全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

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裂蹄木层孔菌抗肿瘤作用及其机制研究
张 问 1，焦 燕 1，李 航 2，李敬轩 2，蔡 云 3，李 红 1*，杨世杰 1
1. 吉林大学白求恩医学院 药理学系，吉林 长春 130021
2. 长春日惠食用菌研究所，吉林 长春 130000
3. 福建省农业科学院，福建 福州 350013
摘 要：目的 研究裂蹄木层孔菌的抗肿瘤作用及其机制。方法 制备 S180、H22、MFC 实体瘤小鼠模型和 S180腹水瘤小鼠
模型。将 3 种实体瘤模型小鼠均分为模型组，裂蹄木层孔菌低、中、高剂量（0.5、1.0、2.0 g/kg）组和环磷酰胺（CTX）阳
性对照组，S180 腹水瘤小鼠模型加设对照组。观察裂蹄木层孔菌对腹水瘤小鼠生存时间以及实体瘤小鼠瘤质量、胸腺和脾脏
指数、血清中白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响。结果 与模型组比较，裂蹄木层孔菌低、中、
高剂量均能延长 S180 腹水瘤小鼠的生存时间（P＜0.05），抑制肿瘤生长（P＜0.05），提高胸腺和脾脏指数（P＜0.05）及血
清 IL-2（P＜0.05）和 TNF-α水平（P＜0.01）。结论 裂蹄木层孔菌对小鼠肉瘤 S180、肝癌 H22细胞、前胃癌 MFC 肿瘤的生
长有明显抑制作用，显示一定的抗肿瘤效应，其可能通过提高免疫器官指数及血清中 IL-2、TNF-α的水平达到抗肿瘤目的。
关键词：裂蹄木层孔菌；抗肿瘤；白细胞介素-2；肿瘤坏死因子-α；腹水瘤
中图分类号：R285.5；R979.19 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)10 - 2047 - 04
Antitumor effect of Phellinus linteus and its mechanism
ZHANG Wen1, JIAO Yan1, LI Hang2, LI Jing-xuan2, CAI Yun3, LI Hong1, YANG Shi-jie1
1. Department of Pharmacology, Norman Bethune College of Medicine, Jilin University, Changchun 130021, China
2. Ri Hui Edible Fungi Research Institute, Changchun 130000, China
3. Fujian Academy of Agricaltural Sciences, Fuzhou 350013, China
Abstract: Objective To study the antitumor effect of Phellinus linteus and preliminarily discuss its mechanism. Methods
MFC-bearing, H22-bearing, S180-bearing, and S180 ascites tumors mice models were established. Five groups, model group,
cyclophosphamide (CTX) group, high- (2 g/kg), middle- (1 g/kg) and low-dose (0.5 g/kg) of P. linteus groups, were studied for the
former three models and a normal control group was added for S180 ascites tumors mice model. Then the life span prolongation of
ascites tumor mice and tumor weight, thymus and spleen indexes, and interleukin-2 (IL-2) and tumor necrosis factor (TNF-α) levels of
S180-bearing mice were determined. Results Compared with model group, high-, middle-, and low-dose groups of P. linteus could
prolong life span (P<0.05), inhibit tumor growth (P<0.05), increase thymus and spleen indexes (P<0.05), and elevate IL-2 and TNF-α
levels (P<0.01) of ascites tumors mice. Conclusion P. linteus shows antitumor effects and can obviously inhibit the cell growth of
MFC, H22 and S180 through increasing index of immune organ and the IL-2 and TNF-α levels of serum.
Key words: Phellinus linteus (Berk. et Curt.) Teng; antitumor; interleukin-2 (IL-2); tumor necrosis factor-α (TNF-α); ascites tumor

裂蹄木层孔菌 Phellinus linteus (Berk. et Curt.)
