全 文 ：酸碱对药大黄与黄柏在大黄硝石汤中配伍的
化学研究
裴妙荣，段秀俊，裴香萍
（山西中医学院 中药系，山西 太原 ０３００２４）
［摘要］ 目的：考察酸碱对药大黄与黄柏在大黄硝石汤中配伍后酸、碱性成分的变化情况。方法：采用高效液相色
谱法对大黄、黄柏单味药提取液、大黄黄柏对药提取液及全方提取液中蒽醌类成分和小檗碱的提取量进行了测定。结果：
蒽醌类成分及小檗碱的提取量随着单药、对药及全方的配伍变化，水煎煮降低趋势明显，乙醇提取变化不明显，且提取量
不及水提取。水煎煮单药与对药之间变化趋势尤其明显，而小檗碱的变化趋势较蒽醌类成分更明显。结论：大黄、黄柏单
煎和乙醇回流、大黄、黄柏对药煎煮和乙醇回流、大黄硝石汤全方煎煮和乙醇回流，酸、碱性成分的提取量发生有规律的
变化。
［关键词］ 大黄；黄柏；大黄硝石汤；酸碱对药；配伍化学
［收稿日期］ ２００９００００
［基金项目］ 国家自然科学基金项目 （３０４７２１２５）
［通信作者］ 裴妙荣，教授。Ｔｅｌ：（０３５１）２２７２１８０，Ｆａｘ：（０３５１）
２２７２２６９，Ｅｍａｉｌ：ｐｅｉｍｒ６０２＠１６３．ｃｏｍ
大黄硝石汤源于张仲景的 《金匮要略》，由大
黄、黄柏、硝石、栀子 ４味药组成，具有清热通
便，利湿退黄的功效，主治热重于湿型黄疸表热里
实者［１］。方中大黄泄胆胃之瘀热而除中焦之滞；
黄柏、栀子清上下焦之热邪；方中硝石后人解为芒
硝，将于另文报道。芒硝寓于苦寒泄热诸味中，以
逐瘀消坚。诸味相协，使三焦之邪热从大便而出，
为泄下之重剂。临床常有应用，但目前还未见有关
大黄硝石汤的实验研究报道。方中大黄主要含有蒽
醌类成分，黄柏主要含有生物碱类成分，二者为一
对酸碱对药。本文研究了大黄与黄柏在大黄硝石汤
中配伍后酸、碱性成分的提取量变化情况，现将研
究结果报道如下。
１ 材料
Ｗａｔｅｒｓ５１５系列高效液相色谱仪；２９９６二极管
阵列检测器；Ｍ３２色谱工作站。大黄为蓼科植物掌
叶大黄ＲｈｅｕｍｐａｌｍａｔｕｍＬ．的干燥根及根茎、黄柏
为芸 香 科 植 物 黄 皮 树 Ｐｈｅｌｏｄｅｎｄｒｏｎ ｃｈｉｎｅｎｓｅ
Ｓｃｈｎｅｉｄ．的干燥树皮，购自四川省五块石药材市
场；栀子为茜草科植物栀子ＧａｒｄｅｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓＥｌ
ｌｉｓ的干燥成熟果实、芒硝为天然硝酸钾经加工而
成的结晶体，购自河北省茂安中药材有限公司，以
上药材均由山西中医学院裴香萍老师鉴定为正品。
芦荟大黄素 （批号 １１０７９５２００６０５）、大黄酸 （批
号０７５７２００２０６）、大黄素 （批号１１０７５６２００１１０）、
大黄酚 （批号 １１０７９６２００３１０）、大黄素甲醚 （批
号 １１０７５８２００４０８）、盐酸小檗碱 （批号 ０７１３
９９０６）等化学对照品购自中国药品生物制品检定
所。色谱测定用水为重蒸水，甲醇为色谱纯，其他
所用试剂均为分析纯。
２ 方法
２．１ 大黄硝石汤配伍研究提取物的制备
２．１．１ 测定蒽醌类成分提取液的制备 按大黄
硝石汤处方比例 （大黄、黄柏、芒硝、栀子用量
比为１５∶１５∶１５∶１３）［１］，精密称取大黄单味药、
大黄黄柏对药、大黄硝石汤全方，分别加水煎煮２
次，一部分提取液双层纱布滤过，一部分提取液经
离心处理，作为水煎液和水煎离心液。精密称取单
味药、对药及全方，分别加 ９５％乙醇回流提取 ２
次，每次１ｈ，作为乙醇提取液。
２．１．２ 测定小檗碱提取干膏的制备 按大黄硝
石汤处方比例，精密称取黄柏单味药、大黄与黄柏
对药、大黄硝石汤全方，同２．１．１测定蒽醌类成
分的制备方法制备水煎液与水煎离心液，２种药液
分别浓缩，６５℃干燥得水提取干膏。以乙醇为溶
剂，同２．１．１法制备乙醇提取液，回收乙醇浓缩
干燥得乙醇提取干膏。
２．２ 蒽醌类成分的含量测定方法
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２．２．１ 色谱条件［２８］ 色谱柱 ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８
（４６ｍｍ×２００ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０１％磷
酸 （８０∶２０）；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２５４
ｎｍ；柱温室温。
