全 文 ：黄连花中两个新的三萜皂苷
田景奎 , 邹忠梅 , 徐丽珍＊ , 张宏武 , 穆红梅 , 杨世林
(中国医学科学院 、中国协和医科大学 药用植物研究所 , 北京 100094)
摘要:目的 对黄连花(Lysimachia davurica Ledeb.)全草的三萜皂苷成分进行分离和结构鉴定 。方法 通过大孔
树脂纯化 ,硅胶和反相硅胶色谱分离正丁醇萃取物物中的三萜皂苷;利用多种波谱技术并结合酸水解方法鉴定其化
学结构。结果 分离鉴定了 2 个三萜皂苷 , 其结构分别为 3β , 16α, 29-三羟基-13 , 28-环氧-齐墩果烷-3-O-β-D-吡喃葡
糖基-(1※2)-β-D-吡喃葡糖酸甲酯苷(I), 3β , 16α, 28-三羟基-齐墩果-12-烯-3-O-{β-D-吡喃葡糖基(1※2)-β-D-吡喃葡糖
醛酸}-28-O-β-D-吡喃葡糖苷(II)。结论 化合物 I和 II为新的三萜皂苷 ,分别命名为黄连花皂苷 D和 J。
关键词:黄连花;三萜皂苷;黄连花皂苷 D;黄连花皂苷 J
中图分类号:R284.1;R284.2 文献标识码:A 文章编号:0513-4870(2004)03-0194-04
Two new triterpenoid saponins from Lysimachia davurica
TIAN Jing-kui , ZOU Zhong-mei , XU Li-zhen＊ , ZHANG Hong-wu , MU Hong-mei , YANG Shi-lin
(Institute of Medicinal Plant Development , Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College , Beijing 100094 , China)
Abstract:Aim To study the triterpenoid saponins in the whole plant of Lysimachia davurica Ledeb.
Methods Column chromatography (including AB-8 macroporous resin , silica gel and ODS)was used to
separate triterpenoid saponins whose structures were elucidated by ESI-MS , NMR(1D and 2D)and hydrolysis
methods.Results Two new triterpenoid saponins were isolated and established as 3β ,16α,28-trihydroxy-olean-
12-en-3-O-{β-D-glucopyranosyl-(1※2)-β-D-glucuronopyranosyl}-28-O-β-D-glucopyranoside}(I), 3β , 16α,
28-trihydroxy-olean-12-en-3-O-{β-D-glucopyranosyl-(1※2)-β-D-glucuronopyranosyl}-28-O-β-D-glucopyranoside}
(II).Conclusion Compounds I and II are new compounds and named as davuricosides D and J.
Key words:Lysimachia davurica;triterpenoid saponin;davuricoside D;davuricoside J
收稿日期:2003-05-29.
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39870085);国家“九
五”攻关课题(96-901-06-37).
