全 文 ：α葡萄糖苷酶抑制活性跟踪分离芙蓉菊中的活性成分
吴琦１，杨秀伟１，邹磊２，３，傅德贤３
（１．北京大学 天然药物及仿生药物国家重点实验室 药学院 天然药物学系，北京 １００１９１；
２．中国医药研究开发中心有限公司，北京 １０２２０６；
３．中国科学院 过程工程研究所 生化工程国家重点实验室，北京 １０００８０）
［摘要］　目的：研究芙蓉菊全草中具有抑制α葡萄糖苷酶活性的化学成分。方法：采用体外α葡萄糖苷酶抑制活性跟踪
方法和各种柱色谱技术进行化学成分的分离和纯化；应用各种谱学方法鉴定化合物的结构；对单体化合物进行α葡萄糖苷酶
抑制活性试验，确定活性成分。结果：芙蓉菊７０％乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部分和水溶性部分对α葡萄糖苷酶活性具有较
强的抑制作用，从两部分分离鉴定了５，７二羟基３′，４′，５′三甲氧基黄酮 （１）、东莨菪素（２）、艾菊素、粗毛豚草素（３）、５，５′，７
三羟基３′，４′二甲氧基黄酮（４）、柯伊利素（５）、万寿菊黄素３，６，７三甲基醚（６）、石杉黄素（７）、东莨菪苷（８）和槲皮万寿菊
素３，６二甲醚（９）。其中，化合物２，３，５，６，７，９对α葡萄糖苷酶活性具有较强的抑制作用，ＩＣ５０（μｍｏｌ·Ｌ
－１）值分别为（３４３６±
２０６），（１４６２８±１２４４），（２４６２６±８７３），（７４０６±３８３），（４２１９±５２５），（１３６２０±２５７３），强于同条件下的阳性对照药
阿卡波糖（ＩＣ５０＝４８９２５±３８５５μｍｏｌ·Ｌ
－１）。化合物１，４，８和艾菊素的ＩＣ５０值皆大于１０００μｍｏｌ·Ｌ
－１。结论：化合物５和９
为首次从该属植物中分离得到；化合物２，３，５，６，７，９对α葡萄糖苷酶活性具有较强的抑制作用，其抑制作用类型属于竞争性
抑制作用，它们可能是芙蓉菊防治糖尿病的物质基础。
［关键词］　芙蓉菊；黄酮；α葡萄糖苷酶
［收稿日期］　２００９０４２３
［基金项目］　国家高技术研究领域９７３项目（２００１ＣＢ５１００８）
［通信作者］　杨秀伟，Ｔｅｌ：（０１０）８２８０５１０６，Ｅｍａｉｌ：ｘｗｙａｎｇ＠ｂｊｍｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ
　　菊科蕲艾属 ＣｒｏｓｏｓｔｅｐｈｉｕｍＬｅｓｓ．植物全世界有
４种，产中亚、东亚、菲律宾和美国加尼福利亚，我国
引种有芙蓉菊Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ（Ｌ．）Ｍａｋｉｎｏ１种。广东
民间用芙蓉菊全草治疗糖尿病；叶入药治疗风寒感
冒、痈疽、疔疮；根入药治疗风湿性关节痛和胃脘冷
痛［１］。
食物中的多糖复合物可由淀粉酶水解为糊精
和寡糖，在肠吸收和进入血液循环之前进一步由
α葡萄糖苷酶（αｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ；又称 α葡萄糖苷水
解酶）水解，从低聚糖底物的非还原端切开 α１，４
糖苷键，释放出葡萄糖，在机体多种代谢功能中起
着关键的作用。它与因代谢紊乱失调引起的疾病
如糖尿病密切相关［２］，人们试图寻找合适的抑制
剂，如 １９９５年德国拜耳公司上市的阿卡波糖
（Ａｃａｒｂｏｓｅ；拜唐平）现已成为控制和调节α葡萄糖
苷酶活性的首选药物，以期对有关疾病进行防治。
但是，由于阿卡波糖能够引起某些严重的副作用，
以 α葡萄糖苷酶为靶分子，从中药或天然产物中
寻找 α葡萄糖苷酶抑制剂已成为一个世界性的热
点［３７］。本文以芙蓉菊全草治疗糖尿病为线索，研
究其是否存在抑制 α葡萄糖苷酶活性成分，阐明
其治疗糖尿病的物质基础。
１　仪器与试剂
ＪＥＯＬＡＬ３００ＯＶ型核磁共振波谱仪，ＴＭＳ为
内标，二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）ｄ６为溶剂；Ｆｉｎｎｉｇａｎ
ＴＲＡＣＥＭＳ（ＥＩ电离源，７０ｅＶ）质谱仪；ＨＺＳＨ型
恒温水浴振荡器（哈尔滨市东联电子技术开发有