２．２．２ 对照品溶液的配制 精密称取芦荟大黄
素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照
品，分 别 加 甲 醇 制 成 ００５６，００４６，００５６，
００６，００６ｇ·Ｌ－１的溶液，摇匀，０４５μｍ滤膜
过滤后作为对照品溶液。
２．２．３ 供试品溶液的制备 分别取相当于大黄
１５ｇ的上述测定蒽醌类成分的水提液，浓盐酸调
ｐＨ至 ２，水浴水解 １ｈ，放冷，二氯甲烷萃取 ５
次，第１次５０ｍＬ，第２～５次４０ｍＬ，二氯甲烷液
蒸干，残渣加甲醇溶解并转移至１０ｍＬ量瓶内，加
甲醇稀释至刻度，摇匀，作为检测总蒽醌的水煎液
与水煎离心液的供试品溶液；浓盐酸调 ｐＨ至２后
不水解直接萃取制备检测游离蒽醌的供试品溶液。
分别取相当于大黄 １５ｇ的上述乙醇提取液，蒸
干，残渣加水转移至分液漏斗中，同上制备检测总
蒽醌与游离蒽醌的乙醇提取液的供试品溶液。
２．２．４ 方法学考察 以检测总蒽醌类成分的大
黄硝石汤水煎液供试品溶液作为方法学考察的供试
品溶液。实验对线性范围、精密度、稳定性、重复
性及加样回收率等方法学指标进行了考察。其中芦
荟大黄素在０００７０～７０４μｇ、大黄酸在０００５３
～５２８μｇ、大黄素在０００５２～５１６μｇ、大黄酚
在０００５２～５２２μｇ、大黄素甲醚在 ０００２９～
２９４μｇ范围内呈良好线性，相关系数分别为
０９９９５，０９９９３，０９９９２，０９９９４，０９９９３，
回归方程的处理采用了加权最小二乘法；５种蒽醌
类成分精密度试验 ＲＳＤ分别为 １７％，１６％，
１８％，１５％，１８％；１２ｈ稳定性试验 ＲＳＤ分别
为１４％，１１％，１８％，１１％，１６％；重复性
试验 ＲＳＤ分别为 １０％，１３％，１７％，１１％，
１０％；芦荟大黄素平均回收率为 ９９４６％，ＲＳＤ
２２％；大 黄 酸 平 均 回 收 率 为 ９８７９％，ＲＳＤ
２０％；大 黄 素 平 均 回 收 率 为 ９９４３％，ＲＳＤ
２１％；大 黄 酚 平 均 回 收 率 为 ９８２５％，ＲＳＤ
２０％；大黄素甲醚平均回收率为 ９９１２％，ＲＳＤ
２２％。
２．３ 小檗碱的含量测定方法
２．３．１ 色谱条件［９１２］ 色谱柱Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ（钻石）
Ｃ１８ （４６ｍｍ×２００ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０５％
三乙胺溶液 （５０∶５０），磷酸调 ｐＨ＝３；检测波长
２６５ｎｍ；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；柱温室温。
２．３．２ 对照品溶液的配制 精密称取小檗碱对
照品，加甲醇制成 ０５２ｇ·Ｌ－１的溶液，摇匀，
０４５μｍ滤膜过滤后作为对照品溶液。
２．３．３ 供试品溶液的制备 分别取相当于黄柏
０６ｇ的上述测定小檗碱提取物的各干膏，置１００
ｍＬ量瓶中，加流动相 ８０ｍＬ，超声处理 ４０ｍｉｎ，
放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤
液作为水煎滤过、水煎离心及乙醇提取的供试品溶
液。
２．３．４ 方法学考察 以检测小檗碱的大黄硝石
汤水煎液供试品溶液作为方法学考察的供试品溶
液。实验对小檗碱测定的线性范围、精密度、稳定
性、重复性及加样回收率等方法学指标进行了考
察。小檗碱在０２６～２６μｇ内呈良好线性，相关
系数为０９９９６；精密度试验 ＲＳＤ１３％；１２ｈ稳
定性试验 ＲＳＤ１３％；重复性试验 ＲＳＤ１９５％；
平均回收率为９７９１％，ＲＳＤ２４７％。
３ 配伍研究测定结果
３．１ 大黄、黄柏单味药、大黄黄柏对药及大黄硝
石汤全方水煎液测定结果
游离蒽醌、总蒽醌及小檗碱的提取量随着单
药、对药、全方的配伍变化，水煎液及水煎离心液
均显著降低，尤其是单药与对药之间变化明显，小
檗碱的降低趋势比蒽醌类成分的更显著。且水煎离
心液的提取量较相对应的水煎液更低 （见表 １，
３）。
对药煎煮液及全方煎煮液蒽醌类成分和小檗碱
的提取量均明显高于对药煎煮离心液及全方煎煮离
心液 （见表１，３）。
３．２ 大黄、黄柏单味药、大黄黄柏对药及大黄汤
全方乙醇回流提取测定结果
游离蒽醌、总蒽醌及小檗碱的提取量随着单
药、对药、全方的配伍变化有所升高，但变化均不
