全 文 :x种大黄蒽醌类衍生物解离常数的测定
李 菲 o丁中涛 o曹秋娥 3
k云南大学 化学系 o云南昆明 yxss|tl
≈收稿日期 ussx2tt2sx
≈基金项目 国家自然科学基金项目 kuswyxssvovsuysstwl~
云南省自然科学基金项目 kussv
sssw l
≈通讯作者 3 曹秋娥 oר¯}ks{ztlxsvvzuyo∞2°¤¬¯}´¨ ¦¤²
¼±∏1 §¨∏1¦±
中药有效成分的酸碱性不仅是药物的生产 !制
剂 !分析及贮存中常要利用的性质 o也与药物在体内
的吸收 !分布 !代谢 o以及药物对皮肤 !黏膜 !肌肉 !内
脏的刺激等密切相关 ≈tou ∀因此 o测定中药有效成
分的离解常数 kΚ¤l具有一定的意义 ∀目前 o用于测
定离解常数的方法较多 o常见的有紫外光谱法 ≈v !
电位滴定法 ≈w !各种常规电泳法 ≈xoy 及高效毛细管
区带电泳法 k≤∞l≈z2ts ∀其中 ≤∞法是以分析物在
不同 ³下的电泳淌度作为理论依据 o因此用该法
测定离解常数既不需要知道样品溶液的浓度也不要
求样品具有很高的纯度 ∀此外 o毛细管区带电泳法
灵敏度高 !用样量少 o对于某些因溶解度较差或纯度
不高而无法用其他方法测定的样品具有无可比拟的
优点 o因而被认为是测定离解常数方便而有效的方
法 ∀
大黄素甲醚 !大黄酚 !芦荟大黄素 !大黄素和大
黄酸 x种大黄蒽醌类衍生物的 Κ¤至今未见文献报
道 ∀本研究采用毛细管区带电泳法并结合紫外光度
法测定这 x个中药活性成分的离解常数 o结果表明
u种方法测得的数值基本一致 ∀
1 相关理论及计算
1q1 ≤∞法测定离解常数 kΚ¤l
在 ≤∞电泳模式中 o球形带电粒子的有效淌度
Λεφφ为 }
Λεφφ θyΠΓρ ktl
式中 θ和 ρ分别为带电粒子的带电量和半径 oΓ
为电泳介质的黏度 ∀
对于一元弱酸 o它以 及 p两种形态存
在于溶液中 o形态因不带电荷 o随中性物质迁
移 o因此在电解质溶液中 o弱酸的有效淌度 Λεφφ只与
p浓度有关 ∀设当 处于完全理解状态时 o弱酸
的有效淌度为 Λαo则在达到完全离解前 o弱酸的有
效淌度为 Λεφφ为 ≈| }
Λεφφ ∆Α p ≅ Λα
Κα
≈Η n n Κα
Λα kul
式中为 Αp的分布系数 oΚα为 的离解常数 o
Λεφφ为有效淌度 o用下式求算 ≈ut2uv }
Λεφφ λ≅ Λς k
t
τεοφ p
t
τΜ l kvl
其中 ς为分离电压 o 和¯ 分别为毛细管有效
长度及总长度 oτΜ和 τεοφ分别为分析物的及中性物
k本实验中为甲醇 l的迁移时间 ∀
由式 kul可见 o当 Λεφφ tru Λα时 oΚα ≈ n o即
³Κ¤ ³∀因此可通过测定不同 ³下弱酸的有效
淌度 Λεφφo以 ³值对 Λεφφ作图得 ³ 2Λεφφ曲线 o曲线上
最大有效淌度 Λεφφk即 Λα l的 tru处所对应的 ³即
为 的 ³Κ¤值 ≈| ∀
1q2 紫外 2可见光度法测定离解常数 kΚαl
对于一元弱酸 o在不考虑离子强度的影响
时 o其电离常数 Κα可表示为 }
Κα ≈Η
n ≈Αp
≈ΗΑ kwl
设在 未发生电离和电离完全时 o体系在某
一固定波长下的吸光度分别为 ΑΗΑ和 ΑΑp o当 发
生部分电离时 o体系的吸光度 为 }
将 ΑΗΑ和 ΑΑp的计算式代入方程 kwl并整理得 }
³Κα p ²¯ª
kΑΗΑ p Αl
kΑ p ΑΑ p l n ³ kxl
由方程 kxl可知 o当 Α ΑΗΑ n ΑΑpu 时 o³Κ¤ ³∀