限公司）；ＵＶｍａｘＫｉｎｅｔｉｃＭｉｃｒｏｐｌａｔｅＲｅａｄｅｒ（Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒＤｙｎａｍｉｃｓ，Ｉｎｃ．，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＣＡ，
ＵＳＡ）。９６孔板购自 ＣｏｒｎｉｎｇＣｏｓｔａｒ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，
ＭＡ，ＵＳＡ）公司。α葡萄糖苷酶（ＥＣ３２１２０，
０２８Ｋ１１８６）、对硝基酚αＤ吡喃葡萄糖苷（ｐｎｉｔｒｏ
ｐｈｅｎｙｌαＤｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ，ＰＮＰＧ；０９７Ｋ２５８２）、对
硝基苯酚（ｐｎｉｔｒｏｐｈｅｎｏｌ，ＰＮＰ；０９７Ｋ２５８２）、牛血清
白蛋白（ＢＳＡ）、ＤＭＳＯ皆购自 Ｓｉｇｍａ公司；阿卡波
糖（ａｃａｒｂｏｓｅ，１００８０８２００５０１）购自中国药品生物
制品检定所；Ｎａ２ＣＯ３购自北京化学试剂公司。柱
色谱和薄层色谱用硅胶皆为青岛海洋化工厂产
品；大孔吸附树脂 Ｄ１０１为天津化学试剂二厂产
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品；所用试剂皆为市售分析纯。
芙蓉菊样品采自广东芙蓉菊栽培基地，经中国
科学院植物研究所郭仲琛研究员鉴定为Ｃ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ
的全草，凭证标本存放在中国科学院过程工程研究
所标本室，标本号为２００３０８１００１。
２　方法
２．１　α葡萄糖苷酶抑制活性组分的跟踪分离
芙蓉菊干燥全草７０％乙醇提取物溶于水中，依
次用环己烷、醋酸乙酯（ＥｔＯＡｃ）和正丁醇（ＢｕＯＨ）萃
取，得相应萃取和残留水层，其制备过程详见文献
［８９］。
ＥｔＯＡｃ萃取物和残留水层对α葡萄糖苷酶活性
具有抑制作用，进行如下分离纯化。
取 ＥｔＯＡｃ萃取物 ３５０ｇ经硅胶柱色谱，环己
烷ＥｔＯＡｃ梯度洗脱，得 ５个流分。流分 ２反复经
硅胶柱色谱，石油醚丙酮（９∶１）和三氯甲烷
（ＣＨＣｌ３）ＥｔＯＡｃ（８∶１）洗脱，得到化合物５，７二羟
基３′，４′，５′三甲氧基黄酮（３０ｍｇ，１）。流分３经
硅胶柱色谱，ＣＨＣｌ３ＥｔＯＡｃ（９∶１）和石油醚丙酮（９
∶１）洗脱，得到东莨菪素（２ｇ，２）。流分４经硅胶
柱色谱，ＣＨＣｌ３丙酮梯度洗脱，分为 Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ４个
部份。Ａ部份经硅胶柱色谱，环己烷ＥｔＯＡｃ（１∶１）
洗脱，得到艾菊素（５ｇ）。Ｂ部份再经硅胶柱色谱，
环己烷ＥｔＯＡｃ梯度洗脱，得到 ２个组分；前一组
分经制备性 ＨＰＬＣ纯化，得到粗毛豚草素（３０ｍｇ，
３）、５，５′，７三羟基３′，４′二甲氧基黄酮（３０ｍｇ，４）
和柯伊利素（２０ｍｇ，５）；后一组分用丙酮重结晶，
得到万寿菊黄素３，６，７三甲基醚（１ｇ，６），母液经
聚酰胺柱色谱，Ｈ２ＯＭｅＯＨ洗脱，得到 ４（２０２
ｍｇ），５（２０５ｍｇ）和６（５ｍｇ）。Ｄ部份再经聚酰胺
柱色谱，ＥｔＯＡｃＭｅＯＨ洗脱，得到石杉黄素（５０ｍｇ，
４′，５′，５，７四羟基３′甲氧基黄酮；７）。流分 ５经
硅胶柱色谱，ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨ（５∶１）洗脱，得到东莨菪
苷（２００ｍｇ，８）。
残留水层部分５００ｇ经大孔吸附树脂柱色谱，
依次用 １０％，３０％，６０％，９５％乙醇水溶液梯度洗
脱。６０％乙醇水溶液洗脱部分再反复经硅胶柱色
谱，ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨＨ２Ｏ（６∶３∶１）洗脱，得 ５个流分。
流分２经硅胶柱色谱，ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨ（２０∶１）洗脱，得
到东莨菪素（３５ｍｇ）；流分 ３经聚酰胺柱色谱，
ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨ（３∶１）洗脱，得到化合物１（３４ｍｇ）和
槲皮万寿菊素３，６二甲醚（２１ｍｇ，９）；流分４经硅
胶柱色谱，ＣＨＣｌ３ＭｅＯＨ（５∶１）洗脱，得到化合物 ８
（３０ｍｇ）。
２．２　α葡萄糖苷酶抑制活性的试验方法
２．２．１　试验方法　按稍改良的方法［１０］在９６孔板
上进行，用ＵＶｍａｘＫｉｎｅｔｉｃＭｉｃｒｏｐｌａｔｅＲｅａｄｅｒ于４０５ｎｍ
波长下测定吸光度Ａ值。
２．２．２　标准曲线制作　根据采用的反应体系，用
０１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲液（ｐＨ６８）配制 １０００
μｍｏｌ·Ｌ－１ＰＮＰ溶液，稀释成２５０，２００，１５０，１００，５０，
２５，１０，５，２，０μｍｏｌ·Ｌ－１系列浓度。分别取１０个不
同浓度的 ＰＮＰ溶液各１６０μＬ，加入０２ｍｏｌ·Ｌ－１
Ｎａ２ＣＯ３溶液８０μＬ，混匀，在４０５ｎｍ下测定Ａ值，测
４组取平均值。以 Ａ值为纵坐标（Ｙ），对 ＰＮＰ浓度
（Ｘ）为横坐标，绘制标准曲线。
２．２．３　α葡萄糖苷酶活力的测定　根据所采用的
反应体系：１１２μＬ０１ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸钾缓冲液（ｐＨ
６８），加入２０μＬ０８Ｕ·ｍＬ－１α葡萄糖苷酶溶液，
８μＬＤＭＳＯ，３７℃恒温１５ｍｉｎ后加入５０ｍｍｏｌ·
Ｌ－１ＰＮＰＧ溶液２０μＬ，３７℃恒温反应１５ｍｉｎ。再加
入８０μＬ０２ｍｏｌ·Ｌ－１的Ｎａ２ＣＯ３溶液，于４０５ｎｍ波
长下测Ａ值。
酶活力单位定义：３７℃、ｐＨ６８条件下，每分钟
水解底物ＰＮＰＧ所产生１μｍｏｌ·Ｌ－１ＰＮＰ的酶量，
规定为一个酶活力单位（Ｕ）。
２．２．４　数据分析　按照抑制率％ ＝［１－（样品
Ａ试验组 －样品 Ａ空白组）／（对照 Ａ试验组 －对照 Ａ空白组）］
×１００％计算抑制率，并用ＯｒｉｇｉｎＰｒｏ７５ＳＲ１软件计
算半数抑制浓度（ＩＣ５０）值。实验数据用 珋ｘ±ｓ表示
（ｎ＝４）。各组组间差异采用 Ｆ检验 双样本方差分
析后，采用 Ｔ检验（Ｅｘｃｅｌ）进行组间的两两比较，以
Ｐ＜００５作为具有统计学意义的标准。
３　结果与讨论
３．１　结构鉴定
粗毛豚草素（ｈｉｓｐｉｄｕｌｉｎ，３）和石杉黄素（ｓｅｌａｇｉｎ，
４′，５′，５，７四羟基３′甲氧基黄酮；７）的结构鉴定已
在文献［９］报道；通过与文献数据比较和与对照品
共ＴＬＣ分析，鉴定了艾菊素（ｔａｎａｃｅｔｉｎ）［１１１２］、５，７
二羟基３′，４′，５′三甲氧基黄酮（ｔｒｉｃｅｔｉｎ３′，４′，
５′ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ，１）、５，５′，７三羟基３′，４′二甲氧
基黄酮（ａｐｏｍｅｔｚｇｅｒｉｎ，４）、万寿菊黄素３，６，７三甲基
醚（ｑｕｅｒｃｅｔａｇｅｔｉｎ３，６，７ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ，６）［９］，东莨菪
素（ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ，２）、东莨菪苷（ｓｃｏｐｏｌｉｎ，８）［１１］的化学
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结构。
柯伊利素（ｃｈｒｙｓｏｅｒｉｏｌ，５）黄色粉末；ＥＩＭＳｍ／ｚ
３００［Ｍ］＋；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，３００ＭＨｚ）δ：１２９６
（１Ｈ，ｓ，５ＯＨ），６９０（１Ｈ，ｓ，３Ｈ），６１９（１Ｈ，ｓ，Ｈ
６），６５０（１Ｈ，ｓ，Ｈ８），７５６（１Ｈ，ｓ，Ｈ２′），７５４（１Ｈ，
ｓ，Ｈ６′），６９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９０Ｈｚ，Ｈ５′），３８９（３Ｈ，
ｓ，３′ＯＭｅ）。以上１ＨＮＭＲ数据与文献［１３］报道的
