全 文 ：川芎中含阿魏酸效应组分的提取、纯化工艺研究
洪燕龙１，徐德生１，冯 怡２，袁 莹２
（１．上海中医药大学 附属曙光医院，上海 ２０００２１；
２．上海中医药大学 中药学院，上海 ２０１２０３）
［摘要］ 目的：对川芎中含阿魏酸效应组分的提取、纯化工艺进行优化研究。方法：以阿魏酸为主要指标，采
用单因素及正交试验设计考察提取工艺参数的最佳组合；采用单因素试验考察大孔树脂吸附法的纯化工艺参数。
结果：纯化后含阿魏酸效应组分的出膏率为１６７％，其中含阿魏酸５８２％。结论：本实验研究为川芎药材及其制剂
的开发提供有益的实验依据。
［关键词］ 川芎；阿魏酸；提取；纯化
［中图分类号］Ｒ２８３ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１７１７４００４
［收稿日期］ ２００６１０２０
［基金项目］ 上海市重点学科建设项目资助（Ｔ０３０１）
［通讯作者］ 徐德生，Ｔｅｌ：（０２１）５１３２２４９３，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｄｅｓ１９５３
＠１２６．ｃｏｍ
川芎为中医临床常用药，具有活血行气、祛风止
痛之功效，为治头痛、经痛、风湿痹痛之良药。其主
要含有挥发油、内酯类、生物碱类、酚类等多类成
分［１］，其中阿魏酸具有较强的生理活性［２］，可抑制
血小板聚集、促进血小板的解聚、抗血栓的形成、解
除血管平滑肌痉挛、抗氧化和提高膜稳定性以及抗
炎、镇痛、抗生育、调节免疫功能等药理作用。川芎
的提取文献报道较多［３５］，而纯化工艺报道较
少［６，７］，作者以阿魏酸为主要指标，采用单因素及正
交试验系统研究了川芎的提取、纯化工艺，为川芎药
材及其制剂的开发提供有益的实验依据。
１ 仪器与试药
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪，Ａｇｉｌｅｎｔ化学工作
站（ＨＰ），ＤＺ－２ＢＣ型真空干燥箱（天津泰斯特），电
子天平（北京分析仪器厂）；甲醇（ｓｉｇｍａ公司，色谱
纯）；余试剂均为分析纯。大孔树脂购于南开大学
化工厂及沧州保恩化工厂；阿魏酸对照品（中国药
品生物制品检定所，批号０７７３９９１０）；川芎经本校
生药教研室赵志礼教授鉴定为伞形科植物川芎 Ｌｉ
ｇｕｓｔｉｃｕｍｃｈｕａｎｘｉｏｎｇＨｏｒｔ．的干燥根茎，购自上海天
桥中药饮片厂（批号０６０４０５，产地四川）。
２ 方法与结果
２．１ 阿魏酸含量测定
２．１．１ 色谱条件 ＫｒｏｍａｓｉｌＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ），流动相１％冰醋酸甲醇（６５∶３５），流速
１ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长３２２ｎｍ，进样量１０μＬ，理论
塔板数以阿魏酸计不低于５０００，分离度不小于２。
２．１．２ 对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照
品３０５ｍｇ，置２５ｍＬ棕色量瓶中，加流动相溶解
并稀释至刻度，摇匀，即得含阿魏酸 １２２μｇ·
ｍＬ－１的对照品储备液，经稀释得１２２，２４４，４８８，
７３２，９７６，１２２μｇ·ｍＬ－１的系列对照品溶液。
２．１．３ 样品溶液的制备 称取川芎粗粉２５ｇ，７０％
乙醇回流提取２次（２，１５ｈ），合并提取液，转移至
１０００ｍＬ量瓶中，用水稀释至刻度摇匀，微孔滤膜
滤过，取续滤液，即得。
２．１．４ 标准曲线的制作 分别精密吸取各对照品
溶液１０μＬ，按上述色谱条件测定，以阿魏酸对照品
的进样量（μｇ）为横坐标，以峰面积（Ａ）为纵坐标绘
制标准曲线，计算得回归方程：Ｙ＝２４９０５Ｘ＋
２７３８２，ｒ＝０９９９７，进样量在０１２２～１２２０μｇ与
峰面积呈良好的线性关系。
２．１．５ 精密度试验 精密吸取同一样品溶液，重复
测定５次，结果ＲＳＤ１７９％。
２．１．６ 稳定性试验 精密吸取同一样品溶液，分别
在０，１，２，４，６，８ｈ测定，结果ＲＳＤ２３８％
２．１．７ 重复性试验 精称取同一批号川芎药材２５
ｇ，按２．１．３项下方法平行制备５份，测定，结果ＲＳＤ
１１５％。
２．１．８ 回收率试验 称取同一批号川芎药材１２５
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ｇ，精称，共５份，精密加入对照品１４６０ｍｇ，按２．１．
