全 文 ：萸连巴布剂体外释放和透皮行为的研究
杜茂波，刘淑芝，李曼玲，金日显，康　琛，李军红
（中国中医科学院 中药研究所，北京 １００７００）
［摘要］　目的：考察萸连巴布膏的体外释放和透皮行为和规律。方法：试验采用改良Ｆｒａｎｚ扩散装置，用ＨＰＬＣ法使用１
种流动相测定接收液中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小檗碱４种指标成分的含量。结果：吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小
檗碱释放速率分别为００２３９，００１５６，００７２５，０８１９１ｍｇ·ｃｍ－２·ｈ－１／２；透皮速率分别为１２５６，１０３０２，２８０２９，２０９１９μｇ
·ｃｍ－２·ｈ－１。结论：萸连巴布剂的体外释放符合Ｈｉｇｕｃｈｉ方程，透皮行为为零级过程。
［关键词］　巴布剂；黄连；吴茱萸；透皮；释放
［收稿日期］　２００８１０２７
［基金项目］　国家“十一五”科技支撑计划（２００６ＢＡＩ０９Ｂ０８１３）
［通信作者］　刘淑芝，研究员，博士生导师，Ｔｅｌ：（０１０）８４０４３２２７，
Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｓｈｕｚｈｉ２００４＠ｓｉｎａｃｏｍｃｎ
　　萸连巴布膏由黄连、吴茱萸、木香等３味药组
成，具有泻火止痛之功，用于脘胁疼痛，嗳气吐酸，大
便热泻等症。本研究以黄连中的巴马汀、小檗碱；吴
茱萸中的吴茱萸碱和吴茱萸次碱４种成分为指标，
通过体外释放度和离体小鼠皮的体外透皮试验，考
察萸连巴布膏的体外释放和透皮行为，考察了萸连
巴布膏成型可行性，并为体内试验提供依据。
１　材料
Ｗａｔｅｒｓ１５１５７１７自动进样器，２４８７检测器，Ｅｍ
ｐｏｗｅｒ数据处理系统；色谱柱 ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８（４６
ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ），检测波长 ２９０ｎｍ；柱温 ３０
℃；流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１；流动相 甲醇乙腈１５ｍｍｏｌ
ＳＤＳ水溶液（２０∶３６∶４４）。
ＴＫ１２Ｂ透皮扩散试验仪（上海凯科技贸易有限
公司）；Ｚ９２ＢＤ多功能搅拌器（天津利华仪器厂）；
天平ＡＥＬ２００（日本岛津）。
吴茱萸碱（中国药品生物制品检定所，批号
１１０８０２２００５０４）、吴茱萸次碱（中国药品生物制品检
定所，批号０８０１９７０２）、巴马汀对照品（中国药品生
物制品检定所，批号０７３２９６０４），小檗碱对照品（中
国药品生物制品检定所，批号０７１３９９０６）；乙腈为
色谱纯，其余均为分析纯。
巴布剂基质均为食用或药用规格，包括聚丙烯
酸钠，卡波姆，明胶等。
动物皮肤：小鼠皮由中国药品生物制品检定所
实验动物中心提供，合格证号 ＳＣＸＫ（京）２００５
０００４。
２　萸连巴布膏含量测定方法的建立［１］
本实验以吴茱萸碱［２］、吴茱萸次碱、巴马汀、小
檗碱［３］４种成分作为萸连巴布膏的指标成分，用１
种流动相，在单一波长下同时测定４种指标成分的
含量，建立了一种方便快捷测定复方中多种成分的
方法。
２．１　对照品溶液的配制　精密称定吴茱萸碱、吴茱
萸次碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱对照品 ０２９，
０３２，０６１，０９７ｍｇ，置于２５ｍＬ的量瓶中，加适量
甲醇溶解，定容至 ２５ｍＬ，使其质量浓度分别为
００１１６，００１２８，００２４４，００３８４ｇ· Ｌ－１。
见图１～４。
１．吴茱萸碱；２．吴茱萸次碱；３．巴马汀；４．小檗碱（图３～４同）。
图１　萸连巴布膏对照品溶液色谱图
２．２　标准曲线的绘制　取供试品溶液分别进样４，