Teng 作为桑黄 P. igniarius (L. ex Fr.) Quél. 品种使
用。由于桑黄具有利尿作用而受到中医的重视，其
在《神农百草经》、《本草纲目》中均有记载。裂蹄
木层孔菌主要化学成分是子实体、菌丝体以及发酵
液中的胞外多糖，此外还有黄酮及其衍生物、香豆
素类、甾醇类化合物；其子实体、菌丝体及提取物
（主要为多糖）、胞外多糖在抗炎、抗氧化、抑制肿
瘤生成、增强免疫力、保肝、预防和治疗关节炎等
方面有显著活性[1]，桑黄提取物具有抗肿瘤作用[2]。
本课题组观察裂蹄木层孔菌对 S180、H22、MFC 实
体瘤小鼠模型和 S180 腹水瘤小鼠模型的影响，以探
讨其抗肿瘤作用及其机制，为开发新型抗肿瘤药物
提供依据。

收稿日期：2011-06-23
作者简介：张 问（1986—），女，硕士研究生，主要从事分子药理学研究。Tel: 15143171046 E-mail: zhang.jiawen163@163.com
*通讯作者 李 红 Tel: (0431)85619483 E-mail: lhong@jlu.edu.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月

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1 材料
1.1 药品与试剂
裂蹄木层孔菌水提取物（多糖质量分数＞15%），
由长春日惠食用菌研究所提供；环磷酰胺（CTX），
江苏恒瑞医药股份有限公司产品，批号 10070221；
小鼠白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）
定量 ELISA 试剂盒，均由 RD 公司提供。
1.2 动物
ICR 小鼠，清洁级，6～8 周龄，体质量 18～22
g，雌雄各半，吉林大学白求恩医学院实验动物中心
提供，合格证号 SCXK（吉）2007-0003。
1.3 肿瘤细胞
小鼠 S180 瘤株、H22 瘤株、MFC 瘤株，由吉林
大学白求恩医学院药理学系常规传代培养。
1.4 主要仪器
LDZ5—2 型离心机，北京医用离心机厂；LD24—
1.8 型低速自动平衡离心机，北京雷勃尔离心机有限
公司；SW—CJ—1F 超净工作台，万净集团安泰公
司；ESJ60—4 电子天平，沈阳龙腾电子称量仪器有
限公司；恒温循环水浴箱，北京医疗设备厂；酶标
仪，Sunrise 公司。
2 方法
2.1 裂蹄木层孔菌水提取物的制备
裂蹄木层孔菌子实体粉碎成直径 1～2 cm 的小
块，水洗、精选去掉杂物，加 10 倍体积热水于 95～
100 ℃提取 3 h，反复抽提 3 次。合并提取液浓缩，
经喷雾干燥得提取物。提取物主要有效成分为多糖，
质量分数＞15%。
2.2 S180 实体瘤模型的制备[3]
无菌条件下抽取已接种 7～8 d的 S180腹水瘤小
鼠的腹水，与无菌生理盐水按 1∶3 的比例稀释，台
盼蓝染色进行活细胞计数、检查细胞活性＞95%，
调整细胞浓度为 1×107/mL 或 2×107/mL，超净工
作台上于小鼠右腋窝皮下接种细胞悬液，每只 0.2
mL，30 min 内接种完成。H22 实体瘤小鼠模型与
MFC 实体瘤小鼠模型按同法制备。
2.3 S180 腹水瘤模型的制备[3]
无菌条件下抽取已接种 7～8 d的 S180腹水瘤小
鼠的腹水，与无菌生理盐水按 1∶3 的比例稀释，台
盼蓝染色进行活细胞计数，检查细胞活性＞95%，
调整细胞浓度为 2×107～4×107/mL，在无菌操作
条件下，每只小鼠腹腔接种 S180 腹水瘤细胞悬液
0.2 mL。
2.4 分组与给药
于接种肿瘤细胞 24 h 后，腹水瘤模型动物随机
分成5组，每组6只小鼠。模型组 ig蒸馏水0.1 mL/10
g，CTX 组 ip CTX 30 mg/kg，裂蹄木层孔菌组 ig 裂
蹄木层孔菌液（蒸馏水配制）0.5、1.0、2.0 g/kg，
给药体积 0.1 mL/10 g，各组均每天给药或蒸馏水 1