＊通讯作者 Tel:86-10-62899705, Fax:86-10-62896313 ,
E-mail:xulizh@hotmail.com
黄连花(Lysimachia davurica Ledeb.)系报春花科
(Primulaceae)珍珠菜属植物 ,主要分布在我国东北地
区。药用其全草 ,民间用以治疗高血压[ 1] 。作者对
黄连花全草的化学成分进行了系统研究 ,前文报道
了有机酸和黄酮类化合物的分离鉴定[ 2 , 3] 。现又从
其正丁醇部分分离得到 19个三萜皂苷 ,本文报道其
中两个新的三萜皂苷 ,即 davuricosides D(I)和 J(II)。
化合物 I 白色无定形粉末 ,mp 184 ～ 186 ℃
(MeOH), [ α] 20D -16.00(c 0.01 , 吡啶), Liebermann-
Burchard反应阳性 ,Molish 反应阳性 ,薄层酸水解检
测含有葡糖醛酸和葡萄糖;TOF-MS 显示m z 849[M
+Na] + ,827[M+H] + ,结合1HNMR和13CNMR数据推
测其分子式为 C43H70O15 ,不饱和度为 9。红外光谱
在1 720 cm-1显示有羰基碳存在;1HNMR谱在高场区
出现 6 个甲基(δ:1.55 , 1.34 , 1.24 , 1.24 , 1.08 , 0.86
均为单峰), 13CNMR出现 C-13 ,C-28成醚键的特征信
号δ:86.6(C-13)[ 4] ,推测其苷元为 13 ,28-环氧-齐墩
果烷型结构。除去糖基的信号外 ,还有 5个与氧相
连的碳信号 ,分析 HMBC和 HMQC 谱将 5 个与氧相
连的碳信号δ:89.4 ,86.6 ,78.0 ,77.0 ,75.0分别归属
为 C-3 , C-13 ,C-28 ,C-16和 C-29;C-16上的羟基为α
构型(如为 β构型取代 ,C-16的化学位移为 64.0左
右)[ 4] ;C-20位上(C-29或C-30)有 C-29羟基取代 ,即
·194· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2004 , 39(3):194-197
DOI :10.16438/j.0513-4870.2004.03.010
C-20上的羟甲基为α构型(如为 β构型取代 ,即C-30
的化学位移为 65.0 左右)[ 5] ;通过 HMQC 推定 3-H
化学位移为δ3.25(1H , dd , J =4.5 ,11.5 Hz),与 2α-
H的偶合常数为 4.5 Hz ,故确定 3-H为α取代(如为
β取代 ,则 J =5.0 ～ 5.5 Hz)[ 6] 。根据以上分析 ,推
断其苷元为 3β , 16α, 29-三羟基-13 , 28-环氧-齐墩果
烷。
13CNMR谱出现 2 个糖基的端基碳信号(δ
105.3 ,106.0), 1HNMR中也观察到相应 2 个糖基的
端基质子信号[δ:5.37(1H ,d , J =7.0 Hz), 4.95(1H ,
d , J =7.0 Hz)] ,通过 HMQC ,HMBC , 1H-1H COSY谱
归属两个糖基的1HNMR和13CNMR信号(表 1),结合
端基质子偶合常数的数据 ,推测糖基分别为 β-D-吡
喃葡糖醛酸甲酯基和 β-D-吡喃葡糖基。因为与 β-
D-吡喃葡糖醛酸的羰基信号相比 , β-D-吡喃葡糖醛
酸甲酯基的羰基信号向高场位移了 δ6.0 左右 ,
HMBC谱也显示羰基与甲氧基的 H有远程相关(图
1),因此 ,β-D-吡喃葡糖醛酸甲酯化 。HMBC 谱上可
以看到 β-D-吡喃葡糖醛酸甲酯端基质子(δ4.95)、β-
D-吡喃葡糖基端基质子(δ5.37)分别与苷元 C-3(δ
89.4)、β-D-吡喃葡糖醛酸甲酯 C-2′(δ82.3)远程相
关(图 1),从而可以确定苷元 3位连接糖基的位置
及顺序。综上分析 ,此化合物的结构鉴定为:3β ,
16α,29-三羟基-13 , 28-环氧-齐墩果烷-3-O-β-D-吡喃
葡糖基-(1※2)-β-D-吡喃葡糖酸甲酯苷[ 3β , 16α, 29-
trihydroxy-13 , 28-epoxy-oleanane-3-O-β-D-glucopyranosyl-