６，８，１０，２０，４０，６０，８０μＬ，采用上面的色谱条件，测
定其中吴茱萸碱，吴茱萸次碱，巴马汀，小檗碱的峰
面积，并以各个组分的含量为横坐标，峰面积为纵坐
标绘制标准曲线，４种成分的标准曲线见表１。
２．３　供试品溶液的制备　供试品溶液为释放或者
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图２　萸连巴布膏阴性对照色谱图
图３　萸连巴布膏样品色谱图
图４　萸连巴布膏样品和对照品混合液色谱图
表１　吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀和小檗碱的
回归方程以及线性范围
样品名称 标准曲线 ｒ 线性范围／μｇ
吴茱萸碱　 Ｙ＝２ｅ＋０６Ｘ－３２５６２ ０９９９４ ０００４６４～００９４８
吴茱萸次碱 Ｙ＝１ｅ＋０６Ｘ＋１４６５９ ０９９９２ ０００５１２～０１０２４
巴马汀　　 Ｙ＝２ｅ＋０６Ｘ＋４４５０３ ０９９９７ ０００９７６～０１９５２
小檗碱　　 Ｙ＝２ｅ＋０６Ｘ－４０８０４ ０９９９８ ００１５３６～０３０７２
透皮液体，过微孔滤膜后即得。
２．４　精密度考察　用所配制的标准溶液于１日内
进样６次，每次进样１０μＬ，记录峰面积，计算 ＲＳＤ，
得吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小檗碱的 ＲＳＤ分
别为１９％，１９％，０２９％，０６９％，均符合精密度
试验的要求，说明该方法的精密度良好。
２．５　稳定性试验　取供试品溶液分别在０，２，４，６，
８，１０，１２，２４ｈ进样测定其中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、
盐酸巴马汀、盐酸小檗含量，计算 ＲＳＤ，考察样品在
２４ｈ的稳定性，得吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、
小檗碱的 ＲＳＤ分别为 ０３７％，１４％，０１９％，
０１４％，表明供试品溶液在２４ｈ的稳定性良好。
２．６　加样回收试验　取３种不同浓度的萸连巴布
膏供试品溶液各３份，加入规定量的吴茱萸碱、吴
茱萸次碱、巴马汀、小檗碱对照品，使其完全溶
解，过０４５μｍ的微孔滤膜，测定４种指标成分的
含量，计算得吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小
檗碱的平均回收率分别为９８４％，９８１％，９８２％，
９７７％；ＲＳＤ分别为０９３％，１６％，２１％，０５４％。
３　试验方法与结果
３．１　萸连巴布膏的制备［４］　精密称取处方量的浸
膏和巴布剂基质，混合均匀，制备成膏体后均匀涂布
于衬布上，加盖聚乙烯薄膜，即得巴布剂样品。萸连
巴布剂中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小檗碱的
含量分别为１６１，０６７，３５９，５２７０ｍｇ·ｇ－１。
３．２　离体鼠皮的制备　将年龄适宜的健康小鼠处
死后，用脱毛剂将小鼠毛小心脱去，冲洗干净，剪下
皮肤，小心剥离脂肪，选取完整的皮肤，用生理盐水
冲洗干净，备用。
３．３　试验方法与装置　试验使用垂式 Ｆｒａｎｚ扩散
池，接收液为 ＰＥＧ４００９５％乙醇水（１∶３∶６）。试验
过程：将萸连巴布膏紧密贴与处理好的小鼠皮上，排
净气泡，然后固定于扩散装置的扩散室和接收室之
间，巴布膏的背衬层朝向扩散室，在接收室中注满接
收液，排尽气泡。磁力搅拌器转速设定为 ４００ｒ·
ｍｉｎ－１，水浴温度３２℃，扩散池容积１８ｍＬ，有效扩
散面积为２８３４ｃｍ２。分别在０５，１，２，４，８，１４，２４ｈ
取样，取样时将接收室中的液体全部倒出，同时补加
同样体积的新鲜接收液；将倒出液体过微孔滤膜后，
测定其中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小檗碱的