次，直至死亡。实体瘤模型动物随机分成 6 组，每
组 10 只小鼠，除加设对照组（仅用于 S180 实体瘤小
鼠血清 IL-2 和 TNF-α 水平检测对照）外，给药方
法和剂量同腹水瘤模型，各组均连续给药 10 d。
2.5 检测指标
给药结束后第 1 天，小鼠称体质量，眼眶静脉
丛取血（1～1.5 mL），处死，血样 3 000 r /min 离心
10 min，取上清，−20 ℃保存待检。取血清，每个
检测指标均设 2 个复孔，采用双抗体夹心 ABC-
ELISA 法，严格按照试剂盒使用说明测定小鼠血清
IL-2 和 TNF-α。实体瘤模型小鼠，取瘤组织，称质
量，计算抑瘤率[抑瘤率＝（模型组瘤质量－给药组
瘤质量）/模型组瘤质量]；S180 实体瘤模型小鼠取胸
腺、脾脏，计算脏器指数；S180 腹水瘤模型小鼠记
录存活时间，计算生命延长率[生命延长率=给药组
生存时间－模型组生存时间）/模型组生存时间]。
2.6 统计学处理
采用SPSS 13.0统计软件对数据进行统计分析，
结果以 sx ± 表示，组间比较采用 t 检验。
3 结果
3.1 对 S180实体瘤小鼠的影响
裂蹄木层孔菌 3 个剂量组及 CTX 组小鼠的瘤
质量均明显低于模型组，表明裂蹄木层孔菌及 CTX
对肿瘤生长均有显著的抑制作用，其中以裂蹄木层
孔菌高、中剂量效果较好。结果见表 1。
3.2 对 H22实体瘤小鼠的影响
裂蹄木层孔菌 3 个剂量组及 CTX 组小鼠的瘤
质量均明显低于模型组，表明裂蹄木层孔菌及 CTX
对肿瘤生长均有显著的抑制作用。结果见表 2。
3.3 对 MFC 实体瘤小鼠的影响
裂蹄木层孔菌3个剂量组及CTX组小鼠的瘤质
量均明显低于模型组，表明裂蹄木层孔菌及 CTX
对肿瘤生长均有显著的抑制作用。结果见表 3。
3.4 对 S180腹水瘤小鼠的影响
裂蹄木层孔菌组与CTX组小鼠从给药第5天起
腹部开始逐渐增大，但腹围增加不显著；而模型组
小鼠从接种第 5 天起腹部已明显增大，活动、饮食
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表 1 裂蹄木层孔菌对 S180实体瘤小鼠的影响 ( 10=± n , sx )
Table 1 Effects of P. linteus on S180-bearing mice ( 10=± n , sx )
体质量/g 组 别 剂量/(g·kg−1)
给药前 给药后
瘤质量/g 抑瘤率/%
模型 － 20.80±1.15 23.51±3.64 1.92±0.50 －
裂蹄木层孔菌 0.5 19.20±1.25 21.20±1.93 1.19±0.26*△△ 38.0
1.0 20.60±2.00 22.20±2.48 0.99±0.38*△△ 48.4
2.0 21.30±1.30 24.91±2.09△ 0.89±0.28*△ 53.6
CTX 0.030 20.60±2.19 22.50±2.89 0.50±0.19** 74.0
与模型组比较：*P＜0.05 **P＜0.01；与 CTX 组比较：△P＜0.05 △△P＜0.01
*P<0.05 **P<0.01 vs model group; △P<0.05 △△P<0.01 vs CTX group
表 2 裂蹄木层孔菌对 H22实体瘤小鼠的影响 ( 10=± n , sx )
Table 2 Effects of P. linteus on H22-bearing mice ( 10=± n , sx )
体质量/g 组 别 剂量/(g·kg−1)
给药前 给药后
瘤质量/g 抑瘤率/%
模型 － 20.30±2.26 25.90±2.79 1.96±0.55 －
裂蹄木层孔菌 0.5 19.80±2.10 27.60±3.15△△ 1.21±0.31*△△ 38.27
1.0 19.60±1.85 25.50±3.31△△ 1.02±0.30**△△ 47.96
2.0 20.60±1.61 27.10±3.35△△ 0.87±0.15**△△ 55.61