明显。且乙醇回流单味药酸、碱性成分的提取量均
远不及水煎煮 （见表２，３）。
４ 讨论
实验参照文献报道方法［２１２］，建立了样品液中
大黄与黄柏的含量测定方法，经方法学考察，认为
建立的方法操作简便，结果准确，灵敏度高，重现
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性好。
水提取液中总蒽醌类成分及小檗碱的提取量随
着单药、对药、全方的不同配伍降低趋势明显
（总蒽醌对药与全方的提取量分别为单味药的
５８９％，５２５％；小檗碱对药与全方的提取量分别
为单味药的３０９％，２８２％）。单味药与对药的提
取量变化情况看，酸碱对药大黄与黄柏在合煎时极
易形成沉
表１ 水煎煮蒽醌类成分提取量情况 ｍｇ
处理方法 配伍方式 芦荟大黄素 大黄酸 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚 总计
水煎液游离蒽醌 单药 １３１９ ２１８９ １５９３ １５５３ １０７２ ７７２６
对药 ０８９９ １６６１ １０４５ ０８２７ ０５０３ ４９３５
全方 ０６４０ １２０９ ０６５０ ０４３５ ０２２４ ３１５８
水煎离心游离蒽醌 对药 ０４７６ １００８ ０４２４ ０２５３ ０１４３ ２３０４
全方 ０４１０ ０８５６ ０３５３ ０２４５ ００９０ １９５３
水煎液总蒽醌 单药 ３５５８ ２４２６ ４１０５ ３８８３ １９８２ １５９５４
对药 ２３０３ ２０４２ ２０４９ ２０７９ ０９３１ ９４０４
全方 ２２６８ １９５５ １８３１ １６４２ ０６８１ ８３７７
水煎离心总蒽醌 对药 １６７６ １５３４ １２９４ ０８５７ ０５１７ ５８７８
全方 １６３４ １４５２ １２８５ ０７６０ ０４９９ ５６３０
表２ 乙醇提取蒽醌类成分提取量情况 ｍｇ
测定类型 配伍方式 芦荟大黄素 大黄酸 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚 总计
游离蒽醌 单药 ００７５ ００４６ ０１３６ ０２４１ ００５５ ０５５３
对药 ０１４２ ００８４ ０１７１ ０３０４ ０１１２ ０８１３
全方 ０１４３ ０１０５ ０１９９ ０３１８ ０１２９ ０８９４
总蒽醌 单药 １４６９ ０９４６ １７３２ １５９７ ０８２８ ６５７２
对药 １５３４ １２３６ １８３２ １５９７ ０８９７ ７０９６
全方 １６０８ １３２０ １８６８ １６２５ ０８９９ ７３２０
表３ 小檗碱提取量 ｍｇ
配伍方式 水煎液 水煎离心 乙醇回流
单药 １５５１２ １５５１２ ９８１８
对药 ４７９１ １７８５ ９５４５
全方 ４３７３ １７５８ １０８２４
淀，导致蒽醌类成分及小檗碱提取量大量减损；可
见大黄与含生物碱类成分的中药或黄柏与含酸性成
分的中药共处一方时，共煎会导致蒽醌类成分和小
檗碱提取量下降，药效作用减弱，为了提高药物疗
效，节省药材，笔者认为遇此类方剂时，大黄、黄
柏应分别单煎。全方与对药提取量差异不明显，说
明大黄硝石汤中其他药味对大分子复合物的形成未
产生明显影响。
研究过程中对煎液的处理设计了纱布滤过与煎
液离心２种处理方式，纱布滤过可保留煎煮过程中
形成的沉淀；离心处理则除去了提取液中的全部沉
淀物。从实验数据看对药煎煮液对药煎煮离心液、
全方煎煮液全方煎煮离心液两两比较，２种离心
液蒽醌类成分及小檗碱的提取量均显著低于相应的
煎煮液 （对药煎煮液与水煎离心液，蒽醌类成分
的提取量分别为单味药的５８９％与３６８％，小檗
碱分别为单味药的３０９％与１１５％；全方水煎液
与水煎离心液，蒽醌类成分的提取量分别为单味药
的 ５２５％与 ３５３％，小檗碱分别为单味药的
２８２％与１１３％），说明通过离心处理可除去蒽醌
类成分与小檗碱形成的大分子复合物，水煎液中的
大分子复合物稳定性差，在测定过程中采用酸、碱
处理即可使其分解。
乙醇回流单味大黄蒽醌类成分提取量为水煎煮
的４１２％，提示乙醇不应作为蒽醌类成分的提取
溶媒，其原因为大黄中蒽醌类成分尤其是结合型蒽
醌在水中的溶解度较大，且蒽醌类成分在药材中多
以盐的形式存在，增加了在水中的溶解度，而水煎
煮时还有其他成分的助溶作用，从而出现此种结
果。对于小檗碱提取量，全方乙醇回流远较全方水
煎煮高 （为全方水煎煮的２５倍），是由于乙醇抑
制了酸碱性成分相互间化学反应的进行，减少了小
檗碱的损失。然而全方乙醇回流的提取量还是不及
