全 文 ：ＨＰＬＣ测定刺壳花椒中木兰花碱含量的研究
汪　灿１，伍城颖２，汪文涛１，马一华３
（１．湖南省药品检验所，湖南 长沙 ４１０００１；２．湖南中医药大学，湖南 长沙 ４１０２０８；
３．株洲千金药业股份有限公司，湖南 株洲 ４１２００３）
［收稿日期］　２００８１００９
［基金项目］　湖南省科学技术厅科技计划重点项目（２００７ＳＫ２００５）
［通信作者］　汪文涛，主任药师，主要从事新药研发，Ｔｅｌ：（０７３１）
２２７５８４８，Ｅｍａｉｌ：ｈｎｙｊｗｗｔ＠１６３．ｃｏｍ
　　芸香科花椒属刺壳花椒 Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍｅｃｈｉｎｏ
ｃａｒｐｕｍＨｅｍｓｌ是我国南方地区民间常用药，主要产
于西南及湖南、湖北、广东、广西等地，其药用部位有
根、根皮、茎和叶，有行气止痛的功效。刺壳花椒中
已知的化学成分有木兰花碱、α别隐品碱、１１甲氧
基白屈菜红碱、白藓碱、γ花椒碱、茵芋碱等［１３］。本
实验选用有抗炎［４］作用的木兰花碱为指标，建立了
高效液相色谱法测定刺壳花椒中木兰花碱含量的方
法，并对１０批刺壳花椒药材中木兰花碱的含量进行
了测定，为刺壳花椒药材的质量控制提供实验依据。
１　材料
ＬＣ２０ＡＴ高效液相色谱仪、ＳＰＤＭ２０Ａ二极管
阵列检测器、ＣＴＯ２０ＡＣ柱温箱、ＳＩＬ２０ＡＣ自动进样
器（日本岛津）、ＬＣｓｏｌｕｔｉｏｎ色谱工作站（日本岛
津）、ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×２５０ｍｍ，５
μｍ）、ＡＵＷ２２０Ｄ电子天平（日本岛津）。木兰花碱
（天津中新药业中药现化代技术工程中心）、乙腈
（色谱纯，浙江临海市浙东特种试剂厂台州）、水（重
蒸水经０４５μｍ微孔滤膜抽滤）；磷酸、三乙胺等其
余试剂均为分析纯（湖南师大化学试剂厂）。
１０批药材于２００６年８月由株洲千金药业采集
于湖南省张家界市，经中南林业科技大学鉴定为芸
香科花椒属的刺壳花椒 Ｚ．ｅｃｈｉｎｏｃａｒｐｕｍ，药用部位
根和茎。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８色谱柱（４６ｍｍ×
２５０ｍｍ，５μｍ）；柱温３０℃；流动相为乙腈０２％磷
酸和０２％三乙胺水溶液（１５∶８５）；流速１０ｍＬ·
ｍｉｎ－１；检测波长２７８ｎｍ；分析时间为２０ｍｉｎ；每次
进样检测前用流动相平衡至少２０ｍｉｎ。
２．２　对照品溶液的制备　精密称取木兰花碱对照
品２９ｍｇ，用甲醇溶解并定容至２５ｍＬ，０４５μｍ微
孔滤膜过滤，得到１１６ｇ·Ｌ－１木兰花碱对照品溶
液。
２．３　供试品溶液的制备　精密称取刺壳花椒粉末
约１０ｇ，置圆底烧瓶中，加甲醇２０ｍＬ，水浴上回流
１ｈ，放冷后滤过，用５ｍＬ甲醇洗涤滤渣，合并滤液，
蒸干，加色谱甲醇溶解，并转移定容至１０ｍＬ量瓶
中，０４５μｍ微孔滤膜过滤后得供试品溶液。
２．４　线性关系考察　精密吸取１１６ｇ·Ｌ－１的木兰
花碱对照品溶液１ｍＬ，用甲醇定容至１０ｍＬ，即得
０１１６ｇ·Ｌ－１的木兰花碱对照品溶液。
分别精密吸取０１１６ｇ·Ｌ－１的木兰花碱对照品
溶液各２，１０μＬ及质量浓度为１１６ｇ·Ｌ－１的木兰
花碱对照品溶液各６，８，１０，１５μＬ，注入高效液相色
谱仪，按２．１项下条件测定。色谱图见图１。
１木兰花碱（图２同）。
图１　木兰花碱对照品的ＨＰＬＣ图谱
　　以进样量（Ｘ）为横坐标，峰面积（Ｙ）为纵坐标
进行回归，回归方程为 Ｙ＝３９２９０７Ｘ－９１８３７（ｒ＝
０９９９６），木兰花碱在０２３２～１７４０μｇ线性关系
良好。
２．５　精密度考察　精密吸取质量浓度为１１６ｇ·
Ｌ－１对照品溶液６μＬ，连续进样５次，按２．１项下条件
测定，测定相应峰面积，结果平均峰面积 ２０１９８３，
ＲＳＤ１１％。
２．６　稳定性考察　取供试品溶液，按２．１项下条件
测定，分别于０，２，４，８，１２，２４ｈ后测定，平均峰面积
·２２９·
第３４卷第７期
２００９年４月
　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　７
　Ａｐｒｉｌ，２００９
４３３１７９３，ＲＳＤ１９％，结果表明供试品溶液在２４ｈ
内稳定。
２．７　重复性考察　取同一批样品，按２．３项下的方