(1※2)-(6-methyl ester)-β-D-glucuronopyranoside] , 为
一新化合物 ,命名为黄连花皂苷D(davuricoside D)。
Figure 1 Structure and key HMBC correlations of I
化合物 II 白色无定形粉末 ,mp 229 ～ 232 ℃
(MeOH-H2O 9∶1), [ α] 20D -20.79(c 0.04 , 吡啶),
Liebermann-Burchard反应及Molish反应均为阳性 ,薄
层酸水解检测含有葡糖醛酸和葡萄糖 。(+)-ESI-
MS显示m z 981.5[M+Na] + ,(-)-ESI-MS 显示m z
957.9[M -H] - ,结合1HNMR和13CNMR数据推测其
分子式为 C48H78O19 ,不饱和度为 10。 1HNMR显示 7
个甲基信号(δ:1.69 , 1.15 , 1.05 , 0.92 , 0.92 , 0.91 ,
0.80均为单峰), 一个烯氢信号 5.27(1H , br s , 12-
H),13CNMR有δ:144.5 ,122.4两个烯碳特征信号[ 4] ,
推测化合物可能为 Δ12-齐墩果烯结构 。与已知化合
物 primulagenin A的13CNMR进行比较(表 1)[ 7] ,两者
基本相同 ,区别在于 II C-3 ,C-22和 C-28的δ值分别
向低场位移了δ11.1 ,5.4和8.8 ,说明 II苷元的 C-3
和 C-28被苷化 ,形成双糖链皂苷。通过 HMQC 推定
3δ-H 值为 3.23(1H , br d , J =11.5 Hz),并且为α取
代 。另外 ,在 II的13CNMR中 ,除糖基及 C-3含氧碳
信号外 ,还有两个与氧相连的C信号(δ73.1 ,79.0),
在 HMBC中这两个碳都与另一个碳上的 H 远程相
关(图 2),结合其他远程相关 ,推断 C-28为δ79.0 ,
C-16为δ73.1 ,与已知化合物 primulagenin A 相同 ,
进一步证明其苷元为 3β ,16α,28-三羟基-齐墩果-12-
烯 。
Figure 2 Structure and key HMBC correlations of II
13CNMR显示 3个糖基的端基碳信号(δ105.5 ,
105.2 ,104.8), 1HNMR也观察到 3 个端基质子信号
[δ:5.32(1H , d , J =7.0 Hz), 4.81(1H , d , J =7.0
Hz), 4.79(1H , d , J =7.0 Hz)] 。分析1H-1H COSY ,
HMQC ,HMBC 谱使 3个糖残基1HNMR和13CNMR信号
得到归属(表 1),结合端基质子偶合常数 ,确定 3个
糖基分别为两个 β-D-吡喃葡糖基和 1个 β-D-吡喃
葡糖醛酸基。HMBC显示 β-D-吡喃葡糖醛酸基的端
基H(δ4.81)与苷元 C-3(δ89.2)远程相关;β-D-吡
喃葡糖基的端基 H(δ5.32)与 β-D-吡喃葡糖醛酸基
的 C-2′(δ81.7)远程相关 ,从而可以确定苷元 3位连
·195·田景奎等:黄连花中两个新的三萜皂苷
接糖基的位置和连接顺序。而另一 β-D-吡喃葡糖
基的端基 H(δ4.79)与苷元 C-28(δ79.0)远程相关 ,
从而可以确定苷元 28 位连接糖基的位置(图 2)。
综上分析 ,推断化合物 II的结构为:3β , 16α, 28-三羟
基-齐墩果-12-烯-3-O-{β-D-吡喃葡糖基(1※2)-β-D-
吡喃葡糖醛酸}-28-O-β-D-吡喃葡糖苷{3β , 16α, 28-
trihydroxy-olean-12-en-3-O-{β-D-glucopyranosyl-(1※2)-
β-D-glucuronopyranosyl }-28-O-β-D-glucopyranoside }。
为一新化合物 ,命名为黄连花皂苷 J(davuriconoside
J)。
实验部分
熔点用 Fisher-Johns熔点测定仪(温度未校正),
红外光谱用 Perkin-Elmer 983G 红外光谱仪 ,核磁共
振用 Bruker ARX500核磁共振仪(TMS内标),质谱用
VGZAB-2F 质谱测定仪和 Zabspec E质谱测定仪;旋
光度用 Perkin-elmer241 型旋光仪;柱色谱用硅胶