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单味黄柏水煎煮 （为单味水煎煮的６９８％），可见
大黄硝石汤中的黄柏应单独水煎煮，才能保证小檗
碱最大限度地溶出。
对水煎液实验结果进行分析，游离蒽醌对药比
单药的提取量下降３６１３％，总蒽醌对药比单药的
提取量下降４１０５％，表明游离蒽醌与结合蒽醌均
可与小檗碱发生化学反应，且难易程度没有明显差
异。
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Ｃｏｍｐａｔａｂｉｌｉｔｙｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆａｃｉｄａｌｋａｌｉｎｅｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅｏｆ
ＤａｈｕａｎｇａｎｄＨｕａｎｇｂａｉｉｎＤａｈｕａｎｇｘｉａｏｓｈｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎ
ＰＥＩＭｉａｏｒｏｎｇ，ＤＵＡＮＸｉｕｊｕｎ，ＰＥＩＸｉａｎｇｐｉｎｇ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＳｈａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｔａｉｙｕａｎ０３００２４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｐａｔｅｒｎｏｆａｌｋａｌｉｎｅａｎｄａｃｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｄａｈｕａｎｇａｎｄｈｕａｎｇｂａｉａｍｏｕｎｇｄｉｆ
ｆｅｒｅｎｔｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｉｎＤａｈｕａｎｇｘｉａｏｓｈｉｄｅｃｏｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓａｎｄｂｅｒｂｅｒｉｎｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣｉｎ
ｓａｍｐｌｅｓｏｆＤａｈｕａｎｇｅｘｔｒａｃｔｓ，Ｈｕａｎｇｂａｉｅｘｔｒａｃｔｓ，ＤａｈｕａｎｇａｎｄＨｕａｎｇｂａｉｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅｓｅｘｔｒａｃｔｓ，ａｎｄｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｗｈｏｌｅｒｅｃｉｐｅ．Ｒｅ
ｓｕｌｔ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓａｎｄｂｅｒｂｅｒｉｎｅｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ：ｆｒｏｍｃｏｍｐｏｎｅｎｔｍｅｄｉｃｉｎａｌｍａｔｅ
ｒｉａｌａｌｏｎｅｔｏｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅｓ，ａｎｄｗｈｏｌｅｒｅｃｉｐｅ．ｔｈｅｃｈａｎｇｅｐａｔｅｒｎｗａｓｍｏｒｅａｐｐａｒｅｎｔｉｎｗａｔｅｒｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓｔｈａｎｉｎｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓ．
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［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｄａｈｕａｎｇ；Ｈｕａｎｇｂａｉ；ａｃｉｄａｌｋａｌｉｎｅｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅ；ＤａｈｕａｎｇＸｉａｏｓｈｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎ
［责任编辑 周 驰］
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