含量，计算透过量。
３．４　释放试验及结果［５］　试验方法与透皮试验的
方法相同，只是把皮肤换成纱布。以指标成分的２４
ｈ累积透过量Ｑ对时间ｔ１／２作图，结果见图５～８，并
以６份样品２４ｈ平均累积释放量ｔ１／２进行动力学方
程拟合，结果见表２。６份样品的４种指标成分的平
均释放率为吴茱萸碱４４０％，吴茱萸次碱６５５％，
巴马汀 ５９０％，小檗碱４４７％。
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图５　６份样品中吴茱萸碱的ＱＴ１／２曲线
图７　６份样品中巴马汀的ＱＴ１／２曲线
图６　６份样品中吴茱萸次碱的ＱＴ１／２曲线
图８　６份样品中小檗碱的ＱＴ１／２曲线
表２　吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小檗碱的体外释放曲线（ｎ＝６）
指标成分 拟合曲线 释放速率／ｍｇ·ｃｍ－２·ｈ－１／２ ｒ
吴茱萸碱　 Ｑ＝００２３９ｔ１／２＋０００７８ ００２３９ ０９９７６
吴茱萸次碱 Ｑ＝００１５６ｔ１／２＋００００５ ００１５６ ０９９９３
巴马汀　　 Ｑ＝００７２５ｔ１／２＋００２３４ ００７２５ ０９９５１
小檗碱　　 Ｑ＝０８１９１ｔ１／２＋０１５８３ ０８１９１ ０９９７７
３．５　透皮试验及结果［６］　按上述方法，进行萸连巴
布剂的体外透皮试验，以指标成分的累积的透过量Ｑ
对时间ｔ作图，以４份样品２４ｈ平均累积透皮量Ｑ对
ｔ进行动力学方程拟合，结果见表３。６份样品的４种
指标成分的平均透过率为吴茱萸碱１０９％，吴茱萸次
碱２１３％，巴马汀１１２％，小檗碱５６％。
表３　吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、小檗碱的体外透皮曲线（ｎ＝４）
指标成分 拟合曲线 经皮渗透速率／μｇ·ｃｍ－２·ｈ－１ ｒ
吴茱萸碱　 Ｑ＝１２５６１ｔ－０１０１６ １２５６０ ０９９８３
吴茱萸次碱 Ｑ＝１０３０２ｔ－１０３１８ １０３０２ ０９９８５
巴马汀　　 Ｑ＝２８０２９ｔ－１２１５９ ２８０２９ ０９９８０
小檗碱　　 Ｑ＝２０９１９０ｔ－３２３２２ ２０９１９０ ０９９０９
４　讨论
巴布剂的体外释放和透皮速率是巴布剂评价的
重要指标，对于巴布剂来说，药物从基质中释放出来
的释放量，能否满足其经皮渗透需要就显得非常重
要；由图９，１０，４种指标成分的的释放和透皮曲线图
中很清楚的显示出吴茱萸碱、吴茱萸次碱、巴马汀、
小檗碱的体外释放量远远大于其透皮量，完全满足
体外透皮的需要。
图５～８，４种指标成分体外释放的 ＱＴ１／２曲线
图显示每种成分的６份样品的曲线基本一致，离散
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图９　吴茱萸释放和透皮比较曲线图
图１０　吴茱萸次碱释放和透皮比较曲图
度比较小；横向比较４种指标成分释放规律一致，萸
连巴布膏的体外释放符合Ｈｉｇｕｃｈｅ方程。释放速率
显示小檗碱＞巴马汀＞吴茱萸碱＞吴茱萸次碱。
在样品测定过程中，本研究首次用１种流动相，
在单一波长下，分离４种指标成分吴茱萸碱、吴茱萸
次碱、巴马汀、小檗碱，如图１～４。从色谱图上可以
很清晰的看出，无论是样品、对照品还是样品和对照
品的混合样品，４种指标成分都分离的相当好，所以
该方法不仅满足了测定要求，并且大大减少了含量
测定的工作量，并为中药复方多指标成分的测定提
供了参考。
［参考文献］
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萸碱和吴茱萸次碱含量［Ｊ］．中国药学杂志，１９９９，３４（１０）：１０．
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［Ｊ］．华西医学，２００６，２１（３）：４６７．
