全 文 ：毛细管气相色谱法测定艾迪滴丸中斑蝥素的含量
王金，曲韵智
（北京正大绿洲医药科技有限公司，北京 １０１１１３）
［摘要］ 目的：建立艾迪滴丸中斑蝥素的含量测定方法。方法：采用毛细管气相色谱法测定了艾迪滴丸中斑蝥素的含
量。色谱柱为ＨＰ５（３０ｍ×０３２ｍｍ，０２５ｍ），检测器为ＦＩＤ检测器，载气为氮气，流速５ｍＬ·ｍｉｎ－１，进样口温度２５０℃，检
测器温度３００℃，进样方式为分流进样，分流比为１０∶１。结果：加样回收率为９９０％，ＲＳＤ１９％，线性范围１０４～１００４ｍｇ·
Ｌ－１，ｒ＝０９９９９，重复性ＲＳＤ１６％（ｎ＝５），精密度ＲＳＤ１１％（ｎ＝５）。结论：本方法准确、可靠，可作为艾迪滴丸中斑蝥素的
含量测定方法。
［关键词］ 艾迪滴丸；斑蝥素；含量测定；毛细管气相色谱法
［收稿日期］ ２００９０６１０
［通信作者］ 曲韵智，教授，硕士生导师，主要从事新药开发。
Ｔｅｌ：１３９１１３８６１０４，Ｅｍａｉｌ：ｙｕｎｚｈｉｑ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
艾迪滴丸为改变已上市中药品种剂型的七类中
药制剂，原剂型为注射液，广泛应用于临床治疗原发
性肝癌，效果显著。艾迪滴丸由斑蝥、人参、刺五加、
黄芪组成，其中斑蝥为君药，且为毒性中药，很容易
发生中毒，根据国家新药研究指导原则要求，应严格
控制其含量。斑蝥素具有挥发性，但无 Ｃ＝Ｃ键和
共轭结构，无强的生色团，故一般难以用高效液相色
谱法测定，含量测定方法主要采用毛细管气相色谱
（ＧＣ）法［１４］。本研究采用毛细管气相色谱法测定斑
蝥素的含量，并进行方法学研究。
１ 材料
Ａｇｉｌｅｎｔ６８２０气相色谱仪（ＦＩＤ检测器，Ａｇｉｌｅｎｔ
ｃｅｒｉｔｙＮＤＳｆｏｒＣｈｅｍｉｃａｌＱＡ／ＱＣ工作站），ＨＰ５色谱
柱（３０ｍ×０３２ｍｍ，０２５ｍ，美国），ＳＰＨ３００氢气
发生器，ＳＰＮ３００氮气发生器，ＳＰＢ３全自动空气源
（北京中惠分析仪器厂），ＫＱ２５０ＤＢ数控超声波清
洗器（昆山市超声仪器有限公司），ＳＡＲＴＯＲＩＵＳ
ＣＰ１２４Ｓ电子分析天平（德国）。
斑蝥素对照品（中国药品生物制品检定所，批
号 １１０７８３２００５０３），艾迪滴丸中试制剂３批和艾迪
斑蝥阴性滴丸 １批（为本公司自制，批号分别为
２００６０４０８，２００６０４１６，２００６０４２３）。三氯甲烷（北京化
工厂，分析纯，批号２００５０６１２）。乙醚（北京化工厂，
分析纯，批号２００５０９１６）。水为蒸馏水（公司自制）。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件和系统适用性试验 ＨＰ５色谱柱
（０３２ｍ×３０ｍｍ，０２５ｍ），载气为氮气，流速 ５
ｍＬ·ｍｉｎ－１，进样方式为分流进样（１０∶１），理论塔
板数按斑蝥素峰计算应不低于８０００，其他条件见
表１。
表１ 斑蝥素气相色谱条件
时间
／ｍｉｎ
柱温
／℃
速率
／℃·ｍｉｎ－１
检测器温度
／℃
进样口温度
／℃
载气流速
／ｍＬ·ｍｉｎ－１
氢气流速
／ｍＬ·ｍｉｎ－１
空气流速
／ｍＬ·ｍｉｎ－１
０～４ １１０ ０
４～１６７ １１０～１６０ ３ ２５０ ３００ ５ ４０ ４００
１６７～２５５ １６０～２２０ ９
２．２ 对照品溶液配制 精密称取斑蝥素对照品约
５ｍｇ，置５０ｍＬ量瓶中，用三氯甲烷溶解并稀释至
刻度，摇匀，制成浓度为１００ｍｇ·Ｌ－１的对照品溶
液。
２．３ 供试品溶液的配制 取质量差异下艾滴滴丸
细粉约８ｇ，精密称定，置５０ｍＬ锥形瓶中，加蒸馏水
２０ｍＬ，超声溶解（２５０Ｗ，４０ＫＨｚ），转移至５０ｍＬ分
液漏斗中，用５ｍＬ蒸馏水洗涤锥形瓶，洗涤液一并
转移至分液漏斗中，乙醚萃取４次，每次２０ｍＬ，合
并萃取液，置１００ｍＬ蒸发皿中，室温下挥干乙醚，残
渣加三氯甲烷定容至１０ｍＬ量瓶中，０４５ｍ微孔滤
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膜过滤，取续滤液，即得。
２．４ 专属性试验 取斑蝥阴性艾迪滴丸细粉约８
ｇ，精密称定，按照供试品溶液配制方法，制备阴性供
试品溶液。精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性
供试品溶液各１Ｌ，注入气相色谱仪，记录色谱图，
见图１。结果表明，供试品与对照品在相同保留时
间处有斑蝥素的色谱峰，而阴性供试品溶液没有干
扰，表明专属性好。
Ａ．斑蝥素（ｂｍｓ）对照品；Ｂ．艾迪滴丸供试品；Ｃ．阴性供试品。