CTX 0.030 19.50±2.23 22.00±2.85 0.46±0.25** 76.53
与模型组比较：*P＜0.05 **P＜0.01；与 CTX 组比较：△△P＜0.01
*P<0.05 **P<0.01 vs model group; △△P<0.01 vs CTX group
表 3 裂蹄木层孔菌对 MFC 实体瘤小鼠的影响 ( 10=± n , sx )
Table 3 Effects of P. linteus on MFC-bearing mice ( 10=± n , sx )
体质量/g 组 别 剂量/(g·kg−1)
给药前 给药后
瘤质量/g 抑瘤率/%
模型 － 21.50±2.70 24.60±3.56 1.74±0.53 －
裂蹄木层孔菌 0.5 22.40±1.70 26.10±2.85* 0.96±0.28*△ 44.83
1.0 21.70±1.71 25.10±3.10 0.91±0.55*△ 47.70
2.0 22.60±2.65 27.30±3.23**△ 0.85±0.16**△ 51.15
CTX 0.030 22.32±2.89 25.63±3.06 0.54±0.20** 69.00
与模型组比较：*P＜0.05 **P＜0.01；与 CTX 组比较：△P＜0.05
*P<0.05 **P<0.01 vs model group; △P<0.05 vs CTX group
尚可。与模型组相比，裂蹄木层孔菌组小鼠在治疗
过程中精神状况良好、活泼、皮毛有光泽，出现贫
血症状较晚（约第 10 天）；CTX 组小鼠厌食、活动
减少、喜聚堆、体质量增加缓慢、精神萎靡、皮毛
无光泽、有竖毛现象，出现贫血症状早（约第 7 天）。
与模型组比较，裂蹄木层孔菌低、中、高剂量
均能延长小鼠的存活时间（P＜0.05），给药后模型
小鼠生命延长率均超过“抗癌药体内药效试验规程”
限定标准的 30%[4]，其中以高、中剂量效果最为显
著（P＜0.001）。与模型组比较，CTX 组不能延长
小鼠的存活时间，生命延长率为 19.78%，这可能与
CTX 对免疫力的抑制作用有关。结果见表 4。
3.5 对 S180实体瘤小鼠脏器指数的影响
与模型组、CTX 组比较，裂蹄木层孔菌低、中、
高剂量组小鼠的胸腺指数、脾脏指数均提高（P＜
0.05、0.01）。与模型组比较，CTX 组小鼠胸腺指数、
脾脏指数有所下降，但无统计学意义（P＞0.05）。
结果见表 5。
3.6 对 S180实体瘤小鼠血清 IL-2 和 TNF-α的影响
与对照组相比，模型组小鼠血清 IL-2、TNF-α
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表 4 裂蹄木层孔菌对 S180腹水瘤小鼠体质量及生存时间的影响 ( 10=± n , sx )
Table 4 Effects of P. linteus on weight and life span of S180 ascites tumors mice ( 10=± n , sx )
体质量/g 组 别 剂量/(g·kg−1)
给药前 给药后
存活时间/d 生命延长率/%
模型 － 20.50±1.99 27.96±2.27 15.17±1.72 －
裂蹄木层孔菌 0.5 20.48±1.64 28.14±1.98△△ 20.50±2.59* 35.14
1.0 20.76±2.66 27.98±1.92△△ 21.00±1.79*** 38.43
2.0 20.90±2.23 29.02±1.41△△ 21.83±2.32*** 43.90
CTX 0.030 20.84±2.31 22.06±2.21 18.17±1.47* 19.78
与模型组比较：*P＜0.05 ***P＜0.001；与 CTX 组比较：△△P＜0.01
*P<0.05 ***P<0.001 vs model group; △△P<0.01 vs CTX group
表 5 裂蹄木层孔菌对 S180实体瘤小鼠胸腺及脾脏指数的