３项下方法平行制备，测定，平均回收率为９７８９％，
ＲＳＤ０５６％。
在上述色谱条件下，阿魏酸对照品、供试品溶液
的色谱图见图１。
图１ 川芎药材ＨＰＬＣ图
Ａ．对照品；Ｂ．药材；１．阿魏酸
２．２ 提取工艺研究
２．２．１ 单因素法考察药材的粒度 分别选择川芎
饮片及粗粉（过 ２０目筛），以 １０倍量 ８０％乙醇提
取，提取２次，每次２ｈ。川芎饮片经粉碎后阿魏酸
提取量显著增加，因此宜选用粗粉进行提取，见表
１。
表１ 川芎药材粒度考察结果（ｎ＝２）
样品 出膏率／％ 阿魏酸／ｍｇ·ｇ－１
饮片 １２３５ ０４５６０
粗粉 ２１５６ １１２６０
２．２．２ 醇提取工艺的正交试验考察 选择 Ｌ９（３
４）
正交表，以阿魏酸含量为评价指标，考察提取溶剂
（Ａ）、溶剂用量（Ｂ）和提取时间和次数（Ｃ）对热回流
提取效果的影响。经方差分析，３因素均有显著性
差异，结合极差分析结果，在本试验的条件下川芎的
最佳提取工艺组合为 Ａ１Ｂ３Ｃ３，即 ７０％乙醇、１２倍
量、提取３次。正交试验因素水平表见表２，结果见
表３。
表２ 因素水平
水平
Ａ
乙醇体积分数／％
Ｂ
溶剂用量／倍
Ｃ
提取次数及时间
１ ７０ ８ １（２ｈ）
２ ８０ １０ ２（２，１５ｈ）
３ ９５ １２ ３（２，１５，１５ｈ）
２．２．３ 优化工艺的验证 采用上述优化工艺，阿魏
酸的平均提取率为１２５２８ｍｇ·ｇ－１（ｎ＝２），表明工
艺较为稳定。
２．３ 纯化工艺研究
２．３．１ 样品溶液的制备 取川芎粗粉 ５００ｇ，加
７０％乙醇，１２倍量，提取３次，滤过，合并提取液，浓
缩至１０００ｍＬ（相当于０５ｇ·ｍＬ－１），５０００
表３ 正交试验结果
Ｎｏ 阿魏酸／ｍｇ·ｇ－１
１ １１３２９
２ １２４９４
３ １２７８５
４ １１６３８
５ １１９８２
６ １１２４４
７ ０９９５６
８ ０９０７４
９ １０４１２
ｒ·ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ，取上清液作为纯化工艺的样
品溶液，冰箱放置，备用。
２．３．２ 大孔树脂的预处理 树脂经漂浮法筛选后
用乙醇反复浸泡，并用５％ ＨＣｌ及２％ ＮａＯＨ溶液交
替洗涤，至乙醇洗脱液经全波长扫描吸收值接近于
０，再用水冲洗至无醇味，备用。
２．３．３ 大孔树脂类型的优选 采用静态吸附法，通
过测定吸附残液和解吸液的阿魏酸含量筛选最适树
脂。选择Ｓ－８，ＨＰＤ－１００，ＨＰＤ－４００，ＡＢ－８，ＨＰＤ－
４５０，ＨＰＤ－６００，ＮＫＡ－９，ＮＫＡ－２等８种树脂，以阿
魏酸的吸附量和解吸量为指标，筛选大孔树脂的种
类。ＨＰＤ－１００，ＨＰＤ－４００，ＨＰＤ－６００树脂对阿魏酸
吸附、解析效果较好，选择ＨＰＤ－１００。结果见表４。
表４ 大孔树脂类型的优选结果
大孔树脂
类型
比吸附量
／ｍｇ·ｇ－１
解吸量
／ｍｇ·ｇ－１
解析率
／％
吸附量·解吸量
／ｍｇ２·ｇ－２
Ｓ－８ １３１２９ １０６６９ ８１２６ １４００６
ＨＰＤ－１００ １３４５７ １１８２９ ８７９１ １５９１８
ＨＰＤ－４００ １３１８３ １２３０９ ９３３７ １６２２６
ＡＢ－８ １０５８５ ０９５０４ ８９７９ １００６０
ＨＰＤ－４５０ １２２４４ １１０３５ ９０１２ １３５１１
ＨＰＤ－６００ １３２３６ １２１４０ ９１７２ １６０６８
ＮＫＡ－９ １０９６３ １０２８６ ９３８３ １１２７６
ＮＫＡ－２ １３３５２ ０７０８２ ５３０４ ０９４５６
２．３．４ 最大吸附容量的考察 川芎样品溶液２００
ｍＬ，上ＨＰＤ－１００大孔树脂４ｇ（干重），蒸馏水洗至
近无色后，用９５％乙醇洗脱１０ＢＶ（柱体积），分别
收集水洗脱液、醇洗脱液，测定阿魏酸含量。结果干
树脂与药材的比例为１∶１２５。
２．３．５ 洗脱溶剂及其用量的考察 川芎样品溶液
１００ｍＬ，上ＨＰＤ－１００大孔树脂４ｇ，吸附流速为１
ＢＶ·ｈ－１，蒸馏水洗至近无色，分别用 １０％，３０％，
５０％乙醇洗脱，收集醇洗脱液，测定阿魏酸含量。用
５０％乙醇洗脱，４ＢＶ即可洗脱完全，因此选用５０％
乙醇作为洗脱溶剂，结果见图２。
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图２ 含阿魏酸效应组分洗脱曲线
２．３．６ 吸附流速的考察 川芎样品溶液１００ｍＬ，
上ＨＰＤ－１００大孔树脂４ｇ，吸附流速分别为０５，１，