数据一致，鉴定该化合物为柯伊利素。
槲皮万寿菊素３，６二甲醚（ｑｕｅｒｃｅｔａｇｅｔｉｎ３，６
ｄｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ，９）淡黄色粉末；１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯｄ６，
３００ＭＨｚ）δ：１２７７（１Ｈ，ｓ，５ＯＨ），７５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
２０Ｈｚ，Ｈ２′），７４２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２０，８５Ｈｚ，Ｈ６′），
６８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８５Ｈｚ，Ｈ５′），６４３（１Ｈ，ｓ，Ｈ８），
３７６（３Ｈ，ｓ，３ＯＭｅ），３７２（３Ｈ，ｓ，６ＯＭｅ）。以上１Ｈ
ＮＭＲ数据与文献［１４］报道的数据一致，鉴定该化合
物为５，７，３′，４′四羟基３，６二甲氧基黄酮，即槲皮
万寿菊素３，６二甲醚。
以上化合物的化学结构如图１。
图１　芙蓉菊中化合物的结构
３．２　α葡萄糖糖苷酶抑制活性
３．２．１　实验优化　反应体系按文献［１０］方法，对
α葡萄糖糖苷酶和底物 ＰＮＰＧ的浓度配比进行了
考察（表 １），即考察阳性对照药阿卡波糖的浓度
为１０００ｍｇ·Ｌ－１时对 α葡萄糖糖苷酶的抑制率。
发现在表１所示的１２个配比，阿卡波糖的抑制率
均大于６０％，抑制率大于８５％的有４组，即５～８
组。但在这些配比中，不加抑制剂阿卡波糖时
ＰＮＰ产生量有很大差别，导致 Ａ值有差别。为提
高检测灵敏度，选择阿卡波糖抑制率最高、ＰＮＰ产
量相对较大的配比，即 α葡萄糖苷酶和底物 ＰＮＰＧ
的浓度分别定为 ０８Ｕ·ｍＬ－１和 ５ｍｍｏｌ·Ｌ－１进
行实验。
３．２．２　标准曲线　以ＰＮＰ浓度（Ｘ）为横坐标，Ａ值
为纵坐标（Ｙ），绘制标准曲线，得回归方程 ｙ＝
０００７７ｘ＋００１２３（ｒ＝０９９９０），线性关系良好；线
性浓度范围为０～２５０μｍｏｌ·Ｌ－１。
表１　α葡萄糖苷酶、底物ＰＮＰＧ和阿卡波糖
温孵体系的优化
组号
酶浓度
／Ｕ·ｍＬ－１
底物浓度
／ｍｍｏｌ·Ｌ－１
抑制率
／％
Ａ值
１ １０ ７５ ６３３２ ２６８
２ １０ ５０ ７４６８ ２４３
３ １０ ２５ ７７０８ １５０
４ ０２ ７５ ８３４３ １０８
５ ０２ ５０ ８５６９ １０３
６ ０２ ２５ ８８３２ ０７５
７ ０８ ５０ ８９７６ ２２５
８ ０７ ５０ ８６９７ ２１５
９ ０６ ５０ ８１１１ ２０１
１０ ０５ ５０ ８２５０ １８６
１１ ０４ ５０ ７２０７ １６５
１２ ０３ ５０ ６３３３ １４８
３．２．３　提取部位的 α葡萄糖苷酶抑制活性　从表
２试验结果可见，ＥｔＯＡｃ萃取物和残留水层的抑制
活性较好，其抑制率明显高于其他萃取物以及阳性
对照药物阿卡波糖（ＩＣ５０＝３１５８６±２４８９ｍｇ·
Ｌ－１）。
表２　芙蓉菊７０％乙醇提取物及其萃取物对
α葡萄糖苷酶抑制活性的筛选
试验部位 ＩＣ５０／ｍｇ·Ｌ－１
７０％乙醇提取物 １２６９４９±５５４５
环己烷萃取物 ８８９２１±１０９９３
醋酸乙酯萃取物 ２９２７８±４４３１）
正丁醇萃取物 １９１９４３±２８８１３
水溶性部位 ２０８１８±１３２９２）
阿卡波糖 ３１５８６±２４８９
　　注：与阳性对照组阿卡波糖比较１）Ｐ＜０００１，２）Ｐ＜００５。
３．２．４　活性部位中单体化合物对 α葡萄糖苷酶的
抑制活性　由表２筛选结果，证明醋酸乙酯萃取物
和水溶性部位对α葡萄糖苷酶具有抑制活性，从其
分离得到的单体化合物抑制活性的ＩＣ５０总结在表３。
除化合物１，４和８外，其他６个化合物的 ＩＣ５０值均
小于阳性对照药阿卡波糖，抑制活性由高到低的顺
序是：２＞７＞６＞９＞３＞５。从有活性的醋酸乙酯萃
取物中分离得到的艾菊素对 α葡萄糖苷酶活性无
抑制作用，ＩＣ５０＞１０００μｍｏｌ·Ｌ
－１。从水溶性部位