影响 ( 10=± n , sx )
Table 5 Effects of P. linteus on thymus and spleen indexes
of S180-bearing mice ( 10=± n , sx )
组别 剂量/(g·kg−1) 胸腺指数/(mg·g−1) 脾脏指数/(mg·g−1)
模型 － 2.43±0.84 7.18±1.92
裂蹄木层 0.5 4.23±0.57*△△ 10.72±1.82*△△
孔菌 1.0 4.08±0.44*△△ 10.60±3.10*△
2.0 4.53±0.53**△△ 9.30±1.46△
CTX 0.030 2.20±0.35 5.47±1.54
与模型组比较：*P＜0.05 **P＜0.01
与 CTX 组比较：△P＜0.05 △△P＜0.01
*P<0.05 **P<0.01 vs model group
△P<0.05 △△P<0.01 vs CTX group
水平明显降低（P＜0.05）。与模型组相比，裂蹄木
层孔菌低、中、高剂量组小鼠血清 IL-2、TNF-α水
平明显升高（P＜0.05、0.01），与 CTX 组相比也有
明显差异（P＜0.05），仅裂蹄木层孔菌低剂量组
TNF-α水平与CTX组比较无统计学意义（P＞0.05）。
结果见表 6。
4 讨论
桑黄系药用真菌，具有利五脏、宣肠气、止血、
排毒的功效，古代医书中称其“桑耳”、“桑臣”、“胡
孙眼”等。本实验所用裂蹄木层孔菌是桑黄品种中
的一种。本实验结果显示，裂蹄木层孔菌可有效抑
制小鼠肉瘤 S180、小鼠肝癌 H22、小鼠前胃癌 MFC
肿瘤的生长；各给药组的 S180 腹水瘤小鼠生存状况
优于模型组和 CTX 组，小鼠活泼、皮毛有光泽，饮
食、精神状况良好，表明裂蹄木层孔菌可提高小鼠
的生存质量和延长生存期。裂蹄木层孔菌各组小鼠
的胸腺指数、脾脏指数与模型组比较均显著提高，
表明裂蹄木层孔菌可提高 S180 实体瘤小鼠的免疫功
能。裂蹄木层孔菌各给药组可不同程度地提高 S180
表 6 裂蹄木层孔菌对 S180实体瘤小鼠血清 IL-2 和 TNF-α
的影响 ( 8=± n , sx )
Table 6 Effect of P. linteus on IL-2 and TNF-α levels
in serum of S180-bearing mice ( 8=± n , sx )
组 别
剂量/
(g·kg−1)
IL-2/(ng·L−1) TNF-α/(ng·L−1)
对照 － 878.26±61.72 596.80±42.73
模型 － 793.89±43.22# 536.46±35.31#△
裂蹄木层孔菌 0.5 906.66±35.56**△△ 631.57±49.86**
1.0 888.18±70.50*△ 638.14±43.36**△
2.0 925.68±46.79**△△ 650.64±38.29**#△
CTX 0.030 805.98±55.81# 582.77±43.00
与模型组比较：*P＜0.05 **P＜0.01；与对照组比较：#P＜0.05；
与 CTX 组比较：△P＜0.05 △△P＜0.01
*P<0.05 **P<0.01 vs model group; #P<0.05 vs control group;
△P<0.05 △△P<0.01 vs CTX group
实体瘤小鼠血清中 IL-2、TNF-α水平，说明其抑瘤
作用与这两个因子相关。
综述所述，裂蹄木层孔菌可能是通过提高免疫
器官指数及血清中 IL-2、TNF-α的水平，增强、调
节机体免疫功能，从而达到抑制肿瘤细胞生长的作
用。但其抑瘤作用的确切机制尚待深入研究。
参考文献
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小鼠细胞因子水平及抑瘤率的影响 [J]. 中华中医药学
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