２ＢＶ·ｈ－１，蒸馏水洗至无色，用５０％乙醇洗脱，收
集醇洗脱液，测定阿魏酸含量及出膏率。结果表明
随着吸附流速的增大，出膏率减小；当吸附流速为１
ＢＶ·ｈ－１时，阿魏酸纯度较高。综合考虑选择１ＢＶ
·ｈ－１为吸附流速，结果见表５。
表５ ＨＰＤ－１００树脂吸附流速的考察 ％
流速／ＢＶ·ｈ－１ 出膏率 浸膏中阿魏酸
０５ １８２ ５４７
１ １６９ ５８４
２ １６０ ５６４
２．４ 提取、纯化优化工艺验证
经考察川芎中含阿魏酸效应组分的提取、纯化
工艺为：取川芎粗粉一定量，加７０％乙醇，１２倍量，
提取３次，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至相
当于生药０５ｇ·ｍＬ－１，５０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ，
取上清液，上 ＨＰＤ－１００大孔树脂，吸附流速为 １
ＢＶ·ｈ－１，蒸馏水洗至近无色后，用５０％乙醇洗脱４
ＢＶ，收集醇洗脱液减压回收乙醇，真空干燥。
称取川芎粗粉５００ｇ，平行３份，按上述工艺进
行提取、纯化，实验结果见表６。采用１％冰醋酸甲
醇梯度洗脱，纯化前后的ＨＰＬＣ图谱见图３。
表６ 含阿魏酸效应组分提取、纯化结果 ％
批号 出膏率 浸膏中阿魏酸
０６０５２２ １６２ ５７６
０６０５２７ １６７ ５８９
０６０５２９ １７１ ５８２
３ 讨论
作者系统考察了川芎中含阿魏酸效应组分的提
取、纯化工艺，其出膏率约为 １６７％，含阿魏酸
５８２％；阿魏酸得到较大程度的富集，川芎纯化前后
图３ 川芎纯化前后的ＨＰＬＣ图谱
Ａ药材；Ｂ纯化后
的ＨＰＬＣ图谱验证了本实验结果。与文献［７］１０％
的出膏率相比，本工艺有较大的优越性。
川芎、天麻共同组成了治疗偏头痛的传统名方
大川芎丸。含阿魏酸效应组分与含天麻素效应组分
（其提取纯化工艺另篇报道）按原方比例给药后，可
显著提高醋酸扭体小鼠的扭体抑制率，并可升高硝
酸甘油偏头痛大鼠血浆中的５羟色胺含量，初步证
实了含阿魏酸效应组分的药理效应。
阿魏酸对光热不稳定，因此在分析过程中样品
宜放置在棕色容量瓶并避光保存，且不宜长时间高
温加热。
［参考文献］
［１］ 许 惠．中药川芎的应用及提取工艺的发展研究［Ｊ］．重庆工
商大学学报，２００５，２２（３）：２３３．
［２］ 胡益勇，徐晓玉．阿魏酸的化学和药理研究进展［Ｊ］．中成药，
２００６，２８（２）：２５３．
［３］ 彭晓芳，龚 范，梁逸曾．信息量法评价川芎提取效果［Ｊ］．中
南药学，２００４，２（２）：７６．
［４］ 刘 旭，杨雪梅，徐江平，等．正交试验对川芎提取工艺的筛选
研究［Ｊ］．广东药学．２００３，１３（６）：３．
［５］ 王文祥，顾 明．正交试验法优选川芎总酚提取工艺［Ｊ］．中成
药，２０００，２２（５）：３２５．
［６］ 马双成，邓少伟．川芎提取、纯化工艺条件的实验研究［Ｊ］．中
国中药杂志，１９９９，２４（４）：２１５．
［７］ 张 军，王凤云，詹丽玲．川芎的超临界 ＣＯ２萃取大孔树脂吸
附工艺的研究［Ｊ］．中草药，２００５，３６（８）：１１６８．
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Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｃｔｉｖｅｐａｒｔｓｏｆ
ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄｆｒｏｍＬｉｇｕｓｔｉｃｕｎｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ
ＨＯＮＧＹａｎｌｏｎｇ，ＸＵＤｅｓｈｅｎｇ，ＦＥＮＧＹｉ，ＹＵＡＮＹｉｎｇ
（１．ＳｈｕｇｕａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００２１，Ｃｈｉｎａ；
２．ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｃｔｉｖｅｐａｒｔｓｆｒｏｍＬｉｇｕｓｔｉｃｕｎｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ．Ｍｅｔｈ