(100 ～ 200目和 200 ～ 300目),青岛海洋化工厂生
产;RP-C18硅胶(30 ～ 50 μm)由 Alltech公司生产;大
孔树脂AB-8 ,由天津南开大学化工厂生产;黄连花
采自吉林省安图县 ,原植物由本所资源室郭宝林博
士鉴定为 Lysimachia davurica Ledeb.的干燥全草 。
1 提取与分离
黄连花干燥的全草 16 kg , 95%EtOH 和 50%
EtOH回流提取 3次 ,合并滤液 ,减压浓缩得浸膏 。
浸膏混溶于水 , 分别以石油醚 , CHCl3 , EtOAc , n-
BuOH萃取 ,回收萃取液得各个部分浸膏。 n-BuOH
浸膏 460 g ,经大孔树脂 AB-8柱 ,用 H2O 洗去杂质 ,
以95%EtOH 洗脱 ,得总皂苷 27.7 g ,总皂苷经硅胶
柱色谱 ,CHCl3-MeOH(含 5%水)梯度洗脱 ,得 7个流
份。其中第 2流份经反复硅胶柱色谱 ,CHCl3-MeOH-
H2O(75∶25∶7)洗脱 ,得化合物 I;第 6流份常压反相
硅胶柱色谱 ,MeOH-H2O(43∶57)洗脱 ,得化合物 II。
2 结构鉴定
化合物 I 白色无定形粉末 , mp 184 ～ 186 ℃
(MeOH), [ α] 20D -16.00(c 0.01 , 吡啶), Liebermann-
Burchard反应阳性 ,Molish反应阳性 ,薄层酸水解检
测含有葡糖醛酸和葡萄糖;IR(KBr)cm-1:3 330
(OH), 2 950 , 2 880 , 1 730(C=O), 1 470 , 1 345 ,
1 220 , 1 050 , 920;TOF-MS m z:849.5 [ M +Na] + ,
827.3[M+H] +;1HNMR(C5D5N-d5)δ:5.37(1H , d , J
=7.0 Hz ,1″-H),4.95(1H , d , J =7.0 Hz ,1′-H), 4.23
(1H ,m ,16-H),3.74(2H , s , 29-H2), 3.72(3H , s , glu A-
Me),3.62(1H ,d , J =7.5 Hz ,28-Ha),3.26(1H ,d , J =
7.5Hz ,28-Hb),3.25(1H ,dd , J =4.5 , 11.5 Hz ,3-H),
1.55(3H , s ,Me-27), 1.34(3H , s ,Me-26), 1.24(3H , s ,
Me-30),1.24(3H , s ,Me-23),1.08(3H , s ,Me-24),0.86
(3H , s ,Me-25);13CNMR数据见表 1。
Table 1 13CNMR data of compounds I (125 MHz)
and II(500 MHz , in pyridine-d5)
C I Primulagenin A II C I II
1 39.8 38.8 38.7 3-O-glu A
1′ 105.3 104.8
2 26.8 26.4 26.2 2′ 82.3 81.7
3 89.4 78.1 89.2 3′ 77.6 77.7
4 39.3 39.6 39.3 4′ 71.9 73.8
5 55.8 55.9 55.6 5′ 77.3 78.0
6 18.6 18.7 18.2 6′ 170.4 176.0
52.1(OCH3)
7 34.6 33.3 32.1 glc
1″ 106.0 105.2
8 44.7 40.0 39.8 2″ 76.8 76.5
9 50.9 47.0 46.8 3″ 77.0 78.2
10 37.1 36.8 36.5 4″ 72.9 71.4
11 20.4 23.8 23.5 5″ 78.0 78.2
12 37.0 122.5 122.4 6″ 62.9 62.5
13 86.6 145.1 144.5 28-O-glc
1 105.5
14 45.3 41.9 41.6 2 74.8
15 37.6 34.6 34.4 3 77.5
16 77.0 74.1 73.1 4 71.3
17 42.6 40.8 40.0 5 78.2
18 52.1 42.4 42.9 6 62.4
19 28.0 48.2 47.7
