全 文 ：酸碱对药大黄与黄柏在大黄硝石汤中配伍的
化学研究
裴妙荣，段秀俊，裴香萍
（山西中医学院 中药系，山西 太原 ０３００２４）
［摘要］　目的：考察酸碱对药大黄与黄柏在大黄硝石汤中配伍后酸、碱性成分的变化情况。方法：采用高效液相色谱法
对大黄、黄柏单味药提取液，大黄、黄柏对药提取液及全方提取液中蒽醌类成分和小檗碱的提取量进行了测定。结果：蒽醌类
成分及小檗碱的提取量随着单药、对药及全方的配伍变化，水煎煮降低趋势明显，乙醇提取变化不明显，且提取量不及水提
取。水煎煮单药与对药之间变化趋势尤其明显，而小檗碱的变化趋势较蒽醌类成分更明显。结论：大黄、黄柏单煎和乙醇回
流，大黄、黄柏对药煎煮和乙醇回流，大黄硝石汤全方煎煮和乙醇回流，酸、碱性成分的提取量发生有规律的变化。
［关键词］　大黄；黄柏；大黄硝石汤；酸碱对药；配伍化学
［收稿日期］　２００９０３１２
［基金项目］　国家自然科学基金项目（３０４７２１２５）
［通信作者］　裴妙荣，教授，Ｔｅｌ：（０３５１）２２７２１８０，Ｆａｘ：（０３５１）２２７２２６９，
Ｅｍａｉｌ：ｐｅｉｍｒ６０２＠１６３．ｃｏｍ
　　大黄硝石汤源于张仲景的《金匮要略》，由大
黄、黄柏、硝石、栀子４味药组成，具有清热通便，利
湿退黄的功效，主治热重于湿型黄疸表热里实
者［１］。方中大黄泄胆胃之瘀热而除中焦之滞；黄
柏、栀子清上下焦之热邪；方中硝石后人解为芒硝，
将于另文报道。芒硝寓于苦寒泄热诸味中，以逐瘀
消坚。诸味相协，使三焦之邪热从大便而出，为泄下
之重剂。临床常有应用，但目前还未见有关大黄硝
石汤的实验研究报道。方中大黄主要含有蒽醌类成
分，黄柏主要含有生物碱类成分，二者为一对酸碱对
药。本文研究了大黄与黄柏在大黄硝石汤中配伍后
酸、碱性成分的提取量变化情况。
１　材料
Ｗａｔｅｒｓ５１５系列高效液相色谱仪；２９９６二极管
阵列检测器；Ｍ３２色谱工作站。大黄为蓼科植物掌
叶大黄ＲｈｅｕｍｐａｌｍａｔｕｍＬ．的干燥根及根茎、黄柏为
芸香科植物黄皮树 ＰｈｅｌｏｄｅｎｄｒｏｎｃｈｉｎｅｎｓｅＳｃｈｎｅｉｄ．
的干燥树皮，购自四川省五块石药材市场；栀子为茜
草科植物栀子ＧａｒｄｅｎｉａｊａｓｍｉｎｏｉｄｅｓＥｌｉｓ的干燥成熟
果实、芒硝为天然硝酸钾经加工而成的结晶体，购自
河北省茂安中药材有限公司，以上药材均由山西中
医学院裴香萍副教授鉴定为正品。芦荟大黄素（批
号１１０７９５２００６０５）、大黄酸（批号０７５７２００２０６）、大
黄素（批号１１０７５６２００１１０）、大黄酚（批号１１０７９６
２００３１０）、大黄素甲醚（批号１１０７５８２００４０８）、盐酸
小檗碱（批号０７１３９９０６）等化学对照品均购自中国
药品生物制品检定所。色谱测定用水为重蒸水，甲
醇为色谱纯，其他所用试剂均为分析纯。
２　方法
２．１　大黄硝石汤配伍研究提取物的制备
２．１．１　蒽醌类成分提取液的制备　按大黄硝石汤
处方比例 （大黄、黄柏、芒硝、栀子用量比为
１５∶１５∶１５∶１３）［１］，精密称取大黄单味药、大黄黄柏
对药、大黄硝石汤全方，分别加水煎煮２次，一部分
提取液双层纱布滤过，一部分提取液经离心处理，作
为水煎液和水煎离心液。精密称取单味药、对药及
全方，分别加９５％乙醇回流提取２次，每次１ｈ，作
为乙醇提取液。
２．１．２　小檗碱提取干膏的制备　按大黄硝石汤处方
比例，精密称取黄柏单味药、大黄与黄柏对药、大黄硝
石汤全方，同２．１．１测定蒽醌类成分的制备方法制备
水煎液与水煎离心液，２种药液分别浓缩，６５℃干燥
得水提取干膏。以乙醇为溶剂，同２．１．１法制备乙醇
提取液，回收乙醇浓缩干燥得乙醇提取干膏。
２．２　蒽醌类成分的含量测定方法
２．２．１　色谱条件［２８］　ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳＣ１８柱（４６
ｍｍ×２００ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０１％磷酸（８０∶
