影响
( P> 0 05) ;翁沥通胶囊 A 0 3 g/ kg 仅显著降低小
鼠的前列腺干质量;铜绿 120 mg / kg 亦能明显减轻
模型小鼠的前列腺湿质量及湿质量系数、前列腺干
质量及干质量系数 ( P< 0 05、0 01)。结果见表 3。
己烯雌酚对小鼠前列腺增生模型亦有非常显著的治
疗作用 ( P< 0 01)。
3  讨论
  翁沥通胶囊临床成人日用量 2 4 g, 折合生药
10 86 g, 按人体质量 60 kg 计算约为 0 18 g/ kg。
按照人与小鼠的体表面积折算, 小鼠每日 ig 1 89
g / kg相当于临床成人日用量。为了与临床剂量相
表 3  翁沥通胶囊 A 和 B 对小鼠前列腺增生模型的治疗作用 (x ∃ s, n= 10)
Table 3 Treatment of Wenglitong Capsula A and B for prostatic hyperplasia of mice ( x ∃ s, n= 10)
组  别 剂量/
( g kg- 1 ) 前列腺湿质量/ mg
前列腺湿质量系数/
( mg g- 1) 前列腺干质量/ mg
前列腺干质量系数/
( mg g- 1 )
模型 - 10116 ∃ 15 16 2 390 ∃ 0 247 26 28 ∃ 5 77 0 620 ∃ 0 125
翁沥通 A 药 0 3 8328 ∃ 27 66 2 184 ∃ 0 686 20 31 ∃ 5 28* 0 533 ∃ 0 130
1 2 8436 ∃ 11 97* * 2 109 ∃ 0 297* 21 04 ∃ 3 45* 0 526 ∃ 0 084
4 8 10296 ∃ 12 44 2 454 ∃ 0 239 26 80 ∃ 3 45 0 640 ∃ 0 077
翁沥通 B 药 0 3 8256 ∃ 10 52* * 2 051 ∃ 0 331* 20 66 ∃ 2 32* 0 512 ∃ 0 070*
1 2 8429 ∃ 13 32* * 1 992 ∃ 0 294* 19 80 ∃ 2 86* 0 468 ∃ 0 064* *
4 8 9921 ∃ 8 92 2 440 ∃ 0 225 25 88 ∃ 4 01 0 636 ∃ 0 097
铜  绿 0 12 8314 ∃ 16 14* 2 107 ∃ 0 351* 20 27 ∃ 3 92* 0 515 ∃ 0 090*
己烯雌酚 0 012 6716 ∃ 18 91* * 1 676 ∃ 0 467* * 13 57 ∃ 3 44* * 0 339 ∃ 0 085* *
   与模型组比较: * P< 0 05  * * P< 0 01
   * P< 0 05  * * P < 0 01 vs model gr ou p
1864 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 11 期 2010 年 11月
对应,本研究选用翁沥通胶囊 A和 B的剂量范围为
0 3~ 4 8 g/ kg。
本实验采用翁沥通胶囊的两种配方,即不添加
铜绿的翁沥通胶囊 ( A 药) 和翁沥通胶囊原处方 ( B
药) , 分析了铜绿在翁沥通胶囊镇痛、抗炎及治疗前
列腺增生功效中的作用。结果表明,在小鼠醋酸扭
体模型中 A 药和 B 药都能明显减少小鼠的扭体次
数,而且两药的作用强度无明显差别。这一实验结
果证明,去除铜绿后不影响翁沥通胶囊处方中其他
药物对炎性疼痛的抑制作用, 即翁沥通胶囊的镇痛
作用与方剂中的铜绿无关。在小鼠耳片二甲苯炎症
模型中,翁沥通胶囊原处方 ( B 药) 在 1 2、2 4 及
4 8 g/ kg 剂量时均明显减轻小鼠耳片的肿胀度, 有
明显的抗炎作用;而去除铜绿的 A 药仅在 2 4 g / kg
剂量时才表现出明显的抗炎作用,证明铜绿明显增
强了翁沥通胶囊中其他药物的抗炎效果。
对于丙酸睾酮诱发的前列腺增生模型小鼠, 翁
沥通胶囊原处方 ( B 药) 在 0 3、1 2 g / kg 剂量时均
能显著降低小鼠的前列腺湿质量及湿质量系数、前
列腺干质量及干质量系数。去除铜绿的翁沥通胶囊
( A 药) 在 1 2 g/ kg 剂量下仅显著降低模型小鼠的
前列腺湿质量、湿质量系数及干质量; 在 0 3 g / kg
剂量下仅显著降低小鼠的前列腺干质量; 说明去除
铜绿后,其他药味组方仍然具有抗前列腺增生功效,
但是作用较原方剂明显减弱。单独使用铜绿亦能显
著降低小鼠的前列腺湿质量及湿质量系数、前列腺
干质量及干质量系数, 说明铜绿本身在较高剂量时
即有抗前列腺增生的作用。铜绿的主要成分为含水
碱式碳酸铜或醋酸铜, 作为∀以毒攻毒#类药物用于
外科疮伤和恶性肿瘤的治疗已有很多年的历史, 小
鼠 iv 铜绿的 LD50为 1 47 g / kg;据文献记载临床成
人日服用铜绿的剂量为 0 5~ 1 0 g [ 14]。翁沥通胶
囊原方剂中铜绿的量较少,临床成人日服用量为 60
mg。按照人与小鼠的体表面积折算,本研究中所用
铜绿的剂量约为翁沥通胶囊临床成人剂量的 10
倍,约为文献记载临床最低剂量 ( 0 5 g ) 的 1 3倍。
本研究结果证实, 铜绿本身在临床剂量下具有抗实
验性前列腺增生的作用;同时,翁沥通胶囊中所含的
铜绿能增强方剂中其他药物抗前列腺增生的功效。
上述研究结果表明,铜绿在翁沥通胶囊的组方
中,对于该方剂的抗炎和抗前列腺增生功效发挥重
要作用;去除方剂中的铜绿将会明显降低翁沥通胶
囊的抗炎作用和抗前列腺增生作用, 但不影响翁沥
通胶囊的镇痛作用。
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