20 50.6 30.3 30.8
21 33.0 36.8 36.3
22 32.4 31.1 36.5
23 30.0 28.2 27.8
24 16.6 16.7 16.5
25 16.5 15.6 15.6
26 18.0 17.1 16.9
27 19.7 27.2 27.2
28 78.0 70.2 79.0
29 75.0 33.4 33.1
30 19.3 24.8 24.8
化合物 II 白色无定形粉末 , mp 229 ～ 232 ℃
(MeOH-H2O 9∶1), [ α] 20D -20.79(c 0.04 , 吡啶),
Liebermann-Burchard反应阳性 , Molish 反应阳性 ,薄
层酸水解检测含有葡糖醛酸和葡萄糖;IR(KBr)
cm
-1:3 630(COOH), 3 200(OH), 2 970 , 2 880 , 1 730
(C=O), 1 630 , 1 485 , 1 315 , 1 230 , 1 070 , 940;(+)-
ESI-MS m z:981.5[ M +Na] + , (-)-ESI-MS m z:
957.9[M-H] -;1HNMR(C5D5N-d5)δ:5.27(1H ,br s ,
·196· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2004 , 39(3):194-197
12-H),5.32(1H ,d , J =7.0 Hz , 1″-H), 4.81(1H ,d , J
=7.0 Hz ,1′-H), 4.79(1H ,d , J =7.0 Hz , 1 -H), 4.23
(1H ,m ,16-H), 4.03(1H , d , J =8.0 Hz ,28-Ha), 3.88
(1H ,d , J =8.0 Hz , 28-Hb), 3.23(1H , br d , J =11.0
Hz , 3-H), 1.69(3H , s ,Me-27), 1.15(3H , s , Me-23),
1.05(3H , s ,Me-24),0.92(3H , s ,Me-29),0.92(3H , s ,
Me-30), 0.91(3H , s , Me-26), 0.80(3H , s , Me-25);
13
CNMR数据见表 1。
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第八届中国国际多肽研讨会
8th Chinese International Peptide Symposium
中国 昆明 2004年7月 3-6日
第八届中国(国际)多肽学术讨论会已定于 2004 年 7月 3-6 日在我国著名的旅游城市昆明举行。本次会议将由北京药
理毒理研究所主办 , J.Peptide Res.杂志的主编Victor J.Hruby教授 , 欧洲多肽协会的主席 Jean Martinez教授以及 John D.Wade ,
Ian Smith , Yasuyuki Shimohigashi , Saburo Aimoto , Yoshiaki Kiso , Kit S.Lam 等许多国外知名学者届时将参会并作精彩的学术报
告。我们热情邀请各位同仁 、同学和企业代表参加本届大会 , 您将会了解到国内外多肽研究的最新动态 ,有机会与国内外知
名科学家交流探讨多肽研究领域的热点问题。因此我们希望国内从事多肽 、蛋白质领域研究的科学家踊跃投稿 、参会 , 以推
动中国多肽 、蛋白质领域的基础和应用研究不断向前发展。
摘要及会刊截止日期:摘要:2004年 5 月 1 日
会刊:2004年 7 月 25 日
征文内容:1.合成方法学;2.肽免疫作用;3.肽类似物;4.结构生物学;5.蛋白质组学;6.信号转导;7.生物活性肽;
8.肽类药物;9.药理学;10.蛋白酶抑制剂;11.有机固相合成 , 多样和组合化学 ,等 。
联系人:贾启燕 通讯地址:北京药理毒理研究所 , 北京市海淀区太平路 27号(100850)
电话:010-66931606; 传真:010-68211656
E-mail:qiyanjia@yahoo.com.cn Web Site:Http: www.8thpeptsym.com
·197·田景奎等:黄连花中两个新的三萜皂苷