全 文 ：大黄５种饮片中游离蒽醌类成分比较研究
张村，李丽，肖永庆，林娜，刘春芳，李桂柳，逄镇，陈东东，田国芳
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］ 目的：对大黄５种不同饮片中游离蒽醌类成分进行比较研究。方法：ＨＰＬＣ同时测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄
素、大黄酚、大黄素甲醚等５个主要成分含量；流动相甲醇０１％磷酸（８５∶１５），检测波长２５４ｎｍ，流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１，柱温３５
℃。结果：５个成分在测定范围内线性关系较好（ｒ＞０９９９９），平均回收率分别为 ９６４４％，９８１１％，９９３０％，９８００％，
９７８６％。结论：大黄炮制过程中５种游离蒽醌类成分含量发生了明显变化，熟片、炭片含量较生品明显增加，而醋片、酒片含
量下降，大黄不同饮片的游离蒽醌类成分含量变化呈现一定的规律性。
［关键词］ 大黄饮片；蒽醌；ＨＰＬＣ；含量测定
［收稿日期］ ２００９０２２０
［基金项目］ 国家自然科学基金重点项目（３０７３０１１１）
［通信作者］ 肖永庆，研究员，博士生导师，Ｔｅｌ：（０１０）８４０４０２２１，
Ｅｍａｉｌ：ｘ．ｈｅｑｉ＠１６３．ｃｏｍ
大黄为蓼科植物掌叶大黄 Ｒｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ
Ｌ．、唐古特大黄Ｒ．ｔａｎｇｕｔｉｃｕｍＭａｘｉｍｅｘＢａｌｆ．或药用
大黄 Ｒ．ｏｆｉｃｉｎａｌｅＢａｉｌ的干燥根及根茎。在临床上
常以不同的炮制品组方入药，生大黄苦寒沉降，泻下
作用峻烈；经酒炙后其苦寒泻下作用稍缓，并借酒升
提之性，引药上行，善清上焦血分热毒；醋大黄泻下
作用减弱，以消积化瘀为主；熟大黄，经酒蒸后，泻下
作用缓和，并能增强活血祛瘀之功；大黄炭泻下作用
极微，并具有凉血化瘀止血作用。
游离蒽醌类成分为大黄的主要药效成分之一，
该类成分与大黄不同炮制品的功效变化密切相关。
文献报道［１２］多以酸水解法对大黄药材或单一炮制
品进行含量分析，不能真实地反映该类成分在炮制
过程中的含量变化情况。因此笔者以ＨＰＬＣ直接测
定大黄不同炮制品（生片，酒片，醋片，熟片，炭片）
中５种游离蒽醌类成分的含量，探讨了该类成分在
大黄炮制过程中的变化规律，为大黄不同饮片质量
标准的制订及其临床合理应用，并为揭示炮制改变
大黄药性的科学内涵提供试验依据。
１ 材料
Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪（Ｗａｔｅｒｓ１５１５ｐｕｍｐ，
Ｗａｔｅｒｓ２４８７检测器，Ｅｍｐｏｗｅｒ数据处理软件）；超声
清洗器ＫＱ５００ＤＢ（昆山市超声仪器有限公司）；甲
醇为色谱纯，水为纯净水，使用前均经０４５μｍ滤
膜滤过；其他试剂均为分析纯。
对照品芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大
黄素甲醚（为本研究室从大黄中分离鉴定，纯度达
９８％以上）。
实验用药材采自青海玉树，经中国中医科学院
中药研究所胡世林研究员鉴定为掌叶大黄 Ｒ．
ｐａｌａｍａｔｕｍ的根及根茎；供试饮片以掌叶大黄药材
为原料药材，按照《中国药典》、《全国中药炮制规
范》相关项下的炮制方法，由北京人卫饮片厂制备
成大黄生片，大黄酒炙片，大黄醋炙片，熟大黄片以
及大黄炭片各 １０批供试样品，临用前分别粉碎过
４０目筛后备用。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８（２）柱（４６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０１％磷酸（８５∶１５），检
测波长 ２５４ｎｍ；流速 １０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温３５℃。
在此条件下大黄样品中５种对照品与其他组分均能
达到基线分离，见图１。
２．２ 对照品溶液的制备 精密称取芦荟大黄素、大
黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品各适量，分
别加甲醇制成１５３６，５８００，１２４０，１４０８，５１８ｍｇ
·Ｌ－１的溶液，作为对照品溶液。
２．３ 供试品溶液的制备 取大黄不同饮片样品粉
末各约０５ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入
甲醇２５ｍＬ，密塞，称重，超声提取２０ｍｉｎ，放冷，密
塞，再称重，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取
续滤液，以微孔滤膜（０４５μｍ）滤过，即得。
２．４ 线性关系考察 上述５种对照品溶液分别进
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Ａ．对照品；Ｂ．大黄样品；ａ．芦荟大黄素；