２０）；流速１０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长 ２５４ｎｍ；柱温
室温。
·２１３２·
第３４卷第１８期
２００９年９月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１８
　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００９
２．２．２　对照品溶液的配制　精密称取芦荟大黄素、
大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品，分别加
甲醇制成００５６，００４６，００５６，００６，００６ｇ·Ｌ－１的
溶液，摇匀，０４５μｍ滤膜过滤后作为对照品溶液。
２．２．３　供试品溶液的制备　分别取相当于大黄
１５ｇ的上述测定蒽醌类成分的水提液，浓盐酸调
ｐＨ至２，水浴水解１ｈ，放冷，二氯甲烷萃取５次，第
１次５０ｍＬ，第２～５次４０ｍＬ，二氯甲烷液蒸干，残
渣加甲醇溶解并转移至１０ｍＬ量瓶内，加甲醇稀释
至刻度，摇匀，作为检测总蒽醌的水煎液与水煎离心
液的供试品溶液；浓盐酸调 ｐＨ至２后不水解直接
萃取制备检测游离蒽醌的供试品溶液。分别取相当
于大黄１５ｇ的上述乙醇提取液，蒸干，残渣加水转
移至分液漏斗中，同上制备检测总蒽醌与游离蒽醌
的乙醇提取液的供试品溶液。
２．２．４　方法学考察　以检测总蒽醌类成分的大黄
硝石汤水煎液供试品溶液作为方法学考察的供试品
溶液。试验对线性范围、精密度、稳定性、重复性及
加样回收率等方法学指标进行了考察。其中芦荟大
黄素在０００７０～７０４μｇ、大黄酸在０００５３～５２８
μｇ、大黄 素 在 ０００５２～５１６μｇ、大 黄 酚 在
０００５２～５２２μｇ、大黄素甲醚在０００２９～２９４μｇ
呈良好线性，相关系数分别为 ０９９９５，０９９９３，
０９９９２，０９９９４，０９９９３，回归方程的处理采用了
加权最小二乘法；５种蒽醌类成分精密度试验 ＲＳＤ
分别为 １７％，１６％，１８％，１５％，１８％；１２ｈ稳
定性试验 ＲＳＤ分别为１４％，１１％，１８％，１１％，
１６％；重复性试验 ＲＳＤ分别为 １０％，１３％，
１７％，１１％，１０％；芦荟大黄素平均回收率为
９９４６％，ＲＳＤ ２２％；大 黄 酸 平 均 回 收 率 为
９８７９％，ＲＳＤ ２０％；大 黄 素 平 均 回 收 率 为
９９４３％，ＲＳＤ ２１％；大 黄 酚 平 均 回 收 率 为
９８２５％，ＲＳＤ２０％；大黄素甲醚平均回收率为
９９１２％，ＲＳＤ２２％。
２．３　小檗碱的含量测定方法
２．３．１　色谱条件［９１２］　Ｄｉａｍｏｎｓｉｌ（钻石）Ｃ１８柱（４６
ｍｍ×２００ｍｍ，５μｍ）；流动相甲醇０５％三乙胺溶液
（５０∶５０），磷酸调ｐＨ３；检测波长２６５ｎｍ；流速１０ｍＬ
·ｍｉｎ－１；柱温室温。
２．３．２　对照品溶液的配制　精密称取小檗碱对照
品，加甲醇制成０５２ｇ·Ｌ－１的溶液，摇匀，０４５μｍ
滤膜过滤后作为对照品溶液。
２．３．３　供试品溶液的制备　分别取相当于黄柏
０６ｇ的上述测定小檗碱提取物的各干膏，置 １００
ｍＬ量瓶中，加流动相 ８０ｍＬ，超声处理 ４０ｍｉｎ，放
冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为
水煎滤过、水煎离心及乙醇提取的供试品溶液。
２．３．４　方法学考察　以检测小檗碱的大黄硝石汤
水煎液作为方法学考察的供试品溶液。实验对小檗
碱测定的线性范围、精密度、稳定性、重复性及加样
回收率等方法学指标进行了考察。小檗碱在
０２６～２６μｇ呈良好线性，相关系数为０９９９６；精
密度试验ＲＳＤ１３％；１２ｈ稳定性试验 ＲＳＤ１３％；
重复性试验 ＲＳＤ２０％；平均回收率为 ９７９１％，
ＲＳＤ２５％。
３　配伍研究测定结果
３．１　大黄、黄柏单味药，大黄、黄柏对药及大黄硝石
汤全方水煎液测定结果
游离蒽醌、总蒽醌及小檗碱的提取量随着单药、
对药、全方的配伍变化，水煎液及水煎离心液均显著
降低，尤其是单药与对药之间变化明显，小檗碱的降