分离得到的３个化合物中，仅有化合物２对 α葡萄
糖苷酶活性有抑制作用。因此，芙蓉菊中对 α葡萄
糖苷酶活性有抑制作用的活性成分主要集中在
７０％乙醇提取物的醋酸乙酯萃取物中。
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表３　活性部位中单体化合物对α葡萄糖苷
酶抑制活性的ＩＣ５０
化合物 来源部位 ＩＣ５０／μｍｏｌ·Ｌ－１ ＩＣ５０／ｍｇ·Ｌ－１
阿卡波糖 　 ４８９２５±３８５５ ３１５８６±２４８９
１ 醋酸乙酯、水 　　＞１０００ ＞３４４
２ 醋酸乙酯、水 ３４３６±２０６１） ６６０±０４０１）
３ 醋酸乙酯 １４６２８±１２４４２） ４３８８±３７３１）
４ 醋酸乙酯 　　＞１０００ ＞３３０
５ 醋酸乙酯 ２４６２６±８７３１） ７３８７±２６２１）
６ 醋酸乙酯 ７４０６±３８３１） ２６６６±１３８１）
７ 醋酸乙酯 ４２１９±５２５２） １３３３±１６６１）
８ 醋酸乙酯、水 　　＞１０００ ＞７００
９ 水 １３６２０±２５７３２） ４７１３±８９０１）
　　注：与阳性对照组阿卡波糖比较１）Ｐ＜００５；２）Ｐ＜０００１。
３．２．５　抑制作用类型的研究　根据底物不同浓度
时的酶催化反应，求出１／［Ｓ］与１／Ｖ（［Ｓ］为底物浓
度，Ｖ为反应速度），绘图，并求出线性方程 ｙ＝
３１９８５ｘ＋２０３９３。则 Ｖｍａｘ＝０４９μｍｏｌ·Ｌ
－１·
ｓ－１，Ｋｍ＝１５７ｍｍｏｌ·Ｌ
－１（Ｋｍ为米氏常数）。对于
ＩＣ５０值大于阳性对照药阿卡波糖的６个化合物进行
了抑制作用类型的研究，受试化合物选取两个合适
的浓度，ＰＮＰＧ选取 ４个浓度，测定反应速度。按
ＬｉｎｅｗｅａｖｅＢｕｒｋ作图法，以１／［Ｓ］为横坐标，１／Ｖ为
纵坐标，分别绘制６个化合物抑制作用的动力学曲
线（图２～图７）。从图２～７可以看出，所有化合物
的反应速度Ｖｍａｘ随受试化合物浓度的增大而保持不
变，Ｋｍ增大，判断这些化合物对 α葡萄糖苷酶抑制
作用属竞争性抑制作用［１５１６］。根据竞争性抑制作
用动力学方程１／Ｋｍ′＝１／｛Ｋｍ（１＋［Ｉ］／Ｋｉ）｝（式中
［Ｉ］为抑制剂浓度），可求出受试化合物２，３，５～７，９
的抑制剂常数（Ｋｉ）值分别为：００７３，００４４，１７４７，
００６３，００４０，００５７ｍｍｏｌ·Ｌ－１。
图２　２的ＬｉｎｅｗｅａｖｅＢｕｒｋ双倒数曲线
４　结论
４．１　选取生物活性跟踪的方法首次用 α葡萄糖苷
酶抑制活性体外筛选模型对芙蓉菊７０％乙醇提取
　　
图３　３的ＬｉｎｅｗｅａｖｅＢｕｒｋ双倒数曲线
图４　５的ＬｉｎｅｗｅａｖｅＢｕｒｋ双倒数曲线
图５　６的ＬｉｎｅｗｅａｖｅＢｕｒｋ双倒数曲线
图６　７的ＬｉｎｅｗｅａｖｅＢｕｒｋ双倒数曲线
图７　９的ＬｉｎｅｗｅａｖｅＢｕｒｋ双倒数曲线
物及其不同极性萃取物抑制 α葡萄糖苷酶活性进
行了筛选，结果表明醋酸乙酯萃取物和水溶性部位
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有较高的抑制活性。
４．２　从２个活性部位中分离得到的单体化合物包
括倍半萜、黄酮和香豆素等类化合物。其中，倍半萜
类化合物艾菊素、香豆素苷类化合物东莨菪苷、兼具
５，７二羟基和３′，４′二甲氧基取代基本结构的黄酮
类化合物５，７二羟基３′，４′，５′三甲氧基黄酮（１）和
５，５′，７三羟基３′，４′二甲氧基黄酮（４）对 α葡萄糖
苷酶活性无抑制作用。石杉黄素抑制 α葡萄糖苷
酶活性最高（ＩＣ５０ ＝４２１９±５２５μｍｏｌ·Ｌ
－１或
１３３３±１６６ｍｇ·Ｌ－１）。依据 ＩＣ５０值，本文中的黄
酮类化合物抑制 α葡萄糖苷酶活性由强到弱的顺
序是：石杉黄素（７）＞万寿菊黄素３，６，７三甲醚（６）
＞槲皮万寿菊素３，６二甲醚（９）＞粗毛豚草素（３）
＞柯伊利素（５）。
４．３　上述５个黄酮类化合物和香豆素类化合物东
莨菪素对α葡萄糖苷酶抑制作用属于竞争性抑制
类型，与阳性对照药阿卡波糖的抑制作用类型相同。
４．４　文献［１７］报道万寿菊黄素３，６，７三甲醚对体
外培养的大鼠胰岛分泌胰岛素功能有促进作用，综
合本文研究结果，其作用于降糖作用的多个环节，推