ｏｄ：Ｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｅｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｃｔｉｖｅｐａｒｔｓｏｆｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄｂｙｄｉｒｅｃｔｃｏｍｐａｒｉｓｏｎａｎｄｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅ
ｓｉｇｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｅｘｔｒａｃｔｒａｔｅｏｆａｃｔｉｖｅｐａｒｔｓｏｆｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄｗａｓ１６７％ ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄｗａｓ５８２％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ａｃｔｉｖｅ
ｐａｒｔｓｏｆｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄｆｒｏｍＬ．ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｅｆｅｃｔｉｖｅｌｙ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｎｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ；ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ
［责任编辑 鲍 雷］
［收稿日期］ ２００６０９２８
［基金项目］ 全军中医药研发推广项目（２００６０３２００１）；甘肃省
科技攻关项目（２ＧＳ０５４Ａ４３０１４１４）
［通讯作者］ 贾正平，Ｔｅｌ：（０９３１）８９７５８８４，Ｅｍａｉｌ：ｌｍ７３０５３０ｘｉｎｇ
＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
大孔树脂富集纯化藏药独一味总环烯醚萜苷
李茂星１，２，贾正平１，胡之德２，张汝学１，任晓玲１，王 娟１，胡 静１
（１．兰州军区兰州总医院 药材科，甘肃 兰州 ７３００５０；
２．兰州大学 化学化工学院，甘肃 兰州 ７３００００）
［摘要］ 目的：进行藏药独一味止血活性成分总环烯醚萜苷的富集纯化。方法：以一阶导数分光光度法检测，
以总环烯醚萜苷含量为跟踪指标，比较１０种不同厂家、不同型号的大孔树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成
分的吸附与解吸附条件，优选最佳的纯化工艺。结果：富集后总环烯醚萜苷的含量达到６７５３％。结论：ＸＤＡ－１型
大孔吸附树脂对独一味水提取物中环烯醚萜苷类成分有较好的吸附能力，５０％乙醇溶液解吸附快速有效。树脂重
复利用度高。
［关键词］ 独一味；总环烯醚萜苷；大孔树脂；工艺
［中图分类号］Ｒ２８３ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００７）１７１７４３０５
藏药独一味为唇形科独一味属植物独一味
Ｌａｍｉｏｐｈｌｏｍｉｓｒｏｔａｔａ（Ｂｅｎｔｈ．）Ｋｕｄｏ的全草或根，具
有止血、镇痛消肿、活血化瘀、补髓、行气、续筋接骨
之功效［１］。张承忠［２］、易进海［３］等从独一味中分得
过大量的环烯醚萜类和黄酮类化合物。作者的前期
工作首次证明独一味水提物中的总环烯醚萜类成分
具有很好的止血、促凝血作用，是其中的止血活性成
分［４６］。大孔吸附树脂用于环烯醚萜苷类成分的分
离富集已有文献报道［７，８］。作者以一阶导数分光光
度法为检测方法，以总环烯醚萜苷含量为跟踪指标，
优选了１０种不同厂家、不同型号的大孔树脂对独一
味水提取物中环烯醚萜苷类成分的吸附与解吸附能
力，并考察了各项工艺参数。
１ 仪器与材料
ＨＰ８４５３二级管阵列紫外可见分光光度计（惠
普公司，美国）；ＢＰ２１０Ｓ电子分析天平（赛多利斯有
限公司，德国）；ＳＫ７２００Ｈ超声波清洗器（上海科导
超声仪器公司），ＸＤＡ－１，ＸＤＡ－１６型大孔吸附树
脂（西安蓝晓科技有限公司）；Ｄ１０１型大孔吸附树
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