低趋势比蒽醌类成分的更显著。且水煎离心液的提
取量较相对应的水煎液更低（表１，２）。
对药煎煮液及全方煎煮液蒽醌类成分和小檗碱
的提取量均明显高于对药煎煮离心液及全方煎煮离
心液（表１，３）。
３．２　大黄、黄柏单味药，大黄、黄柏对药及大黄汤全
方乙醇回流提取测定
游离蒽醌、总蒽醌及小檗碱的提取量随着单药、
对药、全方的配伍变化有所升高，但变化均不明显。
且乙醇回流单味药酸、碱性成分的提取量均远不及
水煎煮（表２，３）。
４　讨论
实验参照文献报道方法［２１０］，建立了样品液中
大黄与黄柏的含量测定方法，经方法学考察，认为建
立的方法操作简便，结果准确，灵敏度高，重复性好。
水提取液中总蒽醌类成分及小檗碱的提取量随
着单药、对药、全方的不同配伍降低趋势明显（总蒽
醌对药与全方的提取量分别为单味药的 ５８９％，
５２５％；小檗碱对药与全方的提取量分别为单味药
的３０９％，２８２％）。从单味药与对药的提取量变
化情况看，酸碱对药大黄与黄柏在合煎时极易形成
沉淀，导致蒽醌类成分及小檗碱提取量大量减损；可
见大黄与含生物碱类成分的中药或黄柏与含酸性成
·３１３２·
第３４卷第１８期
２００９年９月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１８
　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００９
　　 表１　水煎煮蒽醌类成分提取量 ｍｇ　
处理方法 配伍方式 芦荟大黄素 大黄酸 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚 总计
水煎液游离蒽醌　 单药 １３１９ ２１８９ １５９３ １５５３ １０７２ ７７２６
　 对药 ０８９９ １６６１ １０４５ ０８２７ ０５０３ ４９３５
　 全方 ０６４０ １２０９ ０６５０ ０４３５ ０２２４ ３１５８
水煎离心游离蒽醌 对药 ０４７６ １００８ ０４２４ ０２５３ ０１４３ ２３０４
　 全方 ０４１０ ０８５６ ０３５３ ０２４５ ００９０ １９５３
水煎液总蒽醌　　 单药 ３５５８ ２４２６ ４１０５ ３８８３ １９８２ １５９５４
　 对药 ２３０３ ２０４２ ２０４９ ２０７９ ０９３１ ９４０４
　 全方 ２２６８ １９５５ １８３１ １６４２ ０６８１ ８３７７
水煎离心总蒽醌　 对药 １６７６ １５３４ １２９４ ０８５７ ０５１７ ５８７８
　 全方 １６３４ １４５２ １２８５ ０７６０ ０４９９ ５６３０
表２　小檗碱提取量 ｍｇ　
配伍方式 水煎液 水煎离心 乙醇回流
单药 １５５１２ １５５１２ ９８１８
对药 ４７９１ １７８５ ９５４５
全方 ４３７３ １７５８ １０８２４
分的中药共处一方时，共煎会导致蒽醌类成分和小
檗碱提取量下降，药效作用减弱，为了提高药物疗
效，节省药材，笔者认为遇此类方剂时，大黄、黄柏应
分别单煎。全方与对药提取量差异不明显，说明大
黄硝石汤中其他药味对大分子复合物的形成未产生
表３　乙醇提取蒽醌类成分提取量 ｍｇ　
测定类型 配伍方式 芦荟大黄素 大黄酸 大黄素 大黄酚 大黄素甲醚 总计
游离蒽醌 单药 ００７５ ００４６ ０１３６ ０２４１ ００５５ ０５５３
　 对药 ０１４２ ００８４ ０１７１ ０３０４ ０１１２ ０８１３
　 全方 ０１４３ ０１０５ ０１９９ ０３１８ ０１２９ ０８９４
总蒽醌　 单药 １４６９ ０９４６ １７３２ １５９７ ０８２８ ６５７２
　 对药 １５３４ １２３６ １８３２ １５９７ ０８９７ ７０９６
　 全方 １６０８ １３２０ １８６８ １６２５ ０８９９ ７３２０
明显影响。
研究过程中对煎液的处理设计了纱布滤过与煎
液离心２种处理方式，纱布滤过可保留煎煮过程中
形成的沉淀；离心处理则除去了提取液中的全部沉
淀物。从实验数据看对药煎煮液对药煎煮离心液、
全方煎煮液全方煎煮离心液两两比较，２种离心液
蒽醌类成分及小檗碱的提取量均显著低于相应的煎