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［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２００１，７（３）：９．
［５］　刘淑芝，彭丽华，郭春燕，等．两种巴布剂基质体外释放度的研
究［Ｊ］．中国实验方剂学杂志，２００５，１１（６）：５．
ＳｔｕｄｙｏｎｖｉｔｒｏｒｅｌｅａｓｅａｎｄｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｂｅｈａｖｉｏｒｓｏｆＹｕｌｉａｎｃａｔａｐｌａｓｍ
ＤＵＭａｏｂｏ１，ＬＩＵＳｈｕｚｈｉ，ＬＩＭａｎｌｉｎｇ，ＪＩＮＲｉｘｉａｎ，ＫＡＮＧＣｈｅｎ，ＬＩＪｕｎｈｏｎｇ
（ＩｎｓｔｉｔｕｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅｍａｔｉｒａｌｍｅｄｉｃａＣｈｉｎａＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００７００，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｅｇｕｌａｒｉｔｙｏｆＹｕｌｉａｎＣａｔａｐｌａｓｍｉｎｖｉｔｒｏｒｅｌｅａｓｅａｎｄｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｂｅｈａｖｉｏｒｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：
ＩｍｐｒｏｖｅｄＦｒａｎｚｄｉｆｕｓｉｏｎｄｅｖｉｃｅｓｗａｓｕｓｅｄｗｉｔｈｆｏｕｒｉｎｄｅｘｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓａｓｅｖｏｄｉａｍｉｎｅ，ｒｕｔａｅｃａｒｐｉｎｅ，ｐａｌｍａｔｉｎｅａｎｄｂｅｒｂｅｒｉｎｅｔｈａｔｗｅｒｅ
ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣｉｎｏｎｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｒｅｌｅａｓｅｒａｔｅｓｏｆｅｖｏｄｉａｍｉｎｅ，ｒｕｔａｅｃａｒｐｉｎｅ，ｐａｌｍａｔｉｎｅａｎｄｂｅｒｂｅｒｉｎｅｗｅｒｅ
００２３９，００１５６，００７２５，０８１９１ｍｇ·ｃｍ－２·ｈ－１／２，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｌｅｙ．Ｔｈｅｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｒａｔｅｓｏｆｅｖｏｄｉａｍｉｎｅ，ｒｕｔａｅｃａｒｐｉｎｅ，ｐａｌｍａｔｉｎｅ
ａｎｄｂｅｒｂｅｒｉｎｅｗｅｒｅ１２５６，１０３０２，２８０２９，２０９１９μｇ·ｃｍ－２·ｈ－１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｒｅｌｅａｓｉｎｇｐｒｏｃｅｓｓｏｆａｌｉｎｄｅｘ
ｉｓｉｎａｃｃｏｒｄａｎｃｅｗｉｔｈＨｉｇｕｃｈｉｅｑｕａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｐｒｏｃｃｅｓｓｉｓｉｎａｃｃｏｒｄａｎｃｅｗｉｔｈｚｅｒｏｌｅｖｅｌｅｑｕａｔｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ｃａｔａｐｌａｓｍ；ｈｕａｎｇｌｉａｎ；ｒｕｔａｅｃａｒｐｉｎｅ；ｖｉｔｒｏｒｅｌｅａｓｅ；ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ
［责任编辑　周　驰］
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