ｂ．大黄酸；ｃ．大黄素；ｄ．大黄酚；ｅ．大黄素甲醚。
图１ 大黄对照品及样品的ＨＰＬＣ图
样１，５，１０，１５，２０，２５，３０μＬ，依法测定，以进样量
（μｇ）为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，并
计算回归方程：芦荟大黄素 Ｙ＝７２８６×１０６Ｘ－
４０６６×１０４，ｒ＝１００００；大黄酸 Ｙ＝６２０７×１０６Ｘ－
１１１４×１０５，ｒ＝０９９９９；大黄素 Ｙ＝４２８５×１０６Ｘ－
１８１３×１０４，ｒ＝１００００；大黄酚 Ｙ＝８０００×１０６Ｘ－
４５４１×１０４，ｒ＝０９９９９；大黄素甲醚 Ｙ＝４９４１×
１０６Ｘ－１０９６×１０４，ｒ＝０９９９９；结果表明芦荟大黄
素在００１５３６～０４６０８μｇ，大黄酸在００５８～１７４
μｇ，大黄素在 ００１２４～０３７２μｇ，大黄酚在
００１４０８～０４２２４μｇ，大黄素甲醚在 ０００５１８～
０１５５５２μｇ线性关系较好。
２．５ 精密度试验 精密吸取上述供试品溶液 １０
μＬ，重复进样５次，依法测定，结果各对照品峰面积
积分值的ＲＳＤ均小于２０％。
２．６ 稳定性试验 精密吸取上述供试液溶液 １０
μＬ，间隔一定时间进样共６次，由峰面积值统计结
果可见样品溶液在２４ｈ内保持稳定。
２．７ 重复性试验 取大黄生片粉末５份，各约０５
ｇ，精密称定，制备成供试品溶液，依法测定并计算含
量，结果各对照品５次测定值的ＲＳＤ分别为１９％，
１２％，１２％，０９３％，１１％。
２．８ 加样回收率试验 精密称定已知含量的大黄
生片粉末适量，共 ５份，分别精密加入各对照品适
量，按供试品溶液制备及测定法操作，进行色谱分
析，结果见表１。
２．９ 样品测定 取大黄不同饮片，依法制备成供试
表１ 生大黄加样回收率
对照品
样品含量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测得量
／ｍｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
芦荟大黄素 ０１１２３ ０１１６００２２４８ ９７０４ ９６４４ ０７１
０１１３７ ０２２４６ ９５６４
０１１２５ ０２２５２ ９７１７
０１１１３ ０２２２１ ９５５８
０１１３２ ０２２５５ ９６７９
大黄酸 ０６３８５ ０４４５０１０８１３ ９９５０ ９８１１ １２６
０６４６７ １０８０２ ９７４３
０６３９８ １０８３２ ９９６５
０６３２９ １０６２８ ９６６１
０６４４１ １０７７３ ９７３５
大黄素 ０１３７３ ０１１４２０２５２１１００６１ ９９３０ １４９
０１３９０ ０２５４４１０１００
０１３７５ ０２５１５ ９９７９
０１３６０ ０２４７３ ９７４６
０１３８５ ０２５００ ９７６４
大黄酚 ０２０００ ０１３５８０３３７２１００６７ ９８００ ２１５
０２０２６ ０３３６５ ９８２８
０２００４ ０３３６４ ９９７９
０１９８２ ０３２７８ ９５０８
０２０１８ ０３３２９ ９６１９
大黄素甲醚 ００６５０ ００５５５０１２０４ ９９８９ ９７８６ １４８
００６５８ ０１２０４ ９８３０
００６５１ ０１１９９ ９８６０
００６４４ ０１１７６ ９５７５
００６５６ ０１１９３ ９６７４
品溶液。精密吸取对照品溶液和供试品溶液各１０
μＬ，注入液相色谱仪分析测定，结果见表２。
表２ 大黄不同饮片有效成分的质量分数（ｎ＝１０） ％
饮片
芦荟大
黄素
大黄酸 大黄素 大黄酚 大黄素
甲醚
总量
生大黄 ００５５９ ０２２６９ ００５２９ ００７８０ ００２４１ ０４３７７
酒大黄 ００４７８ ０１７２５ ００３７８ ００６２９ ００１９９ ０３４１０
醋大黄 ００５４０ ０１８８４ ００４７７ ００７７４ ００２４９ ０３９２５
熟大黄 ００９３９ ０３４３１ ０１２１４ ０１４５７ ００５９９ ０７６４０
炭大黄 ００５７１ ０２８５５ ００９２３ ０１５４７ ００４８２ ０６３７８
３ 结果与讨论
本研究中以ＨＰＬＣ法同时测定大黄不同饮片中
芦荟大黄素等５种蒽醌苷元的含量，经甲醇、乙醇、
氯仿等３种提取溶剂以及超声、回流和冷浸等提取
方法比较，样品以甲醇直接超声提取后测定各饮片
中蒽醌苷元的含量，较之样品酸水解后的含量测定
方法，可以较为真实、直观地反映大黄不同饮片中５
种蒽醌苷元成分含量的变化情况。同时对检测波
长、色谱流动相等进行了考察，结果表明该方法灵敏
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可靠、重现性好，可用于大黄不同饮片的含量
比较测定。
通过对大黄生片、酒片、醋片、熟片以及炭片等
５种饮片各１０批次的含量测定，并以平均含量进行
比较，结果各饮片中５种蒽醌苷元成分的含量呈现
一定的变化规律。从各成分含量分析可见，大黄不
同饮片中均以大黄酸含量最高，大黄酚次之，大黄素
和芦荟大黄素的含量在酒片和醋片中有交替，而大
黄素甲醚的含量最低。从不同饮片的成分含量来