法操作，制备５份供试品溶液，依２．１项下条件测
定，平均木兰花碱质量分数１２３％，ＲＳＤ１６％。
２．８　加样回收率试验　精密称取已知含量的样品
粉末０５ｇ，共６份，分别加入１１６ｇ·Ｌ－１的对照品
溶液４，５，６ｍＬ各２份，同２．３项下方法制备供试品
溶液，再按２．１项下条件测定，计算木兰花碱的平均
回收率，结果见表１。
表１　木兰花碱回收率
样品中量
／ｍｇ
加入量
／ｍｇ
测定量
／ｍｇ
回收率
／％
均值
／％
ＲＳＤ
／％
６１３９ ４６４ １０６６ ９７５１ 　 　
６２２２ ４６４ １０７５ ９７６６ 　 　
６０９９ ５８０ １２０１ １０２０２
９９４４ ２１
６２７３ ５８０ １２１４ １０１２２ 　 　
６１１８ ６９６ １３００ ９８７７ 　 　
５９４７ ６９６ １２７５ ９７７５ 　 　
２．９　样品的含量测定　取刺壳花椒药材粉末，精密
称取约１０ｇ，按２．３项方法处理后制备供试品溶
液，取供试品溶液及对照品溶液各１０μＬ进样，按
２．１项下条件测定。样品 ＨＰＬＣ色谱图见图２。样
品中木兰花碱的含量测定结果见表２。
图２　刺壳花椒样品的ＨＰＬＣ图
表２　１０批样品中木兰花碱含量（ｎ＝３）
样品编号 质量分数／ｍｇ·ｇ－１ ＲＳＤ／％
２００６００３１ １２２２１ １４
２００６００３２ １２９３２ ２５
２００６００３３ ６８５２ ２７
２００６００３４ １１１６９ １６
２００６００３５ １４１５２ ２１
２００６００３６ １０６０４ １３
２００６００３７ ６４５１ １９
２００６００３８ ４９４８ １２
２００６００３９ ６５８８ １７
２００６００３１０ １０６０９ ２７
３　讨论与小结
在供试品溶液制备过程中，考察了乙醇回流、乙
醇超声、乙醇温浸、甲醇回流、甲醇超声、水煎煮６种
提取方法，甲醇回流提取物中的木兰花碱含量最高，
因此选择甲醇提取法制备供试品溶液。
利用高效液相色谱法对产于湖南张家界的１０
批刺壳花椒药材中的木兰花碱进行定量分析，木兰
花碱的含量范围在 ０４９５％ ～１４１５％。本实验对
木兰花碱的含量测定表明，该成分在刺壳花椒中的
含量较高，这对于刺壳花椒药材的质量评价有一定
的参考价值。
［参考文献］
［１］　国家中医药管理局中华本草编辑委员会．中华本草．第４卷
［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，１９９９：９８７．
［２］　张灿奎，郑安庆，糜留西，等．刺壳椒化学成分研究［Ｊ］．武汉植
物学研究，２０００，１８（５）：４４１．
［３］　陈世文，赖茂祥．１４种花椒属药用植物根的生药鉴定［Ｊ］．药学
学报，１９８５，２０（８）：５９８．
［４］　ＥｓｒａＫüｐｅｌｉ，ＭüｂｅｒａＫｏｓａｒ，ＥｒｄｅｍＹｅｓｉｌａｄａ，ｅｔａｌ．Ａｃｏｍｐａｒａ
ｔｉｖｅｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ，ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｖｅａｎｄａｎｔｉｐｙｒｅｔｉｃ
ｅｆｅｃｔｓｏｆｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅａｌｋａｌｏｉｄｓｆｒｏｍｔｈｅｒｏｏｔｓｏｆＴｕｒｋｉｓｈＢｅｒｂｅｒｉｓ
ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．ＬｉｆｅＳｃｉ，２００２，７２（６）：６４５．
［责任编辑　王亚君］
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２００９年第３４卷第五期插页彩图“羌活基地”应为“川贝母基地”。
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第３４卷第７期
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Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　７
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