图１ 艾迪滴丸专属性ＧＣ图
２．５ 线性关系考察 精密吸取对照品溶液（１，２，
４，６，８）ｍＬ，置１０ｍＬ量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻
度，摇匀。分别精密取上述对照溶液各１μＬ，注入
气相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录峰面积。以
斑蝥素质量浓度（ｍｇ·Ｌ－１）为横坐标，峰面积积分
值为纵坐标，绘制标准曲线。计算回归方程 Ｙ＝
０７２３８Ｘ－０１４３３（ｒ＝０９９９９，ｎ＝５）。结果表明
斑蝥素在 １０４～１００４ｍｇ·Ｌ－１呈良好的线性关
系。
２．６ 进样精密度试验 精密量取斑蝥素对照品溶
液（４０ｍｇ·Ｌ－１）溶液１μＬ，注入气相色谱仪，重复
进样５次，记录色谱图，计算ＲＳＤ１１％。
２．７ 检测限和定量限 以３倍峰高对基线噪声计
算，本方法的最低检测浓度为０５ｍｇ·Ｌ－１，定量限
为２ｍｇ·Ｌ－１。
２．８ 重复性试验 按供试品溶液配制方法，制备同
一批次样品（批号 ２００６０４０８）５份，分别测定含量，
测得平均质量分数为５９６μｇ·ｇ－１，ＲＳＤ１６％。
２．９ 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，分别
于０，２，４，８，１２，２４ｈ进样，测定峰面积，结果表明，
供试品溶液在２４ｈ内稳定，ＲＳＤ２４％。
２．１０ 加样回收率试验 精密称取艾迪滴丸细粉约
４ｇ，６份，精密称定，置５０ｍＬ锥形瓶中，加入质量浓
度为２２８ｍｇ·Ｌ－１的斑蝥素对照品溶液１ｍＬ，水浴
（６０℃）蒸干溶剂，加蒸馏水２０ｍＬ，其余操作同供
试品溶液的配制。精密吸取上述供试品溶液１Ｌ，
注入气相色谱仪，依法测定，计算回收率为９９０％，
ＲＳＤ１９％，结果见表２。
表２ 斑蝥素回收率试验（ｎ＝６）
取样量
／ｇ
样品中量
／μｇ
测得量
／μｇ
回收率
／％
平均值
／％
ＲＳＤ
／％
３９９２６ ２３７８ ４５９１０ ９７１
３９５０１ ２３５２ ４５６５４ ９７１
４０３０６ ２４００ ４７１５８ １０１６
９９０ １９
４０００９ ２３８３ ４６６６１ １００２
４００１３ ２３８３ ４６２０２ ９８１
４００２３ ２３８３ ４６６０６ ９９９
注：加入量均为２２８μｇ。
２．１１ 含量测定 取３批中试制剂，按“供试品试品
溶液的配制”项下制备供试品溶液，分别精密吸取
供试品溶液及对照品溶液各１Ｌ，注入气相色谱仪，
依法测定，结果见表３。
表３ ３样品斑蝥素测定
批号 质量分数／ｇ·ｇ－１
２００６０４０８ ５９１
２００６０４１６ ７７９
２００６０４２３ ７６８
３ 讨论
含量测定是评价药品质量的主要指标之一，要
求采用的方法具有较高的专属性与准确性。本实验
参考原剂型艾迪注射液标准（ＷＳ３Ｂ３８０９９８）中斑
蝥素的含量测定方法，同时参考文献［１４］报道，确
定艾迪滴丸质量标准项下含量测定项仍采用气相色
谱法对斑蝥中的斑蝥素进行测定。
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在样品提取条件的选择方面，由于艾迪滴丸是
自主研发的新剂型，与其他剂型相比，在制剂过程中
加入了大量的辅料聚乙二醇，该辅料在有机溶剂中
具有广泛的溶解性，而气相色谱要求的进样量为１
Ｌ，这就要求进样的样品具有较小的黏度。在供试
品制备过程中，笔者曾尝试采用多种溶剂进行提取
后发现，大量的聚乙二醇的存在，大大的增加了供试
品的黏度，给色谱分析带来困难，因此在试验与经验
相结合的基础上，笔者通过实验研究，证明采用有机
溶剂乙醚萃取的方法，可以达到除去大量的聚乙二
醇，提取斑蝥素的目的，该方法经过试验证明是切实
可行的。
［参考文献］
［１］肖佳尚，刘晓蒙，刘慧琼．毛细管气相色谱法测定参芪抑癌冻干
粉中斑蝥素的含量［Ｊ］．药物研究，２００５，１２（５）：９３５．
［２］ 朱宇红，郝武常．ＧＣ法测定复方斑蝥胶囊中斑蝥索的含量
［Ｊ］．陕西中医，２００４，２５（４）：３５９．
［３］ 曹红，祝业，陈玉敏，等．毛细管气相色谱法测定抗鼻咽癌口服
液中斑蝥素的含量［Ｊ］．中国新药杂志，２００７，１６（４）：３０９．
［４］ 刘传华，陈运久，刘师莲，等．气相色谱法测定复方斑蝥素胶囊
中斑蝥素的含量［Ｊ］．山东中医杂志，２００８，２１（３）：１８０．
［责任编辑 周 驰］
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