因此 o可测定不同 ³下的吸光度 Αo并以 Α对 ³
值作图 o即可得 ³Κ¤≈v ∀
2 仪器与试剂
°r≤∞× ⁄±型高效毛细管电泳仪带二级管
阵列紫外检测器 k
¦¨®°¤± ≤²∏¯·¨µo美国 lo数据处理
#yyt#
第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
采用 vu¤µ¤·软件 ~未涂层石英毛细管 kxz ¦° ≅ zx
Λ°lo有效长度 xs ¦°o河北省永年锐沣色谱器件有
限公司 ~∂ p uws型紫外 2可见分光光度计 k日本岛
津 l~³≥ pu≤型酸度计 k上海雷磁仪器厂 l∀
标准品大黄素甲醚 !大黄酚 !芦荟大黄素和大黄
酸由中国药品生物制品检定所提供 o大黄素购自北
京百灵威化学技术有限公司 k¦µ²¶公司 l∀各标准
品溶液均由甲醇配制成 s1tx °ª# °pt溶液 ow ε
下保存 ~不同 ³的缓冲溶液由 tx °°²¯ # pt的
¤u
w z用 ≤ 或¯ ¤溶液调节得到 ∀电泳分析
中所用溶液包括样品溶液和缓冲溶液在使用前均用
s1wx Λ°滤膜过滤 ∀其他试剂均为分析纯 ~实验用
水为 u次石英蒸馏水 ∀
3 方法
3q1 ≤∞法测定离解常数 整个实验均采用 us
®∂的运行电压 oux ε 的毛细管柱温 o°⁄检测器
k检测波长为 uxw ±°lo以压力 kv wwz1v{ °¤l进样 x
¶∀每次平行测定 v次 o结果取平均值 ∀为确保重现
性 o毛细管柱每天在运行前及两次运行之间均依次
用 s1t °²¯# pt氢氧化钠 !水和运行缓冲溶液分别
冲洗 vouow °¬±∀
3q2 紫外 2可见光度法测定离解常数 分别取各组
分甲醇溶液 s1t °o用不同 ³的 ¤u
w z缓冲溶
液 k固定 ¤u
w z浓度为 tx °°²¯ # pt l稀释至 x
°o摇匀后 o以 tx °°²¯ # pt的 ¤u
w z缓冲溶液
为参比 o用 t ¦°比色皿在紫外 2可见分光光度计上
绘制各组分的吸收光谱曲线 o或在选定波长下测定
吸光度 o每次平行测定 v次 o结果取平均值 o绘制吸
光度 Α对 ³的关系曲线 o求算 ³Κ¤值 ∀
4 结果与讨论
4q1 ≤∞法测定结果
按照 1q1部分的测定原理 o在固定 ¤u
w z浓
度为 tx °°²¯ # pt的情况下 o在 ³ z1w{ ∗ ts1|xo
测定了大黄素 !芦荟大黄素 !大黄素甲醚 !大黄酚和
大黄酸的有效淌度 Λεφφ随 ³的变化情况 o并绘制了
³ 2Λεφφ的关系曲线见图 t∀图 t是以芦荟大黄素
kl和大黄酸 k
l为代表的 ³ 2Λεφφ的关系曲线 o其
他组分的 ³ 2Λεφφ曲线与此类似 ∀由 ³ 2Λεφφ的关系曲
线及方程 kul求得大黄素甲醚 !大黄酚 !芦荟大黄素
和大黄素的 ³Καt列于表 t∀对于大黄酸 o其一级电
离为羧基的电离 o因此在 ³ z1w{ ∗ ts1|x应该为其
第二级电离 o由图 k
l中曲线及方程 kul同样求得大
图 t 芦荟大黄素 kl和大黄酸 k
l的
³ 2Λεφφ关系曲线
黄酸的 ³Καu ∀
4q2 紫外 2可见光度法测定结果
大黄素 !芦荟大黄素 !大黄素甲醚 !大黄酚和大
黄酸的 ³Κ¤值未见文献报道 o因此 o为了验证 ≤∞法
对 x种醌类组分 ³Κ¤值的测定结果 o本研究采用紫
外 2可见光度法对此 x种蒽醌类组分的 ³Κ¤值进行了
进一步的测定 ∀在固定 ¤u
w z浓度为 tx °°²¯ #
pt的缓冲溶液中 o分别绘制了 x种组分在酸性及碱
性下的吸收曲线 ∀根据吸收曲线 o选择测定大黄素 !