看，各饮片中均含有该 ５种成分，且以熟片含量最
高，炭片次之，生片、醋片再次，酒片含量最低。
大黄含有的蒽醌类成分有蒽醌苷和蒽醌苷元，
从结构上看，有由苷向苷元转化的可能。从５种饮
片的蒽醌类成分总量比较分析，结果熟片 ＞炭片 ＞
生片＞醋片＞酒片；以生品的总量为１计算，结果熟
片约为１７５，炭片约为１４６，醋片约为０９０，酒片约
为０７８。此与不同饮片的炮制工艺过程密切相关，
醋片和酒片均为短时间加热炒制，蒽醌苷元含量较
之生品有所下降，推测在它们的炮制过程该类成分
是以破坏为主。熟片以黄酒闷润后长时间的隔水蒸
制和炭片的高温炒制在蒽醌类成分遭到破坏的同
时，也促使蒽醌苷向苷元转化，但转化程度不一，且
蒽醌苷的转化过程大于苷元的破坏过程。深入的研
究尚需结合蒽醌苷的含量分析进行。
［参考文献］
［１］ 李先端，黄璐琦．炮制对中药大黄５种蒽醌成分含量的影响
［Ｊ］．中国中药杂志，２００５，３０（１２）：９０４．
［２］ 李玉林，车国冬，索有瑞，等．青海栽培和野生唐古特大黄蒽醌
类成分的 ＨＰＬＣ对比分析［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００８
（２０）：４６９．
Ａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎｆｉｖｅｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｆｒｏｍ
Ｒｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ
ＺＨＡＮＧＣｕｎ，ＬＩＬｉ，ＸＩＡＯＹｏｎｇｑｉｎｇ，ＬＩＮＮａ，ＬＩＵＣｈｕｎｆａｎｇ，ＬＩＧｕｉｌｉｕ，ＰＡＮＧＺｈｅｎ，ＣＨＥＮＤｏｎｇｄｏｎｇ，ＴＩＡＮＧｕｏｆａｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭａｄｉｃａ，ＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｆｉｖｅａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｆｉｖｅｄｉｆｅｒｅｎｔｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓｆｒｏｍ
Ｒｈｅｕｍｐａｌａｍａｔｕｍ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｌｅｏｅｍｏｄｉｎ，ｒｈｅｉｎ，ｅｍｏｄｉｎ，ｃｈｒｙｓｏｐｈａｎｏｌａｎｄｐｈｙｓｃｉｏｎｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ
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ｓｅｔａｔ２５４ｎｍａｎｄｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１０ｍＬ·ｍｉｎ－１．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｏｂｔａｉｎｅｄｌｉｎｅａｒｉｔｙｏｆｔｈｅｆｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗａｓｂｅｔｅｒｏｖｅｒ０９９９９
ａｎｄｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｗｅｒｅ９６４４％，９８１１％，９９３０％，９８００％ ａｎｄ９７８６％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ
ｔｈｅｒｅｍａｒｋａｂｌｅｖａｒｉａｔｉｏｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓｓｈｏｗｉｎｔｈｅｆｉｖｅｄｉｆｅｒｅｎｔｐｒｏｃｅｓｓｅｄｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｅｎｏｐａｒｃｈｅｄｐｉｅｃｅｓ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆ
ｔｈｅｆｉｖｅａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｈａｖｅｅｖｉｄｅｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｈｅｂｒａｉｓｉｎｇｗｉｔｈｌｉｑｕｏｒａｎｄｔｈｅｃｈａｒｉｎｇｐｒｏｄｕｃｔｓ，ａｎｄｒｅｄｕｃｅｄｉｎｔｈｅ
ｖｉｎｅｇａｒａｎｄｔｈｅｌｉｑｕｏｒｓａｕｔｅｄｐｉｅｃｅｓ．
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［责任编辑 周驰］
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