煮液（对药煎煮液与水煎离心液，蒽醌类成分的提
取量分别为单味药的５８９％与３６８％，小檗碱分别
为单味药的３０９％与１１５％；全方水煎液与水煎离
心液，蒽醌类成分的提取量分别为单味药的５２５％
与 ３５３％，小檗碱分别为单味药的 ２８２％ 与
１１３％），说明通过离心处理可除去蒽醌类成分与
小檗碱形成的大分子复合物，水煎液中的大分子复
合物稳定性差，在测定过程中采用酸、碱处理即可使
其分解。
乙醇回流单味大黄，蒽醌类成分提取量为水煎
煮的４１２％，提示乙醇不应作为蒽醌类成分的提取
溶媒，其原因为大黄中蒽醌类成分尤其是结合型蒽
醌在水中的溶解度较大，且蒽醌类成分在药材中多
以盐的形式存在，增加了在水中的溶解度，而水煎煮
时还有其他成分的助溶作用，从而出现此种结果。
对于小檗碱提取量，全方乙醇回流远较全方水煎煮
高（为全方水煎煮的２５倍），是由于乙醇抑制了酸
碱性成分相互间化学反应的进行，减少了小檗碱的
损失。然而全方乙醇回流的提取量还是不及单味黄
柏水煎煮（为单味水煎煮的６９８％），可见大黄硝石
汤中的黄柏应单独水煎煮，才能保证小檗碱最大限
度地溶出。
对水煎液实验结果进行分析，游离蒽醌对药比
单药的提取量下降３６１３％，总蒽醌对药比单药的
提取量下降４１０５％，表明游离蒽醌与结合蒽醌均
可与小檗碱发生化学反应，且难易程度没有明显
差异。
［参考文献］
［１］　 李克光．金匮要略讲义［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，
·４１３２·
第３４卷第１８期
２００９年９月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１８
　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００９
１９８５：１８５．
［２］　 熊辉岩，张晓峰，王环，等．大黄属３种大黄植物不同部分蒽
醌含量的测定与比较［Ｊ］．西北植物学报，２００３，２３（２）：２８．
［３］　 罗晨曲．ＨＰＬＣ同时测定大黄錎虫丸中大黄酸、大黄素、大黄
酚的含量［Ｊ］．中成药，２００５，２７（７）：７６４．
［４］　 张丹，蒋心惠．反相高效液相色谱法测定大黄药材中游离及
结合型蒽醌类衍生物的含量［Ｊ］．分析化学研究简报，２００３，
３１（４）：４５９．
［５］　 李敏，李丽霞，刘渝，等．ＨＰＬＣ法测定大黄配方颗粒中大黄
酸、大黄素、大黄酚的含量［Ｊ］．现代中药研究与实践，２００５，
１９（５）：３２．
［６］　 白丽杰，王春梅，刘君富．肝胃气痛片中大黄素和大黄酚含量
的ＨＰＬＣ测定［Ｊ］．药物分析杂志，２００６，２６（５）：６８９．
［７］　 张红霞，金艺，许海燕，等．ＨＰＬＣ法测定胃力片中大黄酸、大
黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量［Ｊ］．沈阳药科大学学报，
２００７，２４（７）：４１７．
［８］　 中国药典．一部［Ｓ］．２００５：２１４．
［９］　 上官一平，方鲜枝．反相高效液相色谱法测定黄连中盐酸小
檗碱含量［Ｊ］．中国药业，２００６，１５（２０）：１８．
［１０］　王金香，张玉祥，袁旭江．ＨＰＬＣ法测定四季三黄胺素中盐酸
小檗碱的含量［Ｊ］．中药新药与临床药理，２００６，１７（４）：２７１．
Ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆａｃｉｄａｌｋａｌｉｎｅｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅｏｆ
ＤａｈｕａｎｇａｎｄＨｕａｎｇｂａｉｉｎＤａｈｕａｎｇＸｉａｏｓｈｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎ
ＰＥＩＭｉａｏｒｏｎｇ，ＤＵＡＮＸｉｕｊｕｎ，ＰＥＩＸｉａｎｇｐｉｎｇ