芦荟大黄素 !大黄素甲醚 !大黄酚和大黄酸 ³¤值时
的波长分别为 xtxoxstowwvoxsvoxsw ±°∀在上述
选定波长下 o在 ³ x1su ∗ tt1ywo测定了各组分的
吸光度 Α随 ³的变化情况 o绘制了 Α2³的关系曲
线 ∀以芦荟大黄素 kΑχl和大黄酸 kΒχl为代表的 Α2
³的关系曲线见图 uo其他组分的 Α2³曲线与此
类似 ∀由 Α2³关系曲线及方程 kyl求得大黄素甲
醚 !大黄酚 !芦荟大黄素和大黄素的 ³Κ¤t及大黄酸的
³Κ¤u列于表 t∀
图 u 芦荟大黄素 kχl和大黄酸 k
χl
的 Α2³关系曲线
表 t x种蒽醌类衍生物的 ³Κ¤测定结果
ks1t °°²¯# pt ¤u
w z ouu ∗ ux ε l
组分 ≤∞法平均值 ≥⁄
紫外 2可见光度法
平均值 ≥⁄ 平均值
大黄素甲醚 tl |1v| t1ux |1xy t1tz |1w{
大黄酚 tl |1wz t1wv |1{s t1sv |1yw
芦荟大黄素 tl |1ux u1x{ |1ts t1|| |1t{
大黄素 tl {1ux t1sw z1|s s1zy {1s{
大黄酸 ul {1{{ s1|{ {1yu t1ww {1zx
注 }tl ³Κ¤t o ul ³Κ¤u
#zyt#
第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz
由表 t可见 o用 ≤∞法测得的 x个组分的 ³Κ¤
值与用紫外 2可见光度法测得的 ³Κ¤值基本一致 o说
明本研究测得的各组分的 ³Κ¤值是可靠的 o具有参
考价值 ∀
≈参考文献
≈t 四川医学院 q药物化学 ≈ q北京 }人民卫生出版社 ot||v}
wwvq
≈u 冯 俭 o谢 萍 q中药有效成分理化性质分析在新药开发研究
中的重要意义与基本方法 ≈ q中国中药杂志 oussvou{k|l}
z|{q
≈v 胡之德 o赵正风 q分光光度分析法 ≈ q银川 }宁夏人民出版
社 ot|{z}tx|q
≈w ≤²²®¶²± ƒq ׫¨ §¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©¤¦¬§¬·¼ ¦²±¶·¤±·¶≈ q ≤ «¨ °
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≈| µ¨¶·¤±¬≠ o ¨ ∏¥¨ µ· o ∏±® o ·¨¤¯q ⁄ ·¨¨µ°¬±¤·¬²± ²©§¬¶¶²¦¬2
¤·¬²± ¦²±¶·¤±·¶²©¦¨³«¤¯²¶³²µ¬±¶¥¼ ¦¤³¬¯¯¤µ¼ ½²±¨ ¨¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶
≈ q ≤«µ²°¤·²ªµo t||{o{sv}uzvq
≈ts 刘海兴 o杨更亮 o王德先 o等 q毛细管电泳法测定电离平衡常
数 ≈ q分析化学 oussuovsktl}tuxq
≈责任编辑 戴 畅
金钱蒲根茎挥发性成分的研究
周 欣 t3 o雷培海 tou o赵 超 t o陈华国 t
ktq贵州师范大学 天然药物质量控制研究中心 o贵州 贵阳 xxssst~
uq贵州大学 精细化工研究开发中心 o贵州 贵阳 xxssuxl
≈收稿日期 ussy2s{2ts
≈通讯作者 3 周欣 o ר¯}ks{xtlyy|sst{o ∞2°¤¬¯}¤¯¬¦¨|{ss
¶¬±¤q¦²°
金钱蒲 Αχορυσ γραµ ινευσ ≥²¯¤±§q为天南星科菖
蒲属多年生草本植物 o又名随手香 o分布于贵州 !西
藏 !甘肃 !陕西 !四川 !云南等省区 ∀根茎入药 o味辛 !
苦 o性温 o具有开窍化痰 !健胃 !辟秽 !杀虫之功
效 ≈tou ∀文献报道金钱蒲的己烷提取物对线虫 !昆
虫和壁虱具有明显的杀虫活性 ≈v ∀作者采用 ≤ 2
≥对金钱蒲挥发油化学成分进行了分析研究 ∀
1 材料与方法
1q1 仪器与分析条件 气相色谱 2质谱联用仪
k°y{|srx|zv型 o美国 º¨¯¨·p ³¤¦®¤µ®公司 l~挥
发油提取器 ∀气相色谱条件 }弹性石英毛细管柱 °
p x ≥ xh °«¨ ±¼¯ ·¨«¼¯ ≥¬¯²¬¤± k¨s1ux °° ≅ vs °o
s1ux Λ°l∀升温程序 }xs ε k保持 t °¬±lo以 w ε
# °¬±pt升温至 uus ε k保持 w °¬±lo载气为高纯 ¨
k||1|||h lo柱前压 xv1x ®°¤o载气流量 t1s °#
°¬±pt o进样量 t Λo分流比 wsΒt∀质谱条件 }离子
源为 ∞源 ~离子源温度 uvs ε ~四极杆温度 txs ε ~
电子能量 zs ∂¨ ~发射电流 vw1y Λ~倍增器电压
t zt{ ∂ ~接口温度 u{s ε ~溶剂延迟 w °¬±~质量范
围 µ / ζ ts ∗ xxs∀
1q2 材料与挥发油提取
金钱蒲于 ussx年 y月采自贵州省毕节地区 o经
贵阳中医学院陈德媛教授鉴定为金钱蒲 Α. γραµ ι2
νευσ∀取金钱蒲阴干的根茎 uss ª切碎 o放入挥发油
提取器中 o常压水蒸气蒸馏 x «o得具有特殊浓郁香
味的白色油状液体 t °o得油率为 s1xh o用乙醚溶
解成一定浓度的溶液备用 ∀
2 结果与讨论
2q1 取金钱蒲挥发油 t Λk乙醚溶液 lo用气相色
谱 2质谱联用仪分析 o共分离出 yv个组分 o通过
° ≥⁄化学工作站检索 ¬¶·|{标准质谱图库和
#{yt#
第 vu卷第 u期
ussz年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλοφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯qvuo ¶¶∏¨ u
¤±∏¤µ¼o ussz