测其对糖尿病防治可能具有潜在的开发应用前景。
４．５　文献［１７］报道东莨菪素对体外培养的大鼠胰
岛分泌胰岛素功能有抑制作用，而本文结果东莨菪
素对α葡萄糖苷酶具有抑制活性，其在糖尿病防治
上的应用应慎重、综合考虑。
４．６　芙蓉菊中的黄酮类化合物可能是其防治糖尿
病的物质基础，有待整体药理学研究进一步证实。
［参考文献］
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８４
第３４卷第１７期
２００９年９月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１７
　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００９
Ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙｇｕｉｄｅｄｉｓｏｌａｔｉｏｎｏｆａｌｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｆｒｏｍｗｈｏｌｅｈｅｒｂｓｏｆ
Ｃｒｏｓｓｏｓｔｅｐｈｉｕｍｃｈｉｎｅｎｓｅ
ＷＵＱｉ１，ＹＡＮＧＸｉｕｗｅｉ１，ＺＯＵＬｅｉ２，３，ＦＵＤｅｘｉａｎ３
（１．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮａｔｕｒａｌ＆ＢｉｏｍｉｍｅｔｉｃＤｒｕｇｓ，ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮａｔｕｒａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｃｈｏｏｌｏｆ
ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１９１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＮａｔｉｏｎａｌＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＲ＆ＤＣｏ．Ｌｔｄ．，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０２２０６，Ｃｈｉｎａ；
３．ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰｒｏｃｅｓＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８０，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆ７０％ ａｑｕｅｏｕｓｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍｔｈｅｗｈｏｌｅｐｌａｎｔｏｆＣｒｏｓ
ｓｏｓｔｅｐｈｉｕｍｃｈｉｎｅｎｓｅｆｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔａｌｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ａｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙｇｕｉｄｅｄｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓ
ｗａｓｕｓｅｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙｔｈｅａｌｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｔｈｅｗｈｏｌｅｐｌａｎｔｏｆＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｅ．Ｔｈｅｄｒｉｅｄｗｈｏｌｅｐｌａｎｔｓｗｅｒｅ
ｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈ７０％ ａｑｕｅｏｕｓｅｔｈａｎｏｌ．Ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｗａｓｓｕｓｐｅｎｄｅｄｉｎｗａｔｅｒａｎｄｔｈｅｎｆｕｒｔｈｅｒｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅｌｙｗｉｔｈｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ，
ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ，ａｎｄｎｏｒｍａｌｂｕｔａｎｏｌ，ａｎｄｔｅｓｔｅｄｆｏｒｔｈｅｉｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔａｌｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｉｎｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｏｆｉ
ｓｏｌａｔｅｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃｍｅｔｈｏｄｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇＮＭＲａｎｄＭＳ，ａｎｄｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｗｉｔｈｄａｔａｏｆａｕｔｈｅｎｔｉｃｓａｍｐｌｅｓ．
Ａｌｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅａｓｓａｙｅｄｆｏｒｔｈｅｉｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔａｌｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｉｎｖｉｔｒｏ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅａｎｄｗａｔｅｒｌａｙｅｒ
ｆｒａｃｔｉｏｎｓｓｈｏｗｅｄｔｈｅｓｔｒｏｎｇｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄｗｅｒｅｓｕｂｊｅｃｔｅｄｔｏｃｏｌｕｍｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｏｖｅｒｔｈｅｖａｒｉｏｕｓｓｔａｔｉｏｎａｒｙｐｈａｓｅｓ．Ｔｒｉｃｅ
ｔｉｎ３′，４′，５′ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ（１），ｓｃｏｐｏｌｅｔｉｎ（２），ｔａｎａｃｅｔｉｎ，ｈｉｓｐｉｄｕｌｉｎ（３），ａｐｏｍｅｔｚｇｅｒｉｎ（４），ｃｈｒｙｓｏｅｒｉｏｌ（５），ｑｕｅｒｃｅｔａｇｅｔｉｎ３，６，
７ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ（６），ｓｅｌａｇｉｎ（７），ｓｃｏｐｏｌｉｎ（８），ａｎｄｑｕｅｒｃｅｔａｇｅｔｉｎ３，６ｄｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ（９）ｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙｄｉｆｅｒ
ｅｎｔｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｉｃｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ａｍｏｎｇｔｈｅｍ，ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ２，３，５，６，７ａｎｄ９ｆｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔａｌｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｗｉｔｈＩＣ５０
（μｍｏｌ·Ｌ－１）ｖａｌｕｅｓｏｆ（３４３６±２０６），（１４６２８±１２４４），（２４６２６±８７３），（７４０６±３８３），（４２１９±５２５）ａｎｄ（１３６２０
±２５７３），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｅｒｅａｓｓａｙｅｄａｓｔｈｅａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ．Ａｐｏｓｉｔｉｖｅｄｒｕｇ，ａｃａｒｂｏｓｅ，ｓｈｏｗｅｄｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔａｌ
ｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｗｉｔｈＩＣ５０ｖａｌｕｅｏｆ（４８９２５±３８５５）μｍｏｌ·Ｌ
－１ｉｎｔｈｅｓａｍｅａｓｓａｙｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｉｔｈｔｈｅａｂｏｖｅｔｅｓｔｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｔｈｅ
ＩＣ５０ｖａｌｕｅｓｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｓ１，４，８ａｎｄｔａｎａｃｅｔｉｎｗｅｒｅａｌｍｏｒｅｔｈａｎ１０００μｍｏｌ·Ｌ
－１．Ｃｏｎｃｌｕｔｉｏｎ：Ｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ５ａｎｄ９ｗｅｒｅｉｓｏ
ｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｇｅｎｕｓＣｒｏｓｓｏｓｔｅｐｈｉｕｍｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ．Ｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ２，３，５，６，７，ａｎｄ９ｓｈｏｗｅｄｔｈｅｓｔｒｏｎｇｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａ
ｇａｉｎｓｔａｌｐｈａｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｉｎｖｉｔｒｏｉｎｔｈｅｓｉｍｐｌｅｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅｍａｎｎｅｒ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｓｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｍａｙｂｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅ
ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｄｉａｂｅｔｅｓｉｎｔｈｅｗｈｏｌｅｐｌａｎｔｏｆＣ．ｃｈｉｎｅｎｓｅｆｏｒｈｕｍａｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｃｒｏｓｏｓｔｅｐｈｉｕｍｃｈｉｎｅｎｓｅ；ｆｌａｖｏｎｅ；αｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ
［责任编辑　王亚君］
９４
第３４卷第１７期
２００９年９月
　　　　　 　 　 　 　 　　　　　 　 　 　 　
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　１７
　Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２００９