（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＳｈａｎｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｔａｉｙｕａｎ０３００２４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｐａｔｅｒｎｏｆａｌｋａｌｉｎｅａｎｄａｃｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆＤａｈｕａｎｇａｎｄＨｕａｎｇｂａｉａｍｏｕｎｇｄｉｆ
ｆｅｒｅｎｔｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｉｎＤａｈｕａｎｇＸｉａｏｓｈｉｄｅｃｏｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓａｎｄｂｅｒｂｅｒｉｎｅｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣｉｎ
ｓａｍｐｌｅｓｏｆＤａｈｕａｎｇｅｘｔｒａｃｔｓ，Ｈｕａｎｇｂａｉｅｘｔｒａｃｔｓ，ＤａｈｕａｎｇａｎｄＨｕａｎｇｂａｉｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅｅｘｔｒａｃｔｓ，ａｎｄｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｗｈｏｌｅｒｅｃｉｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：
Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓａｎｄｂｅｒｂｅｒｉｎｅｗｅｒｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｏｆｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ：ｆｒｏｍｃｏｍｐｏｎｅｎｔｍｅｄｉｃｉｎａｌｍａｔｅｒｉａｌ
ａｌｏｎｅｔｏｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅｓ，ａｎｄｔｏｗｈｏｌｅｒｅｃｉｐｅ．ｔｈｅｃｈａｎｇｅｐａｔｅｒｎｗａｓｍｏｒｅａｐｐａｒｅｎｔｉｎｗａｔｅｒｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓｔｈａｎｉｎｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｓ．Ｃｏｎ
ｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆａｌｋａｌｉｎｅａｎｄａｃｉｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓａｒｅｃｈａｎｇｅｄｗｉｔｈｄｉｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｄａｈｕａｎｇ；Ｈｕａｎｇｂａｉ；ａｃｉｄａｌｋａｌｉｎｅｐａｉｒｍｅｄｉｃｉｎｅ；ＤａｈｕａｎｇＸｉａｏｓｈｉｄｅｃｏｃｔｉｏｎ
［责任编辑　周驰］
本刊重要启事
本刊已开通在线支付功能，作者请登录本刊网站 ｗｗｗ．ｃｊｃｍｍ．ｃｏｍ．ｃｎ“作者中心”，点击在线充值，可以
选择网上银行（没开通网银功能的帐户可以选择信用卡充值）和手机充值卡２种充值方式，充值成功后系统
会显示您的账号余额。然后您可以根据稿件状态和编辑部邮件通知来缴纳相应的费用，如审稿费，发表费
等。如有疑问请咨询鲍雷编辑：１３６８３３６２４０８，１７８５６２９５５＠ｑｑ．ｃｏｍ。
·５１３２·
第３４卷第１８期
２００９年９月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１８
　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００９